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INTRODUCCIÓN



Las membranas confieren a las células su individualidad al separarlas de las demás y de su medio
circundante y les permiten regular la entrada y salida de solutos como iones, gases, nutrientes,
desechos, etc. dependiendo las necesidades de la célula para mantener su homeostasis y volumen
para esto deben encontrarse en estado fluido; están constituidas por una bicapa lipídica, en la cual
se insertan proteínas en proporción variable que pueden ser periféricas o integrales, también
hidratos de carbono asociados a lípidos o proteínas, siempre orientados hacia la fase externa. El
transporte de solutos a través de la membrana depende de varios factores tales como su
polaridad, tamaño y su carga, las sustancias apolares difunden a través los lípidos, los iones no
atraviezan los lípidos. Existen diferentes tipos de transporte, los cuales son:



Transporte activo: proteínas mediadores que facilitan el paso, éste utiliza energía metabólica, va
en contra de un gradiente de concentración, es saturable, es veloz, y con especificidad química



Transporte pasivo: éste utiliza poca energía, va a favor de un gradiente de concentración, no
necesita de acarreadores, no se satura, es poco veloz y no es específico.

Difusión simple: sigue la ley de Fick, y depende del coeficiente de partición que es la relación de
solubilidad en aceite con respecto a agua de una sustancia, si es mayor tiene mayor velocidad de
difusión.

Difusión facilitada; las proteínas forman canales llenos de agua por donde pueden pasar sustancias
polares o cargadas eléctricamente que no atraviesan la capa de fosfolípidos.



Ósmosis: paso del agua hacia donde hay mayor concentración de solutos por medio de acuaporias;
sigue la expresión de Van´t Hoff para determinar la presión osmótica y que se expresa en osmoles.
La presión osmótica es la que se genera por la atracción del agua hacia los iones en la solución.
p = GCRT G:partículas osmoticamente activas, C: concentración molar, R:cte de los gases ideales
0.082 Latm/molK, T:temperatura absoluta (37º C = 310.15K)

- Transporte en masa: Por medio de la formación de vesículas; Endocitosis, Fagocitosis, Pinocitosis,
Exocitosis



    Esquema de una membrana celular, según el modelo del mosaico fluido.
1.



OBJETIVOS:



  • Conocer el fenómeno de la hemólisis por medio de una serie de experimentos.



  • Calcular la osmolaridad de las diferentes sustancias empleadas.



  • Observar el comportamiento de nuestros datos a través de una gráfica.



MATERIALES:



Material biológico:



  • Sangre (5 gotas)



Cristalería, instrumental y equipo:



  • 2 pipetas Pasteur



  • 3 pipetas graduadas de 1, 2 y 5 mililitros.



  • 25 tubos de ensayo



  • 1 gradilla
Soluciones:



  • NaCl 0.15 M



  • CaCl2 0.15 M



  • Sacarosa 0.15 M



  • Glicerol 0.3 M



  • Alcohol metílico 0.3 M



  • Alcohol etílico 0.3 M



  • Alcohol propílico 0.3 M



  • Agua destilada



RESULTADOS



Observación de la hemólisis



Al agregar en los dos tubos de ensayo 5 gotas de la suspensión de glóbulos rojos y 5 ml de suero
salino y 5 ml de agua destilada respectivamente, las 2 soluciones obtuvieron un aspecto turbio y se
observo que el tubo de la solución de glóbulos rojos con agua destilada se volvió cristalina; lo cual
indica que la hemolisis ocurrió primero en éste tubo.
Ahora bien, sabemos que el proceso de osmosis es un transporte pasivo, mediante el cual, un
disolvente - el agua en el caso de los sistemas biológicos - pasa selectivamente a través de una
membrana semi-permeable y si la concentración de agua es mayor (o lo que es lo mismo la
concentración de solutos menor) de un lado de la membrana es mayor que la del otro lado, existe
una tendencia a que el agua pase al lado donde su concentración es menor. En este caso
observamos que en el tubo que tenía suspensión de glóbulos rojos y agua destilada donde la
concentración de agua es mayor, el agua atrviesa la membrana semi-permeable con lo que los
eritrocitos se hinchan y estallan, a lo cual se le conoce como hemolisis.



La imagen de la izquierda representa el tubo de ensayo con NaCl y la solución de globulos rojos
después de haber transcurrido 23 sgundos; la imagen de la derecha representa el tubo de ensayo
con agua destilada y con la suspensión de globulos rojos.



Actividad osmótica de sustancias no difusibles.



Tabla #1.1



|NaCl     |ml de NaCl 0.15 M           |ml de H2O destilada         |Concentración final
|Osmolaridad        |

|1        |5                 |0                   |.15           |289.599 mOsmol            |

|2        |4                 |1                   |.12           |231.679 mOsmol           |

|3        |3                 |2                   |.09           |173.759 mOsmol            |

|4        |2                 |3                   |.06           |115.839 mOsmol           |

|5        |1                 |4                   |.03           |57.9198 mOsmol            |



En los 5 tubos de NaCl observamos que la hemolisis ocurrio primero en el tubo # 5, y en los demás
tubos la hemolisis tardo más, lo cual tiene una explicación si observamos la siguiente tabla la cual
expone que tipo de solución corresponde a cada tubo. Con la siguiente tabla podenos explicar y
sustentar que la hemólisis ocurrio primero en el tubo 5, ya que la solución es hipotónica, lo cual
nos indica que la concentración de soluto es baja y dado que la membrana celular es semi-
permeable, sólo el agua puede atravesarla; al ser la concentración de agua mayor en la solución
hipotónica, el agua entra en el hematíe con lo que este se hincha, pudiendo eventualmente
estallar (este fenómeno se conoce con el nombre de hemolisis.



|NaCl                |Concentración final     |Cálculos            |Resultados           |Tipo de
solución        |

|1                  |.15            |.15x2x1000           |300              |Isotónica              |

|2                  |.12            |.12x2x1000           |240              |Hipotónica                 |

|3                  |.09            |.09x2x1000           |180              |Hipotónica                 |

|4                  |.06            |.06x2x1000           |120              |Hipotónica                 |

|5                  |.03            |.03x2x1000           |60               |Hipotónica             |



Tabla# 1.2



|CaCl2     |ml de CaCl2 0.15 M              |ml de H2O destilada        |Concentración final
|Osmolaridad         |

|1         |5                  |0                  |.15              |418.309mOsmol            |

|2         |4                  |1                  |.12              |334.647 mOsmol           |

|3         |3                  |2                  |.09              |250.985 mOsmol           |

|4         |2                  |3                  |.06              |167.323 mOsmol           |

|5         |1                  |4                  |.03              |83.6619 mOsmol           |



