1. MUESTRAS DEL TRACTO RESPIRATORIO SUPERIOR
1.0 INTRODUCCIÓN
Las vías respiratorias altas se extienden desde los orificios nasales hacia la laringe
y comprende la nasofaringe y la orofaringe,a, los senos paranasales, trompa de
Eustaquio y el oído medio.
Las infecciones del tracto respiratorio superior más frecuentes son: laringitis,
faringitis, epiglotitis, sinusitis, otitis externa y media, difteria, tos ferina, angina de
Vincent y candidiasis oral.
Es fundamental conocer la flora comensal para la interpretación de los resultados
de laboratorio.
2.0 FLORA NORMAL DEL TRACTO RESPIRATORIO SUPERIOR
-Streptococcus spp (alfa, beta, no hemolíticos) -Veillonella spp.
-Neisseria spp. -Peptostreptococcus spp.
-Haemophilus spp. -Actynomyces spp.
-Corynebacterium spp. -Mycoplasma spp.
-Staphylococcus spp -Bacteroides spp.
-Micrococcus spp. -Fusobacterium spp.
-Candida spp.
3.0 FARINGITIS
La principal causa de faringitis es por Streptococcus pyogenes (grupo A). Otras
bacterias que se incluyen son: Streptococcus grupo C, G, y Arcanobacterium
(Corynebacterium) haemolyticum.
El examen de rutina de laboratorio debe incluir métodos para el diagnóstico de
Streptococcus grupo A que sean sensibles ya que un número bajo de esta bacteria puede
indicar no solo colonización sino representar una infección, además es importante
detectarlo por la reemergencia de la fiebre reumática aguda y la posibilidad de un shock
tóxico like.
El estudio de Neisseria meningitidis generalmente se hace con propósitos
epidemiológicos.
El estudio de faringitis gonocócica debe ser solicitada en forma específica por el
médico.
Corynebacterium diphtheriae se debe buscar sólo cuando se solicita
expresamente.
2. FLUJOGRAMA Nº 1 : SECRECION FARINGEA
FARINGITIS
( S. GRUPO A )
DIFTERIA
( C. diphteriae)
FARINGITIS
GONOCOCICA
TORULA
AMIES STUART
O SILICA GEL
PAS
INCUBAR 35-37 ºC
18-24 HORAS
OBS.
β-HEMOLISIS
T. GRAM
CATALASA ( - )( - )
INCUBAR
18-24 HRS
DIAG.
PRESUNTIVO:
-SUSCEPTIBILIDAD
DIAG.
DEFINITIVO:
NHDM
SEROLOGIA
-PYR
BACITRACINA 0,04µ
TORULA (2)
SILICA GEL
LABORATORIO
REFERENCIAPAS
AGAR SANGRE TELURITO*
AGAR TINSDALE
INCUBAR
35ºC x 18-24-48 HORAS*
OBS. COLONIAS
T. GRAM
DIAG.
DEFINITIVO
PRUEBAS
BIOQUIMICAS
LABORATORIO
DE REFERENCIA
TORULA
AMIES STUART
TRANSPORTE NUTRITIVO
THAYER - MARTIN
35 ºC CO 2 x 72 HORAS
OBS. COLONIAS
DIAG.
DEFINITIVO
DIAG.
PRESUNTIVO:
T. GRAM
T. OXIDASA
-UTILIZAC.DE CARBOHIDRATOS
-DET. DE B- LACTAMASA
ANGINA DE
VINCENT
TORULA
GRAM
PAS: Placa agar sangre
NHDM:No hubo desarrollo microbiano
FLUJOGRAMA Nº2 : SECRECION NASOFARINGEA
Bordetella
pertusssis
N. meningitidis
(PORTADORES )
Haemophilus
influenzae
ASPIRADO NASOFARINGEO
ASPIRACION
SEMBRAR INMEDIATAMENTE
AL LADO DEL PACIENTE
REGAN-LOWE
IFD
35 ºC
( HUMEDAD )
HASTA 7 DIAS
OBS. COLONIAS
T. DE GRAM
DIAG. DEFINITIVO
INMUNOFLUORESCENCIA
SEROLOGIA
NASOFARIANGEA
SEMBRAR AL LADO
DEL PACIENTE
THAYER MARTIN
35ºC CO2
24-48 HRS.
