1. ECUACION DE MICHAELIS-MENTEN
Introducción:
• 1882.- Se introdujo el concepto de Enzima-Sustrato como
intermediario en el proceso de catálisis química.
• Finales del S. XIX.- Empezaron a realizarse estudios sistemáticos
del efecto de la concentración inicial del sustrato sobre la actividad
enzimática.
• 1903.- J. Braun , V Henry .- E+S ES en una etapa inicial de la
rxn.
• 1913-Leonord Michaelis y Maud Menten propusieron la ecuación
de velocidad que explica el comportamiento cinético de las
enzimas.
• G.E. Brigs , J.B.S.Haldane .- Ampliaron posteriormente la teoría.
2. Leonord Michaelis
(16 de enero de 1875 - 8 de
octubre de 1949)
Maud Menten
(Port Lambton, Ontario, 20 de
marzo de 1879 - 26 de
julio de 1960)
Los primeros experimentos de cinética enzimática, realizados bajo condiciones controladas de pH, lo
realizaron Michaelis y Menten en 1913, (una vez que en 1909 Sorensen introdujera el concepto de
pH).
3. Postulados
Este modelo solo aplica cuando:
1.- En condiciones de estado estacionario , ósea la concentración de
[ES] es constante.
2.- Concentración del Sustrato es mayor que la concentración de la
enzima de tal manera que el sustrato unido a la enzima es pequeña.
↓*E+ + ↑*S+ ↔ *ES+ (Máxima actividad)
3.- Velocidad máx. [ES]., coincide con el momento de saturación.
4. Secuencia de una reacción
k1 k3
[E] + [S] ↔[ES] [E] + P
k2
E = Concentración de la Enzima libre
S = Concentración del sustrato
ES = complejo Enzima-Sustrato.
P = Producto (Sustrato convertido en producto)
k1, k2 y k3 = constantes cinéticas .
E+S proceso es reversible (formación) . E+P proceso irreversible( disociar)
Etapa rápida
Etapa lenta
5. Donde :
V1 = k1.[E] [S] (Formación)
V2 = k2.[ES] (disociación)
V3 = k3 .[ES] (velocidad de la Rxn)
Adopta la Hipótesis del
estado estacionario
La [ES] es pequeña y cte. a lo
largo de la reacción.
(Postulado nº1)
Por lo tanto la velocidad de formación del complejo ES (V1) es igual al de
su disociación (V2 +V3).
0=V1 –(V2+V3)
V1=V2+V3
REEMPLAZANDO
k1.[E].[S]= k2.[ES] +k3 .[ES]……(1)
6. Luego decimos que la enzima libre [E] + la enzima unida al sustrato [ES] nos da la
concentración total de la enzima [E total] y despejamos:
[E total]= [E] + [ES]
[E]=[E total] - *ES+ ….(2)
Luego se reemplaza (2) en (1)
k1.[E].[S]= k2.[ES] +k3 .[ES]
k1.([E total] - [ES] ).[S]= k2.[ES] +k3 .[ES]
(k1. [E total]. [S]) –( k1.[ES] .[S])= k2.[ES] +k3 .[ES]
k1. [E total]. [S] =k2.[ES] +k3 .[ES]+ ( k1.[ES] .[S]), factorizando (ES)
k1. [E total]. [S]= [ES].(k2+k3+(k1.[S]))
Despejando [ES]
Km o constante de
Michaelis-Menten
7. Como la [ES] es cte, la velocidad de formacion de los productos es
constante, entonces se dice al inicio :
V3 = k3 .[ES] (velocidad de la Rxn que forma el Producto)
Aplicando la condición de que la (S) es muy alta , entonces la
velocidad será máxima (postulado Nº2) y Km tiene un valor
despreciable con respecto a la (S) que tiende a 0
Vmax = v km = 0