el microscopio, breve historia, clasificacion, partes, uso

1. EL
MICROSCOPIO
Laura MelanieHoffmann Vaca
REGISTRO: 53376
MATERIA: BIOQUIMICA
DOCENTE:RICHARD ALAN CALAWAY COHEN

2. INTRODUCCIÓN
El microscopio es una de las herramientas básicas en el estudio de la biología.
Mediante un conjunto de lentes, el microscopio aumenta el tamaño de los objetos bajo
estudio, que son demasiado pequeños para ser estudiados a simple vista.
Dos principios están involucrados en el uso del microscopio:
 MAGNIFICACIÓN: la capacidad de aumentar el tamaño de una imagen
 RESOLUCION: la capacidad de producir una imagen nítida, o bien la capacidaddel
instrumento para dar imágenes bien definidas de puntos situados muy cerca uno
del otro en el objeto.
Existen distintos tipos de microscopios, cada uno con un propósito particular.

3. HISTORIA DE LA MICROSCOPIA
En las primeras décadas del siglo XVII se iniciaron experiencias con lentes, así llamadas por
tener forma de lentejas a fin de lograr el mayor aumento posible. Para ello se basaron en
otro instrumento con lentes que obtuvo gran éxito, el telescopio, usado por primera vez
con fines astronómicos por Galileo, en 1609. Antes de esta fecha, los seres vivientes más
pequeños conocidos eran insectos diminutos. Naturalmente, se daba por sentado que no
existía organismo alguno más pequeño.
Los instrumentos para aumentar fueron llamados microscopios, la palabra griega significa
“para ver lo pequeño”.
Así, los naturalistas podían describir en detalle los pequeños organismos, cosa de otro
modo imposible, y los anatomistas podían descubrir estructuras hasta entonces invisibles.
Existían dos tipos de microscopios: el sencillo y el compuesto; el sencillo no era más que
una lente montada, el compuesto estaba formadopor una combinación de lentes; no se
sabe con seguridad quien fue el prionero en inventar el microscopio. Entre ellos tenemos a
Zacharias Jansen y Anton Van Leewenhoek en Holanda y Galileo Galilei en Italia
microsopio de Leewenhoek
microscopio de Zacarias Jansen
microscopio de Galileo Galilei

4. Luego de la invención de Jansen, en pocos años hubo un gran número de
diseñadores de microscopios en Europa. El primer avance técnico del microscopio luego
de Jansen fue el paso de un sistema de 2 lentes a uno de 3, este sistema es la
configuración estándar que se mantiene en la actualidad.
ACONTECIMIENTOS MÁS SOBRESALIENTES EN LA HISTORIA DE LA MICROSCOPÍA
 El anatomista holandés Reigner de Graaf realizó estudios similares en animales
describiendo ciertos elementos del ovario que desde entonces se conocen con el
nombre de folículos de Graaf.
 Marcello Malpighi fue uno de los microscopistas más grandes de la historia de
acuerdo a su espectacular descubrimiento. Sus primeros estudios los realizó con
pulmones de rana, pudiendo observar en ellos una compleja red de vasos
sanguíneos, demasiado pequeños para ser vistos por separado y muy
anastomosados, siguió el recorrido de los vasos hasta que se unían con otros
mayores, comprobó que estos últimos eran venas en una dirección y arterias en
dirección opuesta. Por consiguiente, las arterias y las venas se hallaban unidos
mediante una red de vasos llamados capilares.
 Otro descubrimiento importante en la época fue el del científico inglés Robert
Hooke. La observación más importante fue la de un delgado trozo de corcho.
Hooke observó que estaba constituido por una fina trama de pequeñas celdillas
rectangulares en las cuales se encontraba aire, que él llamó “células”, un término
habitual para designar pequeñas habitaciones en los monasterios.
 El comerciante holandés, Anton van Leeuwenhoek usaba lentes simples, que por su
reducido tamaño podían obtenerse de pequeños trozos de cristal perfecto.
Puliendo cuidadosamente dichos fragmentos, logró aumentar un objeto hasta 270
veces sin perjuicio de la nitidez. Tenía 419 lentes alguna de las cuales eran de cristal
de roca y hasta de diamante, en algunos casos no eran mayores que el tamaño de
un alfiler, por lo que sus microscopios tenían un tamaño diminuto comparados con
otros de la misma época. Con esas lentes logró describir los glóbulos rojos de la
sangre y los capilares con mayor detalle que los verdaderos descubridores:
Swammerdam y Malpighi. Pero lo más sensacional de todo ello fue su
descubrimiento de pequeños organismos invisibles a simple vista. No cabe duda
que fue el primero en ver lo que más tarde se llamarían bacterias y “animalículos”,
como los denominó entonces, conocidos hoy como protozoarios que en griego
significa pequeños animales.

