Se diseñó un experimento para cuantificar el efecto de la suplementación mineral sobre la calidad seminal bovina pre y pos criopreservación suministrando de forma aleatoria: 0, 100 y 200 g/toro/día de mezcla mineral a toros alimentados con forraje ab-libitum. Los datos se organizaron en un diseño cruzado con el test de Tukey al 5%. Se evaluó: volumen, concentración y motilidad masal en semen fresco; motilidad progresiva e individual, vitalidad y morfología espermática en semen fresco y descongelado.Se encontraron diferencias (p<0,05) para motilidad masal (76,47%) y anomalías espermáticas (1,67%) en semen fresco, cuando se suplementó con minerales. Se concluye que la suplementación mineral mejora la calidad del semen fresco.

1. 60
Vol. 3 No 1 de 2019 de Revista Ecuatoriana de Ciencia Animal, ISSN 2602-8220
Los minerales y su efecto en la calidad seminal bovina pre y pos criopreservado (The
minerals and their effect on the bovine seminal quality pre and post cryopreserved).
María Verónica Taipe Taipe 1
, Karen Johana Piloso Chavez 1
, Francisco Ivan Caiza de la
Cueva2
, Diego Estuardo Oñate Rivera2
, Armando Quintero Moreno3
, Ricardo Ramón
Montesdeoca Párraga 4
.
1
Facultad de Ciencias Agropecuarias. Extensión El Carmen. Universidad Laica Eloy
Alfaro de Manabí. El Carmen Ecuador.
2
Departamento de Producción. Centro de mejoramiento genético bovino “BOSSGEN”,
Produ-Biogensa, Machachi, Ecuador.
3
Facultad de Ciencias Veterinarias. Universidad del Zulia. Maracaibo, Venezuela.
4 Carrera de Agroindustria, Escuela Superior Politécnica Agropecuaria de Manabí
Manuel Félix López, Campus Politécnico El Limón, Km 2.7 vía Calceta – Morro – El
Limón Sector La Pastora, Calceta, Manabí, Ecuador.
Autor para la correspondencia: ricardomontesdeoca1982@gmail.com
Resumen
Se diseñó un experimento para cuantificar el efecto de la suplementación mineral sobre la
calidad seminal bovina pre y pos criopreservación suministrando de forma aleatoria: 0, 100 y
200 g/toro/día de mezcla mineral a toros alimentados con forraje ab-libitum. Los datos se
organizaron en un diseño cruzado con el test de Tukey al 5%. Se evaluó: volumen,
concentración y motilidad masal en semen fresco; motilidad progresiva e individual, vitalidad y
morfología espermática en semen fresco y descongelado.Se encontraron diferencias (p<0,05)
para motilidad masal (76,47%) y anomalías espermáticas (1,67%) en semen fresco, cuando
se suplementó con minerales. Se concluye que la suplementación mineral mejora la calidad
del semen fresco.
Palabras clave: Minerales, calidad seminal, crio-preservación

2. 61
Abstract
Livestock advancing rapidly thanks to the development of reproductive biotechnologies as
dilution and cryopreservation of semen for use in artificial insemination (AI), however factors
such as mineral deficiency causes reduced rates of fertility and economic losses due to poor
semen quality. Thus it was determined the effects of minerals on bovine semen quality pre and
post cryopreservation was applied randomly: 0, 100 and 200 g/bull/day of mineral mixture fed
forage ab-libitum bulls, data is organized in a crossover design with Tukey test at 5% was
evaluated: volume, concentration and mass motility in fresh semen; progressive motility,
individual motility, vitality and morphology in fresh semen and frozen/thawed. Determining
differences (p<0,05) for mass motility (76,47%) and anomalies (1,67%) in fresh semen, when
minerals are applied. Concluding that the mineral supplementation improves the quality of fresh
semen.
Key words: Minerals, semen quality, cryopreservation
Introducción
La ganadería avanza rápidamente gracias al desarrollo de la biotecnología, mejoramiento
genético, sanidad, nutrición, etc., fortaleciendo el incremento de la producción, la rentabilidad
y la sostenibilidad (Rahman,2014). El uso de biotecnologías como la dilución del semen y su
criopreservación, así como la masificación de técnicas de Inseminación Artificial (IA), ha
permitido, acelerar el mejoramiento de las características productivas del hato. La
criopreservación permite la conservación del semen por períodos prolongados de tiempo, lo
cual propicia de manera masiva la multiplicación y difusión de genes deseables a nivel nacional
e internacional evitando la compra y traslados de los reproductores muy costosos y
disminuyendo los riesgos sanitarios para los países, además de economizar de manera
sustancial los costos de producción [oxidativo y la formación del hielo intracelular (Giraldo,
2007).

