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BIOTECNOLOGÍA REPRODUCTIVA
Estudiante: Cobeñas Gisbert
DOCENTE: Dr. Manuel Quezada
CICLO: IX “A”
GENERALIDADES
La ecografía bovina es una técnica en la que se emplean ondas
de sonido de alta frecuencia para producir imágenes de los
tejidos blandos y órganos internos
Útil para determinar gestación precoz, sexado de crías y la
evaluación de las enfermedades del sistema reproducto.
EQUIPOS DE ECOGRAFÍA
LINEALES
• Imagen tipo rectangular
• Necesitan una pequeña
superficie de contacto
CONVEXOS
• Aplicación: aspiracion folicular y obtención de
ovocitos FIV.
• Tienen mas superficies de contacto
• Hay externas y trasrectales
SECTORIALES
• Imagen tipo pirámide
ECOGENICIDAD DE LOS TEJIDOS
Las estructuras corporales están formadas por distintos tejidos, lo que
da lugar amúltiples interfases que originan, en imagen digital.
Hiperecogénico, hiperecoico:
estructuras que en sus
diferentes interfases
reflejan más los ultrasonidos
(brillantes, su espectro va del
blanco al gris claro), ej.,
tendones; se produce una gran
reflexión de US (escasa o nula
transmisión). Los puntos en el
monitor aparecen con una
intensidad de brillo máxima,
es
decir, blancos (gas, hueso).
Isoecogénico,
ecógeno o ecoicos:
la imagen es más o
menos blanquecina,
según la
ecogenicidad de un
órgano o de la
región estudiada.
Hipoecogénico,
hipoecoico: aquellas
estructuras que
producen una
menor reflectividad
(espectro gris oscuro
a negro), ej.,músculo.
Anecogénico,
anecoico: Es
aquella estructura
que no refleja el haz
ultrasónico y
produce una imagen
negra, como es el
caso de algunos
líquidos orgánicos,
ej., contenido de los
quistes
sinoviales.
DIAGNÓSTICO DE GESTACIÓN
CON ECÓGRAFO EN LAS
DIFERENTES ESPECIES
El útero se examina en toda su dimensión en cortes transversales, longitudinales y
oblicuos. si los cuernos están vacíos es sumamente fácil su ubicación mediante su
visualización en la pantalla de redondeles de 2 a 4 cm de diámetro, pero si la vaca esta
en celo, entonces la luz uterina se observa con exudados, apreciándose una imagen de
estrella oscura anecogénica en toda la luz del cuerno. en la ultrasonografía del útero es
fundamental el análisis de los cambios morfológicos durante el ciclo estral en la vaca.
Un folículo pre - ovulatorio puede llegar a medir 45 a 50 mm.
Principales usos de la ecografia en equinos:
● Diagnóstico temprano de gestación.
● Determinacion del sexo.
● determinación del momento de la ovulación.
● hallazgos patológicos: mellizo, patología ovárica y uterina, patología de la gestación.
La ultrasonografía reproductiva puede realizarse a través de la pared abdominal o por
víatransrectal, es necesario tener al animal inmovilizado, la sonda debe ubicarse sobre la
pared abdominal derecha, a unos 5 cm sobre los dos últimos pares de mamas. es
necesario colocar gel obstétrico sobre la superficie de la sonda para una mayor
transmisión y captación de las sondas a través dela piel.
Las ecografías deben realizarse a partir de los 26 días de gestación,, a partir del día 60 resulta más
práctica la vía abdominal,
● Día 12 al 21 de gestación: vesícula en ubicación ventrolateral a la vejiga tamaño de 0,3 a 1,0 cm.
●Día 21 al 25 de gestación: estadio embrionario, contenido ecogénico en el fluido uterino
anecogénico y un diámetro vesicular de 1,2 a 2,0
● Dia 26 : por primera vez latidos cardiacos.
● Día 27: se distingue el cordón umbilical.
● Dia 30: identificación de placentomas.
● Dia 31: identificación de amnios.