En los 5 tubos de CaCl2 observamos que la hemolisis ocurrio primero en el tubo # 5, y en los
demás tubos la hemolisis tardo más, lo cual tiene una explicación si observamos la siguiente tabla
la cual expone que tipo de solución corresponde a cada tubo. Con la siguiente tabla podenos
explicar y sustentar que la hemilisis ocurrio primero en el tubo 5, ya que la solución es hopotónica
lo cual nos indica que a concentración de agua es más alta lo cual explica que una celula en un
ambiente hipotonico se hincha con el agua y explota, a lo cual se le denomina hemolisis. Ahora
bien, observando la siguiente tabla podemos darnos cuenta de que la henolisis solo se podra dar
en los tubos 3, 4 y 5 porqué las soluciones de los estos tubos son hipotónicas.
|CaCl2                 |Concentración final    |Cálculos           |Resultados        |Tipo de
solución         |

|1                   |.15             |.15x3x1000           |480            |Hipertónica             |

|2                   |.12             |.12x3x1000           |360            |Hipertónica             |

|3                   |.09             |.09x3x1000           |270            |Hipotónica              |

|4                   |.06             |.06x3x1000           |180            |Hipotónica              |

|5                   |.03             |.03x3x1000           |90            |Hipotónica             |



Tabla# 1.3



|Sacarosa   |ml de Sacarosa 0.15 M             |ml de H2O destilada        |Concentración final
|Osmolaridad         |

|1          |5                   |0                 |.15            |160.888mOsmol             |

|2          |4                   |1                 |.12            |128.710 mOsmol            |

|3          |3                   |2                 |.09            |96.5330 mOsmol            |

|4          |2                   |3                 |.06            |64.3553 mOsmol            |

|5          |1                   |4                 |.03            |32.1776 mOsmol            |



En los 5 tubos de sacarosa observamos la hemolisis en los tubos 4 y 5, lo cual tiene una explicación
al observar la siguiente tabla la cual expone que tipo de solución corresponde a cada tubo, al
observar la siguiente tabla podemos darnos cuenta de que todos los tubos de sacarosa son
soluciones Hipotónicas lo cual nos indica que a concentración de agua es más alta lo cual explica
que una celula en un ambiente hipotonico se hincha con el agua y explota, a lo cual se le
denomina hemolisis.



|Sacarosa               |Concentración final    |Cálculos           |Resultados           |Tipo de
solución         |

|1                   |.105            |.15x1x1000           |150             |Hipotónica               |
|2                  |.12     |.12x1x1000   |120   |Hipotónica   |

|3                  |.09     |.09x1x1000   |90    |Hipotónica   |

|4                  |.06     |.06x1x1000   |60    |Hipotónica   |

|5                  |.03     |.03x1x1000   |30    |Hipotónica   |



Cálculos para la tabla 1.1



TUBO #1



[pic]



6.48702     X



22.4ATM      1 Osmol



π ’ 0.289599 Οsmol



[pic]



TUBO #2



[pic]



5.189616        X



22.4ATM      1 Osmol
[pic]



[pic]



TUBO #3



[pic]



3.892212    X



22.4ATM    1 Osmol



[pic]



[pic]



TUBO #4



[pic]



2.594808    X



22.4ATM    1 Osmol



[pic]
[pic]



TUBO#5



[pic]



1.297404        X



22.4ATM        1 Osmol



[pic]



[pic]



Cálculos para la tabla 1.2



TUBO #1



[pic]



9.37014    X



22.4ATM        1 Osmol



[pic]
[pic]



TUBO #2



[pic]



7.496112    X



22.4ATM    1 Osmol



[pic]



[pic]



TUBO #3



[pic]



5.622084    X



22.4ATM    1 Osmol



[pic]



[pic]
TUBO #4



[pic]



3.748056       X



22.4ATM      1 Osmol



[pic]



[pic]



TUBO#5



[pic]



1.874028       X



22.4ATM      1 Osmol



[pic]



[pic]



Cálculos para la tabla 1.3
TUBO #1



[pic]



3.6039    X



22.4ATM       1 Osmol



[pic]



[pic]



TUBO #2



[pic]



2.88312       X



22.4ATM       1 Osmol



[pic]



[pic]



TUBO #3
[pic]



2.16234     X



22.4ATM   1 Osmol



[pic]



[pic]



TUBO #4



[pic]



1.44156     X



22.4ATM   1 Osmol



[pic]



[pic]



TUBO#5



[pic]
.72078          X



22.4ATM      1 Osmol



[pic]



[pic]



Actividad de sustancias difusibles.



Al colocar 5 ml de cada una de las soluciones (glicerol 0.3 M y sacarosa 0.3 M) en diferentes tubos
de ensayo y se añadió a cada uno 5 gotas de la suspensión de glóbulos rojos se observo que noto
la hemólisis fue mas lenta ya que algunas moléculas son demasiado grandes como para difundir a
través de los canales de la membrana y demasiado insolubles en lípidos como para poder difundir
a través de la capa de fosfolípidos. Tal es el caso de la glucosa y algunos otros monosacáridos.
Estas sustancias, pueden sin embargo cruzar la membrana plasmática mediante el proceso de
difusión facilitada, con la ayuda de una proteína transportadora.



 En el primer paso, la glucosa se une a la proteína transportadora, y esta cambia de forma,
permitiendo el paso del azúcar. Tan pronto como la glucosa llega al citoplasma, una kinasa (enzima
que añade un grupo fosfato a un azúcar) transforma la glucosa en glucosa-6-fosfato. De esta
forma, las concentraciones de glucosa en el interior de la célula son siempre muy bajas, y el
gradiente de concentración del exterior al interior favorece la difusión de la glucosa.



En el tubo de glicerol la hemólisis fue mas rápida, pues tardo 6 minutos y 30 segundos en que se
diera la hemolisisy el tubo con sacarosa despues de ahber transcurrido casi 10 minutos aun no
ocurria la hemolisis, ya que su coeficiente de partición del glicerol es menor y su gradiante de
concentración también es mínimo.



Velocidad de difusión
Al colocar 5 ml de alcohol metílico, alcohol etílico y de alcohol propílico y 5 gotas de la suspensión
de glóbulos rojos en tres tubos de ensayo respectivamente se observo como cambio rápidamente
la suspensión de turbia a cristalina. En la siguiente tabla se observa el tiempo que tardo cada uno
de los tubos en cambiar de turbia a transparente, dado a que la velocidad a la que atraviesa la
membrana celular aumenta mientras mayor sea el peso molecular y la longitud de la cadena de
átomos de carbono de la sustancia, lo cual lo podemos comprobar observando la siguiente tabla y
las estructuras de los alcholes empleados, ya que si observamos el efecto se observo primero en
el alcohol metilico que si lo comparamos con los otrops 2 alcoholes tiene menor peso molecular y
la longitud de átomos de carbono es menor.



|# de tubo                                           |Tiempo                            |

|#1 Alcohol metílico                                      |3 s                             |

|#2 Alcohol etílico                                      |5 s                          |

|#3 Alcohol propílico                                     |8 s                             |



     Alcohol metílico                          Alcohol etílico



|      |     |H       |        |                 |

|      |     ||       |        |                |

|H      |-    |C          |-       |(OH)             |

|      |     ||       |        |                |

|      |     |H       |        |                 |

|    | |H     | |H         | |             |

|    | ||     | ||        | |              |

|H    |- |C       |- |C        |- |(OH)         |

|    | ||     | ||         | |             |

|    | |H     | |H         | |             |
Alcohol propílico



HHHH||||H-C-C-C-C-(OH)||||HHHH



[pic]



La grafica anterior representa la velocidad del alcohol metílico, alcohol etílico y del alcohol
propílico utilizando como variables el tiempo y el coeficiente de partición.



