apuntes de laboratorio

1. “año del bicentenario de la consolidación de nuestra
independencia y de la comercialización de las heroicas
batallas de Junín y Ayacucho”
Alumno:
Nieves flores deyvis Andrés
Docente:
Marleni Esther inga Barreto
Ciclo:
V
Curso:
Perfil bioquímico

2. DETERMINACION Y ANALISIS DE LA GLICEMIA
OBJETIVO: El estudiante determina la diabetis mediante el Perfil
Glicémico, con responsabilidad y eficiencia, según el protocolo
establecido.
MUESTRA:
Suero en ayunas.
REACTIVO:
Kit para determinación de glucosa.
MATERIALES:
3 Tubos de Ensayo pequeños
1 gradilla
2 punteras azules
2 punteras amarillas
INSTRUMENTOS:
Cronometro
Micropipeta de 10 – 100 ul
Micropipeta de 100 – 1000ul
EQUIPOS:
Baño María
Espectrofotómetro

3. PROCEDIMIENTO
Un perfil de glucosa en sangre es una evaluación de los niveles de
azúcar en sangre durante un período de tiempo, generalmente unas
horas después de una comida o durante todo el día.
PREPARACIÓN DEL PACIENTE:
Antes de realizar el perfil glucémico, es importante que el paciente siga las instrucciones
específicas proporcionadas por el profesional de la salud. Esto puede incluir indicaciones
sobre la dieta y la actividad física previa a la prueba,
TOMA DE MUESTRAS:
La toma de muestras se realiza mediante una punción venosa. Se extrae una pequeña
cantidad de sangre del paciente utilizando una aguja y un tubo de recolección adecuado.
PROCESAMIENTO DE LA MUESTRA:
Después de la extracción de la sangre, las muestras se procesan para separar el suero o
plasma de los elementos celulares. Esto se puede lograr centrifugando las muestras a una
velocidad y tiempo específicos
ANÁLISIS DE LAS MUESTRAS:
Las muestras de suero o plasma se analizan para medir los niveles de glucosa en diferentes
momentos del día. Esto se puede hacer utilizando métodos de laboratorio como la
determinación enzimática de la glucosa
REGISTRO DE DATOS Y ANÁLISIS:
Se registran cuidadosamente los resultados de cada muestra tomada en diferentes
momentos del día. Los datos recopilados se analizan para evaluar cómo varían los niveles
de glucosa en sangre a lo largo del tiempo.
INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS:
Una vez completado el análisis, se interpretan los resultados en función de los rangos de
referencia establecidos y se proporciona retroalimentación al paciente sobre sus niveles
de glucosa en sangre

4. Proceso:
 Se toma una muestra de sangre, ya sea en suero o plasma, mediante una punción
venosa.
 Se preparan los reactivos necesarios para llevar a cabo la reacción enzimática.
Esto generalmente incluye un reactivo que contiene la enzima glucosa oxidasa,
que cataliza la reacción de la glucosa
 La muestra de suero o plasma se combina con el reactivo enzimático. La glucosa
en la muestra reacciona con la enzima glucosa oxidasa, produciendo peróxido de
hidrógeno y ácido glucónico como productos.
 Se mide la absorbancia de la muestra a una longitud de onda específica utilizando
un espectrofotómetro. La absorbancia es directamente proporcional a la
concentración de peróxido de hidrógeno presente, y por lo tanto, a la
concentración de glucosa
 Se utilizan las soluciones de calibración de glucosa para crear una curva de
calibración que relaciona la absorbancia con la concentración conocida de
glucosa.
 Los resultados se informan en unidades de concentración de glucosa
(generalmente miligramos por decilitro, mg/dL o milimoles por litro, mmol/L) y
se interpretan en función de los rangos de referencia establecidos
VALORES DE REFERENCIA:
Se analizaron con Glicemia enzimática, 120 muestras de individuos en ayunas,
de ambos sexos, con edades comprendidas entre 20 y 45 años, provenientes de
la ciudad de Rosario (Argentina), sin síntomas de diabetes o cualquier otra
enfermedad aparente. Se encontró que el 95% de los resultados cubrieron el
siguiente rango:
Suero o plasma: 0,70 a 1,10 g/l En la literatura (Tietz, N.W.) se menciona el
siguiente rango de referencia: Suero o plasma: 0,74 - 1,06 g/l Se recomienda
que cada laboratorio establezca sus propios valores de referencia, teniendo en
cuenta sexo, edad hábitos alimenticios y otros factores.
CONVERSION DE UNIDADES Glucosa (g/l) = Glucosa (mg/dl) x 0,01

5. Anexos
Primero preparamos todos los materiales para hacer la práctica y unas ves
que tengo el suero lo echas un tubo de recolector de suero
Luego pipeteamos el reactivo para poder echarlo en el tubo

6. Luego pasamos al baño maría por 5 minutos
Después pasaremos al analizar bioquímico para haci poder ver los
resultados
PRACTICA N° 04

7. DETERMINACION DE LA GLUCOSA POST PRANDIAL/ HB GLICOSILADA
OBJETIVO: El estudiante determina la Glucosa post prandial y la
hemoglobina glicosilada con responsabilidad y eficiencia, siguiendo los
protocolos adecuados.
MUESTRA:
Sangre venosa en tubo rojo y lila
REACTIVO:
Kit para determinación de hemoglobina glicosilada.
MATERIALES:
3 Tubos de Ensayo pequeños
1 gradilla
2 punteras azules
2 punteras amarillas
INSTRUMENTOS:
Cronometro
Micropipeta de 10 – 100 ul
Micropipeta de 100 – 1000ul
EQUIPOS:
Baño María
Espectrofotómetro
Epp para usar en el laboratorio:
Epp
Guantes
Mascarilla
Mascarilla

8. PROCEDIMIENTO:
1. Condiciones de ensayo:
Longitud de onda: 660 nm
Temperatura: 37ºC
Paso de luz de la cubeta: 1 cm 2.
2. Ajustar el espectrofotómetro a cero frente a agua destilada.
3. Pipetear en una cubeta.
R1 (µL) 360
Calibrador o muestra (µL) 10
4. Mezclar e incubar 5 minutos
5. Pipetear en la misma cubeta:
R2 (µL) 120
6. Mezclar y leer la absorbancia (A) a los 5 minutos de la adición del
Reactivo R2.
CALCULOS
Concentración HbA1c (%)
Representar la absorbancia (A) obtenida frente a las concentraciones de
HbA1c de cada Calibrador (del 1 al 4). El porcentaje de HbA1c en la muestra
se calcula por interpolación de su absorbancia (A) en la curva de calibración.
CONTROL DE CALIDAD
Se recomienda utilizar sueros control para controlar los ensayos tanto en
procedimiento manual como en automático. Spinreact dispone de sueros
control HbA1c (Ref: 43106).
Los Controles, una vez reconstituidos, precisan de un tratamiento
hemolizante antes de su uso. Cada laboratorio debería establecer su propio
Control de Calidad y establecer correcciones en el caso de que los controles
no cumplan con las tolerancias exigidas.
VALORES DE REFERENCIA11 Valores recomendados: inferior a 6% para
no-diabéticos, inferior a 7% para control glicémico de persona con diabetes.
Es recomendable que cada laboratorio establezca sus propios valores de
referencia. En el uso de Hemoglobina A1c para el control de pacientes
diabéticos, los resultados se deben interpretar individualmente. Significa que
el paciente se debe controlar frente a él mismo. Hay un intervalo de tiempo

9. de 3-4 semanas antes que Hemoglobina A1c refleje cambios en el nivel de
glucosa en sangre.
RECOMENDACIONES:
Aquí tienes algunas recomendaciones relacionadas con la glucosa
postprandial:
 Control de la ingesta de carbohidratos: Limita la ingesta de
carbohidratos simples y procesados, y opta por fuentes de
carbohidratos complejos y fibra, como granos enteros, frutas, verduras
y legumbres
 Distribución de las comidas: Distribuye las comidas a lo largo del día
de manera equilibrada, evitando comidas abundantes o excesivamente
altas en carbohidratos en una sola vez.
 Ejercicio regular: La actividad física regular puede ayudar a mejorar
la sensibilidad a la insulina y facilitar la absorción de glucosa por parte
de las células musculares.
 Monitoreo de la glucosa: Si tienes diabetes o estás en riesgo de
desarrollarla, considera realizar un seguimiento regular de tus niveles
de glucosa en sangre, incluyendo la medición de la glucosa
postprandial.
 Consulta con un profesional de la salud: Si experimentas niveles
elevados o inusuales de glucosa postprandial
 Mantén un peso saludable: El exceso de peso y la obesidad pueden
aumentar el riesgo de resistencia a la insulina y diabetes tipo 2.

10. PROCEDIMIENTO
 Explica el procedimiento al paciente y responde cualquier pregunta que pueda
tener.
 Si es necesario, asegúrate de que el paciente haya cumplido con los requisitos de
ayuno o de preparación previa al examen, según las instrucciones del médico.
 Prepara el equipo de extracción de sangre, incluyendo una jeringa o un dispositivo
de punción venosa y un tubo de extracción de sangre con anticoagulante EDTA.
 Realiza la extracción de sangre venosa según los procedimientos estándar.
 Transfiere la muestra de sangre al tubo de extracción de sangre con EDTA y
mezcla suavemente para asegurar una distribución uniforme del anticoagulante.
 Si es necesario, etiqueta el tubo de muestra con la identificación del paciente y
otra información relevante.
 Utiliza un analizador de HbA1c automatizado y específico para realizar el análisis.
Asegúrate de seguir las instrucciones del fabricante del equipo y los
procedimientos operativos estándar del laboratorio.
 Calibra el equipo según las recomendaciones del fabricante y utiliza los reactivos
y controles de calidad proporcionados.
 Una vez completado el análisis, revisa los resultados de la HbA1c obtenidos del
analizador.
 Compara los resultados con los valores de referencia establecidos y evalúa si los
niveles de HbA1c del paciente están dentro del rango deseado.
 Documenta los resultados de la HbA1c en el expediente médico del paciente y
proporciona la información al médico solicitante para su interpretación.
 Si los resultados indican niveles elevados de HbA1c, discute los hallazgos con el
paciente y considera la necesidad de cambios en el tratamiento o en el manejo de
la diabetes.

11. Anexos