● Dia 39: se distingue el contorno del cráneo fetal.
● Día 45: se distinguen las costillas, las estructuras óseas del cuello, las órbitas y las
extremidades fetales.
EVALUACIÓN SEMINAL
 Todos los años antes del servicio, es fundamental realizar a todos los toros, una minuciosa revisión.
 Incluye observación del toro en movimiento, conformación de patas, la condición corporal general.
Una vez que el toro es confinado, la evaluación física continúa con la observación de ojos, dientes y
fosas nasales.
EXAMEN DE GENITALES
EXTERNOS
TESTÍCULOS
 Tamaño: largo, ancho y diámetro.
 Forma: ovalada, un tanto aplanada del lado medial.
 Eje de rotación.
 Simetría: tiene que existir simetría entre los testículos
 Posición: normal es con la curvatura mayor hacia lateral, la cara más aplanada
hacia medial, su eje mayor es vertical y el menor horizontal.
 Tono: es una medida de la consistencia y elasticidad para volver a su estado
previo luego de la presión ejercida.
 Temperatura.
 Desplazamiento de ambos testículos
ESCROTO
Función: protección y de termorregulación.
Circunferencia escrotal (CE): correlacionada con volumen y peso testicular.
Bos Taurus: CE mínima de 31 cm a los 18 meses
Bos Indicus: medida mínima de 27 cm a los 24 meses
La CE esta relacionada a la calidad seminal, aproximadamente el 4- 4.6% de lo toros con CE igual o
mayor a 30 cm tienen calidad seminal cuestionable.
EPIDIDIMO
A la palpación se determina tamaño,
forma, simetría, posición, tono y reacción
de dolor.
CORDON ESPERMATICO
Palpar en toda su longitud; verificar su extensión, no debe ser
tan corto que pueda llevar a afectar la termorregulación, ni
muy largo y colgante, que lo predisponga a constantes
traumatismos
CORDON ESPERMATICO
Palpar en toda su longitud; verificar su
extensión, no debe ser tan corto que
pueda llevar a afectar la
termorregulación, ni muy largo y
colgante, que lo predisponga a constantes
traumatismos
PREPUCIO
debe ser palpado para descartar la presencia de adherencias, heridas o
hematomas
RECOLECCIÓN DE SEMEN
La colecta de semen se considera la operación de mayor importancia
Envuelve una serie de factores, prácticas, conocimientos y habilidades.
Puede hacerse por medio vagina artificial o por electroeyaculación.
En general se prefiere el uso de vagina artificial para animales de tipo Bos taurus, con
temperamento manso, y el uso de electroeyaculador para animales de temperamento más
nervioso y agresivo, como los de tipo Bos indicus y los toros de lidia
PROCESO DE HIGIENIZACIÓN
PRE – COLECTA
Preparación del toro para ser colectado.
Limpieza de la parte ventro abdominal de manera descendente.
Con una tijera se realiza el corte del exceso de pelo del ostio prepucial, a una altura de 2 a 3
centímetros de la base,
Lavado con agua y jabón neutro, secado, lavado interno del prepucio con una infusión de solución
salina.
CONDUCTA SEXUAL DEL TORO
El comportamiento sexual en el toro incluye la detección,
cortejo y servicio de hembras en estro.
La libido, o impulso sexual: "disposición y entusiasmo" de
tratar de montar y servir a una hembra
La habilidad de apareamiento describe su habilidad física para
completar el servicio.
La capacidad de apareamiento es una medida del número de
servicios alcanzados por un toro. Incluye: libido y habilidad para la
monta.
La vagina artificial:
 Tubo cilíndrico
 7cm de diámetro y 35–40 cm de largo
 Cámara que se llena con agua caliente (45–46 º C) y aire, con el fin de proveer el estímulo de
temperatura y presión, lográndose la eyaculación.
PROCEDIMIENTO:
Para la monta se utiliza un maniquí.