CUESTIONARIO



1.Mencione los diferentes mecanismos por los que puede pasar una sustancia a través de la
membrana celular.



UltraFiltración

UltraFiltración es el movimiento de agua y moléculas disueltas a través de la membrana debido a
la presión hidrostática generada por el sistema cardiovascular.

Dependiendo del tamaño de los poros de la membrana, sólo los solutos con un determinado
tamaño pueden pasar a través de la membrana. Por ejemplo, los poros de la membrana de la
cápsula de Bowman en los glomérulos renales, son muy pequeños, y sólo la albúmina la más
pequeña de las proteínas, tienen la capacidad de ser filtrada a través de ella.

Por otra parte, los poros de las membranas de los hepaticitos son extremadamente grandes, por lo
que una gran variedad de solutos pueden atravesarla y ser metabolizados.



Difusión simple

Difusión simple Las moléculas en solución están dotadas de energía cinética y, por tanto tienen
movimientos que se realizan al azar.
La difusión consiste en la mezcla de estas moléculas debido a su energía cinética cuando existe un
gradiente de concentración, es decir cuando en una parte de la solución la concentración de las
moléculas es más elevada.

 La difusión tiene lugar hasta que la concentración se iguala en todas las partes y será tanto más
rápida cuanto mayor sea energía cinética (que depende de la temperatura) y el gradiente de
concentración y cuanto menor sea el tamaño de las moléculas.

Osmosis

Es un transporte pasivo, mediante el cual, un disolvente - el agua en el caso de los sistemas
biológicos - pasa selectivamente a través de una membrana semi-permeable

. La membrana de las células es una membrana semi-permeable ya que permite el paso del agua
por difusión pero no la de iones y otros materiales.

Si la concentración de agua es mayor (o lo que es lo mismo la concentración de solutos menor) de
un lado de la membrana es mayor que la del otro lado, existe una tendencia a que el agua pase al
lado donde su concentración es menor.



El movimiento del agua a través de la membrana semi-permeable genera un presión hidrostática
llamada presión osmótica.

La presión osmótica es la presión necesaria para prevenir el movimiento neto del agua a través de
una membrana semi-permeable que separa dos soluciones de diferentes concentraciones.

La ósmosis puede entenderse muy bien considerando el efecto de las diferentes concentraciones
de agua sobre la forma de las células. Para mantener la forma de un célula, por ejemplo un
hematíe, esta debe estar rodeada de una solución isotónica, lo que quiere decir que la
concentración de agua de esta solución es la misma que la del interior de la célula.

Difusión facilitada

Algunas moléculas son demasiado grandes como para difundir a través de los canales de la
membrana y demasiado insolubles en lípidos como para poder difundir a través de la capa de
fosfolípidos. Tal es el caso de la glucosa y algunos otros monosacáridos.

Esta sustancias, pueden sin embargo cruzar la membrana plasmática mediante el proceso de
difusión facilitada, con la ayuda de una proteina transportadora.

En el primer paso, la glucosa se une a la proteína transportadora, y esta cambia de forma,
permitiendo el paso del azúcar. Tan pronto como la glucosa llega al citoplasma, una kinasa (enzima
que añade un grupo fosfato a un azúcar) transforma la glucosa en glucosa-6-fosfato. De esta
forma, las concentraciones de glucosa en el interior de la célula son siempre muy bajas, y el
gradiente de concentración exterior --> interior favorece la difusión de la glucosa.



La difusión facilitada es mucho más rápida que la difusión simple y depende:

del gradiente de concentración de la sustancia a ambos lados de la membrana

del número de proteínas transportadoras existentes en la membrana

de la rápidez con que estas proteínas hacen su trabajo

Transporte activo

El transporte activo requiere un gasto de energía para transportar la molécula de un lado al otro
de la membrana, pero el transporte activo es el único que puede transportar moléculas contra un
gradiente de concentración, al igual que la difusión facilitada, el transporte activo esta limitado
por el numero de proteínas transportadoras presentes.



Son de interés dos grandes categorías de transporte activo:

primario y secundario.

El transporte activo primario

El transporte activo primario usa energía

(generalmente obtenida de la hidrólisis de ATP),

a nivel de la misma proteína de membrana produciendo un cambio conformacional que resulta en
el transporte de una molécula a través de la proteína.



El ejemplo mas conocido es la bomba de Na+/K+.

La bomba de Na+/K+ realiza un contratransporte("antiporte")

transporta K+ al interior de la célula y Na+ al exterior de la misma, al mismo tiempo, gastando en
el proceso ATP.



El transporte activo secundario
Utiliza la energía para establecer un gradiente a través de la membrana celular, y luego utiliza ese
gradiente para transportar una molécula de interés contra su gradiente de concentración.

Un ejemplo de ese mecanismo es el siguiente:

Escherichia coli establece un gradiente de protones (H+) entre ambos lados de la membrana
utilizando energía para bombear protones afuera de la célula.

Luego estos protones se acoplan a la lactosa a nivel de la lactosa-permeasa (otra proteína de
transmembrana), la lactosa permeasa usa la energía del protón moviéndose a favor de su
gradiente de concentración para transportar la lactosa dentro de la célula.

Este transporte acoplado en la misma dirección a través de la membrana celular se denomina
cotransporte (“simporte”). Escherichia coli utiliza este tipo de mecanismo para transportar otros
azucares tales como ribosa y arabinosa, como así también numerosos aminoácidos.



2. ¿Por qué cuando hay hemólisis la solución de glóbulos rojos pasa de turbia a transparente?



Cuando la solución se encuentra turbia, es debido a que los glóbulos rojos (eritrocitos) aun se
encuentran aglomerados y en su forma de discos bicóncavos conteniendo hemoglobina, pero al
ocurrir la hemólisis, estos se hinchan adquiriendo una apariencia esférica en vez del discoidal y
eventualmente pierden su hemoglobina. A su vez, la hemoglobina de los eritrocitos hemolizados
se disuelve en la solución tiñéndola de rojo.

3. Razone las causas por la que diferentes sustancias no difusibles requieren de diferentes
concentraciones para producir el mismo efecto osmótico.



Debido a la osmolaridad de las sustancias fuera y dentro de la célula, es decir que, a mayor
diferencia de osmolaridad entre los medios intra y extracelular, se tendrá un efecto osmótico mas
notable que cuando se tiene una diferencia de osmolaridad extra-inter celular menor.



Otra razón a la que se debe este efecto es a la presión osmótica que presenta una solución con
respecto al medio interno de la célula, teniendo que a una menor presión osmótica el efecto
osmótico será menor y será del exterior al interior; se dará en mayor proporción cuando exista
una presión osmótica mayor y será del interior al exterior.
4. Si tuviéramos soluciones de Mg2SO4, CaCl2 y glucosa con la misma concentración, ¿cuál será la
más rápida y cuál la más lenta para producir la hemólisis?



