Este documento presenta información sobre el diagnóstico de micosis superficiales mediante exámenes macroscópicos y microscópicos. Describe las características morfológicas de varios agentes causales comunes como Epidermophyton floccosum, Microsporum canis, Trichophyton rubrum y Malassezia furfur. También presenta detalles sobre técnicas de preparación como fresco con cinta adhesiva, descamación y KOH, e incluye dos casos clínicos de piedra blanca y pitiriasis versicolor con
3. PREPARACIONES EN FRESCO
(TÉCNICA DE CINTA ADHESIVA O SCOTCH)
◈ Colocar una pequeña gota de azul de algodón en el centro de un portaobjetos limpio.
◈ Cortar un fragmento de cinta scotch y tocar con el lado adhesivo un área de la colonia,
en la periferia si la colonia está bien desarrollada, o bien, en el centro si se trata de una
colonia joven.
◈ Coloque la cinta con el lado adhesivo hacia abajo sobre la laminilla ya preparada,
coloque una gota adicional de colorante sobre la cinta, coloque un cubreobjetos y
presione suavemente para eliminar burbujas de aire.
◈ Examinar al microscopio con los objetivos 10x y 40x. Anotar las características:
aspecto del micelio (septado o cenocítico), uninucleado multinucleado, el origen del
micelio (verdadero o pseudomicelio), la función del micelio (vegetativo o de nutrición,
o bien aéreo o reproductivo), el pigmento del micelio: hialino (no pigmentado) o
pigmentado (melánico o carotenoide), color y forma de las esporas, etc.
◈ Si se quiere sellar la preparación, se coloca alrededor del cubreobjetos barniz de uñas.
4. PREPARACIONES EN FRESCO MEDIANTE
LA TÉCNICA DE DESCAMACIÓN
◈ Asepsia previa con etanol (70%) para eliminar la flora
bacteriana, exudación o restos de excipientes de
tratamientos previos que dificultan el examen directo y
el cultivo.
◈ Raspando su borde activo con un escalpelo desechable.
◈ Colocamos la muestra en una placa Petri, con el fin de
mantenerlo seco y libre de contaminación.
5. PREPARACIONES EN FRESCO MEDIANTE
EL EMPLEO DE KOH PARA UÑAS
◈ Realizar una limpieza y desinfección de la zona afectada
utilizando una gasa estéril impregnada con alcohol de
70°.
◈ Toma de muestra: escamas, pelos o fragmentos de uñas.
◈ Se incubación con hidróxido potásico al 10-30%
◈ Se visualiza al microscopio, lo que permite observar la
existencia de hifas septadas (dermatofitosis), formas
levaduriformes, que son suficientes para confirmar el
diagnóstico.
6. Especie
Agentes
etiológicos
Morfología Macroscópica Morfología Microscópica
Epidermophyton Epidermophyton
floccosum
Se caracteriza por colonias radiadas y
finamente pulverulentas decrecimiento rápido,
de color verdoso (caqui); cuando envejece
aparecen parches algodonosos y plegamientos.
Hay macroconidios de 7 a 12 por 20 a 40 micrómetros de diámetro, de
paredes delgadas, en forma de mazo o clava con un extremo
redondeado. No existen microconidios, pero presenta numerosas
clamidosporas.
Microsporum M. canis
M. adouinii
M. gypseum
M. canis se caracteriza por colonias de
crecimiento rápido de superficie plana y
abundantes hifas aéreas que dan un aspecto
velloso a la superficie; el centro adopta un color
café claro y hay un color amarillo anaranjado en
los bordes y al reverso.
M. audouinii produce colonias planas de color
blanco, textura sedosa y el reverso es de color
rosado o durazno.
M. gypseum; la colonia es plana y pulverulenta
de color café claro o rosado.
M. canis se observan macroconidios fusiformes de 7 a 20 por 30 a 60
micrómetros, con extremos afilados y paredes gruesas con espículas o
equinuladas presentan 1 a 15 lóculos.- Se pueden observar hifas en
“raqueta”, pectinadas y clamidosporas (clamidoconidios).
M. adouinii pueden existir microconidios alargados y, si hay
macroconidios, tienen un aspecto deformado.
M. gypseum; presenta macroconidios en forma de bala e hifas en espiral.
Trichophyton T. rubrum
T. tonsurans
T. mentagrophytes
T. rubrum colonias de color blanco,
algodonosas con
un pigmento rojizo o rojo oscuro en el reverso.