OBS. COLONIAS
T. DE GRAM
OXIDASA
SEROLOGIA
ACCION SOBRE
CARBOHIDRATOS
DIAG. DEFINITIVO
ENVIO AL LAB. DE
REFERENCIA PARA
CONFIRMACIÓN
SEMBRAR AL
LADO DEL PACIENTE
AMIES STURAT
CHOCOLATE SUPLEMENTADO
INCUBAR
35ºC CO2
18-24 HRS
GRAM
FACTORES X y V
OXIDASA
B LACTAMASA
CULTIVO:
IDENTIFICACIÓN
DEFINITIVA: SEROLOGÍA
ENVIO AL LAB. DE
REFERENCIA PARA
CONFIRMACIÓN
3. TABLA 1: OTRAS MUESTRAS TRACTO RESPIRATORIO SUPERIOR
MUESTRA S.PARANASAL
ES
SEC.OTICA MUCOSA
BUCAL
DIAGNÓSTICO Sinusitis Otitis
media
Otitis
externa
Candidiasis
oral
TIPO MUESTRA Punción Timpanocente
sis
Tórula Tórula
AGENTE
ETIOLÓGICO
S. pneumoniae
H. influenzae
Anaerobios
Neisseria
B. catarrhalis
S. aureus
S. pneumoniae
S. aureus
H. influenzae
B.catarrhalis
Bacilos G-
Anaerobios
P. aeruginosa
Otras
bacterias
aerobias
Candida
albicans
PROCEDIMIENTO T.Gram *
PAS
ACHO (CO2)
Cult.
Anaerobios
35ºC-48 hrs
T.Gram *
PAS
ACHO (CO2)
Cult.
Anaerobios
35ºC-48 hrs
T.Gram *
PAS
M.Conkey
35ºC-48 hrs
T.Gram *
Sabureaud
30ºC hasta 5
días
PAS: Placa agar sangre cordero 5%, ACHO: Placa agar chocolate, * Anexo 1
(Tinciones).
4.0 TOMA DE MUESTRA
4.1. SECRECIÓN FARÍNGEA
engu lengua.
b.- Frotar con una tórula la pared p r de la f las a las tocando
o.
c.- Evitar tocar la lengua, úvula y pared de la boca.
4.1.2 Cu
a.- Deprimir la lengua con bajalengua. Si se advierte la presencia de pseudomembrana,
tomar dos muestras c bord la sin romper.
b.- Poner ambas tóru st o muestras al laboratorio
es superior a cuatro horas, se recomi s en un tubo con silica gel. Una de
ellas debe ser usada para la tinción de Gram. En caso de sospecha de difteria cutánea,
z iel afe ás de a fa
c.- Hacer tinción d Si se bacil sitiv logía
característica, el lab en rm ar q
grampositivos diftero
4.1.1 Cultivo corriente
a.- Deprimir la l a con baja
osterio aringe y mígda
cualquier exudad
ltivo para Corynebacterium diphtheriae
on tórula del e de la misma p
nsp
resionándo
rte de laslas en un tubo e éril. Si el tra
enda enviarla
tomar muestra de la ona de la p
am.
ctada adem
rvan
una muestr
ampo
ríngea.
e Gr
oratorio debe
s."
obse
tregar un info
os gr o de morfo
e prelimin ue diga “bacilos
morfo
4. 4.1.3 Cultivo para Neisseria meningitidis
Tomar la muestra con tórula por detrás de la úvula en la porción nasal de la
EO
a.- Lavarse s y luego colocarse guantes estériles.
.- Romper el sobre que contiene el kit de aspiración y conectar el final del tubo con
ón.
da, sin aspirar, por una fosa nasal hasta la nasofaringe y retirarla
.- Repetir el procedimiento en la otra fosa nasal.
f.- Aspirar rastrar toda la secreción.
.- Homogeneizar la muestra agitando el tubo con la mano.
4.4 EPIGLOTITIS
a.- Causada habitualmente por Haemophilus influenzae tipo b, ocurre principalmente en
niños de 2 a
.- El diagnóstico de esta infección debe ser hecho clínicamente ya que está
contra
.
.- Si se hace un procedimiento en la vía aérea, en ese momento se puede tomar
mues
.- En muchos casos hay una bacteriemia y esto puede apoyar el diagnóstico.
da por organismos
la Tabla 1.
es el aspirado mediante jeringa de la
o nasofaringe, ya que éstas
erenciar el agente causal.