La solución de sulfato de magnesio será la más rápida en producir la hemólisis, debido a que su
osmolaridad es mucho mayo adentro de la célula que fuera de ella, y por tanto esta solución haría
que la célula absorbiera una cantidad de agua en menor tiempo. Y la que produciría la hemólisis
en mayor tiempo sería la glucosa, ya que la osmolarida en el medio extracelular es muy parecida a
la osmolaridad del medio intracelular, por lo que el efecto de osmosis se lleva a cabo en menor
tiempo y en menor proporción.



5. ¿Cuál es la diferencia entre isoosmoticidad e isotonicidad?



La isotonicidad se refiere a que la osmolalidad de las sustancias con respecto a la osmolalidad en
el interior de la célula es la misma. Mientras que la isoosmoticidad nos indica una igualdad en
cuanto a la presión osmótica del medio intracelular y la presión osmótica de la solución que se
encuentra en el medio extracelular.



Analisis de resultados.



En la práctica pudimos aprender a diferenciar cual era una solución Isotonica, Hipotónica e
Hipertónica observando los efectos que producían al mezclar 2 sustancias, como también por
medio de calculos podíamos saber que soluciones podrían presenciar el efecto de la hemolisis,
pero en la parte de la práctica de actividad osmótica de sustanvias no difusibles en los tubos de
sacarosa solo pudimos observar el fenomeno de la hemolisis en los tubos 4 y 5 .



Ahora bien, observando los calculos podemos percatarnos de que todos los tubos tenían
soluciones hipotonicas, por lo que se esperaba que ocurriera el efecto en todos tubos.



Se observaron los tubos periodicamente donde no se aprecio el efecto, pero por falta de tiempo
no pudimos percatarnos de cuanto tiempo más se tardaron en que ocurriera la hemolisis.
En la parte de Velocidad de difusión, se pudieron haber cometido errores ya que los efectos se
producían mu y rapido; es muy probable que se cometieran errores de tipo accidentales.



Conclusiones

Cuando se pone en contacto una solución con un solvente a través de la membrana
semipermeable que deja pasar moléculas de solvente pero no de solutos, las moléculas del
solvente que están en mayor concentración en el disolvente puro difunden hacia la solución
donde su concentración es mas pequeña por esta razón la presión osmótica depende del numero
de partículas activas como su unidad lo dice los osmoles son el numero de partículas activas en
una solución.



Por lo tanto la presión osmótica no depende de la concentración, la presión osmótica depende de
la cantidad de sustancias activas.



Referencias:

Ambrose, Edmund Jack; Biologia celular. Madrid : Alhambra, 1977; pg 313-319.

Best y Taylor; Bases fisiologicas de la practica medica; editorial: Panamericana; 12ª edición; pgs 31-
45.

Manual de practicas de fisiologia; departamento de biologia.

William F. Ganong; Fisiologia medica; 19ª edición; pg 34,35.

http://faa.unse.edu.ar/document/apuntes/biol/Permembr.pdf

http://www.biologia.edu.ar/cel_euca/transporte.htm

http://www.efn.uncor.edu/dep/biologia/intrbiol/membranas/transpor.htm

http://www.iqb.es/cbasicas/farma/farma01/sec01/c1_002.htm

-----------------------

|Mora Pérez Jose Luis obtuvo 5 gotas de |ml de NaCl 0.15 M                     |ml de H2O destilada
|

|sangre de Manuel Eduardo, las cuales se |                            |                         |

|pusieron en un tubo de ensayo y se les    |                         |                         |
|adiciono 5 ml de suero salino (NaCl 0.15 |                                       |                                   |

|M), se mezclaron con suavidad y se          |                            |                                   |

|conservo durante toda la práctica.          |                            |                                   |

|Se Añidieron 5 gotas de la suspensión           |                            |                                   |

|inicial a dos tubos de ensayo con 5 ml de |                                      |                                   |

|suero salino (NaCl 0.15 M) y 5 ml de agua |                                      |                                   |

|destilada, respectivsamente.            |                            |                                   |

|Se observo y detecto en cuál de los tubos |                                      |                                   |

|se produjo la hemólisis.            |                            |                                   |

|                           |                        |                                    |

|                           |                        |                                    |

|Observación de la hemólisis             |                            |                                   |

|                           |                        |                                    |

|                           |                        |                                    |

|Actividad osmótica de sustancias no             |                            |                                   |

|difusibles.                     |                            |                                   |

|                           |                        |                                    |

|                           |                        |                                    |

|De acuerdo con la siguiente tabla se        |                            |                                   |

|marcaron 5 tubos de ensayo con las              |                            |                                   |

|concentraciones correctas para el suero |                                        |                                   |

|salino (NaCl).Se mezclaron con suavidad y |                                          |                                   |

|realizaron las observaciones necesarias. |                                   |                                   |

|# de tubo de ensayo                 |                            |                                   |

|1                          |5                           |0                                   |

|2                          |4                           |1                                   |
|3                       |3                           |2                       |

|4                       |2                           |3                       |

|5                       |1                           |4                       |



 1. Actividad osmótica de sustancias no difusibles.



 De acuerdo con la siguiente tabla se marcaron 5 tubos de ensayo con las concentraciones
correctas para Cloruro de calcio (caCl2).Se mezclaron con suavidad y realizaron las observaciones
necesarias.



|# de tubo de ensayo              |ml de CaCl2 0.15 M                |ml de H2O destilada
|

|1                       |5                           |0                       |

|2                       |4                           |1                       |

|3                       |3                           |2                       |

|4                       |2                           |3                       |

|5                       |1                           |4                       |



 De acuerdo con la siguiente tabla se marcaron 5 tubos de ensayo con las concentraciones
correctas para la sacarosa.Se mezclaron con suavidad y realizaron las observaciones necesarias.



|# de tubo de ensayo              |ml de CaCl2 0.15 M               |ml de H2O destilada
|

|1                       |5                       |0                       |

|2                       |4                       |1                       |

|3                       |3                       |2                       |

|4                       |2                       |3                       |
|5                       |1                        |4                       |



 2. Actividad osmótica de sustancias no difusibles.



 3. Actividad osmótica de sustancias difusibles.



Se colocaron 5 ml de cada una de las soluciones (glicerol 0.3 M y sacarosa 0.3 M) en diferentes
tubos de ensayo y añada a cada uno 5 gotas de la suspensión de glóbulos rojos. Se mezcló
suavemente y se observó.



 4. Velocidad de difusión.



Se colocaron 5 ml de alcohol metílico CH3OH en un tubo de ensayo y se agregaron 5gotas de la
suspensión de glóbulos rojos. Se mezclo y se observaron los efectos midiendo el tiempo, en
segundos, en que se produjo la hemólisis total.



Se colocaron 5 ml de alcohol etílico CH3-CH2OH en un tubo de ensayo y se agregaron 5 gotas de la
suspensión de glóbulos rojos. Se mezclo y se observaron los efectos midiendo el tiempo, en
segundos, en que se produjo la hemólisis total.



