Contaje de glubulos blancos las cuales son células con núcleo.

CONTAJE DE GLÓBULOS
BLANCOS
OBJETIVO
Aprender mediante el conocimiento y manipulación de los materiales
adecuados, la realización del contaje total de glóbulos blancos por mm3
de sangre y de esta forma ayudar en el diagnóstico de un paciente,
dependiendo del estado clínico y patológico que suele alterarse ante la
presencia de ciertas enfermedades.

GLÓBULOS BLANCOS
• Los leucocitos o glóbulos blancos son células con núcleo. En
preparaciones por frotis, las células se aplanan y aparecen más grandes
que en vida, pueden ser agranulares y granulares.
• Son organismos de defensa celular y humoral contra sustancias extrañas
y realizan sus funciones en el tejido conectivo. Cuando el organismo es
atacado por una afección los órganos hematopoyeticos lanzan a la
circulación gran cantidad de células inmaduras, produciendo en una
primera fase un aumento considerable de glóbulos blancos
(leucocitosis)

GLÓBULOS BLANCOS
• El incremento en el número de leucocitos (leucocitosis) suele denotar
infección, abceso, meningitis, apendicitis, amigdalitis, leucemias,
necrosis tisular por quemaduras, infarto del miocardio, gangrena.
• La disminución en el recuento leucocítico (leucopenia) indica depresión
de médula ósea, que puede ser resultado de infecciones virales o de
reacciones tóxicas es también caracterísitica en la influenza, fiebre
tifoidea, sarampión, hepatitis infecciosa, mononucleosis y rubéola.

CONTAJE DE GLÓBULOS BLANCOS
Esta técnica se encarga de medir el número de
leucocitos por mm3 de sangre, con una muestra
de sangre diluída con un reactivo o solución
ácida, colorante e hipotónica capaz de lisar los
eritrocitos, pero no los leucocitos ni los
eritrocitos nucleados, y colorea los núcleos de los
leucocitos , los cuales se cuentan en la cámara de
neubawer, con ayuda del microscopio

CONTAJE DE GLÓBULOS BLANCOS (TÉCNICA)
MATERIALES Y EQUIPOS.-
• La pipeta de thomas para glóbulo blancos
• Cámara de Neubawer
• Cubre - cámara
• Agitador de pipetas (opcional)
• Microscopio
• Gasa Estéril
• Manguerilla de aspiración.
• Tubo de vidrio de 13 x 75 mm
• Puntas amarillas
• Pipetas semiautomática

• La pipeta de thomas para glóbulo blancos

• La pipeta de thoma para glóbulo blancos

• Cámara de Neubawer
• Cubre - cámara
• Microscopio
• Gasa Estéril
• Tubo de vidrio de 13 x 75 mm
• Puntas amarillas y Azules
• Pipetas semiautomática

MUESTRA.-
• Sangre total con anticoagulante (EDTA)
• REACTIVO.-
• Solución diluyente Hayem II Solución de ácido acético al 3% (Turk)
Acido Acético Glacial 2ml Acido Acético Glacial 3ml
Violeta de Genciana al 1% 1ml H20 dest. c.s.p 100ml
H20 dest. c.s.p. 100ml
Filtrar y calentar 37°C antes de usar.

PROCEDIMIENTO.-
1. Preparar un dilución 1/20.
2. Seguida cargamos la cámara la cual debe estar preparada y limpia, (cubrehematimetro) se colocará una
10 microlitos entre el cubre y la camara. El fluído se expande en la superficie por capilaridad
3. Esperar 3 minutos para que se sedimenten los glóbulos y llevamos al microscopio y enfocamos con el
objetivo de 10X, se cierra el diafragma del condensador para ver los leucocitos y contaremos los cuatro
cuadros grandes laterales de 1mm2 o sea 64 cuadros pequeños. En cada uno de estos se incluirán las
células que están dentro de éste y en las líneas divisorias izquierda e inferior
4. Los leucocitos aparecen como pequeños puntos negros refringentes completamente redondeados. Se
suman las células contadas en los 4 cuadrantes y luego se los multiplica por 50, el valor obtenido es el
número de leucocitos por milímetro cúbico de sangre.
5. Por ejemplo: En los cuatro cuadrantes se conto:
56
60
58
54
TOTAL 228 X 50 = 11400 /mm3

PROCEDIMIENTO.- 1/20
1 + 19
10 ul de sangre + 190 ul turk
25ul de sangre + 475 ul turk

CONTAJE DE GLÓBULOS ROJOS
CONCLUSIONES.-
• Por que se multiplica por 50? porque como cada cuadro mide 1mm
por lado y tiene 0,1 Mm. de espesor si multiplicamos estas medidas
nos da igual a un Mm. cuadrado y multiplicado por 0,1 Mm. de
espesor es igual a 0,1 mm3. el volumen de cada cuadro es de 0,1
mm3 por 4 cuadros que contamos son 0,4 mm3. y como la dilución
es de una aparte de sangre y 19 partes de solución el factor de
dilución es 20, entonces dividimos el factor de dilución para volumen
contado y nos da igual a 50.
• La relación de leucocitos en los cuadrantes es de 2 a 3 en cada uno de
los 64 cuadritos, si existen mas es porque significa que hemos fallado.
Así mismo la distribución de leucocitos por cuadrante debe ser
proporcional

PROCEDIMIENTO.-

PROCEDIMIENTO.-
lente de 10x se cuenta
el de 40x

CONTAJE DE GLÓBULOS BLANCOS
Mujeres Hombres
5.000 - 10.000/uL

RECUENTO DIFERENCIAL DE LA
FÓRMULA LEUCOCITARIA

FORMULA LEUCOCITARIA
OBJETIVO
Interpretar la fórmula leucocitaria que es una tabulación o diagrama que
representa el porcentaje de los diferentes tipos de leucocitos, de un
espécimen de sangre

• La fórmula leucocitaria es un elemento constituyente en el recuento
diferencial estudia los diversos tipos de leucocitos: polimorfonucleares
neutrófilos, eosinófilos y basófilos. Mononucleares representados por
Linfocitos, Monocitos. Los neutrófilos maduros circulan en forma de
segmentados. Ocasionalmente circula un juvenil o un mielocito.
• Su identificación se produce por las reacciones tintorias, determinando
así los procesos normales y anormales por su estructura, morfología
citoplasmática, endoplasmática y cromatina, que permite definir valores
diferenciales preestablecidos y humanos.