La monta falsa: monta sobre el señuelo y desviar el
pene sin ofrecerle la vagina
En el siguiente intento de monta se coloca la punta
del pene desviado en la entrada de la vagina.
La monta falsa en el bovino aumenta la calidad del
semen en cuanto a volumen, concentración
espermática y motilidad
Los electro eyaculadores estimulan los nervios pélvicos simpáticos y parasimpáticos y de esta forma
pueden inducir erección peneana y eyaculación.
Un sistema de electroeyaculación está constituido por:
• caja de transporte
• la sonda rectal
• la unidad de control
• el cargador de batería
• el cable de energía
• el cable de conexión de la sonda
• el mango
• el cono
• el envase de colección
PROCEDIMIENTO.
• Se asegura que las líneas metálicas o electrodos estén
limpios y libres de corrosión.
• Retirar el exceso de heces del recto, se levanta la cola del
toro, se lubrica el electrodo y se introduce en el recto,
dirigiéndose ligeramente hacia abajo y haciendo
movimientos rotatorios.
• Una vez insertado completamente el electrodo, se coloca la
cola en el medio del mango
• El material para la recolección del semen (un embudo
colector que conducirá el semen a una bolsa estéril o tubo de
ensayo estéril).
• La primera porción del eyaculado incolora no se debe
colectar, se colectará cuando sea de color cremoso u
opalescente.
• Posteriormente de haberlo recolectado se evitará que los
rayos de luz le den directamente, mientras se traslada al
laboratorio
COLECTA CON
ELECTROEYACULADOR
 El método estándar para evaluar la fertilidad de machos reproductores
 Predecir el potencial reproductivo de los sementales
MACROSCÓPICAS MICROSCÓPICAS
Observación de características:
VOLUMEN DEL EYACULADO (ml):
• 2 ml en animales jóvenes
• ≥ a 4 ml, en animales adultos
COLOR:
Se evalúa por medio de la visualización
Depende del contenido de riboflavina
Normal: desde blanquecino marfil hasta amarillento
• Coloración rojiza: mezcla con sangre fresca (hemospermia)
• Color pardo: mezcla con sangre más vieja (hemospermia)
• Coloración gris: indica contaminación. Los tienen una
• Coloración amarillo-verdosa: eyaculados sin
espermatozoides y son de apariencia acuosa.
• El pus en el eyaculado: presencia de flóculos (piospermia)
pH
• pH del semen varía normalmente en un rango muy estrecho (7,2 - 8,0)
• pH elevado (> 8) puede considerarse un signo de infección seminal
• pH disminuido (< 7,2): déficit de la función de las vesículas seminales
DENSIDAD
Para la evaluación se han establecido criterios basados en intervalos de concentración espermática
En bovinos, la densidad macroscópica se clasifica en:
• Azoospérmico: ausencia de espermatozoides en el eyaculado.
• Oligozoospérmico: ≤ 200 millones espermatozoides/ml
• Ralo: 200–500 millones espermatozoides/ml.
• Semi-denso: 500–800 millones espermatozoides/ml.
• Denso: 800–1.500 millones espermatozoides/ml.
• Densísimo: ≥ 1.500 millones espermatozoides/ml.
CARACTERÍSTICAS
MACROSCÓPICAS DEL
SEMEN DEL TORO
OLOR
Olor sui géneris
CARACTERÍSTICAS
MICROSCÓPICAS DEL SEMEN
Estado de acrosoma
Concentración
Motilidad Masal Motilidad individual
Morfología
CONCENTRACIÓN DE
ESPERMA
Cámara de Neubauer
• Motilidad progresiva
• Morfología normal
• Metabolismo energético activo
• Capacidad para desarrollar motilidad hiperactivada
• Integridad estructural y funcional de la membrana
• Integridad de las enzimas asociadas a la fecundación
• Capacidad de penetración
• Transferencia óptima del material genético
• Se utiliza NaCl- al 3% (solución hipertónica) de 1:200.
• Se diluye 1 volumen de semen en 199 volúmenes
iguales de NaCl- al 3%.
