Este documento describe la preparación del medio de cultivo Agar MacConkey. Explica que el Agar MacConkey es un medio selectivo diferencial utilizado para aislar y diferenciar bacilos gram negativos fermentadores y no fermentadores de lactosa. Detalla los pasos para preparar el medio, incluyendo suspender los ingredientes en agua destilada, calentar hasta disolver completamente, esterilizar en autoclave, y verter en placas Petri para solidificar. El grupo estudiantil preparó 4 placas de Agar MacConkey siguiendo estos

1. MICROBIOLOGIA GENERAL

2. MICROBIOLOGIA GENERAL
TITULO DE LA PRACTICA:
MEDIOS DE CULTIVO
I. INTRODUCCIÓN
En el presente informe se desarrollará la descripción de la práctica de preparación de medios
de cultivo, que se desarrolló el 24 de Mayo del presente año en el laboratorio de
microbiología, donde al inicio de la práctica dirigida se nos asignó uno de los cuatro agares
disponibles a cada grupo, tales como: Agar Salado nutritivo, Agar caldo cultivo, Agar citrato
según Simmons y Agar Maconkey, de tales se nos encargó desarrollar el ultimo mencionado,
con la finalidad de que cada grupo con sus respectivos integrantes aprenda a desarrollar las
técnicas y los pasos recomendados para preparar medios de cultivo, para lo cual fue
necesario revisar libros, guías, videos basados en el tema de práctica.
Los medios de cultivo microbiano son una mezcla de sustancias que promueve y sustenta el
crecimiento y la diferenciación de los microorganismos. Los medios de cultivo contienen
nutrientes, fuentes de energía, factores promotores del crecimiento, minerales, metales, sales
amortiguadoras y gelificantes (para los medios sólidos). Las sofisticadas formulaciones de
nuestros medios de cultivo garantizan resultados precisos, reproducibles y repetibles de los
análisis microbiológicos. Los medios de cultivo siguen siendo el producto de referencia en
la industria farmacéutica y de alimentos y bebidas para enumerar y detectar
microorganismos.
Los medios de cultivo microbiológico pueden prepararse como un líquido (caldo), un sólido
(placas de agar) o un semi-sólido (en profundidad). Los medios sólidos y semi-sólidos
contienen un agente solidificanté como el agar o la gelatina.
En la actualidad, la gran mayoría de los medios de cultivo se encuentran comercializados
por diferentes compañías, normalmente bajo la forma de liofilizados que es preciso
rehidratar. Por ello, en la mayoría de los casos la preparación de un medio de cultivo se
reduce a pesar la cantidad deseada del mismo y re disolverla en agua destilada siguiendo las
instrucciones del fabricante. Si se trata de un caldo, se pasa directamente a la esterilización
en las condiciones descritas en el envase. Si es un medio sólido (con agar), habitualmente se
procede a fundir el agar en un baño María antes de esterilizarlo.

3. MICROBIOLOGIA GENERAL
II. OBJETIVOS DE LA PRACTICA
• Familiarizarnos con la preparación de medios de cultivo como soporte y fuente de
nutrientes para fundamentar el crecimiento selectivo de microorganismos bacterianos
in vitro de acuerdo con los componentes e indicadores.
• Reconocer los componentes del Agar a cada grupo que toco.
III. ANTECEDENTES
IV. MATERIALES Y METODOS
• Medios de cultivos comunes, selectivos y diferenciales
• Balanza
• Cocinilla eléctrica
• Probeta 500 ml
• Matraz
• Agitador
• Papel indicador
• Tubos de ensayo
• Algodón
• Vaso de precipitados
• Vidrio de Reloj
• HCl
• NaOH
MEDIOS DE CULTIVO
Se trabajó con los siguientes Agares:
✓ Agar Salado nutritivo
✓ Agar caldo cultivo
✓ Agar citrato según Simmons
✓ Agar MacConkey
Los medios de cultivo se pueden clasificar de acuerdo a la naturaleza de sus constituyentes
en:

4. MICROBIOLOGIA GENERAL
• Medios naturales o complejos: constituidos por sustancias complejas de origen
animal o vegetal, las que son usualmente complementadas por la adición de
minerales y otras sustancias. En ellos no se conocen todos los componentes, ni las
cantidades exactas presentes de cada uno de ellos.
• Medios definidos o sintéticos: son los medios que tienen una composición química
definida cualitativamente y cuantitativamente. Generalmente se usan en trabajos de
investigación.
De acuerdo al uso del medio de cultivo, éstos se clasifican en:
• Medios de enriquecimiento: son medios líquidos que favorecen el crecimiento de
un tipo de microorganismo en particular. Permiten aumentar el número de
microorganismos de ese tipo. Usualmente contienen una o más sustancias
inhibidoras del crecimiento de los microorganismos con excepción de los que se
quieren cultivar.
• Medios selectivos: son parecidos a los de enriquecimiento, se diferencian por ser
medios sólidos y están diseñados para el aislamiento de microorganismos
específicos.
• Medios diferenciales: son medios que contienen indicadores de productos derivados
de la actividad microbiana de los microorganismos. No contienen ningún tipo de
sustancia con actividad antimicrobiana. Permiten revelar características fisiológicas
de los microorganismos.
CARACTERISTICAS FUNDAMENTALES DEL AGAR MACCONKEY
Es un medio selectivo diferencial utilizado para el aislamiento y diferenciación de bacilos
gram negativo fermentadores y no fermentadores de lactosa. Se utiliza con frecuencia
para el aislamiento de coliformes
Composición
• Digerido pancreático de gelatina 17,0 g
• Digerido pancreático de caseína 1,5 g
• Digerido péptico de tejido animal 1,5 g
• Lactosa 10,0 g
• Mezcla de sales biliares 1,5 g
• Cloruro de sodio 5,0 g

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• Agar 13,5 g
• Rojo neutro 30,0 mg
• Cristal violeta 1,0 mg
• Agua destilada 1.000 ml
¿PARA QUÉ SIRVE?
Es un medio selectivo diferencial utilizado para el aislamiento y diferenciación de bacilos
gram negativo fermentadores y no fermentado- res de lactosa. Se utiliza con frecuencia para
el aislamiento de coli- formes. Suspender los ingredientes en el agua destilada.
Preparación
Suspender los ingredientes en el agua destilada. Calentar agitando frecuentemente y dejar
hervir hasta disolver completamente. Esterilizar en autoclave a 121ºC (15 lb de presión)
durante 15 minutos. Se debe evitar el sobrecalentamiento. Enfriar entre 45ºC y 50ºC, colocar
20 mL de medio por cada placa y dejar solidificar.
Colonias típicas
Las colonias de los microorganismos fermentadores de lactosa (coliformes) en agar
MacConkey son de color rojo ladrillo, eventualmente rodeadas de bilis precipitada.
V. PROCEDIMIENTO
1.- EXPLICACION:
La práctica inicio con la pertinente revisión de las guías de práctica, posterior a ello se nos
permitió retirar de refrigeración nuestros materiales necesarios y se nos designó un agar a
nuestro grupo integrado de 10 estudiantes y nos tocó preparar el agar MacConkey lo cual
lo desarrollamos de la siguiente manera.

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2.- PREPARACIÓN DEL AGAR MACCONKEY
Suspender los ingredientes en el agua destilada. Calentar agitando frecuentemente y dejar
hervir hasta disolver completamente. Esterilizar en autoclave a 121ºC (15 lb de presión)
durante 15 minutos. Se debe evitar el sobrecalentamiento. Enfriar entre 45ºC y 50ºC, colocar
20 mL de medio por cada placa y dejar solidificar.
PREPARACIÓN
Preparamos 4 placas Petri de 20 ml por lo tanto sería necesario 80 ml de agua destilada.
5Og 1000ml
Xg 80ml
4000 = 1000 . X
X = 4g

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VI. RESULTADOS

8. MICROBIOLOGIA GENERAL
VII. DISCUSION DE RESULTADOS.
VIII. CONCLUSIONES:

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IX. REFERENCIAS