FORMULA LEUCOCITARIA(TÉCNICA)
• TINCION DE WRIGHT
• PROCEDIMIENTO.-
• Técnica de Coloración : Cubrir la lámina con wright por cinco minutos,
luego se le agrega una solución tampón (Agua destilada) y se deja por
dos minutos, se lava la lámina con agua de chorro. Se debe hacer el
recuento diferencial con objetivo de 100 X para poder observar todas
las características de las diferentes células.

FORMULA LEUCOCITARIA(TÉCNICA)

LEUCOCITOS AGRANULOSOS
Linfocitos Pequeños 7-10 um, forma redonda, núcleo
voluminoso
ocupa la mayor parte de la
célula,cromatina morado oscuro
citoplasma reducido, azul y sin gránulos
Linfocitos Grandes 10 -15 um, forma redonda o irregular,
núcleo oval o redondo, gránulos escasos
ocupa un lado de la célula citoplasma
abundante azul pálido
Monolitos 10-25 um, forma irregular, núcleo con
forma de riñón
cromatina dispuesta en cordones
irregulares color malva pálido
gránulos muy pequeños como partículas
de polvo.
LEUCOCITOS GRANULOSOS
Neutrófilos Maduros
(segmentados)
12-15 um, forma redonda bien definida,
citoplasma abundante
gránulos de color malva, numerosos y
separados
núcleo lobulado(2ª5) unidos por bandas
de cromatina, es morado oscuro
Neutrófilos Inmaduros
(cayados)
Semejantes a los anteriores, pero su
núcleo tiene forma de C
No se ha lobulado el núcleo todavía.
Eosinófilos 12-15 um, núcleo generalmente con 2
lóbulos
gránulos voluminosos, redondos de color
rojo anaranjado
agrupados estrechamente.
Basófilos 11-13, forma redonda, núcleo difícil de
observar, cubierto por gránulos
gránulos muy voluminosos, morado
oscuro, abundantes y estrechos.
OTRAS CÉLULAS
Plaquetas 1-3 um de diámetro, forma redonda u
oval, de perfil un bastoncillo

Neutrófilos segmentados
40 - 75 %
Linfocitos
20 - 40 %
Monocitos
2 - 8 %
Eosinófilos
0 - 4 %
Basófilos
0 - 1 %

segmentados
linfocitos
Eosinófilos
Monocitos
Basófilos

FROTIS SANGUINEO INTERPRETACIÓN
• El recuento diferencial de leucocitos realizado por los aparatos
automatizados, especialmente los de las últimas generaciones, sólo
determina cinco poblaciones: neutrófilos, eosinófilos, basófilos, linfocitos y
monocitos; y reporta “alarmas” cuando las células nucleadas, como otras
células blancas o los eritroblastos, no son clasificables dentro de los cinco
grupos antes citados
• Por lo tanto, estas alteraciones sólo puede notarse si se hace un recuento
manual de un frotis de sangre periférica

Alteraciones relacionadas con el núcleo de los neutrófilos
•De acuerdo con el grado de maduración de los neutrófilos,
tradicionalmente se han definido dos figuras hematológicas:
la desviación a la izquierda y la desviación a la derecha

•De acuerdo con el grado de maduración de los neutrófilos
si hay > 3-5% de formas inmaduras o jóvenes del
neutrófilo (cayados, metamielocitos, mielocitos), lo
que puede observarse en infecciones graves,
síndromes mieloproliferativos
Si hay mas de 5 % de neutrófilos con más de cinco lobulaciones
en el núcleo, conocidas como macropolicitos o pleocariocitos.
Su tamaño es del doble del neutrófilo normal. puede deberse a:
anemia perniciosa o ferropénica, síndrome mielodisplásico.

si hay > 3-5% de formas inmaduras o jóvenes del
neutrófilo (cayados, metamielocitos, mielocitos), lo
que puede observarse en infecciones graves,
síndromes mieloproliferativos
Si hay mas de 5 % de neutrófilos con más de cinco lobulaciones
en el núcleo, conocidas como macropolicitos o pleocariocitos.
Su tamaño es del doble del neutrófilo normal. puede deberse a:
anemia perniciosa o ferropénica, síndrome mielodisplásico.

Alteraciones relacionadas con los
neutrófilos
Los cuerpos de Döhle
Son bandas rectangulares de retículo endoplásmico
rugoso que persisten en los granulocitos maduros y se
tiñen de color azul grisáceo Aparecen especialmente
en infecciones graves

Alteraciones relacionadas con los
neutrófilos
Granulaciones tóxicas
Gránulos irregulares, gruesos y basófilos en el citoplasma
de los es decir Caracterizada fundamentalemente por
gránulos hiperteñidos y vacuolas en el citoplasma, pueden
ir acompañado de desviación a la izquierda, cuerpos de
DÖhle y vacuolización citoplasmática se asocian con
infecciones, septicemias y quemaduras

Alteraciones relacionadas con los linfocitos
Linfocitos Atípicos
Los linfocitos atípicos (>10% de total de linfocitos) son linfocitos que presenta una
forma variada y que surgen normalmente cuando hay infecciones, principalmente
infecciones virales como mononucleosis, herpes, SIDA, rubéola y varicela.

FROTIS SANGUINEO INTERPRETACIÓN(Hematíes)
• Macrocítica.
> 9 micras
• Normocítica.
6-9 micras
• Microcítica.
< 6 micras

Anisocitosis.- Presencia en
frotis sanguíneos de eritrocitos
de diferente tamaño, puede ser
leve, moderada o marcada y de
predominio macrocítico o
microcítico.
Poiquilocitosis.- Presencia
en el frotis sanguíneo de
eritrocitos de diferentes formas:
puede ser leve, moderada o
marcada.