4.6 OTITIS MEDIA
.- Es una infección común en niños. Agentes más comunes se muestran en la Tabla 1.
faringe.
4.2. ASPIRADO NASOFARÍNG
cuidadosamente las mano
b
diámetro menor a una sonda de aspiraci
c.- Conectar el otro extremo de diámetro mayor a la bomba de vacío.
d.- Introducir la son
aspirando.
e
el suero fisiológico a través del tubo colector para ar
g
h.- Colocar la tapa al tubo que contiene la muestra.
i.- Procesar según flujograma Nº 2.
4.3 LARINGITIS
a.- Laringitis aguda habitualmente es de etiología viral.
b.- Los cultivos bacterianos raramente son orientadores excepto para descartar difteria o
infección estreptocócica basándose en la clínica.
6 años.
b
indicado tomar muestra de la epiglotis, pues puede provocar una oclusión de la
vía aérea
c
tra.
d
4.5 SINUSITIS
a.- Sinusitis bacteriana frecuentemente es de origen endógeno, causa
que están normalmente en el tracto respiratorio superior. Agentes más comunes se
muestran en
b.- La única muestra apropiada para el laboratorio
cavidad sinusal. Se debe hacer cultivo aerobio y anaerobio.
c.- Rechazar líquidos de lavado o tórulas de fosas nasales
contendrán mucha flora normal y será muy difícil dif
a
5. b.- La muestra del oído medio se toma mediante tímpanocentesis por un especialista, y
se debe cultivar para aerobios y anaerobios. Si hay descarga en el canal externo se debe
acer cultivo sólo para aerobios.
4.7 OTITIS EXTERNA
ntacto, limpiar el conducto auditivo externo con solución jabonosa,
monas aeruginosa es la causa más frecuente de otitis externa u “otitis del
cer cultivo aerobio.
deben ser
mados en cuenta.
IDIASIS ORAL
rofaringe, habitualmente es
.- El diagnóstico se hace fácilmente por observación directa de la muestra en KOH al
10% exo Tinciones). La muestra se toma con dos tórulas, una
ara directo y la otra muestra para cultivo.
.- Borrelia vincentii y Fusobacterium spp, están asociados con esta infección que se
caracteriza por la ulceración de la faringe o encías. Es infrecuente en niños, pero sí se
resenta en adultos que tienen una mala higiene bucal, stress o una enfermedad
sistém
, con fucsina diluida 1:10 en agua, o con
E PORTADORES
5.1 DETECCIÓN DE PORTADORES DE Staphylococcus aureus
.- Tomar muestra de fosas nasales, faringe, axila y periné y sembrarlas en medio
selectivo co ol o agar sal manitol que permita recuperar
oca cantidad de S aureus.
ncia o ausencia de S. aureus en cada muestra.
h
Para tímpano i
y recolectar la secreción con aspiración con jeringa. Para tímpano roto, colectar la
secreción con tórula flexible usando espéculo.
a.- Pseudo
nadador” aún cuando hay otras bacterias aerobias que pueden causarla, por lo tanto sólo
se debe ha
b.- En estos cultivos pude haber contaminantes de la piel los cuales no
to
4.8 OTRAS PATOLOGÍAS
4.8.1 CAND
a.- La infección por levaduras de la mucosa bucal, lengua y o
producida por Candida albicans y es común en recién nacidos y adultos
inmunosuprimidos (Ej.VIH-SIDA).
b
o tinción de Gram (An
p
4.8.2 ANGINA DE VINCENT
a
p
ica grave.
b.- El diagnóstico de laboratorio se hace mediante tinción de un extendido directo
obtenido mediante lo descrito en el punto 4.1.b
violeta de genciana. La presencia de muchas espiroquetas y fusiformes además de
polimorfonucleares confirma la infección.
5.0 DETECCIÓN D
a
mo agar sangre, feniletilalcoh
p
b.- Incubar, aislar e identificar S. aureus de acuerdo a los procedimientos de rutina.
c.- Guardar las cepas aisladas por si solicitan estudios posteriores.
d.- En el informe sólo se indica prese
6. 5.2 DETECCIÓN DE PORTADORES DE Neisseria meningitidis
a.- Tomar muestra de la garganta y nasofaringe, con tórula por detrás de la úvula en la
orción nasal de la faringe. Habitualmente en la muestra de nasofaringe se obtiene
ayor número de organismos. Sembrar en un medio selectivo como Thayer Martin.
b.- Emplear ra toma de muestra, transporte, incubación,
islamiento e identificación de N. meningitidis. (ver capítulo correspondiente).