Cualidades de los espermatozoides
Formula: (Espermatozoides/mL)= Número de espermatozoides
contados en 5 cuadrados (4 esquinas + el centro) x 5 x dilución
(1:200) x 10 x 1000.
MOTILIDAD MASAL
Se usa semen FRESCO, colocando una gota de éste sobre un
porta objetos precalentado a 37ºC en una plancha térmica a la
misma temperatura y se observa bajo el microscopio con una
lente 40x
El movimiento en masa va a depender de tres factores:
• Concentración
• Porcentaje de células con movimiento progresivo
• Velocidad de movimiento de los espermatozoides
Motilidad de los
espermatozoides
0 (estacionario) a 5 (rápido)
1 al semen que no presenta ondas y 5 cuando las ondas se
mueven rápidamente formando remolinos
MOTILIDAD INDIVIDUAL
Se usa semen DILUIDO, colocando una gota de éste sobre un
porta objetos precalentado a 37ºC en una plancha térmica a la
misma temperatura y se observa bajo el microscopio con una
lente 100x
El movimiento en masa va a depender de tres factores:
• Concentración
• Porcentaje de células con movimiento progresivo
• Velocidad de movimiento de los espermatozoides
Motilidad de los
espermatozoides
0 (estacionario) a 5 (rápido)
• Cabezas separadas
• Colas enrolladas
• Integridad acrosómica y
función
MORFOLOGÍA
Cualquier anomalía que afecte a algún atributo del
espermatozoide puede dificultar su migración en el
tracto genital de la hembra, impidiendo la unión con
el ovocito.
En general, un buen reproductor no deberá
tener más del 30% de células anormales en
un eyaculado
El test de endosmosis tiene la
ventaja de no solo indicar si la
membrana está intacta, sino
también de indicar si es
osmóticamente activa y podría
usarse para predecir la
capacidad fertilizante de semen
post descongelado.
ENVASADO DEL SEMEN
El Protocolo Estandar CSS
Los diluyentes más comúnmente utilizados en este protocolo
tienen como amortiguadores el Tris (hidroximetil-aminometano)
o el Citrato de sodio.
La fracción A requieren de yema de huevo para proteger
las células espermáticas contra el shock térmico por frío y
una mezcla de antibióticos.
La Fracción B es similar a la Fracciónn A, excepto que
contiene 14% de glicerol como crioprotector.
Empacado en pajillas de 0.25 y 0.5 ml
 Deben ser isotónicos al semen.
 Capacidad amortiguadora.
 Proteger a los espermatozoides de las lesiones producidas por el choque
térmico.
 Proporcionar nutrientes para el metabolismo de los espermatozoides.
 Controlar contaminantes microbianos.
 Los espermatozoides deben de estar protegidos contra el daño durante la
congelación y descongelación.
 Debe preservar la vida de los espermatozoides con un mínimo de efecto sobre
la fertilidad.
CARACTERÍSTICAS QUE DEBEN TENER
LOS DILUYENTES
 Se usa Tris (Hidroximetil amino metano) 3,605 gr, acido cítrico 2,025 gr, fructuosa
1,488 gr, todo esto se disuelve en agua biodestilada, en una probeta graduada a 100
ml, se toma el 80% de la solución y se le agrega 20% de yema de huevo que sería
el dilutor A, preparado para semen refrigerado.
 Para congelación se prepara el mismo dilutor anterior pero añadiendo el glicerol
que sería el dilutor B.
 Así mismo al dilutor A se le agregan los antibióticos de 500 a 1000
microgramos/ml dilutor y ya se puede hacer la dilución con el dilutor A tratando
que el semen baje lentamente por las paredes de la probeta, luego el dilutor B se
divide en tres partes y se mezcla la primera parte con el semen diluido con el
dilutor A y luego el resto con intervalos de 15 minutos.
PROCEDIMIENTO
CRIOPRESERVACIÓN
Herramienta esencial para la conservación
a largo plazo de machos genéticamente
superiores.