•Alteraciones del color: anisocromía, hipocromía, hipercromía

ALTERACIONES MORFOLÓGICAS DE LOS
HEMATÍES
Acantocitos
•Eritrocito con proyecciones o prominencias irregulares en la
superficie(Espinoso, en espuela ,espiculado)
CUADROS HEMATOLÓGICOS
•Anemia hemolítica
•microangiopática,
•hepatopatías alcohólicas,
•acantocitosis hereditarias

HEMATÍES
Codocitos o células diana
•Eritrocito con reborde periférico nítido que rodea una zona angular de
hemoglobina más clara y con su parte central más coloreada(Diana)
•CUADROS HEMATOLÓGICOS
•Hepatopatía obstructiva
•talasemia

HEMATÍES
Queratocitos
•Eritrocito Células en casco
•PTT, CID, síndrome urémico hemolítico
•Anemia hemolítica microangiopática

HEMATÍES
Dacriocitos
•Eritrocito con extremo alongado en forma de gota o lágrima
•Mielofibrosis,
•Eritropoyesis ineficaz
•talasemia, anemia megaloblástica

HEMATÍES
Drepanocitos Célula Falciforme
•Eritrocitos en forma de hoz o semiluna
•Anemia falciforme, Hb CS,
•HB S -tal

HEMATÍES
Eliptocitos
Eritrocito en forma ovalada o alongada
•Eliciptosis hereditaria,
•ferropenia, talasemia

HEMATÍES
Ovalocitos
Eliptocito o eritrocito en forma ovalada o alongada
•Anemia megaloblástica

HEMATÍES
Esquistocitos
Eritrocito fragmentado con aspecto cuneiforme irregular especulado,
con proyecciones cortas que cubren su superficie
•hemólisis de fragmentación

HEMATÍES
Equinocito O crenocito
Eritrocito especulado con proyecciones cortas como espina, que cubren
toda la superficie.
•hemólisis de fragmentación

HEMATÍES
Esferocitos
Eritrocitos esféricos que han perdido su carácter bicóncavo sin centro
claro.
•Esferocitosis hereditaria
•anemia hemolítica
•TCD+, hemólisis de fragmentación

HEMATÍES
Estomatocitos
Eritrocito con una concavidad central en forma de boca.
•Estomatocitosis hereditaria
•Hepatopatía obstructiva,
•Alcoholismo, cirrosis

HEMATÍES
Megalocitos
Eritrocito grande, ovalado y con escaso o nulo centro claro.
•Anemia megaloblástica

HEMATÍES
Cuerpos de Howell Jolly
Gránulo grueso, esférico, generalmente excéntrico, se tiñe de color
azulado (basófilo) ubicado en el interior de un eritrocito, corresponde a
restos de núcleo(son remanentes nucleares intraeritrocitarios).
• Aparece en sujetos esplenectomizados

HEMATÍES
Punteado basófilo
Pueden ser agregados ribosómicos originados por una degeneración
vacuolar del citoplasma o precipitados de cadenas globínicas libres.
Consiste en puntitos basófilos,de tamaño variable y dispersos por toda
la superficie del hematíe
• intoxicaciones por plomo,
•talasemia y en la leucemia.

FORMULA LEUCOCITARIA(VALORES
REFERENCIALES)
Resultado Valor referencial
Neutrófilos segmentados 62 % 40 - 75 %
Linfocitos 35 % 20 - 40 %
Monocitos 2 % 2 - 8 %
Eosinófilos 1 % 0 - 4 %
Basófilos 0 % 0 - 1 %
100 %

Resultado Valor
referencial
Neutrófilos
segmentados
62 % 40 - 75 %
Linfocitos 35 % 20 - 40 %
Monocitos 2 % 2 - 8 %
Eosinófilos 1 % 0 - 4 %
Basófilos 0 % 0 - 1 %
100 %
10-15 micras
Núcleo 2-5 lóbulos conectados
por lamentos delgados sin
cromatina visible
Citoplasma de color rosa
pálido, crema o incoloro
7-18 micras
nucleo Redondo a oval;
puede
Estar ligeramente indentado;
Nucléolos ocasionales
Condensada
12-20 micras
Nucleo Variable; puede ser redondo, con
forma de herradura o de riñón
Citoplasma Azul-gris;
12-17 micras
núcleo 2-3 lóbulos conectados por lamentos
delgados sin Cromatina visible
Citoplasma granulos le dan Un color naranja
10-14 micras
Núcleo dos lóbulos conectados por lamentos delgados sin
Cromatina visible
Citoplasma con Granulos de color lavanda a violeta oscuro
pueden enmascarar el núcleo

Leucograma
Los datos que habitualmente se reportan en una biometría
hemática sobre los leucocitos se pueden dividir en:
✔ Recuento de leucocitos
✔ Cuenta diferencial de leucocitos relativa(%)
✔ Cuenta diferencial de leucocitos absoluta
Granulocitos:
• Neutrófilos.
• Eosinófilos.
• Basófilos.
No granulocitos o agranulocitos:
• Monocitos.
• Linfocitos.
Los granulocitos son
llamados así porque al
teñirlos presentan
gránulos coloreados en su
citoplasma

Leucograma
Recuento de leucocitos
5.000 - 10.000/uL
Cuenta diferencial de leucocitos relativa(%)
Neutrófilos segmentados 40 - 75 %
Linfocitos 20 - 40 %
Monocitos 2 - 8 %
Eosinófilos 0 - 4 %
Basófilos 0 - 1 %
Cuenta diferencial de leucocitos absoluta
Neutrófilos segmentados 1.600 a 8.000/uL
Linfocitos 900 a 4.000/uL
Monocitos 100 a 1000/uL
Eosinófilos 0 a 500/uL
Basófilos 0 a 200/uL

