1. INSTITUTO POLITECNICO NACIONAL
ESCUELA NACIONAL DE MEDICINA Y
HOMEOPATIA
SECUENCIACIÓN DE ADN
MÉTODO DE SANGER
BECERRIL CUEVAS CARLA
ALEJANDRA.
6HM4

2.  Consiste en un conjunto de
técnicas y métodos
bioquímicas que nos
permite determinar
mediante un análisis
detallado el orden de los
nucleótidos en el ADN.

3. 1958  insulina bovina 
secuencia proteica.
1977  secuencia el genoma del
bacteriófago Phi-X174.
¨El primer organismo cuyo
genoma fue secuenciado¨
1980  segundo Nobel de
química.

4.  ADN molde o segmento de ADN.
ADN polimerasa. (añadir BN).
Cebador.
Nucleótidos (
Adenina, Citosina, Guanina, Timina)

5. Nucleótidos didesoxi
Carece del grupo
hidroxilo de la
posición 3´

6. La cadena molde de ADN se une el cebador, un oligonucleótido corto
de 20 bases.
A partir de este la ADN polimerasa
comenzara a trabajar, agregando
nucleótidos de 3´a 5´
Hasta que es colocado un nucleótido didesoxi, que
al carecer del grupo OH, evitara la unión de un
nuevo nucleótido.
Marcando un paro y dando como resultado cadena de distintos tamaños.

8. Dentro del método de Sanger se busca hacer cuatro reacciones
diferentes de síntesis de ADN usando un nucleótido didesoxi
distinto.
Los fragmentos de ADN obtenidos se separan por tamaños
mediante una electroforesis en geles verticales de acrilamina.
Los productos de cada una de las muestras se colocan en carriles
diferentes del gel.
Terminada la electroforesis, se pone en contacto con una película
fotográfica de autoradiografia

10. VENTAJAS
 Tiempo es relativamente corto una par de horas.
 Las reacciones son mas puras con menos contaminantes que
afecten la resolución del gel.