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Curso de Doctorado del programa del Instituto de Biotecnología de la Universidad de Granada. Departamento de Química Física. Facultad de Ciencias. (U.Gr.) Calorímetro de Lavoisier  y Laplace, 1780. Aplicación de la Microcalorimetría  al estudio de la estabilidad e  interacciones en proteínas.
Aplicación de la Microcalorimetría al estudio de la estabilidad e interacciones en proteínas. Curso de doctorado del programa del Instituto de Biotecnología de la Universidad de Granada, impartido por los profesores del Departamento de Química Física Obdulio López Mayorga y Pedro Luis Mateo Alarcón. ,[object Object],[object Object],OLM
Aplicación de la Microcalorimetría al estudio de la estabilidad e interacciones en proteínas. Clasificación de los calorímetros ,[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],OLM
Aplicación de la Microcalorimetría al estudio de la estabilidad e interacciones en proteínas. Las ténicas microcalorimétricas  I.T.C y D.S.C. ,[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],OLM
Aplicación de la Microcalorimetría al estudio de la estabilidad e interacciones en proteínas. Contenidos I.- Fundamentos teóricos. II.- Aspectos instrumentales. III.- Análisis de datos experimentales. IV.- Algunos ejemplos de aplicación. D.S.C  I.T.C  OLM
Aplicación de la Microcalorimetría al estudio de la estabilidad e interacciones en proteínas. Revisión de conceptos preliminares para una descripción de la instrumentación calorimétrica ,[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],OLM
Aplicación de la Microcalorimetría al estudio de la estabilidad e interacciones en proteínas. Revisión de conceptos preliminares para una descripción de la instrumentación calorimétrica Capacidad calorífica Capacidad calorífica de un sistema homogéneo a presión constante:   Es la razón del calor infinitesimal necesario para producir un cambio infinitesimal de temperatura al valor de este cambio de temperatura a la presión constante P: Capacidad calorífica específica o calor específico a presión constante:   Es la capacidad calorifica por unidad de masa. Si el cuerpo tiene una masa  de  m  gramos: OLM Sistema T=Tm    dT Entorno Tm Q   Unidades: J.grado-1 o Cal.grado-1 Unidades: J.grado -1 g -1 o Cal.grado -1 g -1
Capacidad calorífica molar o calor molar a presión constante:   Es la capacidad calorifica por mol. Si el sistema contiene n moles: Unidades: J.grado -1 mol -1 o Cal.grado -1 mol -1 Aplicación de la Microcalorimetría al estudio de la estabilidad e interacciones en proteínas. Revisión de conceptos preliminares para una descripción de la instrumentación calorimétrica Relaciones:   De acuerdo con las definiciones anteriores el calor que ha de suministrarse o extraerse de un cuerpo de mas  m  para variar su temperatura desde T 1  a T 2  será: Para resolver esta integral es necesario conocer de forma explicita la función C p (T). En un intervalo de temperatura reducido en el cual c p  pueda considerarse independiente de T, la ecuación anterior se resuelve fácilmente: OLM a
Aplicación de la Microcalorimetría al estudio de la estabilidad e interacciones en proteínas. Revisión de conceptos preliminares para una descripción de la instrumentación calorimétrica Propagación del calor Convección Radiación Conducción Barra de sección transversal A Foco térmico 1 Foco térmico 2 T 2 T 1 Q Aislante térmico OLM T 1 T 2 t=0 t=  t
Aplicación de la Microcalorimetría al estudio de la estabilidad e interacciones en proteínas. Revisión de conceptos preliminares para una descripción de la instrumentación calorimétrica Flujo calorífico:   Si dQ es el calor que atraviesa la sección   recta de una barra durante el intervalo de tiempo dt comprendido entre t y t+dt, se denomina flujo o corriente calorífica a: Este flujo de calor es proporcional al gradiente de temperatura y al área de la sección, A: La constante de proporcionalidad  K  es la  “conductividad térmica“  del material de la barra. Algunos valores correspondientes a sustancias de interés son: Susutancias k (cal.s -1 .K -1 ) Aluminio …………………………… 0,48 Cobre………………………………… 0,93 Plata…………………………………. 1,00 Oro…………………………………… 0,70 H2O…………………………………. 0,00144 Aire…………………………………. 0,000058 Vidrio………………………………. 0,0028 OLM
