2. La ecografía bovina es una técnica en la que se
emplean ondas de sonido de alta frecuencia
para producir imágenes de los tejidos blandos y
órganos internos de bovinos y equinos desde
los 80s y ha tenido grandes avances
tecnológicos para su mejor aplicación.
Diversos órganos pueden examinarse por ultrasonografía.
En el caso del útero, se puede analizar los cambios
morfológicos durante el ciclo estral de la vaca. Es
fundamental para el diagnóstico de diferentes
enfermedades del aparato reproductor, como la metritis y
salpingitis, entre otras dolencias”; permite determinar la
presencia de folículos anovulatorios y eso es fundamental
para decidir si se efectúa la recolección de ovocitos o
embriones.
3. EQUIPOS DE ECOGRAFÍA
Los ecógrafos sectoriales trabajan con
transductor sectorial y producen una
imágen tipo pirámide.
Sectoriales
Los lineales funcionan con transductores lineales conformando
imágenes de tipo rectangular. Los transductores lineales son
usados más frecuentemente en reproducción bovina, ya que el
recto tiene una amplia superficie plana.
Lineales
4. En la actualidad los ecógrafos emplean transductores convexos que son de
frecuente aplicación en la tecnología de aspiración folicular y obtención de
ovocitos para la fertilización in vitro. Las sondas lineales tienen màs
superficie de contacto, las hay externas y transrectales
Convexos
5. ECOGENICIDAD DE LOS
TEJIDOS
Hiperecogénico, hiperecoico: Aquellas estructuras que
en sus diferentes interfases reflejan más los
ultrasonidos se denominan hiperecoicas (brillantes, su
espectro va del blanco al gris claro), ej., tendones; se
produce una gran reflexión de US (escasa o nula
transmisión
Isoecogénico, ecógeno o ecoicos: la imagen es más o
menos blanquecina, según la ecogenicidad de un
órgano o de la región estudiada.
Hipoecogénico, hipoecoico: aquellas estructuras que
propagan menos y producen una menor reflectividad
se conocen como hipoecoicas (espectro gris oscuro a
negro), ej., músculo.
Anecogénico, anecoico: ausencia de ecos por no
producirse reflexión de US (transmisión completa). Es
aquella estructura que no refleja el haz ultrasónico y
produce una imagen negra, como es el caso de algunos
líquidos orgánicos, ej., contenido de los quistes
sinoviales.
6. ECOGRAFÍA EN LAS DIFERENTES ESPECIES ANIMALES,
BOVINO, EQUINO, PORCINO, OVINO Y CAPRINO.
7. ECOGRAFÍA EN BOVINOS
El útero se examina en toda su dimensión en cortes
transversales, longitudinales y oblicuos. si los cuernos están
vacíos es sumamente fácil su ubicación mediante su
visualización en la pantalla de redondeles de 2 a 4 cm de
diámetro, pero si la vaca esta en celo, entonces la luz uterina
se observa con exudados, apreciándose una imagen de
estrella oscura anecogénica en toda la luz del cuerno.
En la ultrasonografía del útero es fundamental el análisis de
los cambios morfológicos durante el ciclo estral en la vaca.El
líquido intrauterino comienza a ser visible a los 3 a 4 días
previos a la ovulación y disminuye hasta los días 3 y 6 del
ciclo. El mayor acúmulo de fluido coincide con la máxima
producción de mucus en las fases de estro y metaestro.
8. ECOGRAFIA EN YEGUAS
En la yegua, un folículo pre - ovulatorio puede llegar a
medir 45 a 50 mm. desde el ecógrafo algunos rayos van a
incidir perpendicularmente y otros de manera tangencial.
Esto va a originar en la imagen una zona de ecogenicidad
mejorada o aumentada porque la vesícula de líquido no
va a detener el sonido.
En la zona donde el rayo incide de manera tangencial va a
ver una pérdida total de sonido y vamos a tener por
detrás una zona oscura.
9. ECOGRAFÍA PORCINA
La ultrasonografía reproductiva puede realizarse a través de la pared abdominal o por vía transrectal,
para lo cual será necesario tener al animal inmovilizado, preferiblemente en una jaula. para las ecografías
tras abdominales, la sonda debe ubicarse sobre la pared abdominal derecha, a unos 5 cm sobre los dos
últimos pares de mamas. es necesario colocar gel obstétrico sobre la superficie de la sonda para una
mayor transmisión y captación de las sondas a través de la piel. ubicado el transductor en esa posición,
las ondas sonoras reflejan imágenes perpendiculares de la cavidad abdominal.
