Este resumen describe un documento sobre las células madre mesenquimales (MSCs) y su utilización en el tratamiento de lesiones del aparato locomotor en caballos. Las MSCs se pueden aislar de la médula ósea y el tejido adiposo, y tienen la capacidad de diferenciarse en varios tipos de células. El documento describe tres ensayos para evaluar la eficacia de las MSCs autólogas y heterólogas en el tratamiento de lesiones naturales e inducidas en caballos.

1. I Jornadas Científicas IIS Aragón
8-9 Noviembre 2010
UTILIZACIÓN DE LAS MSCs EN EL TRATAMIENTO DE
LESIONES DEL APARATO LOCOMOTOR EN CABALLOS
Clementina Rodellar Penella

2. ¿Qué son las MSCs?
MÉDULA (BM-MSCs)
Mesenchymal Stem cells (MSCs)
TEJIDO ADIPOSO (AT-MSCs)
Células multipotentes aisladas por Friedestein y cols en 1970
Han pasado 40 años …
• Controversia sobre su nomenclatura: CFUs, MSCs, MPCs
• Problemas para su identificación: definición de estándares por
la ISCT (2006):
a) Capacidad de adherencia al plástico y capacidad para formar colonias
b) Ausencia de determinados marcadores de superficie (CD34, CD45,
CD14…) y presencia de otros como CD90 o CD105
c) Capacidad de diferenciación a osteocito, condrocito y adipocito.

3. ¿POR QUÉ MSCs?
- Fácil aislamiento
- Fácil cultivo
CARACTERÍSTICAS
- Gran potencial de expansión “ex vivo”
- Gran potencial diferenciación
ADEMÁS…
- Tienen capacidad inmunomoduladora y antiinflamatoria tanto “in
vivo” como “in vitro”.
- No expresan el Complejo Mayor de Histocompatibilidad de tipo II
en las especies en las que se ha estudiado como la rata, perro,
cerdo, humana y babuinos, lo que determina su baja inmunogenicidad.

4. ¿POR QUÉ EL CABALLO?
En los países desarrollados el mundo del caballo mueve una economía
muy importante, no comparable a ningún otro animal doméstico.
GRAN INCIDENCIA DE PATOLOGÍAS EN
TENDONES , LIGAMENTOS Y ARTICULACIONES
Retirada de la competición
Tiene importancia en sí mismo y como modelo
para patologías del aparato locomotor en humana
- Similitudes entre tamaño y tipo de lesiones
- Susceptible de ser entrenado y realizar desafíos atléticos
Se considera que los resultados en caballos para este tipo de patologías podrían ser
más fácilmente extrapolables a la situación de los deportistas humanos que los
obtenidos con otros modelos experimentales (rata, conejo, pequeños rumiantes).

5. Financiación PAMER 2010
1.Caracterización de MSCs:
- Proliferación
- Diferenciación
- Inmunofenotipo
2. Efectividad “in vivo” del transplante de MSCs
autólogas en el tratamiento de lesiones del aparato
locomotor en caballos

6. Financiación PAMER 2010
1.Caracterización de MSCs:
- Proliferación
- Diferenciación
- Inmunofenotipo
- Papel antiproliferativo e inmunomodulador “in vitro”

7. EXPRESIÓN RELATIVA DE mRNA DE ANTÍGENOS DE SUPERFICIE
AT-MSC
BM-MSC
* p<0,05, n= 5.

8. ESTUDIOS DE PROLIFERACIÓN
- > Proliferación en las MSCs obtenidas de tejido adiposo
- Grandes diferencias individuales

9. DIFERENCIACIÓN A OSTEOCITO, ADIPOCITO Y CONDROCITO
Prolongaciones citoplasmáticas
que les permiten establecer
contacto con otras células
El aspecto del nucleolo indica
una alta actividad de síntesis
en los ribosomas

10. EXPRESIÓN RELATIVA mRNA EN MARCADORES ESPECÍFICOS
OSTEOGÉNESIS
ADIPOGÉNESIS BM-MSCs
Expresión en todos los casos entre
controles y células diferenciadas
excepto COL1A1
p<0,05 ** p<0,01 *** p<0,001, n= 5.

