MEDIOS DE CULTIVO MICROBIOLOGIA

2. OBJETIVOS

3.  Facilitar el crecimiento y el aislamiento de las bacterias
presentes en una muestra clínica.
 Determinar qué bacterias entre las que se desarrollan
tienen más probabilidades de ser las causantes de la
infección y cuales son sus posibles contaminantes o
colonizadores.
 Obtener un desarrollo suficiente de las bacterias de
importancia clínica para permitir su identificación y su
caracterización.
 CULTIVO PURO
 CULTIVO MIXTO
 CULTIVO CONTAMINADO

4. DEFINICIÓN
 Sustrato sólido, líquido o semisólido que contiene todos los
nutrientes necesarios para el crecimiento y desarrollo de los
gérmenes.
 Fuentes de energía, carbono, nitrógeno, fósforo, azufre y varios
minerales.
 pH
Luz
Temperatura
 Esterilidad absoluta (salvo excepciones)
 Recipientes adecuados

5. Es importante destacar que la transición exitosa de un
microorganismo in vivo a un ambiente in vitro va a depender de:
Disponibilidad de nutrientes esenciales
Condiciones ambientales adecuadas
pH
Temperatura
Oxígeno y CO2
Presión
Luz

6. Clasificación de los medios de
cultivo según consistencia
SEMISÓLIDOS
LÍQUIDOS
SÓLIDOS

10. semisólido

11. Caldo nutritivo
Caldos de enriquecimiento
Caldos revitalizadores

12. Clasificación de los medios
de cultivo según utilización
Selectivo y
diferencial
Nutritivo
Enriquecimiento

13. Contienen nutrientes que
favorecen el desarrollo de la
mayoría de los
microorganismos sin
requerimientos especiales de
cultivo.
No promueven el
crecimiento de ningún
agente en particular
MEDIOS NUTRITIVOS

14. MEDIOS DE ENRIQUECIMIENTO

15. MEDIOS SELECTIVOS
Contienen uno o más agentes que inhiben el crecimiento de los
microorganismos que no se quieren estudiar
Agentes inhibidores: colorantes, sales biliares, alcoholes, ácidos y
antibióticos

16. MEDIOS DIFERENCIALES
Contienen un factor o factores que permite que
las colonias de una especie o un tipo bacteriano
exhiban ciertas características metabólicas o de
cultivo que puedan utilizarse para diferenciarlas
de otras bacterias que crecen en el mismo agar

17. MEDIOS ESPECIALES
MEDIOS
CROMÓGENOS
MEDIOS DE
TRANSPORTE
MEDIOS DE
CONSERVACIÓN

19. CONTROL DE CALIDAD
 El Control de Calidad en la preparación y evaluación de los
medios de cultivo es considerado como una esencial y buena
práctica de laboratorio, necesaria para mantener el nivel y la
ejecución de cualquier técnica microbiológica.
Proceso continuo que se extiende desde las materias primas ;
a través del productor hasta el producto final utilizado en los
diferentes departamentos de análisis y diagnóstico
microbiológico.

20. ▪ Recuperación o supervivencia de los microorganismos de interés
(Productividad)
▪ Inhibición o suspensión de los microorganismos no deseados.
(Selectividad)
▪ Propiedades bioquímicas (diferenciales y diagnósticas)
▪ Propiedades físicas (por ejemplo, pH, Volumen)
▪ Sea estéril .... etc.
 El Jefe inmediato responsable del área
* Deberá analizar mensualmente los resultados de las pruebas
realizadas por el responsable del departamento de control de calidad
* Evaluará el cumplimiento de objetivos a través de los resultados

21. CRITERIOS DE EVALUACIÓN DE LA CALIDAD
DE LOS MEDIOS DE CULTIVOS PREPARADOS.
Se evalúa utilizando criterios objetivos del medio respecto a:
 La recuperación o supervivencia de los microorganismos de interés
 La inhibición o supresión de los microorganismos no deseados tiene que ser
cuantitativa
 Los atributos ( por ejemplo: Propiedades físicas y bioquímicas)
 Rajadura del plato o envase
 Variaciones en el volumen del medio
 Hemólisis
 Cristales en el medio
 Presencia de burbujas
 Presencia de coágulos
 Cambio de color normal
 Contaminación
 Falla en la inhibición de microorganismos saprofitos
 Esterilidad

22. PRUEBAS FUNCIONAMIENTO
 Para evaluar cada lote de medio de cultivo que sea recibido
en el laboratorio, se emplean cepas patrones (ATCC) de varios
géneros y especies de acuerdo al medio de cultivo a analizar.
 El control del funcionamiento consistirá en comprobar:
 capacidad del medio de recuperar un bajo número de los
microorganismos más sensibles para los que ha sido
preparado.
 capacidad de inhibir un alto número de los
microorganismos que deben ser inhibidos en caso de
los medios selectivos y
diferenciar los microorganismos para los que ha sido
diseñado en caso de los medios diferenciales.