10. ECOGRAFÍA EN OVINOS Y CAPRINOS.
Las ecografías deben realizarse a partir de los 26 días de gestación, ya que en este momento tiene una certeza muy
alta(mayor o igual al 95%;) antes de este periodo los resultados pueden ser inciertos. a los 40 dias de gestacion se
puede ver la presencia de cotiledones placentarios, agilizando mucho el trabajo, debida a la rápida confirmación de
preñez. a partir del día 60 resulta más práctica la vía abdominal, por el tamaño del feto requiere más tiempo de
observación y experiencia.
11. EVALUACIÓN SEMINAL
Examen físico del toro
Es fundamental realizar a todos los todos, una minuciosa
revisión.
Una vez que el toro es confinado, la evaluación física continúa con la observación de los ojos, dientes y
fosas nasales. Una vez que el toro reúne las características fenotípicas buscadas en cuanto a su
conformación, estructura y desarrollo (todas subjetivas y evaluadas por el ojo humano) se deberá
profundizar en que el veterinario efectúe una revisión minuciosa.
El examen físico incluye la observación del toro en
movimiento, la conformación de las patas y la condición
corporal general.
El examen físico incluye la observación del toro en
movimiento, la conformación de las patas y la condición
corporal general.
12. Examen de genitales externos
Testículos
Cuando se proceda a la palpación de los testículos hay que ser muy cuidadosos, una
excesiva presión puede llevar a degeneración. Se deberá inspeccionar
Se deberá inspeccionar:
13. Escroto
Su función es de protección y de termorregulación. Cualquier tipo de lesión puede ocasionar
alteraciones en los testículos y como consecuencia de la espermatogénesis
Circunferencia escrotal (CE): está directamente correlacionada con volumen y peso
testicular. La CE esta influida por el peso, edad y raza, crecimiento y nutrición.
Bos Taurus: se toma una CE mínima de 31 cm a los 18 meses
Bos Indicus: medida mínima de 27 cm a los 24 meses
La CE esta relacionada a la calidad seminal, aproximadamente el 4- 4.6% de los toros
con CE igual o mayor a 30 cm tienen calidad seminal cuestionable.
Mientras que toros con CE menor a 30 cm raramente presentan semen de calidad
satisfactoria.
14. Epidídimo
El epidídimo es el órgano donde maduran y almacenan los espermatozoides. El epidídimo está compuesto por tres
porciones: cabeza, cuerpo y cola. Debe comprobarse presencia y tamaño de cada porción. En la inspección se
comprobará el tamaño y simetría de la cola del epidídimo. A la palpación se determina tamaño, forma, simetría,
posición, tono y reacción de dolor. Para hacerla se eleva el testículo contralateral al que se palpa.
15. Cordón espermático
El cordón espermático se debe palpar en
toda su longitud; se debe verificar su
extensión, no debe ser tan corto que
pueda llevar a afectar la
termorregulación, ni muy largo y
colgante, que lo predisponga a
constantes traumatismos.
16. El Pene
El Prepucio
El pene se explora por palpación bajo la piel del abdomen,
desde la inserción del escroto y en dirección al ombligo, debe
determinarse la presencia de heridas, traumas o
inflamaciones.
El prepucio debe ser palpado para descartar la presencia de
adherencias, heridas o hematomas; hay una característica
especial en toros de tipo cebuino, y es la de tener un
prepucio más penduloso, por lo cual son más propensos a
tener lesiones.
17. Recolección de semen
Se considera la operación de mayor
importancia en el programa de
inseminación. Este proceso envuelve
una serie de factores, prácticas,
conocimientos y habilidades, que
puestos en un conjunto, van a resultar
en el mejor aprovechamiento del toro y
por ende un eyaculado con una con una
excelente calidad.
18. Proceso de higienización pre – colecta
En el inicio del proceso denominado higienización Pre –
Colecta, se realiza el alistamiento o la preparación del toro
para ser colectado. El toro que va ser destinado para el
proceso de colecta debe pasar por una serie de procesos o
prácticas que permiten obtener al final del proceso, una
muestra de semen colectado con unas excelentes cualidades
higiénicas.
El proceso inicia con un lavado de limpieza de la parte ventro
abdominal de manera descendente, utilizando un bajón
neutro y abundante agua, realizando una serie de masajes
para remover cualquier tipo de suciedad presente y
posteriormente realizar el secado con papel toalla.
19. Posteriormente con una tijera se realiza el corte del exceso
de pelo del ostio prepucial, a una altura de 2 a 3 centímetros
de la base, siempre con el cuidado de generar algún tipo de
irritación en esta área; una vez terminado este proceso se
realiza el lavado con agua y jabón neutro, el secado se realiza
con papel toalla, finalizando con un lavado interno del
prepucio con una infusión de solución salina; estas labores se
realizan con el único fin de evitar la contaminación del
semen, con algún tipo de agente externo o por propias
secreciones del toro.