.- En caso de búsqueda de faringitis gonocócica, se debe informar como “Hubo o no
esarrollo de Neisseria gonorrhoeae”. Si hay sobre desarrollo de flora normal o cultivo
uestra.
.- La investigación dirigida a otros patógenos específicos, debe ser informando como
prese
H. J. eds. Manual of Clinical Microbiology. 5th de.
, 1993.
6th
de
. Murray, Baron, Pfaller, Tenover, Yolken. Manual of Clinical Microbiology. 7th
ed.
p
m
los procedimientos habituales pa
a
c.- Guardar las cepas de N. meningitidis por si solicitan estudios posteriores.
d.- Informar sólo la presencia o ausencia de N. meningitidis y el grupo serológico.
6.0 INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS
a.- En una secreción faríngea corriente se debe informar la presencia o ausencia de
Streptococcus β hemolítico.
b
d
invadido por levaduras, solicitar nueva m
c
ncia o ausencia de los mismos
7.0 REFERENCIAS
1. Ballows A, Shadomy
Washington D.C.ASM, 1991.
2. Isenberg H. Clinical Microbiology Procedures Handbook. Vol 1
3. Murray, Baron, Pfaller, Tenover, Yolken. Manual of Clinical Microbiology.
.Washington D.C.ASM, 1995.
4
Washington D.C. ASM, 1999.
5. Vandepitte, K. Engback, P. Piot y C. C. Henck Basic Laboratory Procedures in
Clinical Bacteriology. WHO 1991.
7. MUESTRAS DEL TRACTO RESPIRATORIO INFERIOR
piratorio inferior, es decir las que comprometen:
Chi dad infantil tardía y una de las primeras causas de
s infecciones no es fácil debido a que la muestra
clínica necesariamente pasa a través de la orofaringe, lugar donde se puede contaminar
con numerosas especies bacterianas, salvo aquellas muestras que se obtienen
directamente desde el sitio de la lesión.
2.0 TIPOS DE MUESTRAS
-Expectoración
-Aspirado traqueal
-Lavado bronquial
-Boncoscopía (cepillado bronquial, lavado broncoalveolar)
-Biopsia bronquial
-Biopsia pulmonar
3.0 PROCEDIMIENTO
3.1 EXAMEN MICROSCÓPICO
Preparar un extendido de la muestra y hacer tinción de Gram (Anexo Tinciones)
para e élulas
scamosas; si la secreción es del tracto respiratorio inferior, indicada por la presencia de
btenidas de pacientes transplantados de Médula Osea u otro
acientes inmunosuprimido puede no contener leucocitos) y la presencia del patógeno
probab
a.- Cua
n microorganismo predominante, si no hay
icroorganismos predominantes o si hay ausencia de microorganismos.
nción de Gram para guiarse en la interpretación de las
lacas de cultivo.
1.0 GENERALIDADES
Las infecciones del tracto res
tráquea, bronquios, bronquiolos, alvéolos y/o parénquima pulmonar, constituyen en
le la primera causa de mortali
muerte por infección nosocomial.
El diagnóstico etiológico de esta
valuar si hay contaminación orofaríngea, indicada por la presencia de c
e
leucocitos ( las muestras o
p
le indicado por el organismo predominante asociado con leucocitos.
3.2 INTERPRETACIÓN DE LA TINCIÓN DE GRAM
ntificar el número de células escamosas examinando 10 campos con objetivo
10x.
b.- Interpretar la calidad de la muestra de acuerdo a Tabla 1.
c.- Informar: si hay presencia de u
m
d- Use los resultados de la ti
p
8. TABL
INCIÓN DE GRAM
A 1: CLASIFICACIÓN DE LA MUESTRA DE EXPECTORACIÓN POR
T
GRUPO Nº de células por campo
Leucocitos Células Epiteliales
6 < 25 < 25
5 > 25 < 10
4 > 25 10 – 25
3 > 25 > 25
2 10 – 25 > 25
1 < 10 > 25
Se recomienda no cultivar los Grupo 1,2,3
3.3 FLUJOGRAMA PARA EL EXAMEN DE MUESTRAS DEL
TRACTO RESPIRATORIO INFERIOR SEGÚN OBSERVACIÓN DE TINCIÓN
DE GRAM
Cantidad de células epiteliales (C.E.)y polimorfonucleares(PMN)
MUESTRAS DE ESPUTO
LB, CP, BB,LBA;BP (*)
in importar cantidad C.E 10-25 C.E > 25 por campo
e células epiteliales) PMN>25 por campo PMN 10-25 por campo
A NO
CULTIVO
(solicitar nueva muestra).
