Este documento describe los diferentes tipos de microscopía, incluyendo la microscopía óptica, de fluorescencia, de contraste de fases, confocal, y electrónica. Explica brevemente el desarrollo histórico de la microscopía y define términos como microscopio y microscopía. Además, detalla los principios básicos y usos de cada tipo de microscopía.

1. Microscopía.
Integrantes:
Angie chacón.
Gabriel carrillo.
Durleys charris.

2. 1.Desarrollo Historico De la Microscopia.
2.Defincion De Microscopio.
3.Definicion De Microscopia.
4.Tipos De Microscopia.
CONTENIDO.

3. 1.Desarrollo Histórico De La Microscopia.1.Desarrollo Histórico De La Microscopia.
 1590 Hans y Zacharias Janssen inventaron un
microscopio compuesto, pero este no se ha
podido verificar.
1609 Galileo Galilei desarrolla un microscopio
compuesto de una lente convexo y cóncavo.
1619 Cornelius Debbrel presenta un microscopio
compuesto de dos lentes convexo.
1625 Giovanni Faber de Banmberg acuña la
palabra microscopio por analogía a telescopio.
1665 Robert Hooke acuña la palabra célula.

4. 1679 Anton Van Leuwenhoek inventa el
microscopio simple.
1931 Ernest Ruska construye el primer
microscopio electrónico.
1935 Max Knoll y Von Ardenne desarrollan el
prototipo del microscopio electrónico de
barrido.
1981 Gerd Binning y Heinrich Rohrer
desarrollan el microscopio de efecto túnel.
1985 Gerd Binning y Heinrich Rohrer
desarrollan el microscopio de fuerza atómica.

5. 2.Definición De Microscopio.2.Definición De Microscopio.
Es un instrumento que permite observar objetos
que son demasiado pequeños para ser vistos a
simple vista.
Se trata de un instrumento óptico que contiene
dos o más lentes que permiten obtener una
imagen aumentada del objeto y que funciona por
refracción.
La ciencia que investiga los objetos pequeños
utilizando este instrumento se llama microscopía.

6. 3.Definición de Microscopía.3.Definición de Microscopía.
Es el conjunto de
técnicas y
métodos
destinados a hacer
visible los objetos
de estudio que por
su pequeñez están
fuera del rango de
resolución del ojo
normal.

7. 4.Tipos de Microscopia.

8. 4.1 Microscopía Óptica.4.1 Microscopía Óptica.
•Un microscopio óptico es
un microscopio basado en
lentes ópticas que nos
permiten observar objetos
de pequeño tamaño.
•Los microscopios de este
tipo generalmente producen
un aumento de 1000 veces
el tamaño original. El límite
lo tienen en unas 2000
veces.
•El material a observar se
colorea con colorantes
específicos que aumentan
el contraste y revelan
detalles que no aprecian de
otra manera.
Lab De Biología Febrero 2012.
Elementos de un microscopio básico: (1) ocular,
(2) revólver, (3) objetivo, (4) mecanismo de
enfoque, (5) tornillo de enfoque fino, (6) platina,
(7) espejo, (8) condensador.

9. Las lentes de un microscopio óptico son el
condensador, el objetivo y el ocular.
La luz que entra en el sistema debe enfocarse
sobre la preparación y para esto se utiliza el
condensador. Elevando o bajando el
condensador puede alterarse el plano del foco
de luz y elegirse una posición que consiga el
foco preciso.
El objetivo es la lente situada cerca del objeto
que se observa. El aumento primario del
objeto es producido por la lente objetivo y la
imagen se transmite al ocular.
En el ocular se realiza el aumento final.

10. 4.1.1Microscopio Óptico4.1.1Microscopio Óptico De CampoDe Campo
Oscuro.Oscuro.
 El microscopio de campo oscuro utiliza un haz enfocado
de luz muy intensa en forma de un cono hueco
concentrado sobre el espécimen.
 El objeto iluminado dipersa la luz y se hace así visible
contra el fondo oscuro que tiene detrás, como las
partículas de polvo iluminadas por un rayo de sol que se
cuela en una habitación cerrada.
 Las porciones transparentes del espécimen quedan
oscuras, mientras que las superficies y partículas se ven
brillantes.
 Esta forma de iluminación se utiliza para analizar
elementos biológicos transparentes y sin pigmentar,
invisibles con iluminación normal, sin fijar la muestra,
es decir, sin matarla.
 También es bastante utilizado en la observación de
muestras metalográficas para la observación de detalles
en superficies con alta reflectancia.

