1. Principios de Catálisis Enzimática
y Cinética Enzimática.
Dra. Valeska Ormazabal
Depto. de Ciencias Básicas
Facultad de Medicina
Medicina 2012
2. ¿ De dónde viene la Energía necesaria para
producir un descenso de la energía libre de
activación de reacciones específicas?
1. Reordeamiento de los enlaces covalentes de
las reacciones catalizadas por enzimas.
• Activación del sustrato por
formación de un enlace covalente
transitorio.
• Transferencia de un grupo del
sustrato a la enzima en forma
transitoria.
2. Formación de interacciones no covalentes
enzima-sustrato.
3.
4.
5. ¿Cómo las enzimas usan la energía de la unión no
covalente?
• 1. La energía de fijación proporciona especificidad y catálisis.
• 2. Las interacciones débiles están optimizadas en el estado de
transición.
22. Curva de progreso de una reacción enzimática en el
tiempo
Varias Causas pueden contribuir a que se
produzca esta disminución:
1. El producto puede inhibir.
2. Agotamiento del sustrato.
3. La reacción inversa se hace más
importante.
4. Disminuye la cantidad de P formado
por unidad de Tiempo.
5. Velocidad de formación de producto
y de la reacción inversa es igual.
31. Métodos de linealización para determinación
parámetros cinéticos
Método Eje Y Eje X Intercepto Intercepto Pendiente
Eje Y Eje x
Lineweaver- 1/v 1/s 1/V -1/Km K/V
Burke
Eadie- v v/s V V/Km -Km
Hofstee
32. Kcat: Describe la velocidad limitante de cualquier reacción
enzimática.
Kcat= Vmax/[Et]
33.
34. Cálculo de Actividad
Enzimática
• La velocidad de reacción catalizada por 0,1ml
de una dilución 1:100 de Fosfatasa Alcalina es
0,3umoles / min. de producto. ¿Cuál es su
actividad enzimática?
• 0,1ml-------- 0,3umoles producto / min.
1,0ml------------3,0umoles producto / min.
dil 1:100-------------300umoles producto / min.
Respuesta: 300UI/ml