Leucograma
valor referencial : 5.000 - 10.000/uL
Leucopenia < 5.000 - 10.000/uL > leucocitosis
Cuando se produce una
leucocitosis pueden
aumentar todos los tipos de
glóbulos blancos, o sólo uno
de ellos, principalmente los
neutrófilos (neutrofilia) y, en
segundo lugar, los linfocitos
(linfocitosis)
Leucopenia significa
disminución de los
glóbulos blancos, y
lo más frecuente es
que se trate de una
neutropenia
•Infecciones
•Inflamaciones o enfermedades inflamatorias
•Leucemias, trastornos mieloproliferativos
•Situaciones que cursan con muerte tisular (necrosis) -
traumatismos,
•quemaduras, cirugía o infarto agudo de miocardio
•Respuestas alérgicas y asma
•Afectación de la médula ósea - sustancias tóxicas,
quimioterapia, radioterapia, fármacos
•Trastornos de la médula ósea
•Linfomas u otros cánceres que se han diseminado
(metástasis) hacia la médula ósea
•Enfermedades autoinmunes
•Déficits nutricionales
•Enfermedades del sistema inmunitario

Leucograma
Recuento de leucocitos >50.000/uL reacción leucemoide (o mielemia)
5.000 - 10.000/uL
Neutropenia Neutrofilia
Linfocitopenia Linfocitosis
Eosinopenia Eosinofilia
Monocitopenia Monocitosis
Basopenia Basofilia
no es frecuente encontrar aumento de
eosinófilos o de basófilos y es raro
encontrar un aumento aislado de estas
células tan grande como para ocasionar
leucocitosis.
Puede observarse también disminución de
monocitos (monocitopenia), de eosinófilos
(eosinopenia) y de basófilos (basopenia o
basocitopenia), pero ninguno de los tres
últimos ocasionan por sí solos disminución de
la cuenta total de leucocitos

Leucograma
5.000 - 10.000/uL
Cuenta diferencial de leucocitos relativa(%)
Neutrófilos segmentados 40 - 75 %
Linfocitos 20 - 40 %
Monocitos 2 - 8 %
Eosinófilos 0 - 4 %
Basófilos 0 - 1 %
Cuenta diferencial de leucocitos absoluta
Neutrófilos segmentados 1.600 a 8.000/uL
Linfocitos 900 a 4.000/uL
Monocitos 100 a 1000/uL
Eosinófilos 0 a 500/uL
Basófilos 0 a 200/uL
considerar los
valores absolutos
más que los
relativos

Leucograma
Recuento de leucocitos >50.000/uL reacción leucemoide (o mielemia)
5.000 - 10.000/uL
Neutropenia < 1.600 a 8.000/uL > Neutrofilia
Linfocitopenia < 900 a 4.000/uL > Linfocitosis
Eosinopenia < 100 a 1000/uL > Eosinofilia
Monocitopenia < 0 a 500/uL > Monocitosis
Basopenia < 0 a 200/uL > Basofilia

FORMULA LEUCOCITARIA(VALORES
REFERENCIALES)
100% 5.000/ul
20%x
20% x 5.000/100%=1000/ul
neutropenia
20% x 25.000/100%=5000/ul
neutrofilia
Resultado Resultado Valor referencial
relativo
Valor referencial
Absoluto
Neutrófilos
segmentados
20 %
1000/ul
20 %
5000/ul
40 - 75 % 1.600 a 8.000/uL
Linfocitos 35 %
1750/ul
35 %
8750/ul
20 - 40 % 900 a 4.000/uL
R. de blancos 5.000
/uL
25000
/uL
considerar los valores absolutos más que los relativos (por
ejemplo, un porcentaje de neutrófilos del 20% no puede
etiquetarse de entrada como una neutropenia, puesto que lo
sería en caso de que el paciente tenga 5000 leucocitos /µl
totales, pero no en otro con 25 000 /µl).

Alteraciones cuantitativas
por exceso

Neutrofilia
Neutrófilos > 8.000/uL
•situaciones de estrés (emocional, metabólico, hemorragia aguda, dolor,
cirugía o ejercicio intenso)
•Infecciones bacterianas
•Inflamaciones o enfermedades inflamatorias
•Leucemias, trastornos mieloproliferativos
•Situaciones que cursan con muerte tisular (necrosis) - traumatismos,
•quemaduras, cirugía o infarto agudo de miocardio
•Respuestas alérgicas y asma

Linfocitosis
Linfocitos > 4.000/uL
Infección vírica, pero también infecciones bacterianas agudas (tos
ferina), subagudas o crónicas (tuberculosis, brucelosis, fiebre tifoidea,
rickettsiosis), enfermedades autoinmunes o inflamatorias crónicas
(enfermedad inflamatoria intestinal), postvacunación y como reacción a
fármacos

Monocitosis
Monocitos > 500/uL
•Es un hallazgo poco frecuente y nada específico.
•Se puede observar en la fase de recuperación de una
•neutropenia, como signo precoz de resolución, en
•infecciones virales y crónicas (tuberculosis, brucelosis,
•listeriosis, paludismo, leishmaniosis, toxoplasmosis),
asociada a neutropenias crónicas(infecciones crónicas)

Eosinófilia
Eosinófilos > 1000/uL
• trastornos alérgicos (asma, rinitis, dermatitis atópica, urticaria,
trastornos alérgicos (asma, rinitis, dermatitis atópica, urticaria,
hipersensibilidad a alimentos o fármacos). En países en vías de desarrollo y a
veces en nuestro ámbito (niño viajero, inmigrante o procedente de un entorno
sociosanitario deprimido, aunque no exclusivamente), han de considerarse las
infecciones por parásitos (principalmente helmintos)hipersensibilidad a
alimentos o fármacos).
•Han de considerarse las infecciones por parásitos (principalmente
helmintos)

Basofilia
Basofilos > 500/uL
•Está ligado a muchas situaciones patológicas, principalmente
reacciones de hipersensibilidad a fármacos o alimentos, así como
en urticaria aguda

Alteraciones cuantitativas
por defecto

Neutropenia
Neutrófilos < 1.600/uL
•Estos pacientes tienen un riesgo elevado de infección,
especialmente en las formas graves.
•Pueden ser primarias, con una producción disminuida de
neutrófilos (neutropenia cíclica, inmunodeficiencias primarias,
insuficiencia medular, síndrome de Kostmann, metabolopatías) o
secundarias (infecciones, medicamentos, inmunes, déficits
nutricionales, infiltración tumoral medular, posquimioterapia o por
hiperesplenismo)

Linfopenia
Linfocitos < 1.000/uL
El hallazgo de una linfopenia absoluta mantenida obliga a descartar una
inmunodeficiencia congénita (primaria) o adquirida (SIDA-VIH), otras
infecciones virales o bacterianas como salmonelosis o tuberculosis
miliar, fármacos y exposición a radiación.

