Este documento presenta una guía práctica para realizar la prueba de tolerancia a la glucosa. Describe los materiales y procedimientos necesarios, incluyendo la toma de muestras de sangre, preparación de reactivos, y análisis en un espectrofotómetro. El propósito es medir los niveles de glucosa en la sangre en diferentes momentos para diagnosticar posibles problemas de diabetes.

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PROGRAMAS DE ESTUDIOS:
TÉCNICA EN LABORATORIO CLÍNICO Y ANATOMIA PATOLOGICA
UNIDAD DIDÁCTICA:
DETERMINACIÓN DE PERFILES BIOQUÍMICOS EN MUESTRAS BIOLÓGICAS HUMANAS II
MODULO:
BIOQUÍMICA, INMUNOLOGÍA, HEMATOLOGÍA, HEMOTERAPIA Y BANCO DE SANGRE EN
SALUD
DOCENTE:
Lic. ROGELIO MELGAR
ELABORADO POR:
 INGA DORIA, KEILA ABIGAIL
 BERNARDO APOLINARIO, CECILIA
 VALDIVIA HERRERA, JHARALY
 ROJAS VALVERDE, MIRIAM
 POMA MARTINEZ, LIZBETH
 Tucto Quijano, junior elias
AÑO:
2023
I.E.S.T.P
“APARICIO POMARES”

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GUÍA PRÁCTICA Nº 02
TOLERANCIA A LA GLUCOSA
1. PROPÓSITO:
Es medir la cantidad de glucosa en la sangre para averiguar si los niveles de azúcar en la sangre
están dentro de límites saludables. A menudo se usa para diagnosticar o vigilar la diabetes.
2. MUESTRA REQUERIDA:
 sangre venosa en tubo de tapa roja (suero).
3. MATERIALES Y REACTIVOS:
IMPLEMENTOS DE BIOSEGURIDAD (EPPS)
 Mandilón, guantes descartables, Gorra. Mascarilla quirúrgica.

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MATERIALES:
 Ligadura
 Capuchón
 Torunda y pinza
 Alcohol de 70% y agua destilada
 Tubo con tapa roja roja sin aditivo.
 Esparadrapo
 Gradilla
 Aguja vacutainer Nº 21
 Tacho para deshechos y punzocortante
 Plumón indeleble
 Campo estéril
 tubos de ensayo de 12x75 mm
 Micropipetas de 1000 y 10 ul (graduables)
 Tips de color azul y amarillo
 Reloj marcador
 Escobilla para tubos de 12 X 75.

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REACTIVO
 QCA (glucosa)
 Estándar de glucosa (concentración 100 mg/dL)
EQUIPO
CENTRIFUGA
ESPECTROFOTÓMETRO ANALIZADOR BIOQUIMICO SEMI-AUTOMATIZADO EMPEROR EMP-168.

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4. PROCEDIMIENTO:
FASE PRE ANALÍTICA
Solicitar la orden médica al paciente e indicar el procedimiento que se realizara.
 El ambiente debe ser cómodo e iluminado, para observar y realizar un buen procedimiento;
es indispensable contar con todos los materiales para la extracción.
 Rotular el tubo con el nombre del paciente.

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 Buscar una vena visible donde se realizará la punsión.
 Una vez ubicado la vena, Colocar la ligadura, para resaltar la vena, realizar la assepsia
correspondiente, con torunda empapada de alcohol de 70°.
 Enseguida colocar la aguja con el bisel hacia arriba e introducir sobre la vena, con la otra
mano colocar el tubo rojo, par realizar la extracciòn sanguinea, retirar la ligadura con la otra
mano.

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 Saca lentamente la aguja y presionar con una torunda , colocar el esparadrapo.
 Una vez terminada la extracciòn procedemos a colocar en una gradilla de manera
vertical y esperamos un lapso de 3 a 5 min para que se coagule la sangre.
 Una vez extraida la miestra se le indica al paciente que toma una botella de 500ml que
contienes 4 cucharadas de azucar y limon y agua

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 Una vez pasado el tiempo procedemos a romper fibrina, realizaremos un giro de 360º
por las paredes del tubo con la ayuda del baja lenguas partido en 3.
 Calibraremos con otro tubo similar, llevamos a la centrifugar a 3500 revoluciones por 5
minutos.
 Luego del centrifugado obtendremos el suero, colocar en la gradilla el tubo para
proseguir y analizar dicha muestra,.

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 Colocar en la gradilla 1 tubo de 12x75mm, debe estar esterilizado para cargar el reactivo
QCA y rotulado con indeleble el codigo del paciente:
 DESCONOCIDO
 Con la micropipeta y tips de color azul medir 1000 uL de reactivo y colocar en el tubo, colocar de
manera lenta y luego descartar el tips.
DESCONOCIDO
 luego adicionaremos con una micropipeta de 10 uL y tips amarillo 10 uL de muestra al tubo
de nuestro paciente.