3. 62
En muchas explotaciones de América Latina que implementan la Inseminación Artificial (IA) la
tasa de fertilidad no es óptima, debido a una calidad espermática cuestionable de los toros,
siendo uno de los factores influyentes, la deficiencia de macro y micro minerales. A pesar de
esta situación, no se le da el interés que merece, debido a que la sintomatología asociada a
las deficiencias minerales no se evidencia al evaluar la condición de salud general del animal
o rebaño [19], permaneciendo el problema oculto sin lograr evaluar las pérdidas económicas
que esta conlleva.
El objetivo de este estudio fue determinar el efecto de los minerales sobre la calidad
espermática pre y pos criopreservado. La hipótesis de suplementar a los toros con mezcla
mineral se traduciría en un aumento del volumen de semen, concentración espermática,
vitalidad, motilidad masal, motilidad individual y motilidad progresiva y en una reducción de
las anormalidades de los espermatozoides, en otras palabras se lograría mejorar la calidad
espermática.
Materiales y métodos
El estudio se realizó en el Centro de Mejoramiento Genético Bovino “BOSSGEN” (Produ-
Biogensa), ubicado en la parroquia de Machachi-Ecuador, se evaluó el semen de 6 toros Bos
Taurus de 450 kg de peso promedio, a los cuales se les aplicó de forma aleatoria los siguientes
tratamientos: T0 = 0 g/toro/día (Control), T1 = 100 g/toro/día (óptimo) y T2 = 200 g/toro/día
(exceso) de mezcla mineral siendo su composición química en mg/kg: Ca 18862,52; P
6020,00; Mg 583,25; Zn 131,10; Mn 52,35; Se 1,05; Fe 168,85; Cu 40,72; Co 0,68 y S >8 según
al análisis químico del laboratorio, de acuerdo a la metodología del diseño cruzado (D.C.).
Se establecieron tres periodos, cada uno con una semana de adaptación y tres semanas de
evaluación y entre periodos seis semanas de reposo, como dieta se suministró mezcla forrajera
constituida de: Pasto Azul (Setaria sphacellata), Rye grass (Lolium perenne), Avena Forrajera
(Avena sativa), Vicia Faba (Vicia villosa), LLantén Forrajero (Plantago major), Lengua de vaca
(Rumex crispus L.) y Trébol Blanco (Trifolium repens) ab-libitum bajo la modalidad de pastoreo.
Se colectaron tres eyaculados por toro con el método de vagina artificial con inicio a las 8 a.m.
con la preparación de los toros de acuerdo a los protocolos establecidos, se identificó y se

4. 63
trasladaron las muestras al laboratorio, donde se evaluó: Volumen del eyaculado: medido por
observación directa en tubos colectores graduados (Pirec® de 15 mL) su valor expresado en
mL. Concentración espermática.- se colocó 7 μL de semen puro en la microcubeta y está en
el espectrofotómetro (Spermacue-Minitub) calibrado para la especie bovina y se registró su
lectura. Motilidad masal.- para determinar el porcentaje de espermatozoides con movimiento
se agregó una gota (5 μL) de semen sobre un porta-objetos atemperado a 37⁰C y se observó
en un microscopio óptico (Olympus, CX-21) con aumento de 10X.
Motilidad individual y progresiva.- se diluyó el semen con citrato de sodio al 2.9% en una
relación 1:10, se colocó una gota de esta solución sobre un portaobjetos debidamente
atemperado (37⁰C), para su valoración subjetiva mediante la observación, a través de un
microscopio óptico (Olympus, CX-21) con aumento de 100X. Vitalidad y morfología
espermática.- Valoradas subjetivamente en porcentaje a través de un microscopio de
contraste de fase (Olympus) a 1000X de una gota de semen diluida (5 μL) y teñida con eosina-
nigrosina.
Posteriormente se realizó la dilución, envasado, congelación y preservación de las pajuelas
en nitrógeno líquido por cinco meses, del semen congelado/descongelado se evaluó: motilidad
individual, motilidad progresiva, vitalidad y morfología espermática. Los datos se organizaron
en un diseño cruzado (D.C.) aplicando el siguiente modelo matemático Xijk = µ + Ti + βj +δk
+ Eijk, para determinar los rangos de significación se utilizó la prueba de Tukey al 5%. La
información se procesó en el software estadístico INFOSTAT (versión estudiantil, 2014).
Resultados y discusión
Calidad espermática pre-criopreservación.
Motilidad. Se detectó diferencias (p<0,05) en todo los periodos de evaluación para motilidad
masal, así como también, en las tres últimas semanas para motilidad individual (p<0,05) y en
la semana 0, 1 y 3 para motilidad progresiva (p<0,05), correspondiendo a los mejores
porcentajes de motilidad, cuando se aplicó 100 y 200 g/toro/día de mezcla mineral (Tabla 1).