Se colocaron 5 ml de alcohol propílico CH3-CH2-CH2-OH en un tubo de ensayo y se agregaron 5
gotas de la suspensión de glóbulos rojos. Se mezclo y observaron los efectos midiendo el tiempo,
en segundos, en que se produjo la hemólisis total.



TRANSPORTEE



  • Transporte activo primario: Bomba de sodio y potasio



  • Transporte activo secundario o cotransporte
• Transporte de macromoléculas o partículas:



  o Exocitosis



  o Endocitosis



  • Transporte intracelular



  • Difusión simple



  • Osmosis



  • Ultrafiltración



  • Difusión facilitada



Movimento de lmoléculas a tráves de proteínas transportadoras



Ingreso o salida de sustancias a tráves de la membrana celular



PASIVO



ACTIVO



-----------------------
hˆûhºs9CJ ^J*?+aJ #hˆûhºs9PJmH



nH



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uhÉËhºs96?CJ]?aJhÉËhºs96?CJaJ.hÉËhºs96?CJPJaJmH



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  • 1. INTRODUCCIÓN Las membranas confieren a las células su individualidad al separarlas de las demás y de su medio circundante y les permiten regular la entrada y salida de solutos como iones, gases, nutrientes, desechos, etc. dependiendo las necesidades de la célula para mantener su homeostasis y volumen para esto deben encontrarse en estado fluido; están constituidas por una bicapa lipídica, en la cual se insertan proteínas en proporción variable que pueden ser periféricas o integrales, también hidratos de carbono asociados a lípidos o proteínas, siempre orientados hacia la fase externa. El transporte de solutos a través de la membrana depende de varios factores tales como su polaridad, tamaño y su carga, las sustancias apolares difunden a través los lípidos, los iones no atraviezan los lípidos. Existen diferentes tipos de transporte, los cuales son: Transporte activo: proteínas mediadores que facilitan el paso, éste utiliza energía metabólica, va en contra de un gradiente de concentración, es saturable, es veloz, y con especificidad química Transporte pasivo: éste utiliza poca energía, va a favor de un gradiente de concentración, no necesita de acarreadores, no se satura, es poco veloz y no es específico. Difusión simple: sigue la ley de Fick, y depende del coeficiente de partición que es la relación de solubilidad en aceite con respecto a agua de una sustancia, si es mayor tiene mayor velocidad de difusión. Difusión facilitada; las proteínas forman canales llenos de agua por donde pueden pasar sustancias polares o cargadas eléctricamente que no atraviesan la capa de fosfolípidos. Ósmosis: paso del agua hacia donde hay mayor concentración de solutos por medio de acuaporias; sigue la expresión de Van´t Hoff para determinar la presión osmótica y que se expresa en osmoles. La presión osmótica es la que se genera por la atracción del agua hacia los iones en la solución. p = GCRT G:partículas osmoticamente activas, C: concentración molar, R:cte de los gases ideales 0.082 Latm/molK, T:temperatura absoluta (37º C = 310.15K) - Transporte en masa: Por medio de la formación de vesículas; Endocitosis, Fagocitosis, Pinocitosis, Exocitosis Esquema de una membrana celular, según el modelo del mosaico fluido.
  • 2. 1. OBJETIVOS: • Conocer el fenómeno de la hemólisis por medio de una serie de experimentos. • Calcular la osmolaridad de las diferentes sustancias empleadas. • Observar el comportamiento de nuestros datos a través de una gráfica. MATERIALES: Material biológico: • Sangre (5 gotas) Cristalería, instrumental y equipo: • 2 pipetas Pasteur • 3 pipetas graduadas de 1, 2 y 5 mililitros. • 25 tubos de ensayo • 1 gradilla
  • 3. Soluciones: • NaCl 0.15 M • CaCl2 0.15 M • Sacarosa 0.15 M • Glicerol 0.3 M • Alcohol metílico 0.3 M • Alcohol etílico 0.3 M • Alcohol propílico 0.3 M • Agua destilada RESULTADOS Observación de la hemólisis Al agregar en los dos tubos de ensayo 5 gotas de la suspensión de glóbulos rojos y 5 ml de suero salino y 5 ml de agua destilada respectivamente, las 2 soluciones obtuvieron un aspecto turbio y se observo que el tubo de la solución de glóbulos rojos con agua destilada se volvió cristalina; lo cual indica que la hemolisis ocurrió primero en éste tubo.
  • 4. Ahora bien, sabemos que el proceso de osmosis es un transporte pasivo, mediante el cual, un disolvente - el agua en el caso de los sistemas biológicos - pasa selectivamente a través de una membrana semi-permeable y si la concentración de agua es mayor (o lo que es lo mismo la concentración de solutos menor) de un lado de la membrana es mayor que la del otro lado, existe una tendencia a que el agua pase al lado donde su concentración es menor. En este caso observamos que en el tubo que tenía suspensión de glóbulos rojos y agua destilada donde la concentración de agua es mayor, el agua atrviesa la membrana semi-permeable con lo que los eritrocitos se hinchan y estallan, a lo cual se le conoce como hemolisis. La imagen de la izquierda representa el tubo de ensayo con NaCl y la solución de globulos rojos después de haber transcurrido 23 sgundos; la imagen de la derecha representa el tubo de ensayo con agua destilada y con la suspensión de globulos rojos. Actividad osmótica de sustancias no difusibles. Tabla #1.1 |NaCl |ml de NaCl 0.15 M |ml de H2O destilada |Concentración final |Osmolaridad | |1 |5 |0 |.15 |289.599 mOsmol | |2 |4 |1 |.12 |231.679 mOsmol | |3 |3 |2 |.09 |173.759 mOsmol | |4 |2 |3 |.06 |115.839 mOsmol | |5 |1 |4 |.03 |57.9198 mOsmol | En los 5 tubos de NaCl observamos que la hemolisis ocurrio primero en el tubo # 5, y en los demás tubos la hemolisis tardo más, lo cual tiene una explicación si observamos la siguiente tabla la cual expone que tipo de solución corresponde a cada tubo. Con la siguiente tabla podenos explicar y sustentar que la hemólisis ocurrio primero en el tubo 5, ya que la solución es hipotónica, lo cual nos indica que la concentración de soluto es baja y dado que la membrana celular es semi- permeable, sólo el agua puede atravesarla; al ser la concentración de agua mayor en la solución
