2. CROMATOGRAFIA
La cromatografía puede definirse como una técnica que separa una mezcla de
solutos basada en la velocidad de desplazamiento diferencial de los mismos que se
establece al ser arrastrados por una fase móvil (líquida o gaseosa) a través de un
lecho cromatográfico que contiene la fase estacionaria, la cual puede ser líquida o
sólida.
La palabra Cromatografía
significa Escribir en
Colores, porque cuando fue
desarrollada los
componentes separados
eran colorantes.

3. El botánico ruso Mijail Tswett
estableció las ventajas de la técnica,
adopto la terminología y definió los
procedimientos experimentales
básicos para esta técnica, se
considera que es el Padre de la
Cromatografía. En los años 30 y 40
empezó su desarrollo y aplicación en
diferentes procedimientos de
experimentación.

4. CROMATOGRAFIA DE GASES
La cromatografía de gases es la técnica a elegir para la
separación de sustancias gaseosas. La Fase Móvil es un Gas
(llamado Gas Portador) y la Fase Estacionaria puede ser un sólido
(Cromatografía Gas-Sólido) o una Película de líquido de alto punto
de ebullición (Generalmente Polietilén-Glicol o Silicón)
recubriendo un sólido inerte (Cromatografía Gas-Líquido).

5. El cromatógrafo de gases esta constituido normalmente por un suministro y una entrada del
gas portador, un puerto de inyección, una columna normalmente localizada en el interior de
una cámara termostatizada (horno), un detector y un sistema computarizado para analizar,
registrar e imprimir el cromatógrama.

6. Naturaleza de fase estacionaria
Naturaleza de fase Sólido Adsorción
estacionaria
Exclusión
Cambio iónico
Afinidad
Líquido Partición
Naturaleza de fase móvil Liquido Líquido-líquido
(partición)
Líquido-
sólido)adsorción, cambio
iónico, exclusión,
Afinidad.
Gas Gas-líquido (CGL)
Gas-sólido (CGS)

7. CROMATOGRAFIA DE GASES
Existen dos tipos de cromatografía de gases (GC): La cromatografía gas-
sólido (GSC), y la cromatografía gas-líquido (GLC), siendo esta última la
que se utiliza más ampliamente, y que se puede llamar simplemente
cromatografía de gases (GC).
CROMATOGRAFÍA GAS-SOLIDO (GSC)
En la GSC la fase estacionaria es sólida y la retención de los analitos en ella
se produce mediante el proceso de adsorción.

8. CROMATOGRAFÍA GAS-LIQUIDO (GLC)
En la GLC, la fase estacionaria es líquida, y los analitos se separan mediante
reparto. En ambas técnicas, el desplazamiento de la fase móvil, se realiza
mediante presión constante gracias al Regulador de Presión.

9. APLICACIONES DE LA CROMATOGRAFIA
En el campo también pueden ser aplicados, principalmente en estudios de
contaminantes del agua: insecticidas en agua, pesticidas en aguas de lagos,
lagunas, ríos; desechos industriales descargados en ríos o lagunas.
En la industria del petróleo juega una función primordial, por medio de la
cromatografía se pueden analizar los constituyentes de las gasolinas, las
mezclas de gases de refinería, gases de combustión

10. APLICACIONES DE LA CROMATOGRAFIA
Efectos de los Hidrocarburos de Petróleo a la Salud Humana y Medio
Ambiente
Es conocido que algunos hidrocarburos tienden a acumularse en los organismos a
través de las cadenas alimenticias con creciente riesgo de cáncer y de mutagénesis.
Por ello los organismos más expuestos son los humanos. Estos contaminantes
incluyen el benceno, los fenoles, y a los hidrocarburos policíclicos que son muy
peligrosos por sus efectos cancerígenos.

11. APLICACIONES DE LA CROMATOGRAFIA
Los efectos en la salud humana dependen de muchos factores, estos
incluyen:
 Tipo de hidrocarburo al que se encuentra expuesto
 Tiempo de exposición
 Cantidad de la sustancia química con la que se está en contacto.

12. APLICACIONES DE LA CROMATOGRAFIA

13. APLICACIONES DE LA CROMATOGRAFIA
Efectos al Medio Ambiente
 Los hidrocarburos interfieren en el intercambio de gases entre el aire y el
agua. Esto elimina el abastecimiento de oxígeno para los animales de
respiración branquial y obstruye, en muchos casos, la posibilidad de
respiración pulmonar de otros animales acuáticos.
 Los hidrocarburos se adhieren a sedimentos, allí forman depósitos, los
que se van liberando al ambiente lentamente durante mucho tiempo y
actúan como fuentes de contaminación por un largo período.

14. APLICACIONES DE LA CROMATOGRAFIA
Recolección de la muestra
La muestra de agua se recolecta en botellas color ambar de 1L con tapa
rosca, dejando como mínimo dos centímetros de aire, y colocando
papel parafilm alrededor de la tapa para evitar contaminación o
derrame de la muestra.

15. APLICACIONES DE LA CROMATOGRAFIA
Proceso de Extracción
Para la extracción de hidrocarburos totales de petróleo en matriz
acuosa se utilizó la extracción líquido-líquido.
Proceso de Purificación o Clean Up
El proceso de purificación se debe hacer a muestras demasiado turbias,
caso contrario se puede omitir este paso.

16. APLICACIONES DE LA CROMATOGRAFIA
Proceso de Concentrado y Almacenamiento
El extracto se concentra hasta aproximadamente 5mL y luego se pasa al
Kuderna-Danish dónde se concentra a 1mL, luego se coloca en un vial para
cromatografía.
Las muestras deben ser preservadas en refrigeración a 4ºC por 40 días.
Rotavapor utilizado en la Extracción Kuderna Danish utilizado en la Extracción

17. APLICACIONES DE LA CROMATOGRAFIA
Cuantificación mediante cromatografía
Los hidrocarburos totales de petróleo son cuantificados mediante
cromatografía gaseosa con detector FID, inyectando un 1μL de muestra.
Cromatógrafo Clarus 400

18. APLICACIONES DE LA CROMATOGRAFIA
Las condiciones instrumentales para la cuantificación de los TPH’s
en matrices líquidas de agua se recogen en la siguiente tabla.
Los TPH’s son identificados en un cromatograma en general, debido
a la complejidad de identificar cada componente.

19.  La cromatografía de gases es una
técnica muy útil para de separación y
determinación de compuestos orgánicos
volátiles y semivolátiles que sean
térmicamente estables. Acoplada a la
espectrometría de masas, permite una
identificación inequívoca de los distintos
componentes separados sin necesidad de
disponer de patrones de los mismos. En caso
de poder comparar con los correspondientes
patrones, se puede llevar a cabo, además, el
análisis cuantitativo de los compuestos
identificados.