CULTIVAR E
INVESTIGAR
Streptococcus α hemolítico:
investigar pneumoniae
treptococcus β hemolítico:
investigar Streptococcus Grupo A
us
vaduras
ocardia.
(s
d
MUESTR
APTA PARA
S.
S
bacilos gramnegativos
Staphylococc
le
hongos
Micobacterias
N
9. Estudiar solo si es predominante:
) LB = Lavado bronquial
CB = Cepillado bronquial
B = u al
LBA= Lavado broncoalveolar
AP = Aspirado pulmonar
LBA y orma cuantitativa y establecer niveles de corte.
3.4 SIEMBRA DE LAS MUESTRAS
onkey
.- Incubar agar sangre y agar chocolate a 35ªC en atmósfera con 5-7% de CO2. Agar
olato ( solo en muestras no contaminadas con flora oral) en
l.
ar las placas a las 24 hrs. de incubación, si no hay desarrollo visible, incubar
rs. adicionales. El tioglicolato incubarlo hasta 5 días antes de descartar.
rollo, hacer identificación del microorganismo patógeno.
3.5 CEPILLADO BRONQUIAL Y LAVADO BRONQUIOALVEOLAR
epillado Bronquial son muestras tomadas por
l cual es un método seguro para obtener secreciones directamente de los
alvéolos, pero debe ser realizado por personal entrenado, es un método caro
e obtención de muestras, que se contamina con flora de la porción superior del aparato
licaciones. Por lo anterior es poco realista utilizar este
étodo de rutina en todo paciente con infección de las vías respiratorias inferiores y
ebe re ionados, tales como pacientes con patología crónica o
fracta ntes inmunocomprometidos en los cuales el
iagnó a establecerse con muestras de expectoración. Los
dos por broncoscopía para agentes bacterianos habituales causantes de
eumonias son considerados comparables, pero no mejor que los cultivos obtenidos de
3.51 Toma de Muestra
La broncoscopía se realiza con el paciente sentado o recostado y el instrumento
o aplicación tópica con xilocaína u otro equivalente. Los anestésicos
Haemophilus
Moraxella
(*
B Biopsia bronq i
CB sembrar en f
a.- Sembrar muestras en agar sangre, agar chocolate suplementado, agar Mac C
(opcional).
b
Mac Conkey y tioglic
atmósfera norma
c.- Examin
por 24 h
d.- Si hay desar
Lavado Bronquial y C
broncoscopía, e
bronquios y
d
respiratorio y no exento de comp
m
d servarse para casos selecc
re ria o aquellos casos de pacie
d stico etiológico no pued
cultivos obteni
n
expectoración obtenida con criterios citológicos aceptables.
se pasa a través de las fosas nasales o por vía oral. Se aplica antestesia local por
nebulización
tópicos tienen propiedades antibacterianas, pero los estudios disponibles muestran que
esto no afecta el recobrar microorganismos si la muestra es procesada dentro de dos
horas de obtenida.
10. 3.52 Procesamiento
Las muestras para estudios microbiológicos son consideradas en dos categorías:
) Ca en
problemas de interpretación, a pesar de contaminación con flora de la vía aérea
sup
o pipeta de 10 Ul.
5° C con 5-7% CO2 hasta por 48 horas. El tioglicolato incubar hasta 5
día
Recuentos de bacterias de >
a tegoría N° 1: Incluye estudios para detectar microorganismos que no tien
erior. Esto inlcuye agentes micóticos oportunistas, parásitos, Legionella spp. y
Mycobacterias.
Para lavado bronquioalveolar: Se instilan 20 ml de suero fisiológico, luego se
aspiran a 50-100 mm de Hg para recolectar el líquido de lavado. El procedimiento
se repite 5 veces con un total de 100 ml de suero instilado, del cual se recupera
alrededor de 40-70 ml.