Después del proceso de congelación se
trasfieren las pajillas a termos de
almacenamiento con nitrógeno líquido, usados
para distribución y comercialización del semen
congelado.
Es importante evaluar los lotes de pajillas luego
de su descongelación.
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Ecografia y evaluacion seminal

  • 1. BIOTECNOLOGÍA REPRODUCTIVA Estudiante: Cobeñas Gisbert DOCENTE: Dr. Manuel Quezada CICLO: IX “A”
  • 2.
  • 3. GENERALIDADES La ecografía bovina es una técnica en la que se emplean ondas de sonido de alta frecuencia para producir imágenes de los tejidos blandos y órganos internos Útil para determinar gestación precoz, sexado de crías y la evaluación de las enfermedades del sistema reproducto.
  • 4. EQUIPOS DE ECOGRAFÍA LINEALES • Imagen tipo rectangular • Necesitan una pequeña superficie de contacto CONVEXOS • Aplicación: aspiracion folicular y obtención de ovocitos FIV. • Tienen mas superficies de contacto • Hay externas y trasrectales SECTORIALES • Imagen tipo pirámide
  • 5. ECOGENICIDAD DE LOS TEJIDOS Las estructuras corporales están formadas por distintos tejidos, lo que da lugar amúltiples interfases que originan, en imagen digital. Hiperecogénico, hiperecoico: estructuras que en sus diferentes interfases reflejan más los ultrasonidos (brillantes, su espectro va del blanco al gris claro), ej., tendones; se produce una gran reflexión de US (escasa o nula transmisión). Los puntos en el monitor aparecen con una intensidad de brillo máxima, es decir, blancos (gas, hueso). Isoecogénico, ecógeno o ecoicos: la imagen es más o menos blanquecina, según la ecogenicidad de un órgano o de la región estudiada. Hipoecogénico, hipoecoico: aquellas estructuras que producen una menor reflectividad (espectro gris oscuro a negro), ej.,músculo. Anecogénico, anecoico: Es aquella estructura que no refleja el haz ultrasónico y produce una imagen negra, como es el caso de algunos líquidos orgánicos, ej., contenido de los quistes sinoviales.
  • 6. DIAGNÓSTICO DE GESTACIÓN CON ECÓGRAFO EN LAS DIFERENTES ESPECIES
  • 7. El útero se examina en toda su dimensión en cortes transversales, longitudinales y oblicuos. si los cuernos están vacíos es sumamente fácil su ubicación mediante su visualización en la pantalla de redondeles de 2 a 4 cm de diámetro, pero si la vaca esta en celo, entonces la luz uterina se observa con exudados, apreciándose una imagen de estrella oscura anecogénica en toda la luz del cuerno. en la ultrasonografía del útero es fundamental el análisis de los cambios morfológicos durante el ciclo estral en la vaca.
  • 8. Un folículo pre - ovulatorio puede llegar a medir 45 a 50 mm. Principales usos de la ecografia en equinos: ● Diagnóstico temprano de gestación. ● Determinacion del sexo. ● determinación del momento de la ovulación. ● hallazgos patológicos: mellizo, patología ovárica y uterina, patología de la gestación.
  • 9. La ultrasonografía reproductiva puede realizarse a través de la pared abdominal o por víatransrectal, es necesario tener al animal inmovilizado, la sonda debe ubicarse sobre la pared abdominal derecha, a unos 5 cm sobre los dos últimos pares de mamas. es necesario colocar gel obstétrico sobre la superficie de la sonda para una mayor transmisión y captación de las sondas a través dela piel.
  • 10. Las ecografías deben realizarse a partir de los 26 días de gestación,, a partir del día 60 resulta más práctica la vía abdominal, ● Día 12 al 21 de gestación: vesícula en ubicación ventrolateral a la vejiga tamaño de 0,3 a 1,0 cm. ●Día 21 al 25 de gestación: estadio embrionario, contenido ecogénico en el fluido uterino anecogénico y un diámetro vesicular de 1,2 a 2,0 ● Dia 26 : por primera vez latidos cardiacos. ● Día 27: se distingue el cordón umbilical. ● Dia 30: identificación de placentomas. ● Dia 31: identificación de amnios. ● Dia 39: se distingue el contorno del cráneo fetal. ● Día 45: se distinguen las costillas, las estructuras óseas del cuello, las órbitas y las extremidades fetales.
