1. Instituto Politécnico Nacional
Escuela Superior de Medicina
PRINCIPIOS DEL
DIAGNOSTICO MICOLÓGICO
Laboratorio de Microbiología y Parasitología Medicas
Equipo 5
Integrantes: Ayala Hernández Marcos
Nolasco Galindo Fernando
Ricardiz Lucas Jessica
Alcántara Moreno Renata
Valencia González Pablo Alberto

2. A.
Clasificación y definición de las Micosis
B.
Micosis tegumentarias: dermatofitosis o tiñas
a)
b)
c)
Definición
Géneros de los agentes etiológicos
Clasificación de las tiñas por la localización topográfica o anatómica



d)
Tres etapas del proceso del diagnóstico etiológico por Laboratorio



e)
C.
Tineacapitis seca
Tineacorporis
Tineaunguium
Preanalítica (Obtención y manejo de muestra)
Analítica (Examen directo, Cultivo en Sabouraud)
Posanalítica (Interpretación de resultados)
Cuadro de síntesis
Candidosis mucocutánea: genital (vaginitis)
a)
b)
c)
Definición
Cuadro c´línico, signos y síntomas
Tres etapas del proceso del diagnóstico etiológico por Laboratorio



Preanalítica (Obtención y manejo de muestra)
Analítica (Examen directo, Cultivo en Sabouraud, Prueba de tubo germinativo)
Posanalítica (Interpretación de resultados)

3. Clasificación de Las Micosis (Dr. Gonzáles Ochoa)
 Micosis Exclusivamente Tegumentarias
 Micosis Inicialmente Tegumentarias
 Micosis Secundariamente Tegumentarias
 Micosis por Oportunistas

4. Micosis Exclusivamente Tegumentarias
 Afectan las capas superficiales de la piel y sus anexos queratinizados.
 No son invasivos
 Frecuentes en dermatología
 Distribución amplia y contagiosas.
 Ejemplos: Dermatofitos o tiñas.

5. Micosis Inicialmente Tegumentarias
 Se adquieren a través del traumatismo de la piel.
 Microorganismos en fase infectante: suelo y vegetales.
 No son contagiosas.
 Infección: tejido subcutáneo, puede diseminarse.
 Enfermedades de este grupo: Micetoma, Esporotricosis, Cromomicosis y
Rinosporidiosis.

6. Micosis Secundariamente Tegumentarias
 Agentes: Hongos dimórficos, se encuentran en
fase micelial o infectante.
 Zonas endémicas.
 Infección por vía aérea.
 Fuerte respuesta inmunológica: granuloma
tuberculoide, incluso reacción piógena mixta.
 Resolución espontanea o puede diseminarse.
 Organismos que la causan: Coccidiomicosis,
Histoplasmosis, Paracoccidioidomicosisi y
Blastomicosis Norteamericana.

7. Micosis por Oportunistas
 Localizacion Ubicua
 Infección localizada o diseminada.
 Mala respuesta inmune e histopatológica
 Tratamiento dependiendo del paciente
 Quien la causa: Candidosis, Criptocosis, Aspergilosis y Zigomicosis. Sin
embargo cualquier hongo puede causar problemas de la salud en personas
inmunocomprometidas.

8. MICOSIS EXCLUSIVAMENTE
TEGUMENTARIAS

9. DEFINICIÓN DE DERMATOFITOSIS
1) Se refiere a un complejo de entidades causadas por
algunos hongos filamentosos.
2) Son un conjunto de micosis superficiales que afectan
a la piel, específicamente a la epidermis (estrato
córneo) y sus anexos como uñas y pelo.
3) Estas son causadas por un grupo de hongos:
Queratinofílicos
es decir afinidad
hacia la queratina
Comúnmente
llamadas Tiñas o
Tineas
Queratinolíticos

que
metabolizan la
queratina
por medio de queratinasas lo que les
permite utilizar la queratina de esas
estructuras como fuente de nitrógeno.