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 Luego homogenizamos un poco y lo colocamos en la palma de la mano atemperatura corporal
por 5 min.
 Pasado los 5 min, correr la muestra preparada en el expectofotometro ya calibrado, teniendo en
cuenta el tipo de reactivo a utilisar en este caso es el de GLUCOSA QCA.
Tener en cuenta que para calibrar el espectrofotómetro se tiene que pasar con el blanco y luego
el estandar y en seguida el desconocido. Asi el equipo esta calibrado y podemos hacer las pruebas
respectivas.
Una vez teniendo en cuenta eso seleccionamos la prueba de glucosa y nos pedira: agua destilada
la cual presionaremos push y aspirarar el agua destilada.
DESCONOCIDO
RVO 1000uL
- -
- -
MUESTRA (SUERO) 10uL

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 luego de ello nos dara la opcion de pasar blanco pero como no estamos calibrando precionaremos
NO.
 Seguido a ello procedemos a pasar nuestro desconocido es este caso la muestra de nuestro
paciente.
DESCONOCIDO
Colocar el tubo de desconocido en la manguerita de aspiraciòn y precionar push.
 Aspirar la muestra en el espectofotometro obteniendo el resultado del paciente, reportar dicho
resultado.
 Realizamos el reporte de los resultados obtenidos en este caso el resultado es de 43 mg/dL la
cual nos indica que nuestro paciente esta dentro de los valores normales.
 Dejar el espectofotometro en condicion para usar en otro examen para ello se realiza un lavado
con agua destilada presionando wash.
 Para poder realizar el examen completo, tomaremos un tiempo promedio de 90 min en total;
donde realizaremos la repeticion de la extraccion de sangre y subcion de muestra en el
espectofotometro tomando de esto lectura cada 30 min ( 30, 60, 90 ).

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 Elaborar la curva en papel milimetrado colocando en las abscisa los tiempos y en las ordenada las
concentraciones en mg/dl, si la absorvancia de estándar es de 0,250.
DOSAJE TIEMPO
1ra Muestra 43 mg/dl 0 Segundos
2da Muestra 43 mg/dl 30 Minutos
3ra Muestra 83 mg/dl 60 Minutos
4to Muestra 105 mg/dl 90 Minutos
FUENTES DE ERROR:
 Tubos sucios o en mal estado y mal rotulado.
 Micropipetas mal calibradas y no sean para el uso del procedimiento
 Reactivos vencidos y en mala conservación o temperatura inadecuada
 No calibrar al momento de poner en la centrifuga y como consecuencia muestra
hemolizada.
 No haber aspirado la muestra correctamente.
 Equipo mal calibrado.
 Una mala pre analítica.
 No haber anotado los resultados
FORMA DE REPORTE:

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CONCLUSION
La prueba de tolerancia a la glucosa es un examen de laboratorio de gran utilidad para el
diagnóstico, control, prevención y tratamientode la Diabetes Mellitus y verifica la forma en que el
cuerpo metaboliza a la glucosa que constituye la fuente de energía del organismo controlada por
las vías metabólicas de glucólisis, glucogénesis, glucogenolisis y gluconeogénesis.

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CUESTIONARIO
1. Cuáles son los valores normales de la prueba de tolerancia a la glucosa?
azúcar en la sangre en ayunas
Los valores de azúcar en la sangre en ayunas de 99 mg/dl o menores son normales
Prueba de tolerancia a la glucosa
Los valores de azúcar en la sangre de 140 mg/dl o menores a las 2 horas se consideran normales, los
valores de 140 a 199 mg/dl indican que tiene prediabetes y los de 200 mg/dl o mayores indican que
tiene diabetes.
2. Por qué se realiza la prueba de tolerancia a la glucosa?
La PTGO se utiliza para buscar o diagnosticar diabetes en personas con un nivel alto de glucemia
en ayunas, pero que no es tan alto (por encima de 125 mg/dl o 7 mmol/L) como para cumplir con
los parámetros del diagnóstico de diabetes.
3. Cómo se hace la prueba de la tolerancia a la glucosa?
Antes de que el examen comience, se tomará una muestra de sangre. Luego le pedirán que tome
un líquido que contiene una cierta cantidad de glucosa (por lo regular 75 gramos). Se le tomarán
muestras de sangre nuevamente cada 30 a 60 minutos después de beber la solución. El examen
puede demorar hasta 3 horas
4. Cuantas enfermedades diagnostica la prueba de tolerancia a la glucosa?
Ayuda a los médicos a detectar la diabetes tipo 2, prediabetes y diabetes gestacional.

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REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS
https://www.niddk.nih.gov/health-information/informacion-de-la-salud/diabetes/informacion-
general/pruebas-
diagnostico#:~:text=La%20prueba%20de%20tolerancia%20oral,2%2C%20prediabetes%20y%20diabetes
%20gestacional.
https://medlineplus.gov/spanish/ency/article/003466.htm#:~:text=Antes%20de%20que%20el%20exam
en,puede%20demorar%20hasta%203%20horas.
https://diabetes.org/diagnostico
https://www.mayoclinic.org/es-es/tests-procedures/glucose-tolerance-test/about/pac-20394296
https://cnp.org.pe/wp-content/uploads/2016/12/GU%C3%8DA-ADA-2016_RESUMEN-
CLASIFICACI%C3%93N-Y-DIAGN%C3%93STICO-DE-LA-DIABETES.pdf