Monocitopenia, Eosinopenia y
basopenia..
No tienen relevancia en la práctica clínica

HEMATOLOGIA 1
INTRODUCCIÓN AL HEMOGRAMA

Cámara de neubauer
La cámara de Neubauer, hematímetro o hemocitómetro, es un
instrumento de laboratorio que consiste en una placa de vidrio especial
grueso. Esta cámara sirve para realizar recuentos de algunos tipos
celulares como hematíes, glóbulos blancos y plaquetas, aunque puede
ser usado para recuento de esporas, espermatozoides, parásitos, etc.

Cámara de neubauer
una hendidura central para el recuento y dos zonas de soporte. Cada
cámara posee dos zonas de recuento o retículos, una en la parte
superior y otra en la parte inferior.

Cámara de neubauer
Estos poseen múltiples divisiones en forma cuadriculada. Las zonas de
contaje son los cuadros medianos que se encuentran en las 4 esquinas
de ambos retículos, más el cuadrado central.

Cámara de neubauer
• Diluciones utilizadas
• 1/20
• 1/100

diluciones
• Dilución 1/20 1 parte de soluto + 19 de solvente
• 1 parte 19 partes = 1/20

Diluciones Prácticas
Dilución 1/20 = 1+19
Significa que hay que poner
1 parte de soluto en 19 de solvente
1 ml de soluto + 19 ml solvente
5 ml de soluto + 95ml solvente
Dilución 1/5 = 1+4

UNIVERSIDAD TÉCNICA DE MANABÍ
FACULTAD CIENCIAS DE LA SALUD
ESCUELA DE LABORATORIO CLÍNICO
A.- DATOS GENERALES DE LAPRÁCTICA DE LABORATORIO
Asignatura: Hematología I teoría y práctica
N° de practica: 2
Periodo académico: Mayo – Septiembre
Profesor Responsable: Miguel Ángel Arteaga
Nivel: Quinto nivel
B.- DATOS ESPECÍFICOS DE LA PRÁCTICA DE LABORATORIO
 TÍTULO DE LA PRÁCTICA
Frotis Sanguíneo y interpretación , alteraciones morfológicas
 OBJETIVO DE APRENDIZAJE
Objetivo general:
Aprender la técnica apropiada para realizar un extendido sanguíneo que permita la
visualización de los elementos figurados de la sangre por medio de la microscopía óptica.
Objetivos específicos:
 Reconocer los distintos componentes celulares de la sangre.
 Identificar y contar los diferentes tipos de células sanguíneas
 Evaluar la morfología de las células sanguíneas
 Evaluar la calidad de la muestra de sangre
 Identificar anomalías en las células sanguíneas
 TIEMPO PLANIFICADO PARA LA PRÁCTICA DE LABORATORIO
120 minutos
 RECURSOS PARA REALIZAR LA PRÁCTICA DE LABORATORIO
Materiales:
 Portaobjetos de vidrio
 Cubreobjetos
 Hisopos o palillos de madera
 Jeringuilla´

Equipos
Microscopio
Lancetas o agujas para punción
Reactivos
Colorantes de Wright
Muestra
Sangre
INSTRUCCIONES PARA REALIZAR LA PRÁCTICA (BIOSEGURIDAD)
 Lavado de manos
 Uso de guantes
 Uso de bata o delantal
 Superficie de trabajo limpia
 Eliminación adecuada de los materiales utilizados
 Limpieza y desinfección
SIGNIFICACIÓN CLÍNICA
Frotis sanguíneo
La realización del frotis sanguíneo es de fundamental importancia en la interpretación del
hemograma. Los frotis se pueden realizar de dos maneras: en portaobjetos y cubreobjetos;
el método cubreobjeto permite la distribución más homogénea de los glóbulos blancos, sin
embargo se prefiere en portaobjeto por las siguientes razones:
 Son fáciles de manipular, se rompen menos, se pueden rotular más fácilmente, no
requieren montaje, pueden archivarse en forma automática.
 El estudio del frotis de sangre periférica consiste en precisar e informar las
alteraciones morfológicas de los elementos formes de la sangre.
 Alteraciones morfológicas y semicuantitativas de los elementos formes de la
sangre (eritrocitos, leucocitos y plaquetas) en el estudio de la lámina periférica.
El frotis sanguíneo es una técnica de laboratorio que consiste en extender una muestra de
sangre en un portaobjetos de vidrio, teñirla y observarla bajo un microscopio. Esta técnica
permite evaluar la morfología y la composición celular de la sangre.
El procedimiento básico para realizar un frotis sanguíneo es el siguiente:
 Preparación de la muestra
 Extensión de la muestra.
 Fijación:.
 Tinción
 Observación microscópica
Durante la observación, se pueden identificar diferentes tipos de células sanguíneas, como
los eritrocitos (glóbulos rojos), los leucocitos (glóbulos blancos) y las plaquetas. También
se pueden detectar anomalías morfológicas, como células inmaduras, cambios en la forma
de los glóbulos rojos.