5. 64
Morfología. El porcentaje de anomalías de la cabeza se redujo (p<0,05) cuando se
suplementó mezcla mineral, para anomalías de la cola no se observó diferencias entre los
tratamientos a excepción de la fase inicial (Semana 0 y 1) donde el mayor porcentaje de
anomalías (p<0,05) se presenta en el tratamiento control (Tabla 2). Para el resto de variables
no se detectó diferencias estadísticas (p>0,05).
La deficiencia de minerales está relacionada con el deterioro en el comportamiento
reproductivo de los animales (Smith y Akinbamijo, 2000). El tejido reproductor masculino
requiere un nivel óptimo de selenio (Se), una pequeña desviación (deficiencia o exceso) puede
causar múltiples anomalías de los espermatozoides, reducir la motilidad y la vitalidad, que a
su vez afecta a la calidad del semen y la fertilidad ( Ahsan, 2014 ).
Tabla 1. Promedios para motilidad (%) en el análisis y efectos de la
suplementación mineral sobre la calidad seminal pre criopreservación.
Promedios (%)
Motilidad masal Motilidad individual Motilidad progresiva
Tratamien
tos S 0 S 1 S 2 S 3 S 0 S 1 S 2 S 3 S 0 S 1 S 2 S 3
T0
72,4
b
71,9
b
72,2
b
73,3
b
72,1
a
71,9
b
71,9
b
72,4
b
73,1
b
72,8
b
73,2
a
73,2
b
T1
75,0
a
75,3
a
76,6
a
75,0
a
75,0
a
74,8
a
73,9
a
74,8
a
76,5
a
75,6
a
74,2
a
76,1
a
T2
73,2
a
74,6
a
75,1
a
76,5
a
73,1
a
73,8
a
75,0
a
74,6
a
75,4
a
76,3
a
75,4
a
76,3
a
Letras distintas indican diferencias significativas (p <0,05) Duncan 5%
S = semana
T0= 0g/toro/día de mezcla mineral
T1= 100g/toro/día de mezcla mineral
T2= 200g/toro/día de mezcla mineral

6. 65
Varias investigaciones muestran que la suplementación con niveles óptimos de Se y Zn en la
dieta de las especies como: codorniz, ganso, carnero, toro y el hombre se traduce en un
aumento del volumen, concentración y motilidad, así como también en una disminución de la
mortalidad y anormalidades espermáticas. La deficiencia de Se está relacionada con el estrés
oxidativo, que provoca alteración en la integridad del ADN, proteínas y lípidos de la membrana
plasmática del espermatozoide y afecta la estructura de la pieza intermedia con su
consecuente pérdida o alteración de la motilidad y daños morfológicos. (Kayas et al.,2002;
Ahsan, 2014; Biswas, 2016; Giacone,2016; Jerysz y Lukaszewicz, 2013).
El zinc (Zn) se concentra en la región caudal de los espermatozoides, es crucial en la
estabilidad de la membrana, en las propiedades mecánicas de las fibras accesorias,
morfología, volumen y motilidad espermática (Rahman et al.,2014), además junto con el Cu y
Tabla 2. Promedios para morfología (%) en el análisis y efectos de la
suplementación mineral sobre la calidad seminal pre criopreservación.
Promedios (%)
Anomalías de la cabeza Anomalías de la cola
Tratamient
os S 0 S 1 S 2 S 3 S 0 S 1 S 2 S 3
T0 2,7b 3,0b 3,2c 3,0b 2,2b 2,2b 2,0a 2,0a
T1 1,5a 2,0a 1,7a 1,7a 1,5a 1,3a 1,7a 1,7a
T2 1,5a 2,0a 2,7b 2,0a 1,3a 1,7a 1,3a 1,7a
Letras distintas indican diferencias significativas (p <0.05) Duncan 5%
S = semana
T0= 0g/toro/día de mezcla mineral
T1= 100g/toro/día de mezcla mineral
T2= 200g/toro/día de mezcla mineral

