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Secuenciación del DNA<br />
Existen dos métodos para secuenciar el DNA:<br />Método Químico<br />Método Enzimático<br /> El químico permitió obtener e...
Método Enzimático.<br />Se basa en la capacidad de replicar el DNA in vitro con el fragmento de Klenov de la DNA polimeras...
La replicación del DNA requiere  de copiar una molécula de DNA de una sola hebra que se conoce como MOLDE.<br /><ul><li>Ce...
Los fragmentos del DNA empiezan en el mismo punto, pero varían en longitud. Los extremos de estos tienen la misma base ya ...
En general no se producen <br />Inclusión de análogos en una mezcla de reacción, puede detener la síntesis en ciertos punt...
Los análogos  son derivados didesoxi.<br />Se incorporan a una molécula creciente de DNA <br />Solo se incorporan en donde...
La secuenciación se lleva a cabo de la siguiente manera:<br />Se constituyen 4 mezclas de reacción <br />Cada mezcla conti...
1 cebador
DNA polimerasa I
Los 4 desoxinucleotidos trifosfatos normales (uno de ellos radioactivo)
1 de los cuatro didesoxinucleotidos trifosfatados</li></li></ul><li>Las cuatro mezclas corresponden a :<br /><ul><li>Dides...
Didesoxi C
Didesoxi G
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Secuenciación del dna

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presentacion de la secuenciacion del ADN hecha en forma en que se pueda presentar en una exposicion

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Secuenciación del dna

  1. 1. ESCUELA NACIONAL PREPARATORIA<br />PLANTEL N2<br />“ERASMO CASTELLANOS QUINTO”<br />MATERIA: TEMAS SELECTOS DE BIOLOGIA <br />GRUPO: 600C<br />TEMA: SECUENCIACION DEL ADN<br />PROFESOR: PABLO YOVAL<br />INTEGRANTES DEL EQUIPO: <br />CERECEDO MAYORGA DIANA<br />GARCIA CISNEROS LIZETH<br />SANCHEZ VEGA CECILIA GABRIELA<br />VALDIVIA AMADOR IVETTE<br />
  2. 2. Secuenciación del DNA<br />
  3. 3. Existen dos métodos para secuenciar el DNA:<br />Método Químico<br />Método Enzimático<br /> El químico permitió obtener excelentes resultados, pero el enzimático proporciona más información por experimento.<br />
  4. 4. Método Enzimático.<br />Se basa en la capacidad de replicar el DNA in vitro con el fragmento de Klenov de la DNA polimerasa I. <br />
  5. 5. La replicación del DNA requiere de copiar una molécula de DNA de una sola hebra que se conoce como MOLDE.<br /><ul><li>Cebadores un pequeño tramo de DNA que se hibridiza al molde para alargase</li></li></ul><li>La limitación de el método enzimático fue la dificultad de purificar el molde y el cebador.<br />Actualmente existen cebadores disponibles en el comercio o sintéticos, así como vectores que producen fragmentos de DNA puro a partir de un fragmento clonado.<br />
  6. 6. Los fragmentos del DNA empiezan en el mismo punto, pero varían en longitud. Los extremos de estos tienen la misma base ya sea:<br />Adenina (A)<br />Guanina (G)<br />Citidina (C)<br />Timidina (T)<br />
  7. 7. En general no se producen <br />Inclusión de análogos en una mezcla de reacción, puede detener la síntesis en ciertos puntos.<br />¿Cómo se reproducen estos fragmentos por replicación del DNA?<br />
  8. 8. Los análogos son derivados didesoxi.<br />Se incorporan a una molécula creciente de DNA <br />Solo se incorporan en donde puede incorporarse la base normal.<br />
  9. 9. La secuenciación se lleva a cabo de la siguiente manera:<br />Se constituyen 4 mezclas de reacción <br />Cada mezcla contiene: <br /><ul><li>1 molde
  10. 10. 1 cebador
  11. 11. DNA polimerasa I
  12. 12. Los 4 desoxinucleotidos trifosfatos normales (uno de ellos radioactivo)
  13. 13. 1 de los cuatro didesoxinucleotidos trifosfatados</li></li></ul><li>Las cuatro mezclas corresponden a :<br /><ul><li>Didesoxi A
  14. 14. Didesoxi C
  15. 15. Didesoxi G
  16. 16. Didesoxi T</li></ul>En todas las mezclas se encuentran presentes los didesoxi y los desoxi si los primeros se incorporan termina la cadena y con los segundos continua.<br />
  17. 17. Una mezcla de reacción puede tener cientos de miles de moléculas recién sintetizadas.<br />Cada una de las mezclas produce esa cantidad de moléculas, las cuales terminan en su nucleótido correspondiente.<br />
  18. 18. Gel de poliacrilamida<br />Tienen un poder de resolución mucho mayor que la agarosa<br />Las cuatro mezclas se cargan en gel de poliacrilamida muy delgado, en cuatro pistas adyacentes.<br />
  19. 19. Luego se separan por electroforesis los fragmentos<br />El gel se seca y los fragmentos de detectan exponiendo un trozo de pelicula de rayos X a fragmentos radiactivos del DNA (autorradiografia)<br />
  20. 20. GRACIAS POR SU ATENCION! <br />

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