Alteraciones Morfológicas
Las alteraciones morfológicas en un frotis sanguíneo se refieren a los cambios anormales
en la apariencia y forma de las células sanguíneas que se observan en un examen
microscópico. Estos cambios pueden proporcionar pistas importantes sobre posibles
enfermedades o trastornos que afectan la sangre.
Anisocitosis: se refiere a la presencia de glóbulos rojos de diferentes tamaños. Puede
indicar anemia, deficiencias nutricionales o trastornos de la médula ósea.
Poiquilocitosis: se caracteriza por la presencia de glóbulos rojos con formas anormales o
variadas. Algunos ejemplos incluyen los eritrocitos esquistocitos (fragmentados),
equinocitos (con espinas) o drepanocitos (con forma de hoz). Estas alteraciones pueden
ser indicativas de trastornos hemolíticos, enfermedades de la sangre o daño vascular.
Esferocitosis. Eritrocitos de forma esférica cuyo diámetro es menor que lo normal y que
aparecen hipercrómicos por su forma. Característicamente se encuentran en la
esferocitosis hereditaria pero pueden verse en recién nacidos con enfermedad hemolítica
por incompatibilidad ABO y en adultos con anemias hemolíticas autoinmunes e
isoinmunes.
estomatocitos. Células que adoptan una configuración de boca de pez, se ven en
personas con grupos Rh "nuil" que usualmente tienen un graüo moderado de anemia
hemolítica compensada, también se ven en pacientes con enfermedad hepática crónica y
en ciertas personas con un defecto de la membrana del eritrocito.
ovalocitos. En pocas cantidades puede ser un hallazgo normal. Estas células de forma
ovalada, cuando se encuentran en grandes números sugiere el diagnóstico de eliptocitosis
hereditaria. En pacientes con deficiencia severa de hierro se pueden encontrar células
alargadas que semejan eliptocitos.
Policromasia: hace referencia a la presencia de glóbulos rojos inmaduros en la sangre
periférica. Indica una respuesta de la médula ósea ante la producción acelerada de células
sanguíneas, como en casos de anemia o hemorragia.
Hipocromía: se observa cuando los glóbulos rojos tienen una concentración reducida de
hemoglobina, lo que les da un color más pálido. Puede ser un indicio de deficiencia de
hierro o trastornos de la síntesis de hemoglobina.
Anisocromía: se refiere a una variación en la coloración de los glóbulos rojos. Puede
estar asociada con trastornos de la síntesis de hemoglobina o anemia.
Además de estas alteraciones en los glóbulos rojos, también se pueden observar cambios
en las células blancas (leucocitos) y en las plaquetas. Estos cambios pueden incluir
variaciones en el tamaño, forma y cantidad de estas células, lo que puede indicar
infecciones, trastornos inmunológicos, cánceres de la sangre o trastornos de coagulación.
http://www.bvs.hn/RMH/pdf/1985/pdf/Vol53-4-1985-5.pdf

DESARROLLO DE LA PRÁCTICA
Procedimiento:
 Rotular la placa portaobjeto con el número respectivo, tomar el mismo con la mano
izquierda y colocar una gota de sangre venosa o capilar de 2 a 3 mm de diámetro,
a 1 cm de su extremo derecho.
 Con la mano derecha aplicar paralelamente un borde extremo del extensor cuyos
bordes deben estar bien pulidos y sus ángulos rotos, formando con la placa
portaobjeto un ángulo de 30° hacia la derecha. Deslizar el extensor a la derecha
hasta tocar la gota de sangre la cual se extenderá por capilaridad.
 Deslizar la placa extensora uniformemente hacia la izquierda con presión suave.
Secar al ambiente.
 Tener en cuenta que el frotis consta de 4 partes: cabeza o lugar donde comienza
la extensión es la zona más gruesa del frotis, cuerpo que corresponde a la zona
media, cola o zona terminal que es la más delgada y zonas marginales que
bordean al frotis.
 El grosor de la extensión es directamente proporcional al tamaño de la gota de
sangre, al ángulo formado e inversamente proporcional a la velocidad de
desplazamiento.
 DIBUJOS
CONCLUSIONES
En conclusión, el frotis sanguíneo es una técnica de laboratorio valiosa que permite
examinar y analizar las células sanguíneas en detalle. Proporciona información importante
sobre la composición celular, la morfología y las posibles anomalías presentes en la
sangre.
A través del frotis sanguíneo, es posible identificar y contar los diferentes tipos de células
sanguíneas, como los glóbulos rojos, los glóbulos blancos y las plaquetas. Además, se
pueden detectar cambios morfológicos que pueden indicar enfermedades hematológicas,
infecciones o problemas en la médula ósea.
RECOMENDACIONES
Es importante realizar el frotis sanguíneo siguiendo las recomendaciones adecuadas para
obtener resultados precisos y confiables. Una técnica adecuada de recolección, extensión,
tinción y observación microscópica garantiza la calidad del frotis y la interpretación correcta
de los resultados.

UNIVERSIDAD TÉCNICA DE MANABÍ
FACULTAD CIENCIAS DE LA SALUD
ESCUELA DE LABORATORIO CLÍNICO
A.- DATOS GENERALES DE LA PRÁCTICA DE LABORATORIO
Asignatura: Hematología I teoría y práctica
N° de practica: 4
Periodo académico:
Profesor Responsable:
Nivel: quinto nivel
B.- DATOS ESPECÍFICOS DE LA PRÁCTICA DE LABORATORIO
TÍTULO DE LA PRÁCTICA
Alteraciones cualitativas y cuantitativas de los leucocitos.
OBJETIVO DE APRENDIZAJE
Objetivo general:
 Analizar y comprender las alteraciones cualitativas y cuantitativas de los
leucocitos para identificar posibles trastornos y condiciones médicas que
puedan afectar el sistema inmunológico y la salud general de un individuo.
 Realizar un leucograma para analizar y cuantificar los diferentes tipos de
leucocitos presentes en una muestra de sangre, con el fin de evaluar la salud
del sistema inmunológico y detectar posibles irregularidades o condiciones
médicas subyacente
Objetivos específicos:
 Identificar y describir las alteraciones cualitativas de los leucocitos, como cambios
en la forma, tamaño y estructura celular.
 Determinar el recuento total de leucocitos en la muestra de sangre.
 Analizar la proporción de cada tipo de leucocito en relación con el recuento total de
leucocitos.
 Cuantificar el recuento total de leucocitos en la muestra de sangre.
 Identificar y diferenciar los distintos tipos de leucocitos, incluyendo neutrófilos,
linfocitos, monocitos, eosinófilos y basófilos.
 Calcular y expresar la proporción de cada tipo de leucocito en relación con el
recuento total de leucocitos.
 Comparar los resultados de los análisis de leucocitos con los valores de referencia
establecidos para determinar la gravedad de las alteraciones.
 Evaluar si hay una desviación significativa en la distribución de leucocitos en
comparación con los valores de referencia establecidos.