5.  El microscopista danés Otto Muller consiguió en 1773 distinguir lo suficientemente
bien a aquellos pequeños seres para clasificarlos en dos tipos: bacilos que significa
“pequeños vástagos” y espirilos por su forma espiral.
 En 1820 Joseph Jackson Lister, diseña un microscopio acromáticocapazde elminar
los anillos de color que limitaban la claridad de la imagen, que hasta entonces
impedia una claridaden los detalles. Gracias a ello Lister descubre que los globulos
rojos eran bicóncavos.
El microscopio acromático constituyo un gran avance, iniciando una serie de
perfeccionamientos que dieron como resultado el moderno microscopio óptico.
microscopiode Lister.
Desde 1660 hasta la actualidad el microscopio óptico ha sido el pilar fundamental en el
conocimiento de lo invisible. Aunque su poder de resolución aumentó a través del tiempo
(con la mejora en la calidad de las lentes) al igual que el poder de magnificación, su factor
limitante fue la longitud de onda de la luz. En 1930 el mundo submicroscópico se amplió
con la aparición del microscopioelectrónico cuya ventaja principal con respecto al
microscopio ópticoes un aumento de 1000 veces en la magnificación del material
observado acompañado de una mayor capacidadde resolución generando una mejor
definición y una ampliación del mundo microscópico. ADN, virus y pequeñas organelas
fueron observadas por primera vez con este microscopio.

6. TIPOS DE MICROSCOPIOS
Existen diversas clases de microscopios, según la conformación, la naturaleza de los
sistemas de luz y otros elementos utilizados para obtener las imágenes.
El microscopio ópticopuede ser monocular, binocular, trinocular (para microfotografía). En
los microscopios binoculares la observación se hace con los dos ojos y esto permite una
observación más cómoda y se percibe una mayor nitidez de los detalles en la imagen.
Dentro de los tipos de microscopios se describen:
Clasificación de los microscopios según la estructura
 Microscopio vertical: Es el microscopio convencional, perfeccionadoa partir de
los modelos antiguos, que posee la fuente de luz ubicada en la base, por debajo
de la platina. Es el microscopio de uso más común.
 Microscopio invertido: La estructura del microscopio es invertida en comparación
al microscopio convencional. La fuente de luz está ubicada por encima de la
platina y el principio de funcionamiento y formación de la imagen es el mismo que
el del microscopio tradicional. Utilizadoprincipalmente para cultivos celulares
(células vivas) sin una preparación previa y para monitorear actividades
(crecimiento, comportamiento).
 Microscopio estereoscópico: Este tipo de microscopio proporciona una imagen
estereoscópica, en tres dimensiones (3D) del espécimen. Se fundamenta en la
visión binocular convencional, en la que los dos ojos observan el espécimen con
ángulos levemente distintos. Se utiliza para observar especímenes de gran tamaño,
sin corte o preparación previa puesto que emplea luz incidente y no funciona por
trans-iluminación. Es ideal para realizar microdiseccion.
 Microscopio quirúrgico: Es un microscopio que se emplea en microcirugía.
Proporciona un campo muy bien iluminado y un aumento de las estructuras
anatómicas, facilitándoleal cirujano una mayor visibilidad de los tejidos sanos y
patológicos que serán manipulados más cuidadosamente y con menores
posibilidades de lesión. Se utiliza principalmente en intervenciones quirúrgicas en
las que se amerite una minuciosa disección, como por ejemplo del cráneo y
cerebro o del globo ocular.