23. RECONSTRUCCIÓN DEL MEDIO DE
CULTIVO
DESHIDRATADO
• Cumplir con las instrucciones de preparación del medio de cultivo
indicado en la etiqueta del envase
• Cumplir con los procedimientos técnicos de fórmulas enviadas por el
cliente
• Utilizar agua destilada de calidad
• Determinar el pH del M de C
• Esterilización del medio de cultivo
• Procedimiento escrito
• Control de esterilidad del Medio de Cultivo

24. AGAR INFUSION DE CARNE

25. MEDIO DE LOWENSTEIN JENSEN

26. AGAR SANGRE

27.  DEFECTO
 Apelmazamiento del
 Producto deshidratado
 El valor de pH no coincide
 Con el indicado
ERRORES EN LA PREPARACIÓN
Apelmazamiento del producto deshidratado
 El envase no fue cerrado correctamente después de su uso.
 El envase permaneció abierto por largo rato.
 El producto sobrepasó la fecha de vencimiento.
El valor de pH no coincide con el indicado
• No fue empleada agua destilada
• El medio fue sobrecalentado durante su preparación
• El Ph no fue determinado correctamente
• El medio estaba vencido.

28. Aparición de turbiedad o precipitados:
 El medio preparado perdió agua por evaporación
 El medio se calentó en exceso
 El medio no se calentó lo suficiente.
 No fue empleada la cantidad del medio o suplemento recomendada.
El color del medio no coincide con el indicado:
 El medio fue sobrecalentado durante su preparación.
 El pH no fue ajustado correctamente.
 El recipiente empleado estaba sucio.

29. El gel se obtiene más blando que lo característico para el medio:
 No fue garantizada la disolución total del agar durante la preparación
del medio.
 No fue empleada la cantidad del medio recomendada o se añadió agua
en exceso.
El crecimiento de los microorganismos es pobre:
 El medio fue sobrecalentado
 El valor del pH no fue ajustado correctamente.
 La adición de suplementos al medio se efectuó a excesiva temperatura.
 El medio no fue mezclado correctamente.

30. El crecimiento de los microorganismos es atípico:
 Quedaron residuos de sustancias inhibidoras del
crecimiento no deseables, en los recipientes donde se
preparó o distribuyó el medio.
 El medio de cultivo fue preparado de manera incorrecta.
 El producto sobrepasa la fecha de vencimiento.

31. ES, POR LO TANTO, MUY IMPORTANTE QUE EL
TECNÓLOGO MÉDICO SEA QUIEN SUPERVISE Y
CONTROLE TODOS LOS FACTORES NECESARIOS EN
LA PREPARACIÓN Y CONSERVACIÓN DE LOS MEDIOS
DE CULTIVO, PARA ASÍ LOGRAR AISLAR E
IDENTIFICAR CON EXCELENCIA LOS DISTINTOS
AGENTES MICROBIANOS.

36. Los métodos de siembra se utilizan
para inocular por distintos métodos
sobre un medio de cultivo apropiado
una muestra que contenga
bacterias con el fin de reproducirlas
para aumentar el número de
individuos de la población y formar
colonias en el caso de medios
sólidos.

40. I. Siembra con rastrillo
II. Siembra con asa de cultivo
- Diseminación en superficie
- Agotamiento en superficie
- Tubos en superficie
- Tubos en profundidad o picada
III. Siembra con tórula

41. Figura 12: Siembra con rastrillo
Manual de microbiología 2011, U. Mayor

42. Figura 13: Siembra de diseminación en
superficie
Manual de microbiología 2011, U Mayor

43. Figura 14: Siembra semi-cuantitativa de
agotamiento en superficie.
Manual de microbiología 2011, U Mayor

44. Figura 15: Siembra de tubo en superficie.
Manual de microbiología 2011, U Mayor

45. Figura 16: Siembra de tubo profundidad.
Manual de microbiología 2011, U Mayor

47. 1 minuto 1 minuto
30
segundo
s
15segund
os
Decolorar
con alcohol-
acetona

48. Primera aproximación
al posible diagnóstico
Técnicas rápidas y
baratas
Diagnósticos rápidos
y certeros
DIRECTOS

49. EXAMEN AL FRESCO
MATERIA GENITAL
Secreción
vaginal
y/o uretral
Semen,
secreción
prostática
Orina de
primer
chorro

50. LEVADURAS
BACTERIAS
CLUE CELLS
LEUCOCITOS
TRICHOMONAS