20. Conducta sexual del toro
El comportamiento sexual en el toro incluye la detección, cortejo y servicio de hembras en estro. La libido, o impulso
sexual, ha sido definida como la "disposición y entusiasmo" de un toro de tratar de montar y servir a una hembra,
mientras que la habilidad de apareamiento describe su habilidad física para completar el servicio. La capacidad de
apareamiento es una medida del número de servicios alcanzados por un toro bajo condiciones estipuladas y por lo
tanto incluye aspectos tanto de libido como de habilidad para la monta. El tiempo de reacción es el tiempo que pasa
entre el conocimiento del macho de un estímulo apropiado y la finalización del servicio.
21. Colecta con vagina artificial
La vagina artificial consiste en un tubo
cilíndrico de plástico rígido y resistente, de
siete centímetros de diámetro y 35–40
centímetros de largo, recubierto
internamente por una camisa de goma que
se dobla sobre los extremos del cilindro
formando una cámara que se llena con agua
caliente (45–46 º C) y aire, con el fin de
proveer el estímulo adecuado de
temperatura y presión, lográndose así la
eyaculación.
22. Colecta con electroeyaculador
En este método se hace uso de un electroeyaculador
que no es más que un electrodo conectado a una
batería que genera estimulaciones rítmicas provocadas
por descargas no mayores a 20 voltios.
Los electroeyaculadores están diseñados
para estimular los nervios pélvicos
simpáticos y parasimpáticos con impulsos de
bajo voltaje y amperaje y de esta forma
pueden inducir erección peneana y
eyaculación. Un sistema de
electroeyaculación está constituido por los
siguientes componentes: la caja de
transporte, la sonda rectal, la unidad de
control, el cargador de batería, el cable de
energía, el cable de conexión de la sonda, el
mango, el cono y el envase de colección.
24. CARACTERISTICA
MACROSCÓPICAS
Color
Esta característica se evalúa por medio de la
visualización en el laboratorio. El color del eyaculado
depende del contenido de riboflavina, siendo
normalmente desde blanquecino marfil hasta
amarillento. Una coloración rojiza, indica la mezcla con
sangre fresca; si el color es pardo, indica la presencia
de sangre más vieja (hemolizada), denominándose
ambos tipos como hemospermia. Una coloración gris
indica contaminación. Los eyaculados sin
espermatozoides tienen una coloración amarillo-
verdosa y son de apariencia acuosa.
Volumen
El volumen del eyaculado se expresa en mililitros
(mL), y su lectura se hace por medio de un tubo
colector graduado. Normalmente dicho valor, para el
eyaculado de toros, es de aproximadamente 2 mL en
animales jóvenes y en animales adultos ≥ a 4 mL,
llegando hasta 12 mL.
25. pH
Refleja el balance entre las diferentes secreciones,
principalmente entre el pH alcalino de vesículas
seminales y el ácido de la próstata.
El pH del semen varía normalmente en un rango muy
estrecho (7,2 - 8,0), pocos son los trastornos capaces
de alterarlo. Se ha sugerido que un pH elevado (> 8)
puede considerarse un signo de infección seminal si
se asocia a otros síntomas y signos de sospecha,
mientras que un pH disminuido (< 7,2) se observa
cuando existe un déficit de la función de las
vesículas seminales, en especial en pacientes con el
síndrome de ausencia funcional de los conductos
eyaculadores.
Densidad
Para la evaluación de la densidad macroscópica se han
establecido criterios basados en intervalos de
concentración espermática, dependiendo de la
opacidad de las muestras, lo que indica mayor o menor
concentración espermática. Esta evaluación debe ser
verificada en la evaluación microscópica, en la cual se
calcula con gran precisión la concentración
espermática, mediante el uso de la cámara de
Neubauer o cualquier método de cuantificación de
concentración, como el espectrofotómetro
26. Concentración
La concentración de los espermatozoides se expresa como
el número de espermatozoides/mL de semen. La
determinación de la concentración espermática se lleva a
cabo mediante métodos semejantes al recuento de glóbulos
rojos realizado en hematología. El conteo directo de células,
a través del hemocitómetro o cámara de Neubauer fue
diseñado para contar eritrocitos. Esta cámara de Neubauer
consiste de una laminilla especial que tiene 2 cámaras de
conteo. Las cámaras de conteo poseen 0,1 mm de
profundidad y un área graduada en el fondo de la cámara de
1 mm2 . Este cuadro se divide en 25 cuadros más pequeños.
Al conocerse la profundidad y el área se puede determinar
el número de espermatozoides en un volumen dado.
CARACTERISTICA
MICROSCÓPICAS
27. Motilidad Masal
Por movimiento en masa se entiende al movimiento en onda de
todos los espermatozoides, observado en los eyaculados
densos.