11. 4.2 Microscopía de Fluorescencia.4.2 Microscopía de Fluorescencia.
•El microscopio de fluorescencia es una variación del
microscopio óptico, dotado de luz ultravioleta en el que
los objetos son iluminados por rayos de una
determinada longitud de onda.
•La imagen observada es el resultado de la radiación
electromagnética emitida por las moléculas que han
absorbido la excitación primaria y reemitido una luz
con mayor longitud de onda.
•Para dejar pasar sólo la emisión secundaria deseada,
se deben colocar filtros apropiados debajo del
condensador y encima del objetivo.
•Se usa para detectar sustancias con autofluorescencia
(vitamina A) o sustancias marcadas con fluorocromos.

12. Diagrama de Microscopio deDiagrama de Microscopio de
Fluorescencia.Fluorescencia.
Lab De Biología Febrero 2012.

13. 4.3 Microscopio De Contraste4.3 Microscopio De Contraste
De Fases.De Fases.
 Es un microscopio óptico modificado que permite contrastar
sustancias de diferente grosor o densidad.
 Mediante un condensador y un objetivo especial se controla
la iluminación de tal manera que vaya en diferentes rutas a
través de las distintas partes de una célula.
 El resultado es una imagen con diferentes grados de brillo y
oscuridad.
 Con este método, el material denso aparece brillante,
mientras que las partes de la célula que tienen una
densidad cercana al agua (citoplasma) aparecen oscuras.
 Se utiliza para visualizar estructuras celulares sin necesidad
de usar colorantes o matar microorganismos.

14. Microscopio De ContrasteMicroscopio De Contraste
De Fases.De Fases.

15. 4.3.1 Microscopia Interferencia-4.3.1 Microscopia Interferencia-
Contraste Diferencial. (DIC).Contraste Diferencial. (DIC).
Utiliza dos rayos de luz polarizada y las
imágenes combinadas aparecen como si la
célula estuviera proyectando sombras hacia un
lado. Fue diseñado para observar relieves de
especímenes muy difíciles de manejar, es muy
utilizado en los tratamientos de fertilización in-
vitro actuales. DIC se usa cuando el
espécimen es muy grueso para usar contraste
de fases.

16. 4.4 Microscopia Confocal.4.4 Microscopia Confocal.
El microscopio confocal es en principio un
microscopio óptico que incluye como fuente de
luz un láser y un sistema electrónico que
ayuda a la captación de imágenes.
Debido a esto, el microscopio confocal
consigue un aumento en la resolución y
obtener imágenes de secciones ópticas
extremadamentes finas, eliminando así la
interferencia que produce la luz que llega de
los diferentes campos ópticos de todo el
grosor de la muestra que se observa,
consiguiendo así que el enfoque se realice
sobre un único plano (confocal).
Las imágenes obtenidas son digitales.

17. Microscopio confocalMicroscopio confocal

18. 4.4.1Microscopia De Excitación4.4.1Microscopia De Excitación
Multifotonica.Multifotonica.
Es una técnica de proyección De
imagen fluorescente que permite la imagen de
tejido vivo hasta una profundidad de un
milímetro. El microscopio de excitación de
dos fotones es una variante especial del
microscopio fluorescente de múltiples fotones. En
algunos casos, la excitación de dos fotones
puede ser una alternativa viable a la microscopía
confocal debido a su más profunda penetración
de tejido y fototoxicidad reducida.

19. 4.5 Microscopia Electr4.5 Microscopia Electrónica.ónica.
Fue desarrollada en 1930, y aplicada por primera
vez por Albert Claude, Keith Porter,George
Palade en los años 1940 y 1950.
En el Microscopio Electrónico la luz se
sustituye por un haz de electrones que pasan por
un tubo (con vacío para mejorar el paso de los
electrones).
Permite la observación de las estructuras
interiores de las células.
Sirve para visualizar virus.