10. GENEROS DE LOS AGENTES ETIOLOGICOS DE LAS
DERMATOFITOSIS
Los dermatofitos se dividen en tres géneros que se distinguen por las características
morfológicas de sus macroconidios:
Trichophyton: tiene microconidios que miden de 8 a 50 µm, el número de
septos va de 4 a 6
son alargados cuya porción distal es redondeada, de pared delgada y lisa,
Microsporum: tiene macroconidios
miden de 8 a 15 µm, (5 a 15 septos).
son en forma de huso, de pared gruesa, rugosa, con hoyuelos o prominencias
que semejan tubérculos denominados equínulas, multiseptados
Epidermophyton: los macroconidios son numerosos, miden de 7 a 12 µm,
con 4 septos transversos, en forma de mazo o basto, redondeados en su polo
distal, de pared gruesa y lisa,

11. Clasificación de dermatofitos
Geofílicos
• Viven en el
suelo
• Son
patógenos
de
Animales y
humanos
(según su hábitat natural)
Zoofílicos
• Parasitan
pelo y piel
de animales
y pueden
transmitirse
al humano
Antropofílicos
• Infectan al
humano y
se
trasmiten
de humano
a humano.

12. En la actualidad se consideran 40 las
especies causantes de enfermedad, de
las cuales cinco son las más
frecuentes:
 T. rubrum,
 T. mentagrophytes,
 T. tonsurans,
 M. canis,
 E. floccosum.
 El dermatofito que causa el 80-90% de
esta micosis es T. rubrum.

13. CLASIFICACIÓN DE LAS TIÑAS
Según su localización topográfica anatómica de la infección.
CLÍNICAMENTE, LAS INFECCIONES POR TIÑA SE CLASIFICAN DE
ACUERDO CON LA PROFUNDIDAD Y LA REGIÓN DEL CUERPO
AFECTADA

14. TINEACAPITIS: SECA
(TIÑA DE LA CABEZA)
Microsporum canis
Trichophyton tonsurans

16. Tiña de la cabeza. (Seca)
 Placas seudoalopésicas
 Pelos cortados
 Descamación
 Prurito

18. TINEACORPORIS
(TIÑA DEL CUERPO)
Microsporum canis
Trichophyton rubrum
Trichophyton mentagrophytes

20. Tiña del cuerpo
 Placas eritematoescamosa
 Forma anular
 Borde activo
 Centro de menor actividad y descamación intensa
 Prurito

22. TINEAUNGUIUM
(TIÑA DE LAS UÑAS)
Trichophyton rubrum
Trichophyton mentagrophytes

24. Tiña de las uñas (Onicomicosis)
 Inicio a borde distal
 Opacas con estrías
 Amarillentas
 Quebradizas
 Gruesas
 Material como migajón de pan
 No duele
 No causa prurito

26. Tiñas superficiales
Tinea capitis
• tiña de la cabeza, es la infección del cuero cabelludo.
Tinea barbae
Tinea unguium
• tiña de la barbilla, es la infección de la barba y del área del cuello.
Tinea manuum
• tiña ungueal o tiña de la uña (una
forma de onicomicosis
Tinea pedis
• tiña del pie • "pie de atleta“, afecta principalmentede pies enuñas de los mismos y las zonas
o es la infección a los la las plantas
interdigitales.
• tiña de la mano, es la infección de las palmas y región interdigital.
Tinea corporis
• tiña del cuerpo, es la infección del tronco y extremidades.
Tinea cruris
• tiña crural o tiña de la ingle,es la afección en la ingle.

27. Tiñas profundas
Querión de Celso
Tiña fávica o favus
Granuloma tricofítico
Micetoma
Enfermedad dermatofítica o de Hadida

28. Tinea Corporis.
Agente etiológico
T. rubrum, M. canis y T. mentagrophytes
Entidad nosológica
Tinea corporis
Signos y sintomas.
Son lesiones pruríticas y aparecen en cualquier
parte de la piel expuesta y lampiña, con más
frecuencia en la cara, brazos y espalda. Las
tineas de la piel tienen un aspecto circular
característico con bordes eritematosos y
descamados con pequeñas vesículas y/o
pápulas.

