DETERMINACIÓN CUALITATIVA DE ALGUNOS COMPONENTES DEL PROTOPLASMA CELULAR

1. DETERMINACIÓN CUALITATIVA
ALGUNOS COMPONENTES DEL
PROTOPLASMA CELULAR
DE
Montes A.
Universidad de Cartagena, Facultad de
Ciencias Exactas y Naturales
Programa: Biología
RESUMEN
Para
la
identificación
de
los
componentes del protoplasma celular,
de manera cualitativa es necesaria la
utilización de reactivos que nos
permiten determinar la presencia y/o
cantidad
del
componente
protoplasmático en estudio.
Ciertos conceptos de solución fueron
imprescindibles al momento de
desarrollar la práctica, ejemplo de esto
fue
en
la
determinación
de
carbohidratos atreves del reactivo de
Benedict, los lípidos a partir del Sudan
III como compuesto liposoluble, las
proteínas a través de unas mezclas de
soluciones que permitían precipitado y
solubilización de este y finalmente la
reacción de Lieberman permitió
establecer cualitativamente pruebas al
colesterol.
Palabras
clave:
Carbohidratos,
Proteínas, Colesterol, Reactivos, Lípidos.
ABSTRACT
To identify components of cellular
protoplasm, qualitatively is necessary
to use reagents that enable us to
determine the presence and / or
amount of the component under
consideration protoplasmic.
Certain concepts of solution were
essential when developing practice of
this example was in the determination
of carbohydrate dare Benedict is
reagent, lipids from Sudan III as fatsoluble compound, protein through
mixtures of solutions that allow and
solubilization of the precipitate, and
then the reaction allowed to establish
qualitatively Lieberman cholesterol
tests.
Keywords: Carbohydrates,
Cholesterol, Reagents, Lipids.
Protein,
INTRODUCCIÓN
Durante este laboratorio se realizaron
identificaciones de los compuestos
protoplasmáticos que componen a la
célula. Estos compuestos están
formados por biomolecular, que son
compuestos de carbono que poseen
una variedad de grupos funcionales y se
encuentran
jerárquicamente
organizados en la célula. Estas pueden
establecer unidades monomericas,
como es el caso de los monosacáridos y
aminoácidos, que al polimerizarse
permiten
la
formación
de
macromoléculas
como
son
los
polisacáridos, almidón y glucógeno.
Para identificar estas estructuras o los
componentes protoplasmáticos se

2. utilizaron dos reactivos, como fueron el
de Benedict, que permite identificar los
azucares reductores de algunos
monosacáridos y disacáridos, en el que
se presenta una reacción oxidativa
donde el oxido cúprico se reduce a
oxido cuproso, lo que provoca la
coloración rojo ladrillo de la solución, y
Sudan III que es un compuesto
liposoluble que demuestra la presencia
de triglicéridos y algunos lípidos. En el
caso de la identificación de las
proteínas, se utiliza una solución de
sulfato de cobre al 0,5 % y una de
hidróxido de sodio al 10 %, que dan
como resultado una mezcla color
violeta, que determina la presencia de
proteínas. Por otro lado, para
determinar la presencia de colesterol,
se llevó a cabo la reacción de
Lieberman Burchard, en la cual es
positiva la presencia de colesterol, si la
coloración se torna café pálida. Esta
práctica ayudara a reconocer e
identificar algunas de las macro
moléculas que componen a la
membrana plasmática de las células
animales, adquiriendo el conocimiento
de sus funciones para la conservación
de la estructura y funcionamiento de
las células que nos compete en el
estudio de las organelas celulares.
MATERIALES Y MÉTODOS
Para determinar los componentes del
protoplasma celular, se realizaron
métodos cualitativos que ayudarán a la
identificación de estos durante la
práctica. Se utilizaron tubos de
ensayos, pipetas, goteros, gradillas para
tubos de ensayos, mechero de alcohol,
pinzas, reactivos de Benedict, solución
de glucosa al 3 %, fruta madura,
almidón, macerado de pan, lugol,
solución de clara de huevo, solución de
gelatina sin sabor, hidróxido de sodio al
10 %, sulfato de cobre al 0,5 %, aceite
vegetal, grasa animal, Sudan III, agua,
cloroformo, anhídrido, acético y acido
sulfúrico concentrado.
Los procedimientos se realizaron de
forma distinta cada uno, con la
finalidad de lograr obtener los
resultados
que
permitieran
el
reconocimiento de los componentes
del protoplasma celular.
1. DETERMINACIÓN
DE
CARBOHIDRATOS.
Determinación de los carbohidratos y
más específicamente monosacáridos,
en un tubo de ensayos se vertieron 5
ml del reactivo de Benedict y luego se
calentó hasta ebullición, se hicieron las
respectivas descripciones de lo
observado. Luego se añadió al mismo
tubo de ensayo 1 ml de una solución de
glucosa y se calentó hasta llegar a su
punto de ebullición y se anotaron las
respectivas conclusiones.
En otro tubo de ensayo, se vertieron
también 5 ml del reactivo de Benedict,
se le añadió un macerado de fruta a la
solución y se calentó hasta ebullición.
Luego se realizaron las respectivas
descripciones de lo observado para la
IDENTIFICACIÓN DE POLISACÁRIDOS
Se realizó una suspensión acuosa de 2
ml de almidón y se vertió en un tubo de
ensayo, se le agrego a esta solución dos