T. tonsurans da lugar a colonias pulverulentas
que se pliegan con la edad; el color de la superfi
cie puede ser blanco, gris, café claro o amarillo.
Por lo general hay un color café oscuro en el
reverso.
T. mentagrophytes las cepas antropofílicas se
describen como vellosas o algodonosas de
color blanco cremoso y pulverulentas en el
centro; las zoofílicas son evidentemente
granulosas.
T. rubrum tiene microconidios numerosos o escasos, son ovales y nacen
a los lados de las hifas; las formas granulosas tienen muchos
macroconidios.
T. tonsurans Los microconidios son numerosos
y de tamaño variable, nacen a los lados de las hifas o en brazos cortos,
se disponen en ángulo recto respecto a éstas (Cruz de Lorena); son
comunes las clamidosporas y poco frecuentes los macroconidios de
paredes delgadas y lisas con algunas hifas en espiral.
T. mentagrophytes Se observa abundancia de
microconidios esféricos, los cuales nacen en cúmulos, así como a lo largo
de las hifas; los macroconidios son cilíndricos y de paredes delgadas y
con frecuencia se ven hifas en espiral.
DERMATOFITOSIS
7. Especie Agentes etiológicos
Morfología
Macroscópica
Morfología
Microscópica
Malassezia M. globosa
M. slooffiae
M. sympodialis
M. furfur
M. globosa produce colonias de
crecimiento lento, plegadas, rugosas
y de color crema.
M. slooffiae sus colonias son
finamente plegadas.
M. sympodialis da colonias planas o
ligeramente convexas.
M. furfur produce colonias convexas,
lisas con variantes rugosas.
M. globosa genera levaduras
esféricas y se pueden observar
filamentos cortos.
M. sympodialis produce levaduras
pequeñas, ovales, y a veces los
brotes de levaduras hijas adoptan un
aspecto simpodial.
M. furfur posee estructura variada
con células alargadas (elongadas),
esféricas u ovales y algunos
filamentos.
PITIRIASIS VERSICOLOR
8. Especie Agentes etiológicos
Morfología
Macroscópica
Morfología Microscópica
Cladosporium Hortaea (Exophiala o
Phaeoannellomyces)
werneckii
Las colonias maduras dan hifas
tortuosas de color verde oscuro,
con tabiques y conidióforos en
anélidos o anillos muy conspicuos
que producen racimos de
conidios (aneloconidios)
fusiformes con un tabique.
Al inicio el examen microscópico sólo
muestra células levaduriformes ovales
parcialmente hialinas, de entre 3 a 10
micrómetros, con un tabique único, y se
producen a los lados o al final de los
filamentos; tienen la capacidad de
generar en sus polos células hijas por
conidiogénesis en anélidos.
Con hematoxilina y eosina quedan de
manifiesto hifas pigmentadas, cortas o
ramificadas y blastosporas;
hay acantosis leve.
TIÑA NEGRA
9. Especie Agentes etiológicos
Morfología
Macroscópica
Morfología
Microscópica
Trichosporon T. inkin
T. asahii (T. cutaneum, T.
beigelii)
T. mucoides, y la
variedad negra, por P.
hortae.
El cultivo debe llevarse a cabo en
medio de Sabouraud simple o
adicionado con cloranfenicol, a
temperatura ambiente (25 °C). En 10
a 12 días, las colonias miden 1 cm de
diámetro, son lisas, de color blanco o
crema por ambos lados; la
superfi cie es plisada o cerebriforme,
en ocasiones brillante o un poco
húmeda; su consistencia se compara
con la de la mantequilla.
Con el tiempo se secan y pierden
brillo.
Las colonias crecen de modo muy
lento en medio de Sabouraud con
cloranfenicol a 25 °C; en 2 a 3
semanas son de color café, verde o
negro; son lisas, con centro
acuminado y plisado, y pueden
adoptar un aspecto cerebriforme;
son muy sólidas, están adheridas al
medio de cultivo, y difunden un color
oscuro o rojizo.
Son levaduras caracterizadas
por la formación de artroconidios,
conidiación meristemática
y apresorios.
En el estudio al microscopio se
observan los seudofilamentos o
filamentos septados de 2 a 4
micrómetros, artrosporas
rectangulares y blastosporas
redondas u ovales que nacen de
manera unilateral o a partir de los
ángulos de las artrosporas; puede
haber clamidosporas.