  • 5. hipotónica, el agua entra en el hematíe con lo que este se hincha, pudiendo eventualmente estallar (este fenómeno se conoce con el nombre de hemolisis. |NaCl |Concentración final |Cálculos |Resultados |Tipo de solución | |1 |.15 |.15x2x1000 |300 |Isotónica | |2 |.12 |.12x2x1000 |240 |Hipotónica | |3 |.09 |.09x2x1000 |180 |Hipotónica | |4 |.06 |.06x2x1000 |120 |Hipotónica | |5 |.03 |.03x2x1000 |60 |Hipotónica | Tabla# 1.2 |CaCl2 |ml de CaCl2 0.15 M |ml de H2O destilada |Concentración final |Osmolaridad | |1 |5 |0 |.15 |418.309mOsmol | |2 |4 |1 |.12 |334.647 mOsmol | |3 |3 |2 |.09 |250.985 mOsmol | |4 |2 |3 |.06 |167.323 mOsmol | |5 |1 |4 |.03 |83.6619 mOsmol | En los 5 tubos de CaCl2 observamos que la hemolisis ocurrio primero en el tubo # 5, y en los demás tubos la hemolisis tardo más, lo cual tiene una explicación si observamos la siguiente tabla la cual expone que tipo de solución corresponde a cada tubo. Con la siguiente tabla podenos explicar y sustentar que la hemilisis ocurrio primero en el tubo 5, ya que la solución es hopotónica lo cual nos indica que a concentración de agua es más alta lo cual explica que una celula en un ambiente hipotonico se hincha con el agua y explota, a lo cual se le denomina hemolisis. Ahora bien, observando la siguiente tabla podemos darnos cuenta de que la henolisis solo se podra dar en los tubos 3, 4 y 5 porqué las soluciones de los estos tubos son hipotónicas.
  • 6. |CaCl2 |Concentración final |Cálculos |Resultados |Tipo de solución | |1 |.15 |.15x3x1000 |480 |Hipertónica | |2 |.12 |.12x3x1000 |360 |Hipertónica | |3 |.09 |.09x3x1000 |270 |Hipotónica | |4 |.06 |.06x3x1000 |180 |Hipotónica | |5 |.03 |.03x3x1000 |90 |Hipotónica | Tabla# 1.3 |Sacarosa |ml de Sacarosa 0.15 M |ml de H2O destilada |Concentración final |Osmolaridad | |1 |5 |0 |.15 |160.888mOsmol | |2 |4 |1 |.12 |128.710 mOsmol | |3 |3 |2 |.09 |96.5330 mOsmol | |4 |2 |3 |.06 |64.3553 mOsmol | |5 |1 |4 |.03 |32.1776 mOsmol | En los 5 tubos de sacarosa observamos la hemolisis en los tubos 4 y 5, lo cual tiene una explicación al observar la siguiente tabla la cual expone que tipo de solución corresponde a cada tubo, al observar la siguiente tabla podemos darnos cuenta de que todos los tubos de sacarosa son soluciones Hipotónicas lo cual nos indica que a concentración de agua es más alta lo cual explica que una celula en un ambiente hipotonico se hincha con el agua y explota, a lo cual se le denomina hemolisis. |Sacarosa |Concentración final |Cálculos |Resultados |Tipo de solución | |1 |.105 |.15x1x1000 |150 |Hipotónica |
  • 7. |2 |.12 |.12x1x1000 |120 |Hipotónica | |3 |.09 |.09x1x1000 |90 |Hipotónica | |4 |.06 |.06x1x1000 |60 |Hipotónica | |5 |.03 |.03x1x1000 |30 |Hipotónica | Cálculos para la tabla 1.1 TUBO #1 [pic] 6.48702 X 22.4ATM 1 Osmol π ’ 0.289599 Οsmol [pic] TUBO #2 [pic] 5.189616 X 22.4ATM 1 Osmol
  • 8. [pic] [pic] TUBO #3 [pic] 3.892212 X 22.4ATM 1 Osmol [pic] [pic] TUBO #4 [pic] 2.594808 X 22.4ATM 1 Osmol [pic]
  • 9. [pic] TUBO#5 [pic] 1.297404 X 22.4ATM 1 Osmol [pic] [pic] Cálculos para la tabla 1.2 TUBO #1 [pic] 9.37014 X 22.4ATM 1 Osmol [pic]
  • 10. [pic] TUBO #2 [pic] 7.496112 X 22.4ATM 1 Osmol [pic] [pic] TUBO #3 [pic] 5.622084 X 22.4ATM 1 Osmol [pic] [pic]
  • 11. TUBO #4 [pic] 3.748056 X 22.4ATM 1 Osmol [pic] [pic] TUBO#5 [pic] 1.874028 X 22.4ATM 1 Osmol [pic] [pic] Cálculos para la tabla 1.3
  • 12. TUBO #1 [pic] 3.6039 X 22.4ATM 1 Osmol [pic] [pic] TUBO #2 [pic] 2.88312 X 22.4ATM 1 Osmol [pic] [pic] TUBO #3
  • 13. [pic] 2.16234 X 22.4ATM 1 Osmol [pic] [pic] TUBO #4 [pic] 1.44156 X 22.4ATM 1 Osmol [pic] [pic] TUBO#5 [pic]
  • 14. .72078 X 22.4ATM 1 Osmol [pic] [pic] Actividad de sustancias difusibles. Al colocar 5 ml de cada una de las soluciones (glicerol 0.3 M y sacarosa 0.3 M) en diferentes tubos de ensayo y se añadió a cada uno 5 gotas de la suspensión de glóbulos rojos se observo que noto la hemólisis fue mas lenta ya que algunas moléculas son demasiado grandes como para difundir a través de los canales de la membrana y demasiado insolubles en lípidos como para poder difundir a través de la capa de fosfolípidos. Tal es el caso de la glucosa y algunos otros monosacáridos. Estas sustancias, pueden sin embargo cruzar la membrana plasmática mediante el proceso de difusión facilitada, con la ayuda de una proteína transportadora. En el primer paso, la glucosa se une a la proteína transportadora, y esta cambia de forma, permitiendo el paso del azúcar. Tan pronto como la glucosa llega al citoplasma, una kinasa (enzima que añade un grupo fosfato a un azúcar) transforma la glucosa en glucosa-6-fosfato. De esta forma, las concentraciones de glucosa en el interior de la célula son siempre muy bajas, y el gradiente de concentración del exterior al interior favorece la difusión de la glucosa. En el tubo de glicerol la hemólisis fue mas rápida, pues tardo 6 minutos y 30 segundos en que se diera la hemolisisy el tubo con sacarosa despues de ahber transcurrido casi 10 minutos aun no ocurria la hemolisis, ya que su coeficiente de partición del glicerol es menor y su gradiante de concentración también es mínimo. Velocidad de difusión
  • 15. Al colocar 5 ml de alcohol metílico, alcohol etílico y de alcohol propílico y 5 gotas de la suspensión de glóbulos rojos en tres tubos de ensayo respectivamente se observo como cambio rápidamente la suspensión de turbia a cristalina. En la siguiente tabla se observa el tiempo que tardo cada uno de los tubos en cambiar de turbia a transparente, dado a que la velocidad a la que atraviesa la membrana celular aumenta mientras mayor sea el peso molecular y la longitud de la cadena de átomos de carbono de la sustancia, lo cual lo podemos comprobar observando la siguiente tabla y las estructuras de los alcholes empleados, ya que si observamos el efecto se observo primero en el alcohol metilico que si lo comparamos con los otrops 2 alcoholes tiene menor peso molecular y la longitud de átomos de carbono es menor. |# de tubo |Tiempo | |#1 Alcohol metílico |3 s | |#2 Alcohol etílico |5 s | |#3 Alcohol propílico |8 s | Alcohol metílico Alcohol etílico | | |H | | | | | || | | | |H |- |C |- |(OH) | | | || | | | | | |H | | | | | |H | |H | | | | | || | || | | | |H |- |C |- |C |- |(OH) | | | || | || | | | | | |H | |H | | |
  • 16. Alcohol propílico HHHH||||H-C-C-C-C-(OH)||||HHHH [pic] La grafica anterior representa la velocidad del alcohol metílico, alcohol etílico y del alcohol propílico utilizando como variables el tiempo y el coeficiente de partición. CUESTIONARIO 1.Mencione los diferentes mecanismos por los que puede pasar una sustancia a través de la membrana celular. UltraFiltración UltraFiltración es el movimiento de agua y moléculas disueltas a través de la membrana debido a la presión hidrostática generada por el sistema cardiovascular. Dependiendo del tamaño de los poros de la membrana, sólo los solutos con un determinado tamaño pueden pasar a través de la membrana. Por ejemplo, los poros de la membrana de la cápsula de Bowman en los glomérulos renales, son muy pequeños, y sólo la albúmina la más pequeña de las proteínas, tienen la capacidad de ser filtrada a través de ella. Por otra parte, los poros de las membranas de los hepaticitos son extremadamente grandes, por lo que una gran variedad de solutos pueden atravesarla y ser metabolizados. Difusión simple Difusión simple Las moléculas en solución están dotadas de energía cinética y, por tanto tienen movimientos que se realizan al azar.
