Este documento describe varias estrategias para la regeneración y reparación del cartílago, incluyendo técnicas basadas en la terapia celular como la implantación de condrocitos autólogos. También describe el aislamiento y cultivo de células a partir de cartílago articular humano, así como el cultivo de estas células junto con células madre mesenquimales bajo la influencia de factores de crecimiento. Finalmente, se discuten perspectivas futuras como el uso de andamiajes y membranas de soporte de cél

1. RETOS DE LA INGENIERIA
TISULAR:
APLICACIÓN CLINICA
María José Martínez Lorenzo
Zaragoza, 9 de Noviembre de 2010

2. PI PAMER 0918
“CONDROGENESIS DE CELULAS
MESENQUIMALES BAJO LA
INFLUENCIA DE CONDROCITOS”

3. Estrategias de regeneración y reparación
Técnicas basadas en terapia celular:
Tratamientos actuales
•Implante de condrocitos autólogos
Técnicas que estimulan la médula ósea:
(ACI)
• Microfractura
Extracción de
• Mosaicoplastia periostio de tibia
Sutura de la lesión con
medial
cobertura de periostio
Artroplastia.
Lesión
Alotrasplante.
Biopsia de cartílago
sano Inyección de condrocitos
autólogos en la lesión
Digestión enzimática
Cultivo durante 11-21 días Tratamiento con Suspensión de
(aumento del número de células) tripsina 2,6 -5 x 106 células

4. MUESTRAS
Procedencia:
rodilla
Cartílago
articular
Pacientes
- n=8
- 5 ♀, 3 ♂
- 74 ± 5,07
años
- Artrosis (OA)

5. OBTENCIÓN, AISLAMIENTO Y CULTIVO DE CELULAS
A PARTIR DE CARTILAGO
Disgregación/Digestión
Cultivo
Diferenciación hacia condrocitos

6. Fenotipo por citometría de flujo a pase 1
citometría
CD31-, CD34-, CD36-, CD117-, CD133/1-, HLA-DR-
CD13+, CD44+, CD59+, CD73+, CD90+, CD105+, CD151+,
CD166+

7. COCULTIVOS MSC-Células de cartílago
Cartílago articular
Células de
cartílago
Grasa de Hoffa
MSCs

8. COCULTIVOS MSC-Células de cartílago
Células de cartílago MD1 (BMP-6+ TGFb)
MSC de tejido adiposo
Células de cartílago MD1 (BMP-6+ TGFb)
MSC de tejido adiposo

9. COCULTIVOS –Medios de diferenciación
MD1 (BMP-6+ TGFb)
MSC de grasa
Células de cartílago
+
MSC
MSC de médula

10. COCULTIVOS –Medios de diferenciación
MD1 (BMP-6+ TGFb)
MD2 (…)
Células de cartílago
+
MSC de tejido adiposo
MD3 (TGFb) ?
MD4 (BMP-6)
?

11. Membrana amniótica

12. Aplicación clínica
(soporte de células)

13. PERSPECTIVAS FUTURAS
-Andamiajes (scaffolds)
-Cultivo en condiciones GMP. Aplicación clínica
SALA BLANCA