Los métodos y técnicas para el estudio correcto de la célula.

1. Métodos de
estudio de la
célula
Fisioterapia y Kinesiología

2. Histotecnia
Se denomina técnica histológica al conjunto de operaciones a que se somete una materia
organizada (tejido biológico), a fin de que sea posible su estudio por medio del
microscopio, posibilitando la observación de estructuras no visibles al ojo humano.
Obtención del material histológico para estudiar
1. Proceso de fijación
2. Lavados
3. Deshidratación
4. Aclaramiento
5. Infiltración
6. Inclusión
7. Microtomía
8. Tinción
9. Observación (Este último no es considerado como un paso de la técnica histológica
por varios autores)

3. Obtención
1. Biopsia. La muestra se obtiene de un individuo vivo.
2. Necropsia. La muestra se obtiene de un cadáver.
3. Biopsia incisional. Se obtiene una sección de la lesión.
4. Biopsia excisional. Es extraída la lesión completa.
5. Tipos de biopsias. De acuerdo con el tipo de tejido que sea necesario obtener, es el
tipo de biopsia adecuado. Considere algunos ejemplos:
- Punción y aspiración con aguja fina (PAAF). Tejidos líquidos como la sangre se
obtienen por este método.
- Punción y aspiración con aguja gruesa (PAAG). La médula ósea roja, al ser un tejido
más viscoso que la sangre, se obtiene con una aguja de mayor calibre.
- Citología exfoliativa. Las células que se pueden desprender de los epitelios (como las
de endocérvix y exocérvix), de cavidad oral o de alguna lesión, se obtienen a partir de
un raspado o cepillado.

4. Tecnicas para el estudio químico de las celulas
Para el estudio quimico de la celula, se empleara:

5. 1. Técnica citoquímica e histoquímicas
Sabemos que tanto las células como los tejidos están constituidos por proteínas,
carbohidratos además de otros elementos. Éstas sustancias son activas químicamente,
por lo que se las puede hacer reaccionar con otros compuestos en determinadas
condiciones. La reacción de éstas ante otros compuestos es en lo que se basa esta
técnica.

6. El resultado de las reacciones se observarán mediante compuestos
coloreados visibles al microscopio óptico, mientras que si van a ser
observados por un microscopio electrónico, el producto de estas reacciones
será de alta densidad.
Así también se podrá distinguir la presencia de orgánulos en la célula,
poniéndolos en contacto con una serie de sustratos específicos que sufrirán
una reacción al entrar en contacto con los componentes químicos de un
orgánulo. Esta técnica nos ofrecerá una información muy valiosa sobre la
química celular, su estructura y localización.

7. EL CULTIVO
CELULAR
Gracias a los cultivos de células y
tejidos, hemos podido conocer el
proceso de la mitosis celular, los
movimientos celulares o la
respuestas de éstos ante
sustancias diferentes, tóxicas,
víricas, bacterias, etc.
Se puede estudiar los efectos tanto de
adición como de eliminación al medio
de cultivo de moléculas tales como las
hormonas además de los factores que
influyen en el crecimiento.

8. Fraccionamiento celular
Es una técnica por la cual se aíslan y separan los orgánulos celulares con el fin
de poder posteriormente, estudiarlos. Su metodología será la siguiente:
Se trata de un método de aislamiento y separación de los orgánulos celulares,
con objeto de estudiarlos después independientemente. Por medio de
tratamientos físicos o químicos que rompan las células, se realiza un
homogeneizado del tejido que vamos a estudiar. Estos tratamientos pueden ser
por choque osmótico o trituración.
Se deberá romper sólo la membrana plastmática, por lo que habrá que actuar
con la mayor suavidad posible. Con los orgánulos intectos como pueden ser el
núcleo, las mitocondrias, los lisosmas, los peroxisomas y el complejo de Golgi.
Se disuelve en una solución salina o de azúcar el homogeneizado, para a
continuación mediante una máquina denominada ultracentrífica separar los
diferentes componentes.
Una centrifugación primera a baja velocidad separará los orgánulos mas densos
en el precipitado y los menos densos en el sobrenadante, orgánulos densos
como el núcleo y menos densos como las mitocondrias y ribosomas.
El sobrenadante se decanta y se somete a un nuevo centrifugado, esta vez a
mayor velocidad y así hasta obtener una serie de fracciones en distintos
precipitados que contendrán diferentes orgánulos celulares.

9. Radioautografia
Es una fotografía obtenida al colocar sobre una placa fotográfica tejidos u órganos de
animales a los que se ha administrado una sustancia marcada radioactivamente.
Estudia La síntesis del DNA, División Celular, Síntesis y secreción de proteínas por las
células, la ubicación de los productos de sintesís dentro de las celulas y en la matriz
extracelular.
Luego de la exposición en la cámara oscura (que dura días a semanas), la emulsión
expuesta se revela con las técnicas fotográficas comunes y el portaobjetos con la muestra
se sella con un cubreobjetos.
- .Los preparados se pueden teñir antes o después de la exposición y el revelado.
- Posteriormente la muestra se puede observar en un microscopio óptico o electrónico.

10. Análisis molecular
El término diagnóstico molecular se refiere a un conjunto de técnicas de biología
molecular empleadas para la identificación y análisis de marcadores biológicos en el
genoma y el proteoma (el material genético y cómo se expresan los genes como
proteínas), a fin de diagnosticar y monitorizar enfermedades, detectar el riesgo y aplicar
un tratamiento personalizado
están basados en la detección del genoma del patógeno en el organismo

11. El diagnóstico molecular, al igual que todo proceso de diagnóstico médico, pretende la
determinación de la causa de una enfermedad pudiendo ser de origen genético o bien
infeccioso
el diagnóstico molecular va más allá de la anamnesis y el estudio físico del paciente
analizando, además, su ADN.
Dentro del diagnóstico molecular se engloban el diagnóstico genético y el diagnóstico de
enfermedades infecciosas.

12. Los métodos moleculares más importantes que se utilizan hoy en día en el diagnóstico de
enfermedades infecciosas son la reacción en cadena de la polimerasa (PCR), la
secuenciación y la electroforesis de campo pulsante (CHEF). Estos métodos son directos
y nos indican la presencia o ausencia del material genético del patógeno, y por ende, la
presencia o ausencia del patógeno en el paciente.

13. Preguntas?