El documento describe diferentes tipos de microscopios, incluyendo microscopios estereoscópicos, quirúrgicos, compuestos, de fluorescencia, electrónicos de transmisión, confocales, de campo oscuro, de contraste de fase y de luz polarizada. Cada microscopio se utiliza para un propósito específico como la observación de muestras grandes sin preparación, microcirugía, enseñanza, fluorescencia y detección de componentes a nivel atómico y molecular.

1. UNIVERSIDAD TÉCNICA DE MACHALA
FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS Y DE LA SALUD
CARRERA DE MEDICINA
TAREA EXTRACLASE
Profesor: Bioq. Farm. Carlos García MSc.
Alumno: Angie Yarel Cueva Fajardo
Curso: Salud Paralelo: V-02
CLASES DE MICROSCOPIOS
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Existen diversas clases de microscopios, según la conformación, la naturaleza de
los sistemas de luz y otros elementos utilizados para obtener las imágenes.
Microscopio Estereoscópico: Este tipo de microscopio proporciona una imagen
estereoscópica, en tres dimensiones (3D) del espécimen. Se fundamenta en la
visión binocular convencional, en la que los dos ojos observan el espécimen con
ángulos levemente distintos. El microscopio estereoscópico debe ser binocular. Se
utiliza para observar especímenes de gran tamaño, sin corte o preparación previa
puesto que emplea luz incidente y no funciona por trans-iluminación. Es ideal para
realizar microdisección.
Microscopio Quirúrgico: Es un microscopio que se emplea en microcirugía.
Proporciona un campo muy bien iluminado y un aumento de las estructuras
anatómicas, facilitándole al cirujano una mayor visibilidad de los tejidos sanos y
patológicos que serán manipulados más cuidadosamente y con menores
posibilidades de lesión. Algunos modelos más sofisticados tienen piezas
automatizadas robóticas. Se utiliza principalmente en intervenciones quirúrgicas en

2. las que se amerite una minuciosa disección, como por ejemplo del cráneo y cerebro
o del globo ocular.
Microscopio Compuesto: El microscopio compuesto es un tipo muy común de
microscopio. El término "compuesto" significa que utiliza más de una lente. Este
microscopio tiene dos lentes. La lente principal es la más cercana al objeto y luego
se encuentra la lente secundaria, que está más alejado del mismo. La lente
secundaria se utiliza para ampliar la imagen de la principal. La lente principal está
dirigida hacia el condensador, o platina, y es aquí donde se coloca el objeto que se
desea ampliar con forma de un portaobjetos. Una lente compuesta moderna puede
ampliar el diámetro original de los especímenes de 1000x a 2000x. La platina es
iluminada con una luz que brilla a través de un diafragma, y este se utiliza para
controlar la cantidad de luz. Este microscopio es muy común hoy en día y todavía
se utiliza como microscopio para enseñanza.
Microscopio de Fluorescencia: El microscopio de fluorescencia ha sido diseñado
para ver las muestras que presentan fluorescencia o brillo natural cuando son
tratados con productos químicos fluorescentes. Esto significa que los especímenes

3. son en sí mismos la fuente de luz. Existen muchos materiales que brillan de forma
natural, tales como la clorofila y algunos minerales. Sólo tienen que estar iluminados
por una longitud de onda específica para hacerlos brillar. A las muestras que no
brillan naturalmente, se les trata con un fluoróforo. Tanto las muestras tratadas
como las no tratadas son irradiadas a continuación con una longitud de onda
específica de luz. Esta es absorbida por las muestras, lo que hace que emitan una
luz de mayor longitud de onda. Este es de un color diferente a la luz absorbida.
Luego, el microscopio amplifica la luz radiada por la muestra. La luz se hace pasar
a través de filtros dirigidos a una longitud de onda específica, y se produce una
imagen sobre un fondo oscuro.
Microscopio Electrónico de Transmisión: Los microscopios electrónicos son
instrumentos que utilizan electrones de alta energía para examinar los objetos que
están más allá del alcance del ojo humano. Un microscopio electrónico puede
obtener la topografía de un objeto, que es las características de la superficie,
determinar su morfología o la forma y el tamaño, determinar la composición del
objeto y, finalmente, le muestra al científico cómo están dispuestos los átomos en
un objeto. Este microscopio funciona como un microscopio de luz, pero en lugar de
esta, se utiliza un haz de electrones. Dicho haz de electrones acelerados se centra
en la muestra utilizando un cañón de electrones que es alimentado por varios
millones de voltios. La muestra a observar es encuentra en una cámara de vacío.
Los electrones bombardean y pasan a través de la imagen, donde son capturados
por un imán de electrones que curva la luz para producir una foto o imagen en una
pantalla. El rebote de los electrones fuera de la muestra produce reacciones. Las
diversas reacciones son capturadas y transformadas en una imagen por el
microscopio. Este es el más poderoso de todos los microscopios electrónicos.
Puede magnificar algo un millón de veces.