29. Muestra biológica.
Piel
Técnica de
recolección.
Raspa la lesión de la piel, utilizando un borde
romo como el del portaobjetos de un
microscopio. Los raspados de la lesión de
piel se colocan en un líquido que contiene
hidróxido de potasio (KOH) y se examina
bajo el microscopio.
Exámenes de
laboratorio.
Examen de hidróxido de potasio en lesión de
piel
Estructura
Diagnostica

30. Tinea unguium
Agente etiológico
T. rubrum y T. mentagrophytes
Entidad nosológica
Tinea unguium
Signos y sintomas.
Uñas de coloración blanquecina o amarillenta,
quebradas, frágiles y deformes. Al progresar la
infección se ve la separación de la lámina
ungueal del lecho de la uña. Ocasionalmente se
puede acompañar de dolor, o incomodidad y
raramente se observa celulitis de la piel vecina.
El extremo distal de la uña es la que se afecta
con muchísima más frecuencia, en menor
frecuencia puede iniciar en el extremo proximal o
lateral.

31. Muestra biológica.
Piel o uña
Técnica de
recolección.
Raspa la uña, utilizando un borde romo como
el del portaobjetos de un microscopio, o
debridamiento del tejido lesionado debajo o
alrededor de la uña.
Exámenes de
laboratorio.
Examen de hidróxido de potasio al 30% en
uña y el cultivo micológico (agar de
Sabouraud)
Estructura
Diagnostica

32. ETAPA PRE- ANALÍTICA.
Recolección de escamas, uña y pelo.

33. Técnica para toma de muestras.
 Obtención de escamas de piel con cinta Scotch:
1) Cortar una tira de 5cm de cinta scotch
2) Colocar sobre la lesión, haciendo presión.
3) Retirarla y colocarla sobre un porta objetos con las escamas hacia abajo, previa
aplicación del aclarante.
Útil cuando la descamación es escasa o no se dispone de un portaobjetos estéril.

34. Técnica para toma de muestras.
 Obtención de escamas de piel:
1) Limpiar la zona afectada con un trozo de gaza empapado en alcohol
2) Raspar la lesion con el borde de un portaobjetos (esterilizados en pares y
envueltos en papel manila).
3) Recibir las escamas en el otro portaobjetos.
4) Empalmar los portaobjetos y envolverlos de nuevo en el papel manila.
5) Escribir los datos del paciente sobre la envoltura.

35. Técnica para toma de muestras.
 Obtención de cabellos parasitados con dermatofitos:
1) Examinar la lesión en cuero cabelludo del paciente con lupa.
2) Depilar con pinzas los cabellos quebrados a la
altura del foliculo piloso y al mismo tiempo colectar
sobre un portaobjetos o caja de petri estéril de
escamas.
3) Empalmar los portaobjetos y envolverlos o
cerrar la caja de petri.
4) Escribir los datos del paciente sobre la envoltura.
Cuando el paciente es un niño que no puede resistir la
depilación se toma una muestra con cinta de scotch.

36. Técnica para toma de muestras.
 Obtención de raspado de uñas:
1)
Limpiar la uña con esponja con alcohol.
2)
Colocar la yema del dedo afectado sobre el margen de un portaobjetos estéril o
dentro la superficie de una caja de petri estéril.
3)
Raspar la uña con una navaja estéril pasándola de la parte proximal a la distal.
4)
Empalmar los portaobjetos o cerrar la caja de petri y envolverlos.
5)
Los fragmentos de uñas se obtienen mediante tijeras o cortaúñas estériles y se
depositan en una caja de petri.
Si mas de una uña necesita ser raspada se utiliza material estéril para cada una. Para la
obtención de muestras de uñas de los pies, el laboratorista debe sentarse frente el
paciente quien debe acomodar el talón sobre su rodilla, esto permite una posición cómoda
para la toma de muestra.

37. ETAPA ANALÍTICA.
Método directo.
Cultivo de sabouraud.

38. Examen directo.
 Análisis de muestras como pelo y escaras cutáneas.
 Las muestras son tratadas con hidroxido de potasio (KOH) al 10% para disolver el
tejido dejando intacto al hongo o se tiñe con colorantes especiales para hongos.
 Se encontraran esporas asexuales atípicas, hifas o levaduras en el microscopio.

39. Tinea capitis. invasión endo-ectotrix se observan
hifas dentro y fuera del pelo formando una cubierta
en la parte externa del pelo.
Tinea capitis. Invasión endotrix se observa intacto el
límite del pelo y en el interior hifas

40.  Examen sauboraud.
 Se usa para cultivar dermatofitos y otros tipos de hongos.
 En el medio de cultivo, la peptona, la tripteina y la glucosa son los nutrientes para el
desarrollo de los microrganismos.
 El alto contenido en glucosa, cloranfenicol y el pH acido, inhiben la proliferación
bacteriana y favorecen la de los hongos. El agar es un agente solidificante.
 El aspecto micelio y la naturaleza de las esporas
asexuales bastan para identificar al hongo.
Cultivo de m. canis.