3. gotas de lugol. Luego se calentó por dos
minutos hasta ebullición, se dejo en
reposo para que se enfriara y se
describieron las observaciones. Como
otra muestra para la identificación de
polisacáridos, se depositaron dos gotas
de lugol en una solución acuosa de
macerado de pan, luego se describieron
los resultados.
PROTEÍNAS
Para identificar las proteínas, se diluyó
la clara de un huevo en 50 ml de agua.
Luego de extrajo 1 ml de esta solución,
se añadieron dos gotas de sulfato de
cobre al 0.5 % y 1 ml de hidróxido de
sodio al 10 %, finalmente se sacaron
conclusiones de los resultados. En otro
tubo de ensayo se colocaron 2 ml de
gelatina sin sabor y se procedió a
agregar 2 gotas de sulfato de cobre y 1
ml de hidróxido de sodio, como en el
caso anterior y se agitó, luego se
sacaron conclusiones.
LÍPIDOS
Para observar los lípidos, se coloco en
tubo de ensayo 3 ml de agua, se agregó
una pisca del reactivo Sudan III, se agitó
y se hicieron descripciones de lo
observado. En el mismo tubo de
ensayo, se adiciono 1 ml de aceite
vegetal, se agitó y se dejó en reposo
por dos minutos. Al pasar este tiempo
se
observaron
resultados
que
permitieron sacar las respectivas
descripciones. En otro tubo de ensayo
se adicionaron 2 ml de grasa animal, se
agregó una pizca de
Sudan III, se agitó y se sacaron
descripciones de los resultados.
REACCIÓN DE LIEBERMAN BURCHARD
PARA COLESTEROL
Para observar colesterol, se diluyó una
parte de la yema de huevo en 10 ml de
cloroformo. Se tomó 1 ml de esta
solución colocándola en tubo de ensayo
limpio y seco. Luego se adicionó un 1
ml anhídrido acético, además de esto
se adicionaron tres gotas de acido
sulfúrico concentrado, se agito
suavemente y al observar los
resultados
se
realizaron
las
descripciones de estos.
RESULTADOS
Durante la práctica fueron observados
algunos componentes del protoplasma
celular, con la finalidad de distinguirlos
y de aprender la forma en que estos
pueden ser identificados. La forma en
cómo se realizó cada procedimiento fue
de manera distinta con los diferentes
materiales utilizados, dependiendo de
cual fuera el componente a identificar,
pero todos con la misma finalidad.
DETERMINACIÓN
DE
CARBOHIDRATOS.
En
la
identificación
de
los
monosacáridos, el resultado que se
obtuvo en la solución con la sola
presencia del reactivo de Benedict
calentado hasta ebullición, fue que no
hubo ningún tipo de cambio en la
coloración natural de esta solución.
Al agregarle glucosa y calentarla hasta
ebullición se notó un cambio en la
coloración de un tono rojo ladrillo, lo
que indico la concentración de glucosa.
En otro tubo de ensayo al agregarle la
misma cantidad del reactivo de

4. Benedict y un macerado de fruta,
donde el azúcar manejado es la
fructosa y al calentarse y llegar a su
punto de ebullición se observo la
misma coloración rojo ladrillo. Estas
reacciones que provocaron esta
coloración, son unas reacciones
oxidativas en las cuales en la
composición del reactivo de Benedict
está la presencia de oxido cúprico, que
al calentarse hasta ebullición en
presencia de un azúcar, se reduce el
oxido cúprico al oxido cuproso, lo que
provoca el precipitado de color rojo
ladrillo (Asimov I.1966), que fue
observado en la práctica. (Ver figura)
POLISACÁRIDOS.
En la observación de polisacáridos los
resultados obtenidos con la presencia
de una suspensión acuosa de almidón
de 2 ml y 2 gotas de lugol en la
solución, se presento una coloración
oscura, que luego al calentarse hasta
ebullición, tomo una coloración naranja
y al dejarse enfriar, la solución volvió a
coloración oscura inicial. En otra
solución al depositarse dos gotas de
lugol en macerado de pan, se tornó una
coloración blanca, que al calentarse
hasta ebullición, tomó un color azul
violáceo.
El lugol posee una composición de yodo
molecular y yodo potásico en agua
destilada en la cual al utilizar esta
disolución en prueba de yodo, permite
determinar polisacáridos como los
almidones, es decir, que puede
reaccionar solo con estos. Debido a
esto, el lugol no puede reaccionar con
azucares simples. En presencia de
almidón, la amilopectina que es un
componente de cadena ramificada de
este forma hélices mucho más cortas y
las moléculas de yodo son incapaces de
unirse, lo que provoca una coloración
naranja, como lo logramos observar.
Con el macerado de pan, una solución
de yodo, es decir, diyodo disuelto en
una solución acuosa en yoduro de
potasio, reacciona con almidón
produciendo un color azul violáceo,