[object Object],Aplicación de la Microcalorimetría al estudio de la estabilidad e interacciones en proteínas. Revisión de conceptos preliminares para una descripción de la instrumentación calorimétrica Cuando la diferencia de temperaturas entre el cuerpo y el entorno es pequeña se cumple la llamada “ley del enfriamiento de Newton” cuyo enunciado es: “ La derivada de la temperatura de un cuerpo respecto al tiempo es proporcional a la diferencia de temperaturas correspondientes al cuerpo y al entorno que le rodea.” donde k´ es una constante de proporcionalidad característica del cuerpo; T y T s  son las temperaturas del cuerpo y del entorno, respectivamente. Resolviendo esta sencilla ecuación diferencial se obtiene: La constante k´tiene dimensiones de tiempo reciproco (t -1 ) y su inverso representa el tiempo de respuesta transitoria del cuerpo a un cambio brusco de temperatura, es decir el tiempo de relajación térmica. OLM
[object Object],Aplicación de la Microcalorimetría al estudio de la estabilidad e interacciones en proteínas. Revisión de conceptos preliminares para una descripción de la instrumentación calorimétrica En 1826 Thomas Johann descubrió el efecto termoeléctrico, que consiste en la generación de una f.e.m. en una unión bimetal (soldadura de dos metales diferentes A y B). Esta f.e.m. conocida como f.e.m. térmica o Seebeck es función de la temperatura de la unión.   Unión bimetal Bloque termostatizado A B Voltímetro de alta impedancia de entrada. Termopila o pila termoeléctrica: Sensor de temperatura de alta sensibilidad. Usado en medidas de radiación procedente de estrellas, calorimetría, etc. OLM 1.03456 V + _
[object Object],[object Object],Aplicación de la Microcalorimetría al estudio de la estabilidad e interacciones en proteínas. Revisión de conceptos preliminares para una descripción de la instrumentación calorimétrica Descubierto por el físico francés Jean C. A. Peltier: El calor que se libera o se absorbe en una soldadura o unión bimetal, por la que circula una corriente eléctrica, es proporcional a la carga que atraviesa dicha soldadura.  OLM Unión bimetal A B Fuente de corriente continua  Q =   AB (T).Z  AB (T):   f.e.m. Peltier Q: calor Peltier, Z: carga transportada + I Q
Aplicación de la Microcalorimetría al estudio de la estabilidad e interacciones en proteínas. Revisión de conceptos preliminares para una descripción de la instrumentación calorimétrica Efecto termoeléctrico en dispositivos de semiconductor. Un simple par termoeléctrico: OLM
Aplicación de la Microcalorimetría al estudio de la estabilidad e interacciones en proteínas. Revisión de conceptos preliminares para una descripción de la instrumentación calorimétrica Efecto termoeléctrico en dispositivos de semiconductor. Una termopila actuando como sensor de una diferencia de temperaturas: f.e.m =   (T-T R ) OLM
Aplicación de la Microcalorimetría al estudio de la estabilidad e interacciones en proteínas. Revisión de conceptos preliminares para una descripción de la instrumentación calorimétrica Efecto Peltier en dispositivos termoeléctricos de semiconductor. Un simple par termoeléctrico: OLM
Aplicación de la Microcalorimetría al estudio de la estabilidad e interacciones en proteínas. Revisión de conceptos preliminares para una descripción de la instrumentación calorimétrica Efecto Peltier en dispositivos termoeléctricos de semiconductor. Una termopila actuando como bomba de calor: T h -T c  =   T (W,I,T h ) ;  W: Potencia térmica (J.s -1 );  I: Corriente eléctrica(A) OLM
Aplicación de la Microcalorimetría al estudio de la estabilidad e interacciones en proteínas. Revisión de conceptos preliminares para una descripción de la instrumentación calorimétrica Principio de células gemelas. La simetría de esta configuración da lugar a la autoanulación por compensación de efectos térmicos comunes, artefactuales, a las dos células. OLM

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  • 1. Curso de Doctorado del programa del Instituto de Biotecnología de la Universidad de Granada. Departamento de Química Física. Facultad de Ciencias. (U.Gr.) Calorímetro de Lavoisier y Laplace, 1780. Aplicación de la Microcalorimetría al estudio de la estabilidad e interacciones en proteínas.
  • 2.
  • 3.
  • 4.
  • 5. Aplicación de la Microcalorimetría al estudio de la estabilidad e interacciones en proteínas. Contenidos I.- Fundamentos teóricos. II.- Aspectos instrumentales. III.- Análisis de datos experimentales. IV.- Algunos ejemplos de aplicación. D.S.C I.T.C OLM
  • 6.