Para su valoración se usa el semen fresco, colocando una gota
de éste sobre un porta objetos precalentado a 37ºC en una
plancha térmica a la misma temperatura y se observa bajo el
microscopio con una lente 40x
El movimiento en masa va a depender de tres factores:
concentración, porcentaje de células con movimiento progresivo
y velocidad de movimiento de los espermatozoides. Para evaluar
se usa una escala de 1 a 5, evaluando como 1 al semen que no
presenta ondas y 5 cuando las ondas se mueven rápidamente
formando remolinos.
28. Motilidad individual
La motilidad individual de una muestra de semen se expresa como el porcentaje de células móviles
bajo un campo microscópico. Debido a que el semen bovino es muy concentrado, no se puede realizar
este análisis con semen fresco, por lo tanto, se lo debe diluir, colocar una gota sobre un portaobjeto
temperado a 37ºC y observado al microscopio en una lente de 100x.
29. Morfología
Además de tener una buena motilidad progresiva,
los espermatozoides deben ser morfológicamente
normales. Cualquier anomalía 11 que afecte a algún
atributo del espermatozoide puede dificultar su
migración en el tracto genital de la hembra,
impidiendo la unión con el ovocito. En general, un
buen reproductor no deberá tener más del 30% de
células anormales en un eyaculado.
30. Vitalidad
La vitalidad de la célula espermática, generalmente se
determina valorando su integridad a través de la capacidad
de la membrana plasmática para excluir ciertas sustancias
extracelulares (Betancourt, 2013).
Estado de acrosoma
El acrosoma juega un papel fundamental en la fecundación y
esta importancia hace que convenga realizar una valoración
específica del mismo (Betancourt, 2013).
31. Criopreservación
La criopreservación de esperma se ha
convertido en una herramienta esencial para
la conservación a largo plazo de machos
genéticamente superiores, líneas
transgénicas relevantes y especies en peligro
de extinción. Además, la criopreservación
facilita la distribución del semen a distancia, lo
que ha contribuido en gran medida a la
expansión de tecnologías reproductivas como
la inseminación artificial y la fertilización in
vitro en todo el mundo.
32. Principios básicos para la crioconservación del
semen bovino
El proceso de criopreservación incluye 5 etapas
• Dilución
• Refrigeración
• Adición del crioprotector
• Congelación y
descongelación.
Mientras que algunas fases son relativamente inocuas, otras son muy
estresantes, como es el caso de la refrigeración y la congelación.
33. Diluyentes
Desde el inicio de la criopreservación de
semen bovino , se han utilizado
diluyentes a base de yema de huevo y
leche para proteger los
espermatozoides de los efectos
perjudiciales del enfriamiento y la
congelación .
La lecitina de soja se ha utilizado para reemplazar la
yema de huevo en los diluyentes. Los diluyentes a base
de soja están disponibles comercialmente para la
criopreservación de semen de toro. Sin embargo, el
diluyente de soja varía de un lote a otro y produce tasas
de fertilidad inconsistentes. Recientemente, se han
introducido liposomas compuestos de fosfolípidos
puros para la criopreservación del semen bovino. Sin
embargo, los fosfolípidos puros son bastante caros en
el mercado
34. Características que deben tener los
diluyentes Deben ser isotónicos al semen (tener la misma concentración de
iones libres).
Capacidad amortiguadora (evitar cambios de pH al neutralizar los
ácidos producidos por el metabolismo de los espermatozoides).
Proteger a los espermatozoides de las lesiones producidas por el
choque térmico.
Proporcionar nutrientes para el metabolismo de los
espermatozoides.
Controlar contaminantes microbianos.
Los espermatozoides deben de estar protegidos contra el daño
durante la congelación y descongelación.
Debe preservar la vida de los espermatozoides con un mínimo de
efecto sobre la fertilidad.
35. Crioprotectores
Los agentes crioprotectores son los que tienen la finalidad de
proteger a los espermatozoides durante la fase de cristalización
debido a las bajas temperaturas, el glicerol es la sustancia más
empleada debido a los resultados obtenidos. La eficiencia protectora
del glicerol ha sido atribuida a su capacidad de atrapar el agua y
ayuda a que solo se lleguen a formar pequeños cristales de hielo.
El glicerol, el crioprotector de penetración más común para la criopreservación del semen de mamíferos, protege
los espermatozoides del choque térmico por debajo del punto de congelación. Proporciona un mecanismo de
"amortiguación de sal" y reduce el estrés por congelación. En los bovinos, la motilidad y la fertilidad de los
espermatozoides después de la descongelación dependen de las concentraciones de glicerol en el diluyente. El
glicerol y la yema de huevo tienen un efecto sinérgico en la protección del esperma de toro durante la
criopreservación.
36. Envasado del semen
La inseminación artificial (IA) es la biotecnología reproductiva más empleada en las empresas
ganaderas; su consolidación se ha logrado a partir del uso de semen congelado empacado en pajillas
de 0.25 y 0.5 ml, el cual es aplicado en el cuerpo del útero mediante una técnica instrumental.