7. Clasificación de los microscopios según la naturaleza de la luz
Ciertos especímenes, principalmente las células vivas o muestras no coloreadas, al ser
observados en el microscopio común de campo claro, muestran un muy pobre contraste
de sus estructuras y no aportan datos relevantes, a pesar del poder de resolución de los
objetivos empleados. Para ello se han creado microscopios con ciertas particularidades
que permiten la observación de ese tipo de especímenes con un incremento muy
satisfactorio del contraste. Entre ellos se citan:
 Microscopio de campo oscuro. El microscopio en campo
oscuro utiliza una luz muy intensa en forma de un cono hueco
concentrado sobre el espécimen. El campo de visión del
objetivo se encuentra en la zona hueca del cono de luz y sólo
recoge la luz que se refleja en el objeto. Por ello las porciones
claras del espécimen aparecen como un fondo oscuro y los
objetos minúsculos que se están analizando aparecen como
una luz brillante sobre el fondo. Esta forma de iluminación se
utiliza para analizar elementos biológicos transparentes y sin
manchas, invisibles con iluminación normal.
 Microscopio de luz ultravioleta. El método sirve para
detectar ácidos nucleicos, proteínas que contienen
determinados aminoácidos. Mediante longitudes de ondas
específicas para la iluminación se puede obtener mediciones
espectrofotométricas para cuntificar el DNA y el RNA de cada
célula.El microscopio de luz ultravioleta utiliza el rango
ultravioleta del espectro luminoso en lugar del rango visible,
bien para aumentar la resolución con una longitud de onda
menor o para mejorar el detalle absorbiendo selectivamente
distintas longitudes de onda de la banda ultravioleta.

8.  Microscopio de fluorescencia. una sustancia natural en las
células o un colorante fluorescente aplicado al corte es
estimulado por un haz de luz, emitiendo parte de la energía
absorbida como rayas luminosas: esto se conoce como
fluorescencia.
Permite alcanzar altos niveles de sensibilidad y resolución
microscópica, permitiendouna apreciación diferentede la
información que se puede obtener de los especímenes y que
generalmente pasa desapercibida.
 Microscopio de polarización. El polarizador es un dispositivo
que solo deja pasar la luz que vibra en un plano determinado
denominado eje de polarizaciónEste tipo de microscopiose usa
para poder identificar mejor sustancias cristalinas o fibrosas
(como el citoesqueleto), sustancia amiloide, asbesto, colágeno,
cristales de uratos, queratina, sílice, y otras de origen exógeno.
 Microscopio de contraste de fases. se usa principalmente para
aumentar el contraste entre las partes claras y oscuras de las
células sin colorear. Es ideal para especimenes delgados, o
células aisladas. El microscopiode fase ilumina el espécimen con
un cono hueco de luz, como en el microscopio en campo
oscuroEste tipo de microscopio es muy útil a la hora de examinar
tejidos vivos, por lo que se utiliza con frecuencia en biología y
medicina.

10.  Microscopio confocal: obtiene imágenes
tridimensionales de la célula. Se utilizan dos diafragmas
confocales capaces de enfocar la iluminación en un
único punto de la muestra. Se utiliza un láser como
fuente luminosa, y con él se va barriendo la muestra por
todo su volumen, plano a plano, creando muchas
imágenes bidimensionales que un ordenador interpreta,
generando finalmente una imagen tridimensional del
objeto. Para observar preparaciones con este
microscopio es necesario teñirlas con sustancias
fluorescentes o marcarlas con sustancias conjugadas
con fluorocromos, como los anticuerpos.
MICROSCOPIOS ELECTRONICOS
El principio de la microscopía electrónica es muy similar al de la microscopia de luz y se han
desarrollado dos principales técnicas (14):
Microscopía electrónica de transmisión: Se observa a
través del espécimen (trans- iluminación). El espécimen se
corta en láminas ultrafinas (en el orden de nanómetros)
que se colocan en una rejilla de cobre, la cual es
bombardeada con un haz de electrones enfocado. Una
silueta del espécimen se proyecta en una pantalla
fluorescente o placa fotográfica situada por debajo del
mismo. La resolución puede ser de 0,2nm.
Microscopía electrónica de barrido: Se observa la
superficie de un espécimen sólido (epi-iluminación). Se
puede lograr una resolución de 10nm y un aumento
hasta de 20.000x. Se producen imágenes muy
interesantes en 3D (tridimensionales) gracias a una mayor
profundidad de campo. Se escanea la superficiedel
espécimen con un haz de electrones (primarios) y los
electrones que rebotan (secundarios) son recogidos por
un detector. La señal se observa en un monitor de
televisión. Los átomos del espécimen producen rayos X
que también son detectados.