5. PROTEÍNAS.
En la identificación de proteínas, al
extraer 1ml de la solución de clara de
huevo en 50ml de agua y añadirle dos
gotas de sulfato de cobre al 0.5 % y un
1 ml de hidróxido de sodio al 10 %, se
obtuvo como resultado una coloración
violeta en solución, lo que identifica la
presencia de proteínas en otro tubo de
ensayo, al colocar 2ml de gelatina con
dos gotas de sulfato de cobre y 1ml de
hidróxido de sodio, al mismo
porcentaje que la solución anterior, se
logró
observar
una
coloración
igualmente violeta, como en el caso
anterior. Debido a las reacciones que se
realizaron, observamos que al agregar
el reactivo de sulfato de cobre más la
clara de huevo y por otra parte con
gelatina, la muestra precipitó una
coloración violeta, lo que determinó
presencia de proteínas. El resultado de
esto, es una reacción que se denomina
reacción de Biuret (Robertis – Hib,
1998), (Asimov I. 1966)
LÍPIDOS
En la observación de lípidos, al agregar
en 3 ml de agua Sudan III, la mezcla no
se disolvió, es decir, que se presentó
una mezcla heterogénea en la que el
Sudan III cambió a un color rojizo y se
ubicó en la parte superior de la solución
y el agua se mantuvo en la parte
inferior de la solución. En el mismo
tubo, al adicionar aceite vegetal se
logró observar una mezcla en la que el
reactivo se disolvió con el aceite,
tornándose una coloración rojiza en la
parte superior de la solución y el agua
quedo separada de estos ubicándose
en la parte inferior de la solución. En
otro tubo de ensayo al agregar Sudan III
con grasa animal, al instante la solución
tomó una coloración rojiza en la que la
grasa y el reactivo se disolvieron por
completo.
El reactivo Sudan III tiene la capacidad
de disolverse en grasas y no en otros
solutos como el agua (Cediel, 2009).
Por esto, al compararlo con los
resultados anteriores, se identificó que
en la primera se obtuvo una mezcla
heterogénea y en la segunda también y
en ésta última se obtuvo una mezcla
homogénea.

6. DETERMINACIÓN DEL COLESTEROL.
En la determinación del colesterol, se
observaron cambios de coloración,
como en la yema del huevo que se
tornó de color café oscuro. Esta
coloración determinó la presencia del
colesterol. Esta es una prueba que se
realiza para los esteroles insaturados,
en particular el colesterol, en la cual se
desarrolla un color azul verdoso cuando
esas sustancias se añaden el anhídrido
acético y el ácido sulfúrico en
cloroformo (Cediel, 2009). En el caso de
nuestro resultado, se presentó una
coloración café pálida, debido a que
hubo una mayor presencia de
ergosterol y una menor porción de
colesterol en su contenido.
presencia de algunos componentes que
se encuentran en el protoplasma
celular. Entre los cuales se encuentran
los carbohidratos, proteínas, lípidos y
colesterol,
los
cuales
fueron
identificados durante el desarrollo de la
práctica. Esto se logró por la presencia
de reactivos que permitieron la
identificación de estos compuestos
celulares, como por ejemplo el de
Benedict que nos sirvió para la
identificación de monosacáridos y
polisacáridos;
utilizamos
unos
compuestos químicos que permitieron
una disolución la cual permitió
identificar las proteínas; otro reactivo
utilizado fue el Sudan III, gracias a éste
identificamos los lípidos, debido a su
gran afinidad con éstos.
BIBLIOGRAFÍA
Cediel J.F. 2009. Manual de Histología.
Editorial Universidad del Rosario,
Bogotá D.C., 362pp
Robertis_Hib (1998): FUNDAMENTOS
DE BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR
EL ATENEO. Buenos Aires. 442pp
CONCLUSIONES
Mediante esta práctica se lograron
identificar de manera cualitativa la
Asimov I. 1966. Breve historia de la
Biología. Editorial EUDEBA, Argentina,
226pp