11. Financiación PAMER 2010
1.Caracterización de MSCs:
- Proliferación
- Diferenciación
- Inmunofenotipo
2. Efectividad “in vivo” del transplante de MSCs
autólogas y heterólogas en el tratamiento de lesiones
del aparato locomotor en caballos

12. Financiación PAMER 2010
2. Efectividad “in vivo” del transplante de MSCs
autólogas y heterólogas en el tratamiento de lesiones
del aparato locomotor en caballos

13. ENSAYO I: MSCs EN TRATAMIENTO DE LESIONES NATURALES
Implante autólogo de MSCs en pacientes con tendinitis del hospital veterinario
Tendones flexores digitales (superficial y profundo) y del
Caso clínico
USO CLÍNICO DE MSCs EN LESIONES NATURALES
ligamento suspensor del menudillo
Ninguno de los caballos tratados con implante autólogo de MSC han
ENSAYO II: MSCs EN TRATAMIENTO DE LESIONES INDUCIDAS
Lesión: Ligamento suspensor del menudillo en extremidad
mostrado reacciones adversas serias, sistémicas o locales, tras el
posterior (Corte sagital)
tratamiento
Implante autólogo de MSCs en caballos de experimentación
La evolución ecográfica muestra una marcada mejoría de las lesiones,
en comparación con la evolución esperada en lesiones similares tratadas
convencionalmente
ENSAYO III: MSCs HETEROLOGAS EN ARTICULACION
La mayoría de los casos muestran una reparación ecográfica
prácticamente completa a partir de los 6 meses del tratamiento
(ecogenicidad y orientación fibrilar)
Pre-inyección 1 mes post- 3 meses post- 8 meses post-
tratamiento tratamiento tratamiento

14. ENSAYO II: MSCs EN TRATAMIENTO DE LESIONES INDUCIDAS
Implante autólogo de MSCs en caballos de experimentación
…
… en el tratamiento de lesiones naturales hemos
visto que la evolución es buena, pero con lesiones
inducidas en animales de experimentación :
MATERIAL ANIMAL UNIFORME (sexo, peso…)
MATERIAL ANIMAL UNIFORME (sexo, peso…)
LESIONES BILATERALES SIMILARES
CONTROLES
FACTORES DE CRECIMIENTO ó MSCs?
ANÁLISIS POST-MORTEN

15. ENSAYO II: MSCs EN TRATAMIENTO DE LESIONES INDUCIDAS
Implante autólogo de MSCs en caballos de experimentación con tendinitis
inducidas
24 lesiones inducidas mecánicamente en caballos
de experimentación (12 animales).
12 CABALLOS
Lote A: 6
tratado sólo con fPRP 6
Lote B: tratado con FT-MSCs y resuspendidas en RL
3
Lote C: tratado 3 3 3
con BM-MSCs y resuspendidas en RL
Lote D: tratado
IZDA DRCHA IZDA sólo con RL
DRCHA IZDA DRCHA IZDA DRCHA
BM PRPs BM RL FT PRPs FT RL
(B) (A) (B) (D) (C) (A) (C) (D)
Valoración clínica y ecográfica.
Caracterización genética, bioquímica, histológica,
mecánica y funcional del tejido regenerado.

16. FACULTAD DE VETERINARIA
Inmaculada Martín
Rosario Osta
Pilar Zaragoza
Paco Vázquez
Antonio Romero
Beatriz Ranera
Ana Rosa Remacha
Jaber Lyahyai
Fernanado Fernandes
FACULTAD DE MEDICINA
Maria Luisa Bernal
Jorge Albareda
Concha Junquera
CPS (Grupo GEMM)
Manolo Doblare
José Manuel García
CIEMAT
Rosa Yañez