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Determinación de hCG: más que una prueba de embarazo…… Prof. María Isabel Camejo (PhD) Universidad Simón Bolívar Departamento de Biología de Organismos
Desde tiempos muy  remotos el hombre, ha querido conocer si una  mujer está  embarazada...
Diagnóstico de embarazo en la antigüedad El Papiro Brugsch de 1350 AC, describe una prueba en la cual “un trozo de sandía triturado se mezclaba con leche de una mujer recién parida y se le daba a beber a la paciente; si vomitaba, ella estaba embarazada; si solo tenía flatulencia, ella no estaba embarazada”.
Diagnóstico de embarazo en la antigüedad Otro papiro del Antiguo Egipto cuenta que, para detectar el embarazo se hacía orinar a la mujer durante varios días sobre semillas de trigo y cebada, mezcladas con sal. Si después de un tiempo germinaba la cebada, el hijo sería varón; si germinaba el trigo, sería mujer; si no germinaba ninguna semilla, la mujer no estaba embarazada. No se menciona el caso en el cual germinaran ambas semillas.
Diagnóstico de embarazo en la antigüedad Pasaron tres mil trescientos años de los papiros egipcios para que en el año 1928, los ginecólogos Aschheim y Zondek (Alemania) describieran el método más antiguo para asegurar el diagnóstico temprano de un embarazo.  Este ensayo se realizaba, inyectando pequeñas cantidades de  orina  de mujer potencialmente embarazada a  ratones hembras pre-púberes , de 3-5 semanas de edad, que eran sacrificadas al cabo de 100 horas, e inspeccionaban sus  ovarios . Si se hallaban  engrosados y congestivos , había un 80 % a un 98 % de posibilidades de estar embarazada .
Diagnóstico de embarazo en la antigüedad Luego esta prueba de inyectar la orina de la mujer sospechosa de embarazo se realizó con otros animales como conejas, ratas y peces. Esta prueba se basa en la similitud existente entre la hormona  hCG  y la LH,  las cuales se unen a los mismos receptores celulares, pudiendo sustituir a la  LH del animal  y estimular el ovario del mismo.
La prueba del sapo Se inyectaban 10 mL de  orina  en uno de los sacos linfáticos laterales 1-3 horas después, se extraía orina de la vejiga del sapo mediante la introducción de una pipeta en su cloaca y se observaban la presencia de  espermatozoides  directamente al microscopio. En el año 1942 un citólogo argentino, Eduardo Patricio Diego de Robertis, demostró que la  hCG  actuaba sobre las células de Sertoli de sapos, provocando la expulsión de espermatozoides. En 1947, su discípulo  Carlos Galli Mainini  observaba cómo la orina de mujeres embarazadas inyectadas en el saco linfático dorsal del Bufo Arenarium-Hensel (bufo arenarum) promovía la espermatogénesis bajo el estímulo de  hCG. Se obtienen resultados positivos a la media hora; el 80 % lo hace a la segunda hora y casi la totalidad a las 3 h, de allí en adelante es muy difícil que una prueba negativa se convierta en positiva.
http://pharmexec.mediwire.com/main/Default.aspx?P=Content&ArticleID=139523 Luego vinieron los  immunotest………  de eso trataremos más adelante
Donde se produce la hCG?
Luego de la  fecundación  el embrión se desarrolla en la  trompa de falopio por unos días. Aproximadamente el día  5 post- fecundación entra en el útero y al día 8-9 comienza la  implantación  y el contacto del embrión con la circulación materna. Es en ese momento la hormona  hCG  que está produciendo el embrión comienza a pasar a la sangre de la madre. Luego de unos días la  hCG  ya es detectable en la madre por una prueba de embarazo, cuando aún la mujer no ha percibido la falta de la  menstruación
Cuando se forma la placenta ella es la encargada de producir la  hCG  durante el embarazo. Esta hormona  alcanza sus máximas concentraciones a la 9-10 semanas y luego disminuye.
Determinación de la hCG   Immunoensayos
[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],Embarazada  No embarazada
Determinación de hCG por Electroquimioluminiscencia
Ensayo de detección por electro-quimio-luminiscencia (ECL) Es un ensayo basado en anticuerpos, en el cual un anticuerpo de captura marcado con streptavidin es unido a esferas magnéticas y el anticuerpo de detección es marcado con etiquetas que contienen rutenio, (ruthenium-containing tag), el cual sirve como reportero. Luego de la aplicación de bajo voltaje al electrodo, se inicia una reacción cíclica de oxido-reducción de los iones del metal rutenio, lo cual genera luz. Mientras más tags estén unidos a la proteína (ejemplo cytokine o hCG) más luz es generada y esta señal puede ser medida. http://apresslp.gvpi.net/apcyto/lpext.dll/Family/part1/lis01c004/lis01c004hfig?f=templates&fn=document-frame.htm&2.0
http://www.globalbiosystems.com/ECLtech.htm
¿Cuándo determinar la hCG? ETG: Enfermedad trofoblástica gestacional
Valores de hCG en enfermedad ,[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object]
Conclusiones ,[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object]
Determinación de hCG:  más que una prueba de embarazo……

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Determinación hCG historia

  • 1. Determinación de hCG: más que una prueba de embarazo…… Prof. María Isabel Camejo (PhD) Universidad Simón Bolívar Departamento de Biología de Organismos
  • 2. Desde tiempos muy remotos el hombre, ha querido conocer si una mujer está embarazada...