11. PARTES DE UN MICROSCOPIO
Sistema óptico
 Ocular: Lente situada cerca del ojo del observador. Amplía la imagen del objetivo.
 Objetivo: Lente situada cerca de la preparación. Amplía la imagen de ésta.
 Condensador: Lente que concentra los rayos luminosos sobre la preparación.
 Diafragma: Regula la cantidad de luz que entra en el condensador.
 Foco: Dirige los rayos luminosos hacia el condensador.
Sistema mecánico
 Soporte: Mantiene la parte óptica. Tiene dos partes: el pie o base y el brazo.
 Platina: Lugar donde se deposita la preparación.
 Cabezal: Contiene los sistemas de lentes oculares. Puede ser monocular, binocular,
entre otros.
 Revólver: Contiene los sistemas de lentes objetivos. Permite, al girar, cambiar los
objetivos.
 Tornillos de enfoque: Macrométrico que aproxima el enfoque y micrométrico que
consigue el enfoque correcto.

12. Manejo del microscopio óptico
Colocar el objetivo de menor aumento en posición de empleo y bajar la platina
completamente. Si el microscopiose recogió correctamente en el uso anterior, ya debería
estar en esas condiciones.
Colocar la preparación sobre la platina sujetándola con las pinzas metálicas.
Comenzar la observación con el objetivo de 4x (ya está en posición) o colocar el de 10
aumentos (10x) si la preparación es de bacterias.
Para realizar el enfoque:
Acercar al máximo la lente del objetivo a la preparación, empleando el tornillo
macrométrico. Esto debe hacerse mirando directamente y no a través del ocular, ya que se
corre el riesgo de incrustar el objetivo en la preparación pudiéndose dañar alguno de ellos
o ambos.
Mirando, ahora sí, a través de los oculares, ir separando lentamente el objetivo de la
preparación con el macrométricoy, cuando se observe algo nítida la muestra, girar el
micrométrico hasta obtener un enfoque fino.
Pasar al siguiente objetivo. La imagen debería estar ya casi enfocada y suele ser suficiente
con mover un poco el micrométrico para lograr el enfoque fino. Si al cambiar de objetivo
se perdió por completo la imagen, es preferible volver a enfocar con el objetivo anterior y
repetir la operación desde el paso 3. El objetivo de 40x enfoca a muy poca distancia de la
preparación y por ello es fácil que ocurran dos tipos de percances: incrustarlo en la
preparación si se descuidan las precauciones anteriores y mancharlo con aceite de
inmersión si se observa una preparación que ya se enfocó con el objetivo de inmersión.
Empleo del objetivo de inmersión:
Bajar totalmente la platina.
Subir totalmente el condensador para ver claramente el círculo de luz que nos indica la
zona que se va a visualizar y donde habrá que echar el aceite.
Girar el revólver hacia el objetivo de inmersión dejándoloa medio camino entre éste y el
de x40.
Colocar una gota mínima de aceite de inmersión sobre el círculo de luz.

13. Terminar de girar suavemente el revólver hasta la posición del objetivo de inmersión.
Mirando directamente al objetivo, subir la platina lentamente hasta que la lente toca la
gota de aceite. En ese momento se nota como si la gota ascendiera y se adosara a la lente.
Enfocar cuidadosamente con el micrométrico. La distancia de trabajo entre el objetivo de
inmersión y la preparación es mínima, aun menor que con el de 40x por lo que el riesgo de
accidente es muy grande.
Una vez se haya puesto aceite de inmersión sobre la preparación, ya no se puede volver a
usar el objetivo 40x sobre esa zona, pues se mancharía de aceite. Por tanto, si desea
enfocar otro campo, hay que bajar la platina y repetir la operación desde el paso 3.
Una vez finalizada la observación de la preparación se baja la platina y se coloca el objetivo
de menor aumento girando el revólver. En este momento ya se puede retirar la
preparación de la platina. Nunca se debe retirar con el objetivo de inmersión en posición
de observación.
Limpiar el objetivo de inmersión con cuidado empleando un papel especial para óptica.
Comprobar también que el objetivo 40x está perfectamente limpio