  • 12.  Todos los años antes del servicio, es fundamental realizar a todos los toros, una minuciosa revisión.  Incluye observación del toro en movimiento, conformación de patas, la condición corporal general. Una vez que el toro es confinado, la evaluación física continúa con la observación de ojos, dientes y fosas nasales.
  • 14. TESTÍCULOS  Tamaño: largo, ancho y diámetro.  Forma: ovalada, un tanto aplanada del lado medial.  Eje de rotación.  Simetría: tiene que existir simetría entre los testículos  Posición: normal es con la curvatura mayor hacia lateral, la cara más aplanada hacia medial, su eje mayor es vertical y el menor horizontal.  Tono: es una medida de la consistencia y elasticidad para volver a su estado previo luego de la presión ejercida.  Temperatura.  Desplazamiento de ambos testículos
  • 15. ESCROTO Función: protección y de termorregulación. Circunferencia escrotal (CE): correlacionada con volumen y peso testicular. Bos Taurus: CE mínima de 31 cm a los 18 meses Bos Indicus: medida mínima de 27 cm a los 24 meses La CE esta relacionada a la calidad seminal, aproximadamente el 4- 4.6% de lo toros con CE igual o mayor a 30 cm tienen calidad seminal cuestionable.
  • 16. EPIDIDIMO A la palpación se determina tamaño, forma, simetría, posición, tono y reacción de dolor. CORDON ESPERMATICO Palpar en toda su longitud; verificar su extensión, no debe ser tan corto que pueda llevar a afectar la termorregulación, ni muy largo y colgante, que lo predisponga a constantes traumatismos CORDON ESPERMATICO Palpar en toda su longitud; verificar su extensión, no debe ser tan corto que pueda llevar a afectar la termorregulación, ni muy largo y colgante, que lo predisponga a constantes traumatismos
  • 17. PREPUCIO debe ser palpado para descartar la presencia de adherencias, heridas o hematomas
  • 19. La colecta de semen se considera la operación de mayor importancia Envuelve una serie de factores, prácticas, conocimientos y habilidades. Puede hacerse por medio vagina artificial o por electroeyaculación. En general se prefiere el uso de vagina artificial para animales de tipo Bos taurus, con temperamento manso, y el uso de electroeyaculador para animales de temperamento más nervioso y agresivo, como los de tipo Bos indicus y los toros de lidia
  • 20. PROCESO DE HIGIENIZACIÓN PRE – COLECTA Preparación del toro para ser colectado. Limpieza de la parte ventro abdominal de manera descendente. Con una tijera se realiza el corte del exceso de pelo del ostio prepucial, a una altura de 2 a 3 centímetros de la base, Lavado con agua y jabón neutro, secado, lavado interno del prepucio con una infusión de solución salina.
  • 21. CONDUCTA SEXUAL DEL TORO El comportamiento sexual en el toro incluye la detección, cortejo y servicio de hembras en estro. La libido, o impulso sexual: "disposición y entusiasmo" de tratar de montar y servir a una hembra La habilidad de apareamiento describe su habilidad física para completar el servicio. La capacidad de apareamiento es una medida del número de servicios alcanzados por un toro. Incluye: libido y habilidad para la monta.