  • 3. Diagnóstico de embarazo en la antigüedad El Papiro Brugsch de 1350 AC, describe una prueba en la cual “un trozo de sandía triturado se mezclaba con leche de una mujer recién parida y se le daba a beber a la paciente; si vomitaba, ella estaba embarazada; si solo tenía flatulencia, ella no estaba embarazada”.
  • 4. Diagnóstico de embarazo en la antigüedad Otro papiro del Antiguo Egipto cuenta que, para detectar el embarazo se hacía orinar a la mujer durante varios días sobre semillas de trigo y cebada, mezcladas con sal. Si después de un tiempo germinaba la cebada, el hijo sería varón; si germinaba el trigo, sería mujer; si no germinaba ninguna semilla, la mujer no estaba embarazada. No se menciona el caso en el cual germinaran ambas semillas.
  • 5. Diagnóstico de embarazo en la antigüedad Pasaron tres mil trescientos años de los papiros egipcios para que en el año 1928, los ginecólogos Aschheim y Zondek (Alemania) describieran el método más antiguo para asegurar el diagnóstico temprano de un embarazo. Este ensayo se realizaba, inyectando pequeñas cantidades de orina de mujer potencialmente embarazada a ratones hembras pre-púberes , de 3-5 semanas de edad, que eran sacrificadas al cabo de 100 horas, e inspeccionaban sus ovarios . Si se hallaban engrosados y congestivos , había un 80 % a un 98 % de posibilidades de estar embarazada .
  • 6. Diagnóstico de embarazo en la antigüedad Luego esta prueba de inyectar la orina de la mujer sospechosa de embarazo se realizó con otros animales como conejas, ratas y peces. Esta prueba se basa en la similitud existente entre la hormona hCG y la LH, las cuales se unen a los mismos receptores celulares, pudiendo sustituir a la LH del animal y estimular el ovario del mismo.
  • 7. La prueba del sapo Se inyectaban 10 mL de orina en uno de los sacos linfáticos laterales 1-3 horas después, se extraía orina de la vejiga del sapo mediante la introducción de una pipeta en su cloaca y se observaban la presencia de espermatozoides directamente al microscopio. En el año 1942 un citólogo argentino, Eduardo Patricio Diego de Robertis, demostró que la hCG actuaba sobre las células de Sertoli de sapos, provocando la expulsión de espermatozoides. En 1947, su discípulo Carlos Galli Mainini observaba cómo la orina de mujeres embarazadas inyectadas en el saco linfático dorsal del Bufo Arenarium-Hensel (bufo arenarum) promovía la espermatogénesis bajo el estímulo de hCG. Se obtienen resultados positivos a la media hora; el 80 % lo hace a la segunda hora y casi la totalidad a las 3 h, de allí en adelante es muy difícil que una prueba negativa se convierta en positiva.
  • 10. Luego de la fecundación el embrión se desarrolla en la trompa de falopio por unos días. Aproximadamente el día 5 post- fecundación entra en el útero y al día 8-9 comienza la implantación y el contacto del embrión con la circulación materna. Es en ese momento la hormona hCG que está produciendo el embrión comienza a pasar a la sangre de la madre. Luego de unos días la hCG ya es detectable en la madre por una prueba de embarazo, cuando aún la mujer no ha percibido la falta de la menstruación
  • 11. Cuando se forma la placenta ella es la encargada de producir la hCG durante el embarazo. Esta hormona alcanza sus máximas concentraciones a la 9-10 semanas y luego disminuye.
  • 12. Determinación de la hCG Immunoensayos
  • 13.
  • 14. Determinación de hCG por Electroquimioluminiscencia
  • 15. Ensayo de detección por electro-quimio-luminiscencia (ECL) Es un ensayo basado en anticuerpos, en el cual un anticuerpo de captura marcado con streptavidin es unido a esferas magnéticas y el anticuerpo de detección es marcado con etiquetas que contienen rutenio, (ruthenium-containing tag), el cual sirve como reportero. Luego de la aplicación de bajo voltaje al electrodo, se inicia una reacción cíclica de oxido-reducción de los iones del metal rutenio, lo cual genera luz. Mientras más tags estén unidos a la proteína (ejemplo cytokine o hCG) más luz es generada y esta señal puede ser medida. http://apresslp.gvpi.net/apcyto/lpext.dll/Family/part1/lis01c004/lis01c004hfig?f=templates&fn=document-frame.htm&2.0
  • 17. ¿Cuándo determinar la hCG? ETG: Enfermedad trofoblástica gestacional
  • 18.
  • 19.
  • 20. Determinación de hCG: más que una prueba de embarazo……