  • 17. La difusión consiste en la mezcla de estas moléculas debido a su energía cinética cuando existe un gradiente de concentración, es decir cuando en una parte de la solución la concentración de las moléculas es más elevada. La difusión tiene lugar hasta que la concentración se iguala en todas las partes y será tanto más rápida cuanto mayor sea energía cinética (que depende de la temperatura) y el gradiente de concentración y cuanto menor sea el tamaño de las moléculas. Osmosis Es un transporte pasivo, mediante el cual, un disolvente - el agua en el caso de los sistemas biológicos - pasa selectivamente a través de una membrana semi-permeable . La membrana de las células es una membrana semi-permeable ya que permite el paso del agua por difusión pero no la de iones y otros materiales. Si la concentración de agua es mayor (o lo que es lo mismo la concentración de solutos menor) de un lado de la membrana es mayor que la del otro lado, existe una tendencia a que el agua pase al lado donde su concentración es menor. El movimiento del agua a través de la membrana semi-permeable genera un presión hidrostática llamada presión osmótica. La presión osmótica es la presión necesaria para prevenir el movimiento neto del agua a través de una membrana semi-permeable que separa dos soluciones de diferentes concentraciones. La ósmosis puede entenderse muy bien considerando el efecto de las diferentes concentraciones de agua sobre la forma de las células. Para mantener la forma de un célula, por ejemplo un hematíe, esta debe estar rodeada de una solución isotónica, lo que quiere decir que la concentración de agua de esta solución es la misma que la del interior de la célula. Difusión facilitada Algunas moléculas son demasiado grandes como para difundir a través de los canales de la membrana y demasiado insolubles en lípidos como para poder difundir a través de la capa de fosfolípidos. Tal es el caso de la glucosa y algunos otros monosacáridos. Esta sustancias, pueden sin embargo cruzar la membrana plasmática mediante el proceso de difusión facilitada, con la ayuda de una proteina transportadora. En el primer paso, la glucosa se une a la proteína transportadora, y esta cambia de forma, permitiendo el paso del azúcar. Tan pronto como la glucosa llega al citoplasma, una kinasa (enzima que añade un grupo fosfato a un azúcar) transforma la glucosa en glucosa-6-fosfato. De esta
  • 18. forma, las concentraciones de glucosa en el interior de la célula son siempre muy bajas, y el gradiente de concentración exterior --> interior favorece la difusión de la glucosa. La difusión facilitada es mucho más rápida que la difusión simple y depende: del gradiente de concentración de la sustancia a ambos lados de la membrana del número de proteínas transportadoras existentes en la membrana de la rápidez con que estas proteínas hacen su trabajo Transporte activo El transporte activo requiere un gasto de energía para transportar la molécula de un lado al otro de la membrana, pero el transporte activo es el único que puede transportar moléculas contra un gradiente de concentración, al igual que la difusión facilitada, el transporte activo esta limitado por el numero de proteínas transportadoras presentes. Son de interés dos grandes categorías de transporte activo: primario y secundario. El transporte activo primario El transporte activo primario usa energía (generalmente obtenida de la hidrólisis de ATP), a nivel de la misma proteína de membrana produciendo un cambio conformacional que resulta en el transporte de una molécula a través de la proteína. El ejemplo mas conocido es la bomba de Na+/K+. La bomba de Na+/K+ realiza un contratransporte("antiporte") transporta K+ al interior de la célula y Na+ al exterior de la misma, al mismo tiempo, gastando en el proceso ATP. El transporte activo secundario
  • 19. Utiliza la energía para establecer un gradiente a través de la membrana celular, y luego utiliza ese gradiente para transportar una molécula de interés contra su gradiente de concentración. Un ejemplo de ese mecanismo es el siguiente: Escherichia coli establece un gradiente de protones (H+) entre ambos lados de la membrana utilizando energía para bombear protones afuera de la célula. Luego estos protones se acoplan a la lactosa a nivel de la lactosa-permeasa (otra proteína de transmembrana), la lactosa permeasa usa la energía del protón moviéndose a favor de su gradiente de concentración para transportar la lactosa dentro de la célula. Este transporte acoplado en la misma dirección a través de la membrana celular se denomina cotransporte (“simporte”). Escherichia coli utiliza este tipo de mecanismo para transportar otros azucares tales como ribosa y arabinosa, como así también numerosos aminoácidos. 2. ¿Por qué cuando hay hemólisis la solución de glóbulos rojos pasa de turbia a transparente? Cuando la solución se encuentra turbia, es debido a que los glóbulos rojos (eritrocitos) aun se encuentran aglomerados y en su forma de discos bicóncavos conteniendo hemoglobina, pero al ocurrir la hemólisis, estos se hinchan adquiriendo una apariencia esférica en vez del discoidal y eventualmente pierden su hemoglobina. A su vez, la hemoglobina de los eritrocitos hemolizados se disuelve en la solución tiñéndola de rojo. 3. Razone las causas por la que diferentes sustancias no difusibles requieren de diferentes concentraciones para producir el mismo efecto osmótico. Debido a la osmolaridad de las sustancias fuera y dentro de la célula, es decir que, a mayor diferencia de osmolaridad entre los medios intra y extracelular, se tendrá un efecto osmótico mas notable que cuando se tiene una diferencia de osmolaridad extra-inter celular menor. Otra razón a la que se debe este efecto es a la presión osmótica que presenta una solución con respecto al medio interno de la célula, teniendo que a una menor presión osmótica el efecto osmótico será menor y será del exterior al interior; se dará en mayor proporción cuando exista una presión osmótica mayor y será del interior al exterior.