  • 22. La vagina artificial:  Tubo cilíndrico  7cm de diámetro y 35–40 cm de largo  Cámara que se llena con agua caliente (45–46 º C) y aire, con el fin de proveer el estímulo de temperatura y presión, lográndose la eyaculación. PROCEDIMIENTO: Para la monta se utiliza un maniquí. La monta falsa: monta sobre el señuelo y desviar el pene sin ofrecerle la vagina En el siguiente intento de monta se coloca la punta del pene desviado en la entrada de la vagina. La monta falsa en el bovino aumenta la calidad del semen en cuanto a volumen, concentración espermática y motilidad
  • 23. Los electro eyaculadores estimulan los nervios pélvicos simpáticos y parasimpáticos y de esta forma pueden inducir erección peneana y eyaculación. Un sistema de electroeyaculación está constituido por: • caja de transporte • la sonda rectal • la unidad de control • el cargador de batería • el cable de energía • el cable de conexión de la sonda • el mango • el cono • el envase de colección
  • 24. PROCEDIMIENTO. • Se asegura que las líneas metálicas o electrodos estén limpios y libres de corrosión. • Retirar el exceso de heces del recto, se levanta la cola del toro, se lubrica el electrodo y se introduce en el recto, dirigiéndose ligeramente hacia abajo y haciendo movimientos rotatorios. • Una vez insertado completamente el electrodo, se coloca la cola en el medio del mango • El material para la recolección del semen (un embudo colector que conducirá el semen a una bolsa estéril o tubo de ensayo estéril). • La primera porción del eyaculado incolora no se debe colectar, se colectará cuando sea de color cremoso u opalescente. • Posteriormente de haberlo recolectado se evitará que los rayos de luz le den directamente, mientras se traslada al laboratorio COLECTA CON ELECTROEYACULADOR
  • 25.  El método estándar para evaluar la fertilidad de machos reproductores  Predecir el potencial reproductivo de los sementales MACROSCÓPICAS MICROSCÓPICAS Observación de características:
  • 26. VOLUMEN DEL EYACULADO (ml): • 2 ml en animales jóvenes • ≥ a 4 ml, en animales adultos COLOR: Se evalúa por medio de la visualización Depende del contenido de riboflavina Normal: desde blanquecino marfil hasta amarillento • Coloración rojiza: mezcla con sangre fresca (hemospermia) • Color pardo: mezcla con sangre más vieja (hemospermia) • Coloración gris: indica contaminación. Los tienen una • Coloración amarillo-verdosa: eyaculados sin espermatozoides y son de apariencia acuosa. • El pus en el eyaculado: presencia de flóculos (piospermia) pH • pH del semen varía normalmente en un rango muy estrecho (7,2 - 8,0) • pH elevado (> 8) puede considerarse un signo de infección seminal • pH disminuido (< 7,2): déficit de la función de las vesículas seminales
  • 27. DENSIDAD Para la evaluación se han establecido criterios basados en intervalos de concentración espermática En bovinos, la densidad macroscópica se clasifica en: • Azoospérmico: ausencia de espermatozoides en el eyaculado. • Oligozoospérmico: ≤ 200 millones espermatozoides/ml • Ralo: 200–500 millones espermatozoides/ml. • Semi-denso: 500–800 millones espermatozoides/ml. • Denso: 800–1.500 millones espermatozoides/ml. • Densísimo: ≥ 1.500 millones espermatozoides/ml. CARACTERÍSTICAS MACROSCÓPICAS DEL SEMEN DEL TORO OLOR Olor sui géneris
  • 28. CARACTERÍSTICAS MICROSCÓPICAS DEL SEMEN Estado de acrosoma Concentración Motilidad Masal Motilidad individual Morfología
  • 29. CONCENTRACIÓN DE ESPERMA Cámara de Neubauer • Motilidad progresiva • Morfología normal • Metabolismo energético activo • Capacidad para desarrollar motilidad hiperactivada • Integridad estructural y funcional de la membrana • Integridad de las enzimas asociadas a la fecundación • Capacidad de penetración • Transferencia óptima del material genético • Se utiliza NaCl- al 3% (solución hipertónica) de 1:200. • Se diluye 1 volumen de semen en 199 volúmenes iguales de NaCl- al 3%. Cualidades de los espermatozoides Formula: (Espermatozoides/mL)= Número de espermatozoides contados en 5 cuadrados (4 esquinas + el centro) x 5 x dilución (1:200) x 10 x 1000.