7. 66
Se forman parte de muchas enzimas involucradas en la reproducción, sus deficiencias se
relacionan con machos infértiles (Turk,2014; y Wdowiak et al.,2015).
Los cationes Na+
y K+
establecen el equilibrio osmótico. La osmolaridad del plasma seminal,
juega un papel importante en la activación de la célula espermática. Estos iones tienen un
efecto inhibidor sobre la motilidad de los espermatozoides, que asocia bajos porcentajes de
espermatozoos móviles con altos niveles de Na+
y K+
. El calcio estimula la esteroido-génesis
en las células de Leydig y está asociado al movimiento de los espermatozoides, por ende su
deficiencia provoca una reducción de la motilidad espermática (Asadpour, 2012; Judycka,
2016).
Calidad espermática pos-criopreservación.
No se detectó diferencias entre los tratamientos (p >0,05).Cuando se congela el semen, el
espermatozoide sufre un deterioro en la membrana plasmática y acrosomal, provocado por
alteraciones en su organización, fluidez, permeabilidad, composición lipídica y pérdida de
algunas proteínas de la membrana como las enzimas responsables de la metabolización de
las especies reactivas de oxígeno (ERO). Reflejandose en una disminución promedio de 30 a
40% de la motilidad individual en relación a la del semen fresco y una reducción drástica de la
supervivencia espermática,satisfactorio un valor del 50% de vitalidad con las principales
causas de estrés las de tipo: térmico, mecánico, químico, osmótico oxidativo y la formación del
hielo intracelular (Asadpour, 2012; Curry, 2000; Judycka, 2016).
Las ERO son los responsables de las alteraciones estructurales y funcionales que sufre el
espermatozoide como: daños colaterales a las proteínas y lípidos de la membrana alteran la
integridad del ADN, el citoesqueleto y el axonema, e incrementa la peroxidación lipídica,
produciendo espermatozoides morfológicamente alterados y sin movilidad, como preámbulo a
una calidad espermática deficiente y su consecuente infertilidad. Cuando se adiciona enzimas
o sustancias antioxidantes, se observa: una menor producción de anión superóxido y peróxido
de hidrógeno, inferior peroxidación de lípidos y un número reducido de células con
fragmentación del ADN así como un aumento significativo en la producción de

8. 67
espermatozoides, motilidad, viabilidad e integridad acrosomal, que afectan positivamente las
características de calidad seminal y su capacidad de fertilización.
No olvidemos que estas enzimas o sustancias antioxidantes estan constituidas en su
estructura o son activadas por ciertos minerales como el Se y Cu en la glutatión peroxidasa
(GSHPx), el Mn, Cu y Zn en la súperoxido dismutasa (SOD), manteniendo la integridad de las
membranas espermáticas y ejerciendo un efecto positivo sobre la vitalidad de los mismos. Otro
efecto positivo de la suplementación con mezcla mineral es el aumento de la concentración de
solutos en el exterior de la célula, mecanismo indispensable para mantener el volumen celular
con una cantidad adecuada de agua intracelular, evitando así la formación de cristales de hielo
que afectan la supervivencia de la célula.
Conclusiones
La suplementación con mezcla mineral en la dieta de los sementales, mejoró la calidad seminal
al incrementar los porcentajes de motilidad y disminuir los porcentajes de anormalidades en
semen fresco. Sin embargo no se evidenció diferencias en el semen congelado/descongelado.
Conflicto de Intereses
No hubo conflicto de intereses entre autores ni personal del centro de sementales donde se
realizó el trabajo y las correspondientes personas de la Investigación-desarrollo.
Agradecimientos
Al personal de campo y directivo del centro de sementales que ofreció facilidades de acceso a
los animales y la información de su registro de producción y permitió la realización del ensayo
en campo.
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Recibido: 22-11-2018
Aceptado: 25-01-2019