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Estancia de Postdoctorado:
Dra. Marianela Paredes Mendoza
Laboratorio de Inmunología Molecular Microbiana Facultad
de Medicina
Dra. Yolanda López Vidal
Dra. Antonia I. Castillo Rodal
Dr. Gonzalo Castillo Rojas
Quantitative PCR Monitoring of Antibiotic
Resistance Genes and
Bacterial Pathogens in Three European
Artificial Groundwater
Recharge Systems
Uta Böckelmann, Hans-Henno Do¨rries,Neus Ayuso-
Gabella,Miquel Salgot de Marc¸ay,Valter Tandoi, Caterina
Levantesi,Costantino Masciopinto, Emmanuel Van Houtte,
Ulrich Szewzyk,Thomas Wintgens, and Elisabeth Grohmann
APPLIED AND ENVIRONMENTAL MICROBIOLOGY, 2009,
75(1):154–163
Justificación
 La recarga de acuíferos presenta ventajas para la
gestión integrada del ciclo del agua. Sin embargo
uno de los riesgos que se originan por la recarga
de acuíferos que más preocupa es la posible
contaminación con bacterias patógenas
resistentes a antibióticos.
 Los antibióticos se emiten a diario en el medio
ambiente, se pueden detectar fácilmente en los
recursos hídricos lo que conduce a la creciente
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la abundancia y persistencia de la resistencia a
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Justificación
 Existe poca información
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de resistencia dentro y
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MEDITERRANEAN WASTEWATER REUSE WORKING GROUP
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Membranas Osmosis reversa
 Los términos
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 La tolerancia, es la
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Furuya EY and Lowy F (2006) Antimicrobial-resistant bacteria in the community setting
Nat Rev Microbiol. 4: 36–45 doi:10.1038/nrmicro1325
Transferencia horizontal de genes
OBJETIVOS
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fueron seleccionados debido a su abundancia y
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 ampC (resistencia a la ampicilina)
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Ruptura celular y extracción de ADN total
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 En el agua potable y de riego, ninguno de los
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  • 1. Estancia de Postdoctorado: Dra. Marianela Paredes Mendoza Laboratorio de Inmunología Molecular Microbiana Facultad de Medicina Dra. Yolanda López Vidal Dra. Antonia I. Castillo Rodal Dr. Gonzalo Castillo Rojas
  • 2. Quantitative PCR Monitoring of Antibiotic Resistance Genes and Bacterial Pathogens in Three European Artificial Groundwater Recharge Systems Uta Böckelmann, Hans-Henno Do¨rries,Neus Ayuso- Gabella,Miquel Salgot de Marc¸ay,Valter Tandoi, Caterina Levantesi,Costantino Masciopinto, Emmanuel Van Houtte, Ulrich Szewzyk,Thomas Wintgens, and Elisabeth Grohmann APPLIED AND ENVIRONMENTAL MICROBIOLOGY, 2009, 75(1):154–163
  • 3. Justificación  La recarga de acuíferos presenta ventajas para la gestión integrada del ciclo del agua. Sin embargo uno de los riesgos que se originan por la recarga de acuíferos que más preocupa es la posible contaminación con bacterias patógenas resistentes a antibióticos.  Los antibióticos se emiten a diario en el medio ambiente, se pueden detectar fácilmente en los recursos hídricos lo que conduce a la creciente preocupación con respecto a su contribución en la abundancia y persistencia de la resistencia a los antibióticos en poblaciones de
  • 4. Justificación  Existe poca información crítica con respecto a la transferencia de genes de resistencia dentro y entre las poblaciones de bacterias en el ambiente.
  • 5. MEDITERRANEAN WASTEWATER REUSE WORKING GROUP (MED WWR WG) http://www.emwis.net/topics/wastewater
  • 6.
  • 7.
  • 9.
  • 10.
  • 11.  Los términos empleados para describir los niveles de respuesta a los antibióticos son tolerancia, susceptibilidad y resistencia.  La tolerancia, es la habilidad de una población de no ser dañada en las dosis normalmente utilizadas para controlar otras especies.  La susceptibilidad,
  • 12. Furuya EY and Lowy F (2006) Antimicrobial-resistant bacteria in the community setting Nat Rev Microbiol. 4: 36–45 doi:10.1038/nrmicro1325 Transferencia horizontal de genes
  • 13.
  • 14.
  • 15. OBJETIVOS  Detectar y cuantificar la presencia de seis diferentes genes de resistencia a los antibióticos  Detectar y cuantificar la presencia de tres patógenos intracelulares humanos  Determinar indicadores de contaminación fecal
  • 16. ¿ Porqué? Los genes de resistencia fueron seleccionados debido a su abundancia y persistencia  ampC (resistencia a la ampicilina)  mecA (resistencia a la meticilina)  blaSHV-5 (resistencia extendida -lactámicos, resistencia a las penicilinas y cefalosporinas)  ermB (eritromicina)  tetO (resistencia a la tetraciclina)  vanA (resistencia a la vancomicina).
  • 17. ¿ Porqué?  Yersinia enterocolitica, Helicobacter pylori, y Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis Sobreviven por largo tiempo en los sistemas acuáticos y causan enfermedades relacionadas con el uso y consumo de agua
  • 18. Metodología Torreele, Bélgica, Sabadell, España y Nardo, Italia, Concentración de la muestra Ruptura celular y extracción de ADN total qPCR en tiempo real (efecto Peltier, sondas y fluorocromos ).
  • 19. RESULTADOS  En el agua potable y de riego, ninguno de los patógenos se detectaron.  tetO ermB y se encontraron con frecuencia en el agua tratada de Sabadell nardo.  mecA se detectado una sola vez en el agua tratada de Sabadell.