 TIEMPO PLANIFICADO PARA LA PRÁCTICA DE LABORATORIO
120 minutos
RECURSOS PARA REALIZAR LA PRÁCTICA DE LABORATORIO
Materiales y Equipos
 Cámara de Neubawer
 Cubre - cámara
 Agitador de pipetas (opcional)
 Microscopio
 Gasa Estéril
 Tubo de vidrio de 13 x 75 mm
 Puntas amarillas y azules
 Pipetas semiautomática
Reactivos
 Solución diluyente Hayem II
 Solución de ácido acético al 3% (Turk)
Muestra
 Sangre total con anticoagulante (EDTA)
INSTRUCCIONES PARA REALIZAR LA PRÁCTICA (BIOSEGURIDAD)
 Lavado de manos
 Uso de guantes
 Uso de bata o delantal
 Superficie de trabajo limpia
 Eliminación adecuada de los materiales utilizados
 Limpieza y desinfección
SIGNIFICACIÓN CLÍNICA
Leucograma
Los datos que habitualmente se reportan en una biometría hemática sobre los leucocitos
se pueden dividir en:
 Recuento de leucocitos
 Cuenta diferencial de leucocitos relativa(%)
 Cuenta diferencial de leucocitos absoluta
Granulocitos:
 Neutrófilos.
 Eosinófilos.
 Basófilos.
No granulocitos o agranulocitos:
 Monocitos.
 Linfocitos
Leucopenia
Leucopenia significa disminución de los glóbulos blancos, y lo más frecuente es que se
trate de una neutropenia
 Afectación de la médula ósea - sustancias tóxicas, quimioterapia, radioterapia,
fármacos
 Trastornos de la médula ósea
 Linfomas u otros cánceres que se han diseminado (metástasis) hacia la médula
ósea Enfermedades autoinmunes
 Déficits nutricionales

 Enfermedades del sistema inmunitario
leucocitosis
Cuando se produce una leucocitosis pueden aumentar todos los tipos de glóbulos blancos,
o sólo uno de ellos, principalmente los neutrófilos (neutrofilia) y, en segundo lugar, los
linfocitos (linfocitosis)
 Infecciones
 Inflamaciones o enfermedades inflamatorias •Leucemias, trastornos
mieloproliferativos
 Situaciones que cursan con muerte tisular (necrosis) - traumatismos,
 quemaduras, cirugía o infarto agudo de miocardio
 Respuestas alérgicas y asma
FORMULA LEUCOCITARIA(VALORES REFERENCIALES)
considerar los valores absolutos más que los relativos (por ejemplo, un porcentaje de
neutrófilos del 20% no puede etiquetarse de entrada como una neutropenia, puesto que lo
sería en caso de que el paciente tenga 5000 leucocitos /µl totales, pero no en otro con 25
000 /µl).
De acuerdo con el grado de maduración de los neutrófilos, tradicionalmente se han
definido dos figuras hematológicas:
Alteraciones relacionadas con los neutrófilos
Los cuerpos de Döhle:Son bandas rectangulares de retículo endoplásmico rugoso que
persisten en los granulocitos maduros y se tiñen de color azul grisáceo Aparecen
especialmente en infecciones graves.
Granulaciones tóxicas:Gránulos irregulares, gruesos y basófilos en el citoplasma de los
es decir Caracterizada fundamentalemente por gránulos hiperteñidos y vacuolas en el
citoplasma, pueden ir acompañado de desviación a la izquierda, cuerpos de DÖhle y
vacuolización citoplasmática se asocian con infecciones, septicemias y quemaduras
Linfocitos Atípicos: Los linfocitos atípicos (>10% de total de linfocitos) son linfocitos que
presenta una forma variada y que surgen normalmente cuando hay infecciones,
principalmente infecciones virales como mononucleosis, herpes, SIDA, rubéola y varicela.

Alteraciones cuantitativas por exceso
Neutrofilia Neutrófilos > 8.000/uL
 situaciones de estrés (emocional, metabólico, hemorragia aguda, dolor, cirugía o
ejercicio intenso)
 Infecciones bacterianas
 Inflamaciones o enfermedades inflamatorias
 Leucemias, trastornos mieloproliferativos
 Situaciones que cursan con muerte tisular (necrosis) - traumatismos, •quemaduras,
cirugía o infarto agudo de miocardio
 Respuestas alérgicas y asma
Linfocitosis Linfocitos > 4.000/uL
Infección vírica, pero también infecciones bacterianas agudas (tos ferina), subagudas o
crónicas (tuberculosis, brucelosis, fiebre tifoidea, rickettsiosis), enfermedades autoinmunes
o inflamatorias crónicas (enfermedad inflamatoria intestinal), postvacunación y como
reacción a fármacos
Monocitosis Monocitos > 500/uL
 Es un hallazgo poco frecuente y nada específico.
 Se puede observar en la fase de recuperación de una
 neutropenia, como signo precoz de resolución, en
 infecciones virales y crónicas (tuberculosis, brucelosis,
 listeriosis, paludismo, leishmaniosis, toxoplasmosis), asociada a neutropenias
crónicas(infecciones crónicas)
Eosinófilia Eosinófilos > 1000/uL
 trastornos alérgicos (asma, rinitis, dermatitis atópica, urticaria, trastornos alérgicos
(asma, rinitis, dermatitis atópica, urticaria, hipersensibilidad a alimentos o
fármacos). En países en vías de desarrollo y a veces en nuestro ámbito (niño
viajero, inmigrante o procedente de un entorno sociosanitario deprimido, aunque no
exclusivamente), han de considerarse las infecciones por parásitos (principalmente
helmintos)hipersensibilidad a alimentos o fármacos).
 Han de considerarse las infecciones por parásitos (principalmente helmintos)
Basofilia Basofilos > 500/uL
Está ligado a muchas situaciones patológicas, principalmente reacciones de
hipersensibilidad a fármacos o alimentos, así como en urticaria aguda
Alteraciones cuantitativas por defectos
Neutropenia Neutrófilos < 1.600/uL
 Estos pacientes tienen un riesgo elevado de infección, especialmente en las formas
graves.
 Pueden ser primarias, con una producción disminuida de neutrófilos (neutropenia
cíclica, inmunodeficiencias primarias, insuficiencia medular, síndrome de
Kostmann, metabolopatías) o secundarias (infecciones, medicamentos, inmunes,
déficits nutricionales, infiltración tumoral medular, posquimioterapia o por
hiperesplenismo)
Linfopenia Linfocitos < 1.000/uL
El hallazgo de una linfopenia absoluta mantenida obliga a descartar una inmunodeficiencia
congénita (primaria) o adquirida (SIDA-VIH), otras infecciones virales o bacterianas como
salmonelosis o tuberculosis miliar, fármacos y exposición a radiación.
Monocitopenia, Eosinopenia y basopenia.
No tienen relevancia en la práctica clínica
DESARROLLO DE LA PRÁCTICA
Procedimiento:
contaje de leucocitos
 Preparar un dilución 1/20.