41. ETAPA POST- ANALÍTICA.
Informar la existencia de estructuras esperadas del hongo, confirmando el diagnostico etiológico y el nosológico.

42. Cuadro de Síntesis
Tinea capitis: Seca.
Agente etiológico
M. Canis
Entidad nosológica
Tinea capitis
Signos y síntomas.
Placas alopécicas escamosas con puntos negros debido a
pelos rotos en la superficie.
Picazón en el cuero cabelludo.

43. Muestra biológica.
Cabello.
Técnica de recolección.
1)
2)
3)
4)
Examinar la lesión en cuero cabelludo del paciente con
lupa.
Depilar con pinzas los cabellos quebrados a la altura
del foliculo piloso y al mismo tiempo colectar sobre un
portaobjetos o caja de petri estéril de escamas.
Empalmar los portaobjetos y envolverlos o cerrar la
caja de petri.
Escribir los datos del paciente sobre la envoltura.
Exámenes de laboratorio.
Directo.-Solucion de KOH al 10-30% con tinta Parker
permite localizar esporas endothrix o ectothrix del talla
piloso.
Cultivo de sabouraud.
Estructura diagnostica.
Tinea capitis. Invasión endotrix se
observa intacto el límite del pelo y en el
interior hifas
Tinea capitis. invasión endo-ectotrix se
observan hifas dentro y fuera del pelo
formando una cubierta en la parte externa del
pelo.

45. Infección vulvogenital /vulvovaginitis ocasionada por el hongo
Candida albicans
 El género Candida es el
importante
de
hongos
oportunistas.
grupo más
patógenos
 C. albicans es la especie que ocasiona la
mayor parte de las infecciones mucocutáneas
ocasionadas por el género Candida.
 Factores
predisponentes: anticonceptivos
orales, embarazo, diabetes mellitus, VIH,
tratamiento
con
antibióticos
y
corticoesteroides.
 Microbiota normal
 Depende del estado
inmunológico
 Infección localizada o
diseminada; respuesta
histiopatológica mal
organizada
 Inmunidad específica
escasa o nula

46. Mucocutánea
OTRAS INFECCIONES
CAUSADAS POR
Cutánea
C. albicans
Visceral

47.  Máculas blancas semejantes al requesón, que se adhieren en forma laxa
a la superficie de la mucosa, de color blanco amarillento y de aspecto
mucoide; zonas eritematosas en la vulva
 Leucorrea viscosa moderada o abundante, amarillenta con aspecto de
requesón y fétida
 Ardor intravaginal y prurito vulvar; además de enrojecimiento e
inflamación
 Micción y relaciones sexuales dolorosas

48. • Obtención y manejo
de muestras:
exudado vaginal
Preanalítica
Analítica
• Examen directo
(KOH y tinciones)
• Cultivo
• Interpretación y
significado de
resultados (directo,
cultivo y tubo
germinativo)
Posanalítica

49. Etapa preanalítica
 Ténica de exudado vaginal
 Paciente: sin aseo o medicamentos
24h previas, sin menstruación
 Posición ginecológica, se introduce el
espejo vaginal sin lubricantes
 Se toma la muestra con 3 hisopos
estériles de zonas con alteraciones o
exudado abundante.
Tubos
1. Soln. salina estéril, KOH al 10%
2. Frotis
3. Siembra en medios de cultivo

50. Etapa analítica
 Examen microscópico directo
 KOH al 10% (disolver el tejido, dejar intacto a
los hongos)
 Tinción de Giemsa
 Tinción de Gram (gram +)
 Utilidad clínica: levaduras únicas o en gemación
(blastoconidas) con o sin la presencia de
pseudohifas. Información preliminar o presuntiva,
en algunos casos llegar a ser diagnóstica.
 Cultivo en agar Sabouraud dextrosa; agar
papa dextrosa
pH ácido, cloranfenicol y ciclohexamida,
dextrosa: favorece el crecimiento de
hongos y limita el de bacterias
Extendido con Gram.
Levaduras y pseudohifas
de Candida spp.
Cultivo en agar dextrosa
Sabouraud. Colonias
de Candida spp.