En el estudio al microscopio se
observan filamentos pigmentados
cortos, de pared gruesa, ramificados
y tabicados, existen clamidosporas y
en ocasiones peritecios globosos
u ovoides con sus ascas y
ascosporas.
PIEDRAS BLANCA & NEGRA
10. Ejemplos de algunas colonias de agentes patógenos de
micosis superficiales
Epidermophyton floccosum
Imagen microscópica y macroscópica.
15. Piedra blanca en una paciente pediátrica
Paciente de sexo femenino de 3 años de edad, originaria y residente de
Culiacán, Sinaloa, México. Acude a la consulta de dermatología del Hospital
Civil de Culiacán por presentar en los pelos del cuero cabelludo numerosas
concreciones blanco amarillentas, translúcidas, de 1 mm de diámetro, blandas y
firmemente adheridas al tercio distal del pelo, y de evolución crónica. Al
interrogatorio la madre refiere que desde hace 6 meses la paciente presenta
‘‘bolitas’’ en el pelo que se hacen evidentes al humedecerlo, en un inicio
atribuidas a mala higiene. Al no lograr su eliminación con el baño diario, la
madre decide tratarlas como liendres, sin especificar qué tipo de fármaco usó y
sin lograr su desprendimiento al cepillado, lo que motivó la solicitud de
consulta médica.
16.
17. Se tomaron muestras de pelo del área afectada y se realizó examen directo al
microscopio óptico; este reveló parasitación ectothrix con la presencia de
filamentos tabicados con artroconidios rectangulares y ovales. Se realizó cultivo
en agar Sabouraud a temperatura ambiente, que mostró crecimiento de colonias
cremosas amarillentas a los 12 días, en un principio lisas y posteriormente
cerebriformes, brillantes y húmedas. Al examen directo del cultivo se observaron
seudofilamentos y artroconidios rectangulares con abundantes blastoconidios
ovales y redondeados. Con los resultados anteriores se estableció el diagnóstico
de piedra blanca por Trichosporon beigelii.
18.
19. TRATAMIENTO
Ketoconazol en champú aplicado una vez al día durante 15 días, y se obtuvo una
curación completa del padecimiento al término del tratamiento.
20. Caso Clínico II
Paciente femenina de 18 años, sin antecedentes médicos de
importancia, con cuadro clínico de 8 meses de evolución de
lesiones blanquecinas, ovales, asintomáticas en el dorso, que
en los últimos meses notó “algo hundidas”, por lo que recibió
tratamiento con dipropionato de betametasona en crema a
0.05% dos veces al día durante un mes, sin mejoría.
En el examen físico se observaron en la región dorsal superior
placas ovales hiperpigmentadas, descamativas, en la región
interescapular múltiples placas hipopigmentadas, atróficas,
con signo de Besnier positivo (Figura 1). Con la luz de Wood
se observó fluorescencia amarillo-verdosa de las lesiones, se
solicitó KOH y biopsia de una de las placas atróficas.
21. El examen directo reportó abundantes
blastoconidios de levaduras y fragmentos cortos
de hifas de Malassezia sp y la biopsia
evidenció en la tinción con ácido peryódico de
Schiff (PAS) numerosas hifas de hongos en el
estrato córneo, apoyando la impresión clínica
de pitiriasis versicolor (Figura 2).
22. Con estos hallazgos se confirmó el diagnóstico de
pitiriasis versicolor, variantes hiperpigmentada y
atrófica. Se inició tratamiento con ketoconazol
200 mg/día durante 14 días y terbinafina 1%
loción una vez al día, durante un mes, con alivio
de la atrofia en las lesiones hipopigmentadas y
disminución de la descamación de las lesiones
hiperpigmentadas al mes de tratamiento (Figura
3).
23. BIBLIOGRAFÍA
◈ Muñoz, V; Díaz, E; González, J; Trejo, J.. (2009). Piedra blanca en una paciente pediátrica:
reporte de un caso. Marzo 2022, de ELSEVIER Sitio web: https://www.elsevier.es/es-
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Dermatologia Revista mexicana. https://dermatologiarevistamexicana.org.mx/.
https://dermatologiarevistamexicana.org.mx/article/pitiriasis-versicolor-variante-
atrofica/