Aproximadamente 15 ml se necesitan para cultivo de bacterias aerobias, Legionella
spp., Nocardia spp., hongos, mycobacterias y virus.
Para estudio de bacterias habituales, las muestras de LBA son enviadas al
laboratorio en cantidad mínima de 1 ml de solución salina estéril. Mezclar con
vortex para resuspender previo a la siembra y sembrar en PAS, ACHO, Mac
Conkey y tioglicolato usando un asa calibrada de 0.01 ml
Incubar a 3
s.
104
son considerados significativos.
lizar estudios para bacterias anaerobias.
Se pueden lograr mejor rendimiento utilizando un cepillo protegido, el cual es
ona en que hay secreción purulenta, el cual cuando
s puesto en un tubo que contiene 1 ml de ringer lactato estéril, el cual es
key y
tioglicolato, permite el estudio para bacterias anaerobias.
b) Categoría N° 2: Esta incluye el estudio de microorganismos que pueden ser parte
de la flora oral. Los cultivos de rutina se le pueden realizar de manera similar a la
expectoración, y estos también tienen el problema de contaminación con flora bucal.
No se deben rea
dirigido directamente hacia la z
es retirado e
mezclado con un vórtex. Se inocula 0.01 ml en PAS; ACHO, Mac Con
Incubar durante 48 horas. El tioglicolato incubar hasta 5 días.
Recuentos de colonias de >103
son considerados significativos, dado que estos
representan alrededor de 106
/ml de la solución original.
3.5 Informe Semicuantitativo
- Si no hay crecimiento: No hubo desarrollo microbiano.
-Si hay crecimiento de 1-2 colonias: Muy escaso desarrollo microbiano.
ado desarrollo microbiano.
no sub
ente por tinción del caldo).
-Si hay crecimiento de 3-10 colonias: Escaso desarrollo microbiano.
-Si hay crecimiento mayor a 10 colonias Moder
-Si hay colonias presentes: Abundante desarrollo microbiano.
en un área 1° y 2° de inoculación.
Si un organismo es observado en la tinción de Gram del caldo (caldo
cultivado o sin desarrollo en el sub cultivo), informar microorganismo observado
solam
11. Si un microorganismo está solo presente en el sub cultivo del caldo informar
ción mecánica se define como la neumonia en un
paciente en ventilación mecánica luego de 48 horas. Durante años se utilizó para su
e Joh nson al de 1972, el cual incluye criterios no
ienda el
onia Asociada a Ventilación Mecánica
ivo d na
diag óstica comp s
basadas en estudios fibrobroncoscópicos y tiene la ventaja de la universalidad de su
plicación, bajo costo independencia de equipos humanos y técnicos restringidos.
Se
y >
microorganismo aislado de caldo solamente.
3.54 Informe Cuantitativo
-N° de colonias (<10)= <103
-N° de colonias (10-100)=103
-104
-N° de colonias (100-1000)=104
-105
-N° de colonias(>1000)=>105
3.6 Cultivo cuantitativo de aspirados endotraqueales en paciente en
Ventilación Mecánica
La neumonia asociada a ventila
diagnóstico los criterios d a et
específicos, por lo que se recom uso de criterios microbiológicos
cuantitativos para el diagnóstico de Neum
(NAVM). El uso del cultivo cuantitat el aspirado endotraqueal tiene u
sensibilidad y especificidad n s arables a las estrategias diagnóstica
a
recomienda informar los recuentos microbiológicos de todas las especies
bacterianas potencialmente patógenas y que su lectura sea interpretada utilizando al
menos dos puntos de corte ( <103
106
ufc/ml). Este enfoque permite dar mayor
flexibilidad al grupo tratante sobre interpretación de la etiología polimicrobiana
pre
tibiótico cuando el recuento sea muy
bajo.
tud cuando se ha realizado un cambio en la terapia
ntimicrobiana en la últimas 72 horas, por cuanto el estudio cuantitativo puede verse
as bacterianas.
sobre estudios diagnósticos invasivos y no
de la NAVM en pediatría. El cultivo cuantitativo del
pirado endotraqueal puede ser aplicado, aunque su lectura sólo puede ser realizada
or extrapolación, utilizando los puntos de corte descritos para los adultos.
ltivo de AET
sente en algunos casos y sobre la decisión de dirigir el estudio hacia causas
potenciales y/o suspender el tratamiento an
No se recomienda su solici
a
afectado.