51. Etapa analítica (cultivo y microscopía)
 Morfología microscópica
 Hongo dimórfico: micelial y levaduriforme
 Levaduras de gemación ovaladas, diámetro
de 2-6µm
 Hifas (filamentos ramificados) y pseudohifas
(células alargadas y unidas como salchichas)
 Morfología en cultivo
 Macroscópicas
 Pálidas y opacas
 Blanco-marrón
 Lisas o rugosas
 Microscópicas
 Blastoconidias (estructura procedente de la gemación en la
reproducción asexual; cúmulos esféricos sobre las hifas)
 Pseudohifas (células alargadas y unidas como salchichas)
y/o clamidosporas terminales (aumento del tamaño de la
hifa y paredes gruesas)
 Blastoconidias de diferente
tamaño, redondeadas, de pared
delgada, gemantes
 Hifas y/o pseudohifas.

52. Etapa analítica
 Tubo germinativo (permite diferenciar las especies
de Candida albicans de las no albicans).
Tubo genimativo positivo.
Extensión filamentosa de la
levadura, sin estrechamiento
(constricción) en su sitio de unión
con la blastoconidia, que da lugar
a hifas verdaderas.
Procedimiento
 Suspender un inóculo de la cepa pura de Candida con 24
horas de desarrollo en 0,5 mL de suero humano o de
conejo. Incubar a 35 – 37 ºC por 2h y 30 min.
 Colocar 2 ó 3 gotas de la suspensión en un portaobjeto y
cubrir con un cubreobjeto, observar a 40x.
La prueba es positiva al visualizar la estructura
elongada que se origina a partir de la levadura.
Tubo germinativo: primordio hifal a partir de un
conidio. Parecen prolongaciones tempranas de las
células levaduriformes similares a hifas producidas sin un
estrechamiento en el punto de origen de la célula
Formación de Tubo
germinaltivoPositivo.
Gram, 40x.

53. Etapa posanalítica
 Dx clínico presuntivo: Sígnos y síntomas
 Máculas blancas semejantes al requesón, que se adhieren en forma laxa a la superficie de la mucosa,
leucorrea viscosa moderada o abundante, amarillenta con aspecto de requesón y fétida; ardor
intravaginal y prurito vulvar; además de enrojecimiento e inflamación; micción y relaciones sexuales
dolorosas
 Dx nosológico: Candidiasis/candidosis vaginal o vulvovaginal;
vulvovaginitis por Candida
 Dx etiológico
 Examen directo: levaduras únicas o en gemación (blastoconidas) con o sin la presencia de
pseudohifas
 Cultivo
 Macroscópico: colonias pálidas y opacas, blanco-marrón, lisas o rugosas
 Microscópico: blastoconidias, hifas y/o pseudohifas, clamidosporas. Levaduras de gemación
ovaladas, diámetro de 2-6µm
 Tubo germinativo positivo: Extensión filamentosa de la levadura, sin estrechamiento
(constricción) en su sitio de unión con la blastoconidia

54. CUADRO DE SÍNTESIS
(Candida albicans)

55. Agente etiológico
Candida albicans
Entidad nosológica
Candidiasis vaginal o vulvovaginal ; vaginitis
por Candida
Signos y síntomas
Muestras biológicas o clínicas para el examen
de laboratorio
Técnica de recolección o toma de muestra
Máculas blancas
Leucorrea viscosa
Ardor intravaginal y prurito vulvar
Micción y relaciones sexuales dolorosas
zonas con alteraciones o exudado
abundante.
Ténica de exudado vaginal
Paciente: sin aseo o medicamentos 24h
previas, sin menstruación
Posición ginecológica, se introduce el
espejo vaginal sin lubricantes
Se toma la muestra con 3 hisopos
estériles de zonas con alteraciones o
exudado abundante.

56. Exámenes de laboratorio usados para el
diagnostico
Estructura diagnostica
1. Examen microscópico directo
2. Cultivo en agar Sabouraud dextrosa; agar
papa dextrosa
1. levaduras únicas o en gemación
2. Blastoconidias, Pseudohifas