20. Tiene una resolución de 10 A (se pueden ver
objetos muy pequeños, incluyendo algunas
moléculas).
Un haz de electrones es lanzado por un cañón
en el que se establece una diferencia de
potencial, entre el cátodo y el ánodo.
El chorro de electrones pasa a través de la
muestra a observar, que está colocada en una
rejilla.
Los electrones chocan con la muestra y se
desvían, y estas desviaciones son recogidas
por la pantalla.
Observamos la imagen a través de una
pantalla que es excitada por los electrones que
llegan a ella (mecanismo similar a la
televisión). Las imágenes las recogemos
mediante una placa fotográfica que es
impresionada directamente por los electrones.

21. Es importante el
vacío dentro del
cañón del
microscopio
electrónico, ya que
Los electrones
pueden ser desviados
por las moléculas del
aire, de forma que
tiene que hacerse un
vacío casi total en el
interior de un
microscopio de estas
características.

22. 4.5.1Microscopio Electr4.5.1Microscopio Electrónico Deónico De
Transmisión (TEM).Transmisión (TEM).
Principio de funcionamiento:
◦ El microscopio electrónico de transmisión emite un haz de
electrones dirigido hacia el objeto que se desea aumentar.
◦ Una parte de los electrones rebotan o son absorbidos por el
objeto y otros lo atraviesan formando una imagen
aumentada de la muestra.
◦ Para utilizar un microscopio electrónico de transmisión debe
cortarse la muestra en capas finas, no mayores de un par
de miles de ángstroms.
◦ Los microscopios electrónicos de transmisión pueden
aumentar un objeto hasta un millón de veces.
◦ El primer microscopio electrónico de transmisión fue
desarrollado entre 1931 y 1933 por Ernst Ruska y sus
colaboradores.
◦ El primer microscopio electrónico de transmisión comercial
lo construyó la compañía Siemens en 1939.

23. Microscopios Electrónicos de
Transmisión en Chile (izq.) y
Puerto Rico (der.).

24. 4.5.2Microscopio Electr4.5.2Microscopio Electrónico De Barridoónico De Barrido
(SEM).(SEM).
El microscopio electrónico de barrido o SEM
(Scanning Electron Microscopy), es un
microscopio que tiene una gran profundidad
de campo, la cual permite que se enfoque a la
vez una gran parte de la muestra.
Produce imágenes de alta resolución, que
significa que características espacialmente
cercanas en la muestra pueden ser
examinadas a una alta magnificación.
La preparación de las muestras es
relativamente fácil pues la mayoría de SEMs
sólo requieren que estas sean conductoras.

25. En el microscopio electrónico de barrido la
muestra es recubierta con una capa de metal
delgado, y es barrida con electrones enviados
desde un cañón.
Un detector mide la cantidad de electrones
enviados que arroja la intensidad de la zona
de muestra, siendo capaz de mostrar figuras
en tres dimensiones, proyectados en una
imagen de TV.
Su resolución está entre 3 y 20 nm,
dependiendo del microscopio.
Inventado en 1981 por Ernst Ruska, Gerd
Binnig y Heinrich Rohrer.

26.  Cada punto leído de la muestra corresponde a un píxel en
un monitor de televisión. Cuanto mayor sea el número de
electrones contados por el dispositivo, mayor será el brillo
del píxel en la pantalla.
 A medida que el haz de electrones barre la muestra, se
presenta toda la imagen de la misma en el monitor.
 Los microscopios electrónicos de barrido pueden ampliar
los objetos 100.000 veces o más.
 Este tipo de microscopio es muy útil porque produce
imágenes tridimensionales realistas de la superficie del
objeto.
 Son ampliamente utilizados en la biología celular.
 Este instrumento permite la observación y caracterización
superficial de materiales inorgánicos y orgánicos,
entregando información morfológica del material
analizado.

28. Gracias…Gracias…