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1. UNIVERSIDAD TÉCNICA DE MANABÍ
FACULTAD DE CIENCIAS MATEMÁTICAS FÍSICAS Y
QUÍMICAS
ESCUELA DE INGENIERÍA QUÍMICA
FUNDAMENTOS DE BIOQUIMICA Y MICROBIOLOGIA II Y
LABORATORIO
INFORME DE LABORATORIO #2
Preparación de un medio de cultivo
ESTUDIANTE:
Plúa Ortiz Bolívar Alfredo
Docente: Ing. Virginia Sánchez
Inicio de la práctica
13/05/2019
Término de la práctica
16/05/2019
PERIODO
ABRIL 2019 – AGOSTO 2019

2. 1. Tema
Preparación de un medio de cultivo
2. Resumen
El medio de cultivo constituye el aporte de nutrientes indispensables para el
crecimiento de los microorganismos. La composición precisa dependerá de la
especie que se quiera cultivar, porque las necesidades nutricionales varían
considerablemente. Hay microorganismos muy poco exigentes que crecen bien
en medios de laboratorio normales y microorganismos muy exigentes que
necesitan determinadas sustancias como vitaminas, suero o sangre para crecer.
3. Introducción
Uno de los sistemas más importantes para la identificación de microorganismos
es observar su crecimiento en sustancias alimenticias artificiales preparadas en el
laboratorio. El material alimenticio en el que crecen los microorganismos es el
Medio de Cultivo y el crecimiento de los microorganismos es el Cultivo. Se han
preparado más de 10.000 medios de cultivo diferentes. Para que las bacterias
crezcan adecuadamente en un medio de cultivo artificial debe reunir una serie de
condiciones como son: temperatura, grado de humedad y presión de oxígeno
adecuadas, así como un grado correcto de acidez o alcalinidad. Un medio de
cultivo debe contener los nutrientes y factores de crecimiento necesarios y debe
estar exento de todo microorganismo contaminante. La mayoría de las bacterias
patógenas requieren nutrientes complejos similares en composición a los líquidos
orgánicos del cuerpo humano. Por eso, la base de muchos medios de cultivo es
una infusión de extractos de carne y Peptona a la que se añadirán otros
ingredientes. El agar es un elemento solidificarte muy empleado para la
preparación de medios de cultivo. Se licúa completamente a la temperatura del
agua hirviendo y se solidifica al enfriarse a 40°C. Con mínimas excepciones no
tiene efecto sobre el crecimiento de las bacterias y no es atacado por aquellas que
crecen en él. La Gelatina es otro agente solidificarte, pero se emplea mucho menos
ya que bastantes bacterias provocan su licuación. En los diferentes medios de
cultivo se encuentran numerosos materiales de enriquecimiento como hidratos de
carbono, suero, sangre completa, bilis, etc. Los hidratos de Carbono se adicionan
por dos motivos fundamentales: para incrementar el valor nutritivo del medio y

3. para detectar reacciones de fermentación de los microorganismos que ayuden a
identificarlos.
4. Objetivos
• Conocer los aspectos básicos de bioseguridad y reglas generales de trabajo
para el desarrollo de actividades en el laboratorio de microbiología.
• Adquirir habilidades y/o destrezas para la siembra y cultivo de
microorganismos.
• Hacer un primer acercamiento a la manipulación de microorganismos.
5. Marco Teórico
6. Medios de cultivo:
Son soluciones estériles que tienen macro y micronutrientes, sustancias que
permiten el crecimiento de organismos. Un medio de cultivo es un sustrato o una
solución de nutrientes que permite el desarrollo de microorganismos. En las
condiciones de laboratorio para realizar un cultivo, se debe sembrar sobre el medio
de cultivo elegido las muestras en las que los microorganismos van a crecer y
multiplicarse para dar colonias.
Los microorganismos:
Son los seres más abundantes de la tierra, pueden vivir en condiciones extremas
de pH, temperatura y tensión de oxígeno, colonizando una amplia diversidad de
nichos ecológicos. Entre los requerimientos más importantes para su desarrollo
están el carbono, el oxígeno, nitrógeno, dióxido de carbono e hidrógeno. Muchas
bacterias sin embargo necesitan del aporte extra de factores de crecimiento
específicos en forma de suero, sangre y extracto de levadura entre otros.
Cultivo:
Es el producto del crecimiento de organismos o grupos de organismos,
establecidos con fines experimentales o industriales.
Cultivo puro:
Es la presencia de una sola especie de microrganismo libre de todo contaminante,
a esto que también se le denomina AXENICO.
7. Procedimiento
• Materiales y Equipos
Pipetas
Cajas Petri
Matraz Erlenmeyer
Cabina de flujo laminar

4. Autoclave
Vidrio reloj
Espátula
Lápiz graso
Cinta de papel
Estufa
Algodón
Probeta
Incubadora
Papel aluminio
Papel Kraft
Piola hilo
Gasa
Tijeras
Rollo de papel
Balanza
Placa calefactora
• Reactivos
Agua destilada
Agar MRS
Caldo nutritivo
Procedimiento
1) Sacar las proporciones.
2) Pesar sustancias.
3) Medir el agua destilada y trasvasarlo a matraz de Erlenmeyer.
4) Homogenizar las sustancias más el agua.
5) Hervir, este proceso se realiza de acuerdo a que medio se va a preparar.
6) Añadir y homogenizar las sustancias, hasta disolver las sustancias.
7) Acondicionar el medio.
8) Rotular.
9) Esterilizar (autoclave).
10) Usar el medio de cultivo.
Cálculos
Agar MRS
67,15𝑔 → 1000ml
6,715g ← 100ml

5. Caldo nutritivo
13𝑔 → 1000ml
2,6g ← 200ml
8. Conclusiones
Se logró conocer los diferentes medios de cultivos para sembrar microorganismos.
Aprendimos los pasos para elaborar un medio de cultivo, sus cálculos respectivos
de las cantidades necesarias para su preparación.
9. Referencias Bibliográficas
Baker, F. J., y Breach, M. R. 2012. Manual de técnicas de Microbiología Médica.
Editorial acribia. Zaragoza, España. 676p.
Madigan, M. T.; y Parker J. Brock: Biología de los Microorganismos. Editorial
Prentice Hall Hispanoamericana S.A. 10a
Ed. Madrid. 2011.
Manuel de medios de cultivo Merck. Editorial Merck Alemana. 2011.

6. 10. Anexos