Este documento describe diferentes métodos y técnicas para sembrar microorganismos, incluyendo estriado en placa de Petri, estriado para aislar colonias individuales, estriado en T y siembra en tubos de ensayo mediante estrías o punción. El objetivo es separar bacterias individuales para su cultivo y posterior identificación basada en las características de las colonias.
2. EN CAJA
• Los estudios que implican cultivos microbianos a menudo
requieren la identificación de los organismos presentes en
un cultivo. Cuando una pequeña porción de ese cultivo se
inserta en un medio nutriente que contiene agar, es posible
separar una masa de bacterias individuales en unidades
que forman colonias. Cada una de estas unidades se
desarrolla en colonias discretas que muestran
características que ayudan a identificar el organismo.
3. ESTRIADO EN CAJA.
INSTRUMENTAL.
• Placas de agar nutrientes
• Asa
• Cultivo de bacterias
• Solución desinfectante
• Mechero bunsen
• Equipo de seguridad
4. MÉTODOS Y TÉCNICAS.
• I. Estriado básico.
Se calienta el asa de inoculación hasta que quede de color
rojo intenso para eliminar cualquier microorganismo. Dejar
que se enfrié por 20 o 30 segundos. Recoge una muestra del
cultivo bacteriano. Levanta la tapa de la placa petri que vas a
sembrar en un ángulo de 45 grados, toca con el asa en el
medio y pásalo a través de la superficie de la placa con un
movimiento en forma de S desde atrás hacia adelante.
5. • II. Estriar para aislar.
Estriar para aislar implica una sola inoculación de una
sección de la placa de Petri y a continuación, disminuir la
colonia arrastrando microorganismos de la sección inicial de
dos o tres secciones adicionales, achicando eficazmente la
población de microorganismos. Generalmente utilizado para
separar un cultivo mixto de las bacterias, los bacteriólogos
también utilizan este método para aislar una línea de
bacterias que nacen de un solo progenitor.
6. •Estriado en T.
Para llevar a cabo con precisión un
estriado en T, dibuja una "T" en la parte
posterior de la placa de Petri. Voltea la
tapa de la placa hacia abajo y, con un
marcador permanente, divídela por la
mitad. A continuación, dibuja una línea
divisoria en una de las mitades para
7. ESTRIADO EN TUBO (INOCULACIÓN EN
TUBO)
• Por estrías
1. Coger el asa por el cabo, introducirla directamente en la zona de
color azul de la llama del mechero hasta que se ponga al rojo vivo.
Seguidamente se produce a introducir lentamente el resto del
alambre para lograr el mismo efecto
2. Retire el instrumento de la llama y espero de 4 a 5 seg. Con el
objetivo de que el asa enfrié
3. Con el asa estéril y fría tome el volumen o fragmento de la
muestra que será sembrado y trasládelo de inmediato para el
medio de cultivo selectivo.
8. • 4) Con la mano puesta a la que sujeta el asa tome el tubo para la
porción inferior. Con el dedo meñique de la mano que sostiene el asa
y retire del tubo del tapón de algodón a la tapa de rosca y retegola
• 5) Flamee de inmediato la boca del tubo de ensayo pasándola y o
dos veces por la llama del mechero, con el objetivo de eliminar
incineración, los microorganismo contaminantes que se encuentran
en esa zona, por la parte externa del tubo
• 6) Introduzca el asa con el volumen o fracción de la muestra en el
tubo, hasta el fondo de la cuña a partir de este punto la siembra
puede realizarse de diferentes maneras
9. ESTRIADO EN TUBOS DE ENSAYO.
Siembra en tubos de cultivo con medio sólido
• Las siembras en tubos con medio sólido, por lo general se emplean
para la conservación de un cultivo puro proveniente de una placa o
para la siembra de pruebas bioquímicas como el medio OF, SIM y
MIO. El pico del tubo. Del medio con agar se inocula primero por
punción (cuando es necesario
10. SIEMBRA POR ESTRÍAS EN SUPERFICIE:
• Se utilizan los medios de cultivo inclinados, se toma una muestra de
alguna colonia con el asa estéril y sobre la superficie del medio se
desliza ésta en forma de estrías.
11. POR PICADURA O PUNCIÓN:
• Se utilizan los medios de cultivo en un tubo solidificado en forma
inclinada y en forma recta, se toma la colonia y se introduce en el
medio picándolo longitudinalmente. Con una aguja se toma el
material que se quiere sembrar y se lo introduce en el tubo, con
medio semisólido. Introducir la aguja hasta el fondo, formando un
canal de punción, trayecto por el cual la retiraremos luego. Este
método se utiliza para estudiar la movilidad de las bacterias.
sufinalidad es estudiar la movilidad de las bacterias