 Seguida cargamos la cámara la cual debe estar preparada y limpia,
(cubrehematimetro) se colocará una 10 microlitos entre el cubre y la
camara. El fluído se expande en la superficie por capilaridad
 Esperar 3 minutos para que se sedimenten los glóbulos y llevamos al
microscopio y enfocamos con el objetivo de 10X, se cierra el diafragma del
condensador para ver los leucocitos y contaremos los cuatro cuadros
grandes laterales de 1mm2 o sea 64 cuadros pequeños. En cada uno de
estos se incluirán las células que están dentro de éste y en las líneas
divisorias izquierda e inferior
 Los leucocitos aparecen como pequeños puntos negros refringentes
completamente redondeados. Se suman las células contadas en los 4
cuadrantes y luego se los multiplica por 50, el valor obtenido es el número
de leucocitos por milímetro cúbico de sangre.
 Por ejemplo: En los cuatro cuadrantes se conto:
56 60 58 54 TOTAL 228 X 50 = 11400 /mm3
Cuenta Diferencial de Leucocitos Relativa (%).
 Microscopía: Un técnico o analizador observa el frotis sanguíneo bajo un
microscopio. Se examina el área del portaobjetos donde las células están
distribuidas de manera uniforme.
 Identificación y conteo: Se identifican y cuentan diferentes tipos de leucocitos, como
neutrófilos, linfocitos, monocitos, eosinófilos y basófilos. Se anotan los números
totales de cada tipo de leucocito.
 Cálculo del porcentaje: Se calcula el porcentaje de cada tipo de leucocito en
relación con el número total de leucocitos contados. Esto proporciona la cuenta
diferencial relativa.
Cuenta Diferencial de Leucocitos Absoluta:
 Obtención de la concentración de leucocitos: A partir del análisis de la muestra de
sangre, se obtiene el recuento total de leucocitos por microlitro de sangre.
 Cálculo de la cuenta diferencial absoluta: Se multiplica el recuento total de
leucocitos por el porcentaje de cada tipo de leucocito obtenido en la cuenta
diferencial relativa. Esto proporciona el número absoluto de cada tipo de leucocito
en la muestra.
 Generación de resultados: Los resultados de la cuenta diferencial de leucocitos
absoluta se expresan en números absolutos por microlitro de sangre para cada tipo
de leucocito.

CÁLCULOS DE LOS RESULTADOS
Recuento de globulos blancos
VALORES DE REFERENCIA
Leucograma
5.000 - 10.000/uL
CONCLUSIONES
 Las alteraciones cualitativas y cuantitativas de los leucocitos desempeñan un papel
fundamental en la evaluación médica y el diagnóstico de diversas condiciones de
salud. A través del análisis detallado de estos cambios en la población y la función
de los leucocitos, es posible obtener información valiosa sobre la respuesta
inmunológica del organismo y la presencia de enfermedades subyacentes.
 Las alteraciones cualitativas, que involucran cambios en la forma y estructura de
las células, pueden indicar reacciones inmunológicas anormales o trastornos
hereditarios.
 las alteraciones cuantitativas, como los recuentos elevados o disminuidos de
leucocitos, pueden ser señales de infecciones, inflamación crónica, trastornos
hematológicos o reacciones alérgica
 El leucograma, que incluye tanto la cuenta diferencial de leucocitos relativa como
absoluta, desempeña un papel esencial en la evaluación de la salud inmunológica y
la detección de diversas afecciones médicas.
 Además, las alteraciones en los perfiles leucocitarios pueden indicar la presencia
de infecciones, inflamación, trastornos autoinmunes, enfermedades hematológicas
y otros problemas de salud.
RECOMENDACIONES
 Los resultados del leucograma deben compararse con los valores de referencia
establecidos para identificar cualquier desviación significativa. Esto ayudará a
identificar posibles anormalidades.
 Ante la presencia de alteraciones leucocitarias, se recomienda realizar un
seguimiento médico continuo y exhaustivo. Esto puede incluir evaluaciones
regulares de sangre para monitorizar los cambios en los recuentos y las
proporciones de los leucocitos.
 La relación de leucocitos en los cuadrantes es de 2 a 3 en cada uno de los 64
cuadritos, si existen mas es porque significa que hemos fallado. Así mismo la
distribución de leucocitos por cuadrante debe ser proporcional
 En casos de alteraciones significativas, es importante llevar a cabo investigaciones
adicionales para determinar la causa subyacente. Estas investigaciones pueden
incluir pruebas específicas para infecciones, estudios de médula ósea u otras
pruebas de diagnóstico especializadas.
DIBUJOS

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