3. Existen dos métodos para secuenciar el DNA: Método Químico Método Enzimático El químico permitió obtener excelentes resultados, pero el enzimático proporciona más información por experimento.
4. Método Enzimático. Se basa en la capacidad de replicar el DNA in vitro con el fragmento de Klenov de la DNA polimerasa I.
5.
6. Los fragmentos del DNA empiezan en el mismo punto, pero varían en longitud. Los extremos de estos tienen la misma base ya sea: Adenina (A) Guanina (G) Citidina (C) Timidina (T)
7. En general no se producen Inclusión de análogos en una mezcla de reacción, puede detener la síntesis en ciertos puntos. ¿Cómo se reproducen estos fragmentos por replicación del DNA?
8. Los análogos son derivados didesoxi. Se incorporan a una molécula creciente de DNA Solo se incorporan en donde puede incorporarse la base normal.
16. Didesoxi TEn todas las mezclas se encuentran presentes los didesoxi y los desoxi si los primeros se incorporan termina la cadena y con los segundos continua.
17. Una mezcla de reacción puede tener cientos de miles de moléculas recién sintetizadas. Cada una de las mezclas produce esa cantidad de moléculas, las cuales terminan en su nucleótido correspondiente.
18. Gel de poliacrilamida Tienen un poder de resolución mucho mayor que la agarosa Las cuatro mezclas se cargan en gel de poliacrilamida muy delgado, en cuatro pistas adyacentes.
19. Luego se separan por electroforesis los fragmentos El gel se seca y los fragmentos de detectan exponiendo un trozo de pelicula de rayos X a fragmentos radiactivos del DNA (autorradiografia)
