La duplicación del ADN ocurre en la fase S del ciclo celular. El experimento de Meselson y Stahl en 1957 demostró que la duplicación es semiconservativa, donde cada hebra del ADN original actúa como molde para la síntesis de una nueva hebra complementaria. La duplicación en Escherichia coli es bidireccional e inicia en OriC, luego las helicasas separan las hebras y las topoisomerasas alivian la tensión. Las ADN polimerasas sintetizan las nuevas hebras en direcciones opuestas usando las

1. DUPLICACIÓN DEL ADN La transmisión del material genético de una generación a otra

2. DUPLICACIÓN Sucede en la fase S Se intuyó tras el descubrimiento de Watson y Crick del doble helicoide. Posibles modelos: Modelo conservativo Modelo semiconservativo Modelo dispersivo Experimento de Meselson y Stahl 1957

3. HIPÓTESIS

4. DUPLICACIÓN SEMICONSERVATIVA Meselson y Stahl Cultivaron E. colo en N15 Luego a medio con N14 Tomaron muestras de generación en generación

5. FASES DE LA DUPLICACIÓN (en Escherichia coli )

6. INICIACIÓN OriC – GATC ACONTECIMIENTOS: Helicasas (rompen p. d H.) Girasas y toposiomerasas (alivian tensión) Proteínas SSB Burbuja de replicación con dos horquillas. Comienzo: bidereccional Helicasa

7. IMAGEN DE TOPOISOMERASAS

8. LA DUPLICACIÓN ES BIDIRECCIONAL

9. FASE DE ELONGACIÓN: ASPECTOS GENERALES Dos mecanismo según hebras ENZIMAS: Primasa: ARN cebador ADN POLIMERASAS I, II, III, con actividad POLIMERASA: unión de desoxirribonucleótidos complementarios a partir de una hebra molde. EXONUCLEASA: eliminación de nucleótidos con bases mala pareadas.

10. ARN cebador ADN plimerasa no es capaz de iniciar síntesis: sólo añade nucleótidos. PRIMASA : fabrica un ooligoribonucleótido : ARN cebador A partir de éste, inicia la actividad la ADN polimerasa

11. IMPORTANTÍSIMO LA ADN POLIMERASA Recorre la hebra que va a duplicar en sentido 3’ -> 5’ Fabrica la nueva hebra en sentido 5’ -> 3’ por tanto (ya que las dos hebras del ADN son antiparalelas)

12. ¡LAS DOS HEBRAS NUEVAS NO PODRÁN SINTETIZARSE DE IGUAL MANERA! Por lo tanto:

13. CONCEPTOS : Hebra conductora: Hebra retardada: fragmentos de Okazaki.

16. REPLICACIÓN EN EUCARIOTAS (muy parecida a la procariotas)

17. ALGUNAS DIFERENCIAS Se forman burbujas de replicación, “replicones” , en varios puntos. (en algunas especies hasta 6000) Existen cinco tipos de ADN polimerasas en vez de tres. (una de ellas en mitocondrias( Se necesita duplicación de histonas. Nucleosomas: Nuevos: hebra retardada Antiguos: hebra conductora

18. EL PROBLEMA DE LOS TELÓMEROS