  • 30. MOTILIDAD MASAL Se usa semen FRESCO, colocando una gota de éste sobre un porta objetos precalentado a 37ºC en una plancha térmica a la misma temperatura y se observa bajo el microscopio con una lente 40x El movimiento en masa va a depender de tres factores: • Concentración • Porcentaje de células con movimiento progresivo • Velocidad de movimiento de los espermatozoides Motilidad de los espermatozoides 0 (estacionario) a 5 (rápido) 1 al semen que no presenta ondas y 5 cuando las ondas se mueven rápidamente formando remolinos
  • 31. MOTILIDAD INDIVIDUAL Se usa semen DILUIDO, colocando una gota de éste sobre un porta objetos precalentado a 37ºC en una plancha térmica a la misma temperatura y se observa bajo el microscopio con una lente 100x El movimiento en masa va a depender de tres factores: • Concentración • Porcentaje de células con movimiento progresivo • Velocidad de movimiento de los espermatozoides Motilidad de los espermatozoides 0 (estacionario) a 5 (rápido)
  • 32. • Cabezas separadas • Colas enrolladas • Integridad acrosómica y función MORFOLOGÍA Cualquier anomalía que afecte a algún atributo del espermatozoide puede dificultar su migración en el tracto genital de la hembra, impidiendo la unión con el ovocito. En general, un buen reproductor no deberá tener más del 30% de células anormales en un eyaculado El test de endosmosis tiene la ventaja de no solo indicar si la membrana está intacta, sino también de indicar si es osmóticamente activa y podría usarse para predecir la capacidad fertilizante de semen post descongelado.
  • 33. ENVASADO DEL SEMEN El Protocolo Estandar CSS Los diluyentes más comúnmente utilizados en este protocolo tienen como amortiguadores el Tris (hidroximetil-aminometano) o el Citrato de sodio. La fracción A requieren de yema de huevo para proteger las células espermáticas contra el shock térmico por frío y una mezcla de antibióticos. La Fracción B es similar a la Fracciónn A, excepto que contiene 14% de glicerol como crioprotector. Empacado en pajillas de 0.25 y 0.5 ml
  • 34.  Deben ser isotónicos al semen.  Capacidad amortiguadora.  Proteger a los espermatozoides de las lesiones producidas por el choque térmico.  Proporcionar nutrientes para el metabolismo de los espermatozoides.  Controlar contaminantes microbianos.  Los espermatozoides deben de estar protegidos contra el daño durante la congelación y descongelación.  Debe preservar la vida de los espermatozoides con un mínimo de efecto sobre la fertilidad. CARACTERÍSTICAS QUE DEBEN TENER LOS DILUYENTES
  • 35.  Se usa Tris (Hidroximetil amino metano) 3,605 gr, acido cítrico 2,025 gr, fructuosa 1,488 gr, todo esto se disuelve en agua biodestilada, en una probeta graduada a 100 ml, se toma el 80% de la solución y se le agrega 20% de yema de huevo que sería el dilutor A, preparado para semen refrigerado.  Para congelación se prepara el mismo dilutor anterior pero añadiendo el glicerol que sería el dilutor B.  Así mismo al dilutor A se le agregan los antibióticos de 500 a 1000 microgramos/ml dilutor y ya se puede hacer la dilución con el dilutor A tratando que el semen baje lentamente por las paredes de la probeta, luego el dilutor B se divide en tres partes y se mezcla la primera parte con el semen diluido con el dilutor A y luego el resto con intervalos de 15 minutos. PROCEDIMIENTO
  • 36. CRIOPRESERVACIÓN Herramienta esencial para la conservación a largo plazo de machos genéticamente superiores. Después del proceso de congelación se trasfieren las pajillas a termos de almacenamiento con nitrógeno líquido, usados para distribución y comercialización del semen congelado. Es importante evaluar los lotes de pajillas luego de su descongelación.