  • 7. Aplicación de la Microcalorimetría al estudio de la estabilidad e interacciones en proteínas. Revisión de conceptos preliminares para una descripción de la instrumentación calorimétrica Capacidad calorífica Capacidad calorífica de un sistema homogéneo a presión constante: Es la razón del calor infinitesimal necesario para producir un cambio infinitesimal de temperatura al valor de este cambio de temperatura a la presión constante P: Capacidad calorífica específica o calor específico a presión constante: Es la capacidad calorifica por unidad de masa. Si el cuerpo tiene una masa de m gramos: OLM Sistema T=Tm  dT Entorno Tm Q Unidades: J.grado-1 o Cal.grado-1 Unidades: J.grado -1 g -1 o Cal.grado -1 g -1
  • 8. Capacidad calorífica molar o calor molar a presión constante: Es la capacidad calorifica por mol. Si el sistema contiene n moles: Unidades: J.grado -1 mol -1 o Cal.grado -1 mol -1 Aplicación de la Microcalorimetría al estudio de la estabilidad e interacciones en proteínas. Revisión de conceptos preliminares para una descripción de la instrumentación calorimétrica Relaciones: De acuerdo con las definiciones anteriores el calor que ha de suministrarse o extraerse de un cuerpo de mas m para variar su temperatura desde T 1 a T 2 será: Para resolver esta integral es necesario conocer de forma explicita la función C p (T). En un intervalo de temperatura reducido en el cual c p pueda considerarse independiente de T, la ecuación anterior se resuelve fácilmente: OLM a
  • 9. Aplicación de la Microcalorimetría al estudio de la estabilidad e interacciones en proteínas. Revisión de conceptos preliminares para una descripción de la instrumentación calorimétrica Propagación del calor Convección Radiación Conducción Barra de sección transversal A Foco térmico 1 Foco térmico 2 T 2 T 1 Q Aislante térmico OLM T 1 T 2 t=0 t=  t
  • 10. Aplicación de la Microcalorimetría al estudio de la estabilidad e interacciones en proteínas. Revisión de conceptos preliminares para una descripción de la instrumentación calorimétrica Flujo calorífico: Si dQ es el calor que atraviesa la sección recta de una barra durante el intervalo de tiempo dt comprendido entre t y t+dt, se denomina flujo o corriente calorífica a: Este flujo de calor es proporcional al gradiente de temperatura y al área de la sección, A: La constante de proporcionalidad K es la “conductividad térmica“ del material de la barra. Algunos valores correspondientes a sustancias de interés son: Susutancias k (cal.s -1 .K -1 ) Aluminio …………………………… 0,48 Cobre………………………………… 0,93 Plata…………………………………. 1,00 Oro…………………………………… 0,70 H2O…………………………………. 0,00144 Aire…………………………………. 0,000058 Vidrio………………………………. 0,0028 OLM
  • 11.
  • 12.
  • 13.
  • 14. Aplicación de la Microcalorimetría al estudio de la estabilidad e interacciones en proteínas. Revisión de conceptos preliminares para una descripción de la instrumentación calorimétrica Efecto termoeléctrico en dispositivos de semiconductor. Un simple par termoeléctrico: OLM
  • 15. Aplicación de la Microcalorimetría al estudio de la estabilidad e interacciones en proteínas. Revisión de conceptos preliminares para una descripción de la instrumentación calorimétrica Efecto termoeléctrico en dispositivos de semiconductor. Una termopila actuando como sensor de una diferencia de temperaturas: f.e.m =  (T-T R ) OLM
  • 16. Aplicación de la Microcalorimetría al estudio de la estabilidad e interacciones en proteínas. Revisión de conceptos preliminares para una descripción de la instrumentación calorimétrica Efecto Peltier en dispositivos termoeléctricos de semiconductor. Un simple par termoeléctrico: OLM
  • 17. Aplicación de la Microcalorimetría al estudio de la estabilidad e interacciones en proteínas. Revisión de conceptos preliminares para una descripción de la instrumentación calorimétrica Efecto Peltier en dispositivos termoeléctricos de semiconductor. Una termopila actuando como bomba de calor: T h -T c =  T (W,I,T h ) ; W: Potencia térmica (J.s -1 ); I: Corriente eléctrica(A) OLM
  • 18. Aplicación de la Microcalorimetría al estudio de la estabilidad e interacciones en proteínas. Revisión de conceptos preliminares para una descripción de la instrumentación calorimétrica Principio de células gemelas. La simetría de esta configuración da lugar a la autoanulación por compensación de efectos térmicos comunes, artefactuales, a las dos células. OLM