4. Microscopio Confocal: O Microscopio Láser de
Barrido: En la microscopía fotónica clásica el tejido debe cortarse finamente para
ser examinado y mientras más delgado sea, más nítida será la imagen; pero con
este método se pierde la información tridimensional durante el corte. Si una muestra
gruesa es observada al microscopio fotónico, la imagen que se enfoca se ve
contaminada por la superposición de los elementos del tejido que están fuera de
foco, tanto por encima como por debajo del plano enfocado; la imagen enfocada se
deteriora a causa de las estructuras superpuestas borrosas o no enfocadas.
Con el microscopio confocal estas limitaciones han sido superadas, ya que es un
instrumento que permite realizar cortes ópticos finos a muestras de tejidos más o
menos gruesos y realizar reconstrucciones en tres dimensiones a partir de cortes
seriados. Fue inventado en el año 1955 por el científico estadounidense Marvin
Minsky (116) al estudiar neuronas. Su mecanismo, basado en el microscopio de
fluorescencia hace posible la obtención de imágenes de la arquitectura
tridimensional de células y tejidos.
Los detalles de la óptica del microscopio confocal son complejos y complementado
por métodos electrónicos y de computación, este instrumento permite enfocar
únicamente un plano determinado del espécimen, eliminando la luz (fluorescencia)
procedente de las regiones que no están en el plano de enfoque.
Microscopio de Campo Oscuro: De manera similar a un cielo nocturno en el cual
brillan las estrellas o al iluminar con una linterna un cuarto oscuro y las partículas
de polvo flotantes en el aire se tornan visibles porque reflejan o difractan la luz, los

5. especímenes observados al microscopio de campo oscuro se ven blancos y
brillantes sobre un fondo oscuro (negro).
La iluminación de campo oscuro se puede realizar tanto mediante luz transmitida
(trans-iluminación) como con luz incidente (epi-iluminación). En el primer caso, para
lograr el efecto se requiere bloquear la parte central del rayo de luz que
normalmente pasa a través y alrededor del espécimen, de tal manera que sólo sea
iluminado por rayos oblicuos. La manera más fácil y económica de lograrlo consiste
en colocar un filtro circular opaco (por ejemplo círculos de cartulina negra o una
moneda adherida a un círculo de vidrio o plástico transparente) bajo el condensador
de un microscopio compuesto ordinario. Esta maniobra funciona bien con objetivos
de 10x-40x; el diámetro del circulo
opaco debe ser de aproximadamente 16-
18mm para un objetivo de 10x cuya
apertura numérica sea de 0.25. Para un
objetivo de 20x o 40x con una apertura
numérica de 0.65, el diámetro del círculo
opaco debe oscilar entre 20-24mm. Para la
iluminación con luz incidente o iluminación
oblicua se emplea un filtro en forma de luna
en cuarto decreciente (en forma de C),
obteniéndose una interesante imagen con
relieve.
Microscopio de Contraste de Fase: Las investigaciones iniciales de Frits Zernike
al inicio de la década de 1930 revelaron que en microscopía, al crear interferencias
en la luz empleada para iluminar el espécimen se creaban condiciones que
producían un incremento del contraste. Este descubrimiento le valió el premio Nobel
en física en el año 1953 y revolucionó la investigación en biomedicina al permitir el
estudio de células vivas. Con esta técnica de iluminación se aumenta el contraste
de manera notoria entre las partes claras y oscuras de las células transparentes.