  • 20. 4. Si tuviéramos soluciones de Mg2SO4, CaCl2 y glucosa con la misma concentración, ¿cuál será la más rápida y cuál la más lenta para producir la hemólisis? La solución de sulfato de magnesio será la más rápida en producir la hemólisis, debido a que su osmolaridad es mucho mayo adentro de la célula que fuera de ella, y por tanto esta solución haría que la célula absorbiera una cantidad de agua en menor tiempo. Y la que produciría la hemólisis en mayor tiempo sería la glucosa, ya que la osmolarida en el medio extracelular es muy parecida a la osmolaridad del medio intracelular, por lo que el efecto de osmosis se lleva a cabo en menor tiempo y en menor proporción. 5. ¿Cuál es la diferencia entre isoosmoticidad e isotonicidad? La isotonicidad se refiere a que la osmolalidad de las sustancias con respecto a la osmolalidad en el interior de la célula es la misma. Mientras que la isoosmoticidad nos indica una igualdad en cuanto a la presión osmótica del medio intracelular y la presión osmótica de la solución que se encuentra en el medio extracelular. Analisis de resultados. En la práctica pudimos aprender a diferenciar cual era una solución Isotonica, Hipotónica e Hipertónica observando los efectos que producían al mezclar 2 sustancias, como también por medio de calculos podíamos saber que soluciones podrían presenciar el efecto de la hemolisis, pero en la parte de la práctica de actividad osmótica de sustanvias no difusibles en los tubos de sacarosa solo pudimos observar el fenomeno de la hemolisis en los tubos 4 y 5 . Ahora bien, observando los calculos podemos percatarnos de que todos los tubos tenían soluciones hipotonicas, por lo que se esperaba que ocurriera el efecto en todos tubos. Se observaron los tubos periodicamente donde no se aprecio el efecto, pero por falta de tiempo no pudimos percatarnos de cuanto tiempo más se tardaron en que ocurriera la hemolisis.
  • 21. En la parte de Velocidad de difusión, se pudieron haber cometido errores ya que los efectos se producían mu y rapido; es muy probable que se cometieran errores de tipo accidentales. Conclusiones Cuando se pone en contacto una solución con un solvente a través de la membrana semipermeable que deja pasar moléculas de solvente pero no de solutos, las moléculas del solvente que están en mayor concentración en el disolvente puro difunden hacia la solución donde su concentración es mas pequeña por esta razón la presión osmótica depende del numero de partículas activas como su unidad lo dice los osmoles son el numero de partículas activas en una solución. Por lo tanto la presión osmótica no depende de la concentración, la presión osmótica depende de la cantidad de sustancias activas. Referencias: Ambrose, Edmund Jack; Biologia celular. Madrid : Alhambra, 1977; pg 313-319. Best y Taylor; Bases fisiologicas de la practica medica; editorial: Panamericana; 12ª edición; pgs 31- 45. Manual de practicas de fisiologia; departamento de biologia. William F. Ganong; Fisiologia medica; 19ª edición; pg 34,35. http://faa.unse.edu.ar/document/apuntes/biol/Permembr.pdf http://www.biologia.edu.ar/cel_euca/transporte.htm http://www.efn.uncor.edu/dep/biologia/intrbiol/membranas/transpor.htm http://www.iqb.es/cbasicas/farma/farma01/sec01/c1_002.htm ----------------------- |Mora Pérez Jose Luis obtuvo 5 gotas de |ml de NaCl 0.15 M |ml de H2O destilada | |sangre de Manuel Eduardo, las cuales se | | | |pusieron en un tubo de ensayo y se les | | |
  • 22. |adiciono 5 ml de suero salino (NaCl 0.15 | | | |M), se mezclaron con suavidad y se | | | |conservo durante toda la práctica. | | | |Se Añidieron 5 gotas de la suspensión | | | |inicial a dos tubos de ensayo con 5 ml de | | | |suero salino (NaCl 0.15 M) y 5 ml de agua | | | |destilada, respectivsamente. | | | |Se observo y detecto en cuál de los tubos | | | |se produjo la hemólisis. | | | | | | | | | | | |Observación de la hemólisis | | | | | | | | | | | |Actividad osmótica de sustancias no | | | |difusibles. | | | | | | | | | | | |De acuerdo con la siguiente tabla se | | | |marcaron 5 tubos de ensayo con las | | | |concentraciones correctas para el suero | | | |salino (NaCl).Se mezclaron con suavidad y | | | |realizaron las observaciones necesarias. | | | |# de tubo de ensayo | | | |1 |5 |0 | |2 |4 |1 |
  • 23. |3 |3 |2 | |4 |2 |3 | |5 |1 |4 | 1. Actividad osmótica de sustancias no difusibles. De acuerdo con la siguiente tabla se marcaron 5 tubos de ensayo con las concentraciones correctas para Cloruro de calcio (caCl2).Se mezclaron con suavidad y realizaron las observaciones necesarias. |# de tubo de ensayo |ml de CaCl2 0.15 M |ml de H2O destilada | |1 |5 |0 | |2 |4 |1 | |3 |3 |2 | |4 |2 |3 | |5 |1 |4 | De acuerdo con la siguiente tabla se marcaron 5 tubos de ensayo con las concentraciones correctas para la sacarosa.Se mezclaron con suavidad y realizaron las observaciones necesarias. |# de tubo de ensayo |ml de CaCl2 0.15 M |ml de H2O destilada | |1 |5 |0 | |2 |4 |1 | |3 |3 |2 | |4 |2 |3 |
  • 24. |5 |1 |4 | 2. Actividad osmótica de sustancias no difusibles. 3. Actividad osmótica de sustancias difusibles. Se colocaron 5 ml de cada una de las soluciones (glicerol 0.3 M y sacarosa 0.3 M) en diferentes tubos de ensayo y añada a cada uno 5 gotas de la suspensión de glóbulos rojos. Se mezcló suavemente y se observó. 4. Velocidad de difusión. Se colocaron 5 ml de alcohol metílico CH3OH en un tubo de ensayo y se agregaron 5gotas de la suspensión de glóbulos rojos. Se mezclo y se observaron los efectos midiendo el tiempo, en segundos, en que se produjo la hemólisis total. Se colocaron 5 ml de alcohol etílico CH3-CH2OH en un tubo de ensayo y se agregaron 5 gotas de la suspensión de glóbulos rojos. Se mezclo y se observaron los efectos midiendo el tiempo, en segundos, en que se produjo la hemólisis total. Se colocaron 5 ml de alcohol propílico CH3-CH2-CH2-OH en un tubo de ensayo y se agregaron 5 gotas de la suspensión de glóbulos rojos. Se mezclo y observaron los efectos midiendo el tiempo, en segundos, en que se produjo la hemólisis total. TRANSPORTEE • Transporte activo primario: Bomba de sodio y potasio • Transporte activo secundario o cotransporte
  • 25. • Transporte de macromoléculas o partículas: o Exocitosis o Endocitosis • Transporte intracelular • Difusión simple • Osmosis • Ultrafiltración • Difusión facilitada Movimento de lmoléculas a tráves de proteínas transportadoras Ingreso o salida de sustancias a tráves de la membrana celular PASIVO ACTIVO -----------------------