Esta dirigido hacia algunas etiologí
No existe experiencia significativa
invasivos en el reconocimiento
as
p
3.61 Indicaciones de cu
Se recomienda realizar cultivo cuantitativo de AET a todo paciente con sospecha de
NAVM, conectado en un tiempo mayor de 48 horas y que presente criterios clínicos
y radiológicos y en el que no se haya realizado un cambio en el tratamiento
antimicrobiano en las últimas 72 horas.
12. 3.62 Toma de Muestra
Se debe tomar una muestra en forma estéril, utilizando sonda de aspiración
introducida por el tubo endotraqueal (TET), conectado en el otro extemo a un
colector o trampa estéril. Debe ser realizado por un profesional entrenado.
La muestra no se debe diluir y debe ser enviada de inmediato al laboratorio.
3.62 Procesamiento
-Diluir la muestra a la mitad con suero fisiológico estéril(dilución1:2).
nte 2 minutos.
ósfera aeróbica hasta 72 horas.
a muestra puede también ser sembrada en ACHO para la detección de
.63 Informe de Laboratorio
a emisión del informe debe incluir un detalle de cada microorganismo aislado, con
recuento y antibiograma correspondiente. La presentación de los potenciales
gentes identificados es necesaria debido a que cerca de un tercio de los casos tienen
nos.
colonia: equivale a 20.000 ufc/ml (2x104
).
4.0
ente patógeno en forma
predominante, asociado a una buena calidad de muestra tiene valor diagnóstico cuando
el c
-Homogeneizar con perlas de vidrio y agitador dura
-Extraer 100 Ul y diluir en 9,9 ml de suero fisiológico y agitar ( dilución 1:100).
-Rotular una placa de agar sangre y Mac conkey como A y el otro set como B.
-Sembrar 100 Ul (0,1 ml) en el set de placas A ( dilución final 1:2000).
-Sembrar 10 Ul (0,01 ml ) en el set de placas B ( Dilución final 1:20.000).
-Incubar a 35° C en atm
L
Haemophilus influenzae en caso de NAVM de inicio precoz.
La tinción de Gram de este tipo de muestras tiene un rendimiento limitado, ya que
no permite predecir que tipo de microorganismos tendrá un recuento significativo.
3
L
su
a
aislamientos polimicrobia
- Set Placas A:
1 colonia: equivale a 2000 ufc/ml (2x103
).
5 colonias: equivale a 10.000 ufc/ml (1x104
).
50 colonias equivale a 100.000 ufc/ml ( 1x105
).
-Set de placas B:
1
5 colonias : equivale a 100.000 ufc/ml ( 1x105
).
50 colonias equivale: 1.000.000 (>1x106
).
INTERPRETACIÓN DE LOS CULTIVOS
El desarrollo de un microorganismo potencialm
uadro clínico es compatible.
13. 5.0 REFERENCIAS
1.
2. Laboratorio de Infecciones del tracto respiratorio
ajo.Septiembre,1987
3. ical Microbiology Procedures Handbook. Vol 1, 1993.
4.
5. al of Clinical Microbiology. 7th
ed.
ashington D.C. ASM, 1999.
6. gback, P. Piot y C. C. Henck Basic Laboratory Procedures in
7. eumonia Asociada a Ventilación
. Clinical Micobiology procedures Handbook. Isemberg H. Volumen N° 1. 1.15.
. Ventilator- Associated Pneumonia or Not? Contemporay Diangosis. Mayhall Glen.
rzo- Abril 2001.
Ballows A, Shadomy H. J. eds. Manual of Clinical Microbiology. 5th de.
Washington D.C.ASM, 1991.
Cumitech 7A. Diagnóstico de
b
Isenberg.H. Clin
Murray, Baron, Pfaller, Tenover, Yolken. Manual of Clinical Microbiology. 6th de.
Washington D.C.ASM, 1995.
Murray, Baron, Pfaller, Tenover, Yolken. Manu
W
Vandepitte, K. En
Clinical Bacteriology. WHO 1991.
Documento "Consenso diagnóstico de la N
Mecánica". Sochinf
8
9
Emerging Iinfectious Diseases. Vol 7;, N° 2 Ma