6. El principio es semejante al de campo oscuro; se ilumina la muestra con un cono
hueco de luz pero mucho más estrecho. Se emplea un filtro en forma de anillo que
disminuye la intensidad de la luz y al mismo tiempo provoca un retraso o desfase
en la longitud de onda de la luz. Este método induce variaciones sutiles en el índice
de refracción (determinado por el espesor) de los especímenes translúcidos
permitiendo visualizar una riqueza de detalles muy finos en la estructura, los cuales
pasarían desapercibidos con una iluminación de campo claro.
Los heterogéneos componentes celulares absorben la luz de diferente manera y
causan pequeñas variaciones de fase en las radiaciones luminosas, es decir, las
retrasan ligeramente al disminuir la velocidad a la cual viajan y el retraso varía según
el tipo de estructura. En las células y tejidos no coloreados, el escaso contraste se
mejora y acentúa al transformar las diferencias de fase (invisibles al ojo humano) en
diferencias de intensidad luminosa las cuales sí son detectables. Este tipo de
microscopio también se denomina de Fases o
Diferencia de Fases.
Microscopio de Luz Polarizada: Es un microscopio de campo claro al cual se le
adicionan filtros que modifican la luz. También se denomina microscopio
petrográfico o metalúrgico por su uso inicial en el estudio de minerales, sin embargo
su aplicación se ha extendido al campo de la biología, medicina, química y muchas
otras disciplinas. Esta técnica microscópica puede emplear tanto la luz transmitida
como la luz incidente (trans-iluminación y epi-iluminación respectivamente).
Comparada con las otras técnicas de incremento de contraste, el uso de la luz
polarizada es la más efectiva en el estudio de muestras ricas en materiales
birrefringentes, puesto que mejora de manera incomparable la calidad de la imagen.
La luz proveniente de una fuente estándar de iluminación vibra y se propaga en
todas las direcciones, pero al pasar por un filtro polarizador las ondas y su campo
eléctrico oscilan todos en un mismo plano. El polarizador es un dispositivo que solo
deja pasar la luz que vibra en un plano determinado denominado eje de polarización.

7. Microscopio de Contraste por Interferencia Diferencial: Microscopio sofisticado
de contraste en trans-iluminación, también denominado microscopio Nomarski,
ideal para visualizar especímenes no coloreados y transparentes. Permite obtener
información sobre la densidad óptica de la muestra y observar detalles que de
ordinario son invisibles. Los objetos se ven oscuros o claros en un fondo gris, de
manera semejante a las imágenes del microscopio de contraste de fases, pero sin
halos de difracción. Emplea luz polarizada la cual pasa por dos prismas
birrefringentes (Nomarski, Wollaston) que la fraccionan en dos rayos cuyos
trayectos e índices de refracción son diferentes, dando como resultado una imagen
del espécimen en 3D o relieves que corresponden a las variaciones de la densidad
óptica de la muestra con énfasis en líneas y bordes, como si la célula proyectara
sombras hacia un lado.
Microscopio Vertical: Es el microscopio convencional, perfeccionado a partir de
los modelos antiguos, que posee la fuente de luz ubicada en la base, por debajo de
la platina. Es el microscopio de uso más común.

8. Microscopio Invertido: La estructura del microscopio es invertida en comparación
al microscopio convencional. La fuente de luz está ubicada por encima de la platina
y el principio de funcionamiento y formación de la imagen es el mismo que el del
microscopio tradicional. Utilizado principalmente para cultivos celulares (células
vivas) sin una preparación previa y para monitorear actividades (crecimiento,
comportamiento).
Microscopio de Luz Ultravioleta: Es un microscopio en el que se usa la luz
ultravioleta, que es una radiación cuya longitud de onda es de aproximadamente
200 nm y en consecuencia permite un mayor poder de resolución que la luz visible.
La luz ultravioleta es invisible para el ojo humano, no puede ser captada por la retina
y además es muy nociva; es por ello que la imagen no se observa directamente, por
el contrario debe visualizarse mediante fluorescencia, fotografía o un sensor digital.
Todos los elementos ópticos del microscopio, incluyendo las láminas porta y cubre-objetos
están hechos de cuarzo o fluorita; no pueden ser de vidrio puesto que este
material no transmite la luz ultravioleta.
La estructura del microscopio es básicamente igual a la del microscopio de

