Este documento presenta información sobre un curso de análisis instrumental de productos agroindustriales que incluye el uso de cromatografía de gases. El documento explica los principios básicos de la cromatografía de gases, sus aplicaciones en diversas industrias y áreas de investigación, y los componentes volátiles comunes encontrados en fermentaciones como bebidas alcohólicas.

1. CURSO: Análisis instrumental de productos Agroind.
CICLO: VI
DOCENTE
ING. RODRIGUEZ PAUCAR Gilbert.
INTEGRANTES:
VEGA VIERA, Jhonas Abner
MUÑOZ ROJAS Andrea Gisela.
NUEVO CHIMBOTE - PERÚ
"AÑO DE LA PROMOCIÓN DE LA INDUSTRIA RESPONSABLE Y DEL COMPROMISO CLIMÁTICO"

2. I. INTRODUCCION
La cromatografía de gases se puede aplicar a gases y cualquier compuesto que pueda ser volatilizado o convertido en un derivado volátil; la cromatografía de gases tiene amplia aplicación, en las industrias se enfoca principalmente a evaluar la pureza de los reactantes y productos de reacción o bien a monitorear la secuencia de la reacción, para los fabricantes de reactivos químicos su aplicación para la determinación de la pureza es lo más importante.
En la investigación es un auxiliar indispensable para diversas técnicas de evaluación, entre las principales están los estudios cinéticos, análisis de adsorción a temperatura programada, determinación de áreas específicas por adsorción de gas y determinación de isotermas de adsorción.
En el campo también pueden ser aplicados, principalmente en estudios de contaminantes del agua: insecticidas en agua, pesticidas en aguas de lagos, lagunas, ríos; desechos industriales descargados en ríos o lagunas.
En la industria del petróleo juega una función primordial, por medio de la cromatografía se pueden analizar los constituyentes de las gasolinas, las mezclas de gases de refinería, gases de combustión, etc.
II. OBJETIVOS.
o Conocer las bases científicas de la cromatografía de gases.
o Realizar curvas de calibración de los estándares de alcoholes y analizar muestras de bebidas alcohólicas en el cromatografo de gases.
III. MARCO TEÓRICO.
La cromatografía de un gas para la separación de los componentes en una mezcla. La base del proceso descansa dentro de la columna de separación, la cual normalmente es una tubería de diámetro pequeño, empacada con una cama estacionaria de gran área de superficie. Una fase móvil se filtra en la cama estacionaria .La fase que se mueve es un gas, de ahí el nombre.
Los procesos básicos responsables de las separaciones cromatográficas gas sólido y gas liquido son, respectivamente: Absorción y separación o partición .Aunque las separaciones pueden

3. llevarse a cabo por medio de análisis por elución, frontal y desplazamiento, en la practica la elusión es la mas común.
En el método de elusión de cromatografía de gas ,una corriente de gas transportador fluye a través de la columna .Una muestra se inyecta dentro del gas transportador como un tapón de vapor que es arrastrado dentro de la cabeza de la columna cromatográfica empacada .La separación de los componentes que comprende la muestra resulta de una diferencia de las múltiples fuerzas por las cuales los materiales e la columna tienden a retener cada uno de los componentes .Ya sea que la naturaleza de la retención sea absorción, solubilidad etc. La columna retiene a unos componentes más tiempo que a otros, son selectivamente retenidos en la fase estacionaria
Clasifica. general Método específico Fase estacionaria Tipo de equilibrio Cromatografía de líquidos (LC) (fase móvil: líquida) Líquido-líquido, o reparto Líquido absorbido sobre un sólido Distribución entre líquidos inmiscibles Líquido-fase unida químicamente
Esp. Orgánica. enlaz. a una superf. sólidas Distribuc. Entre el líqu y la sup. Enlaza. Líquido-sólido o adsorción sólido adsorción Intercambio Iónico
Resina de intercambio iónico Intercambio iónico Exclusión por tamaño Líquidos en los Inter.. de un sólido poliméri. Distribución/exclusión Gramatografía de gases (GC) (fase móvil: gas Gas-líquido
Líquido adsorbido sobre un sólido Distribución entre un gas y un líquido Gas-fase unida químicamente Esp. orgánic. enlaz. a una superf. sólidas Distribuc. entre el líqu y la sup. Enlaza. Gas-sólido
sólido Adsorción

4. Crom. De fluidos supercríticos (SPC) Esp. orgánic. enlaz. a una superf. sólidas distrib. entre el fluido supercrít. y la su. Enl
2.1. Cromatografía.
La cromatografía de gases es una técnica cromatografía en la que la muestra se volatiliza y se inyecta en la cabeza de una columna cromatografía. La evaluación se produce por el flujo de una fase móvil de gas inerte. A diferencia de los otros tipos de cromatografía, la fase móvil no interactúa con las moléculas del analito; su única función es la de transportar el analito a través de la columna.
 Tipos de cromatografía de gases.
Existen dos tipos de cromatografía de gases:
o Cromatografía gas-sólido (GSC)
En la GSC la fase estacionaria es sólida y la retención de los analitos en ella se produce mediante el proceso de adsorción. Precisamente este proceso de adsorción, que no es lineal, es el que ha provocado que este tipo de cromatografía tenga aplicación limitada, ya que la retención del analito sobre la superficie es semipermanente y se obtienen picos de elución con colas. Su única aplicación es la separación de especies gaseosas de bajo peso molecular.
o Cromatografía gas-líquido (GLC)
La GLC utiliza como fase estacionaria moléculas de líquido inmovilizadas sobre la superficie de un sólido inerte.
 Usos y aplicaciones de la cromatografía de gases.
La cromatografía de gases tiene amplia aplicación, en las industrias se enfoca principalmente a evaluar la pureza de los reactantes y productos de reacción o bien a monitorear la secuencia de la reacción, para los fabricantes de reactivos químicos su aplicación para la determinación de la pureza es lo más importante.
En la investigación es un auxiliar indispensable para diversas técnicas de evaluación, entre las principales están los estudios cinéticos, análisis de adsorción a temperatura programada, determinación de áreas específicas por adsorción de gas y determinación de isotermas de adsorción.

5. En el campo también pueden ser aplicados, principalmente en estudios de contaminantes del agua: insecticidas en agua, pesticidas en aguas de lagos, lagunas, ríos; desechos industriales descargados en ríos o lagunas.
En la industria del petróleo juega una función primordial, por medio de la cromatografía se pueden analizar los constituyentes de las gasolinas, las mezclas de gases de refinería, gases de combustión, etc.
Las aplicaciones de la cromatografía son múltiples y la convierten en la técnica de análisis más poderosa que existe, su utilización requiere principalmente de constancia y entusiasmo.
2.2. