un articulo científico de una practica de laboratorio de química orgánica,

1. Universidad Distrital Francisco José de Caldas
Facultad de Ciencias y Educación
Licenciatura Biología
CROMATOGRAFIA
1. Cifuentes - Vargas Erika Tatiana; 2. Gallego – Díaz Heidy Viviana; 3.Roncancio –
Castellano Adriana Katherin
2. Estudiante Licenciatura en Biología. Cód. 20122140122
3. Estudiante Licenciatura en Biología. Cód. 20122140090
4. Estudiante Licenciatura en Biología. Cód. 20122140133
RESUMEN
La espinaca es una planta muy nutritiva de color verde debido a su pigmento llamado
clorofila, ya que este le da el color a la planta y le ayuda a su fotosíntesis. En este artículo le
daremos a conocer un proceso de la cromatografía en capa fina el cual sirve para separar
mezclas complejas y la utilizaremos para separar los pigmentos de la espinaca. Tiene como
objetivo medir la proporción de sus componentes ya sea por fase estacionaria o fase móvil.
La práctica se realizó con el método de cromatografía capa fina, utilizamos una lámina
rectangular de óxido de aluminio la cual le agregamos una gota de nuestro pigmento y en un
beaker agregamos hexano 6 ml y acetona 4ml. Luego procedemos a introducir la lámina
dentro del beaker y dejamos reposar durante 45 minutos posteriormente analizamos los
pigmentes que se desplazaron y hacemos las medidas correspondientes para cada punto.
PALABRAS CLAVES: proporción, cromatografía, lámina
ABSTRACT
Spinach is very nutritious plant green because their pigment called chlorophyll, as this gives
color to the plant and helps photosynthesis. In this article we give you a process of thin layer
chromatography which is used to separate complex mixtures and use it to separate the
pigments from spinach. Aims to measure the proportion of its components either stationary
phase or mobile phase.
The practice was performed using thin layer chromatography method, we use a rectangular
sheet of aluminum oxide, which would add one drop of our pigment and a 6 ml beaker and
hexane added 4ml acetone. Then proceed to enter the film into the beaker and let rest for 45
minutes then analyze pigments that moved and do appropriate action for each point.

2. Introducción
La cromatografía es un método de
separación de los componentes de una
sustancia, cuyo nombre proviene de la
palabras griegas khromatos (color) y
graphos (escrito) “escritura a color “. Esta
técnica fue creada por el botánico ruso
Michael Tswett en 1906 y quien definió la
cromatografía como: Método en el cual los
componentes de una mezcla son separados
en una columna adsorbente dentro de un
sistema fluyente. Hoy en día la
cromatografía juega un papel muy
importante en las industrias se usa mucho
en control de calidad de medicamentos,
materias primas y principios activos de uso
farmacéutico. También se aplica para
separar uno o varios compuestos
particulares de extractos vegetales que
poseen muchos compuestos.
Marco teórico
Cromatografía
Es el método utilizado principalmente
para la separación de componentes de
una sustancia, en el cual los
componentes son distribuidos en dos
fases una estacionaria y otra móvil. La
separación entre dos sustancias empieza
cuando una es retenida más fuertemente
por la fase estacionaria que la otra, que
tiende a desplazarse más rápidamente en
la fase móvil esto se logra porque la
movilidad de cada soluto depende de un
equilibrio en la distribución entre la fase móvil
y la estacionaria, y esta separación se puede
realizar en función de sus cargas, masas,
tamaños moleculares, la polaridad de sus
enlaces etc.
Michael Tswett (1872-1913)
Inicios de la cromatografía:
Tswett llevó a cabo una extracción de una
mezcla de pigmentos de hojas verdes
utilizando éter de petróleo, un disolvente
no polar, y descubrió que era capaz de separar
lospigmentos alhacerpasarelextracto através
de una columna, un tubo de vidrio rellenado
con
carbonato de calcio (tiza).Tswett utilizó como
detector del experimento la simple
observación,ya queloscompuestos queseparó
tenían color y era posible detectar bandas o
zonas de distintas materias por su color en la
columna, demostrando que la clorofila es solo
uno de los muchos pigmentos que se
encuentranenlashojasdelasplantas.
Cromatografía en capa fina.
Es una técnica rápida y sencilla que
tiene como fin separa mezclas de
sustancias y poder identificar o
determinar semi cuantitativamente los
componentes individuales de la
sustancia, fue originada por los trabajos
de los investigadores rusos Izmailov y
Schraiberen en 1938 al separar mezclas
de tinturas farmacéuticas. La separación
de sustancias de una sustancia bajo este
método consiste en que las sustancias se
reparten de una forma diferencial en una
fase estacionaria y una fase móvil, la
fase estacionaria se extiende sobre un
soporte inerte, en la fase móvil el
eluyente se desplaza por la capa fina
(soporte inerte). La separación se realiza
generalmente en forma ascendente
introduciendo el borde interior de la
placa cromatografía en el solvente.
RF
La constante física de un compuesto que
mide la velocidad en que se diluye, RF
(Ratio of Front) es simplemente una

3. manera de expresar la posición de un
compuesto sobre una placa como una
fracción decimal, mide la retención de un
componente. Se define como: RF=
Distancia de la muestra desde el
origen/Distancia del eluyente desde el
origen
Materiales y Métodos
Para la realización de la cromatografía de
capa fina es necesario:
 Placa cromatografica
 Reloj de vidrio
 Vaso de vidrio
 Capilar
 Una eluyente apolar
 Pigmento de espinaca
Lo primero que se debe realizar es la
siembra e la muestra para lo cual debes:
1 Trazar una línea a 1cm del pie de la
placa y marcar sobre esa línea la
mitad. figura (1.1)
2 Vertir la muestra sobre el reloj de
vidrio y con un capilar se siembra
en el punto que anteriormente se
trazo.
Lo anterior se conoce como fase
estacionaria.
3 Se realiza una mezcla de 6ml de
hexano y 4 de acetona, se deposita
en el vaso de vidrio
4 Se pone la placa cromatografica en
el vaso. Figura (1.2)
Esta es la fase móvil, por diferencia de
polaridades se separara los pigmentos.
1.1 1.2
Resultados y análisis
Después de realizada la cromatografía
se obtuvo lo siguiente:
El eluyente recorrió una distancia, desde
del punto de inicio, de 5cm, en esta
distancia podemos observar cinco puntos,
es decir, cinco pigmentos diferentes
presentes en la espinaca; el primero se
encuentra a una distancia de 3,1cm, el
segundo a 3,7cm, el tercero a 3,9cm, el
cuarto a 4,1cm y el quinto a 4,9cm del
punto de inicio. Figura (2.1)
D
D1 d2 d3 d4 d5
2.1
D = 5cm
- d1= 3,1cm
- d2 = 3,7cm
- d3 = 3,9cm
- d4 = 4,1cm
- d5 = 4,9cm
Procedemos a hallar el RF de la espinaca. El
RF es la (distancia recorrida por el
compuesto) dividido (distancia recorrida
por el eluyente).
RF= dD

4. El valor RF depende de la estructuras de un
compuesto y es una constante física de
este, que indica la velocidad del flujo para
cada pigmento.
RF = 3,1 5 = 0,62mm
RF = 3,7 5 = 0,74mm
RF = 3,9 5 = 0,78mm
RF = 4,1 5 = 0,82mm
RF = 4,9 5 = 0,98mm
Conclusiones
• Se puede concluir que el
experimento es valido ya que los
RF están por debajo de 1cm.
• La espinaca posee varios
pigmentos en los que se puede
reconocer, según el color, los
carotenos y la clorofila.
• Gracias al método de
cromatografía en capa fina
podemos observar los diferentes
pigmentos que tiene la espinaca y
así saber su cantidad.
Bibliografía
Ballesteros, P y otros; curso experimental
de química orgánica; UNED, 1989.
Brewster, RQ y otros; curso de química
orgánica experimental; Ed. Alhambra,
1978.
http://www.textoscientificos.com/quimica
/cromatografia
http://es.scribd.com/doc/19050563/Crom
atografia-Principios-y-Aplicaciones