9. fluorescencia, con fuente de luz, filtros, objetivos y espejos especiales; estos últimos
son aluminizados. La fuente luminosa corresponde a lámparas de arco de mercurio
o xenón. En términos generales es un microscopio costoso. Las imágenes obtenidas
son semejantes a las del microscopio de fluorescencia, las estructuras marcadas
aparecen brillantes contrastando con un fondo negro.
Microscopios de Barrido con Sondas: También denominados de sonda de
barrido (scanning probe microscopes): Son instrumentos primordiales en la
nanociencia. Se constituyen básicamente de una plataforma y una sonda o aguja
fina que recorre la superficie de la muestra con gran precisión (escaneo o barrido).
Este filamento se coloca muy cerca (a 1 nm) del objeto a estudiar, generando una
corriente eléctrica y se desplaza por la superficie, captando electrones que se
escapan en lo que se llama efecto túnel. Los electrones saltan de la punta a la
muestra y viceversa. La corriente del efecto túnel varía dependiendo de la distancia
entre la sonda y la muestra. De esta manera se reproduce la topografía o relieve de
la muestra con una alta resolución y mediante programas informáticos, la imagen
es traducida por la computadora, pudiéndose distinguir un átomo de otro y se genera
una imagen en tres dimensiones.
Dependiendo del tipo de sonda se puede obtener información sobre las propiedades
químicas, eléctricas, mecánicas o físicas de la microestructuras o nanomateriales.
Como aplicaciones en biotecnología se realiza el estudio genético de moléculas de
ADN, ARN (128) y la manipulación y desplazamiento de átomos para ser colocados
donde se requiera. Estos microscopios deben estar colocados sobre un sistema
anti-vibración y van acoplados a una computadora.

10. Microscopio Acústico: Este tipo de microscopio muy particular que fue introducido en
el año 1974 y su equivalente en microscopía electrónica, denominado microscopio
electrónico acústico de barrido. Están basados en la generación de ondas sonoras que
inciden sobre el espécimen y las variaciones en el sonido reflejado determinan el contraste
y la formación de una imagen. Las ondas reflejadas por el espécimen son colectadas por
un transductor que transmite la señal a un monitor de rayos catódicos. Este tipo de
microscopio se empleó principalmente en la observación de la ultraestructura celular con
una resolución comprendida entre 0.5-0.7 μm. En algunos modelos se utilizó agua como un
medio de inmersión que facilitaba la distribución de las ondas sonoras. Tanto el escaso
poder de resolución como la baja calidad de las imágenes obtenidas por esta técnica
determinaron que el microscopio acústico tuviera poca aceptación ya que sus aplicaciones
eran muy limitadas en las investigaciones científicas.
MICROSCOPIO DE FUERZA ATÓMICA: El Microscopio de fuerza atómica es un
instrumento mecano-óptico capaz de detectar fuerzas del orden de los piconewtons.
Al rastrear una muestra, es capaz de registrar continuamente su topografía
mediante una sonda o punta afilada de forma piramidal o cónica.
MICROSCOPIO ÓPTICO: Un microscopio óptico es un microscopio basado en
lentes ópticas.

11. MICROSCOPIO ELECTRÓNICO: Un microscopio electrónico es aquél que utiliza
electrones en lugar de fotones o luz visible para formar imágenes de objetos
diminutos. Permiten alcanzar una capacidad de aumento muy superior a los
microscopios convencionales, debido a que la longitud de onda de los electrones es
mucho menor que la de los fotones.
WEBGRAFÍA
http://www.medic.ula.ve/histologia/anexos/microscopweb/MONOWEB/capitulo6_8.
htm
http://www.medic.ula.ve/histologia/anexos/microscopweb/MONOWEB/capitulo4_8.
htm
http://www.ehowenespanol.com/diferentes-tipos-microscopios-funciona-lista_
178512/
http://misdeberes.es/tarea/86940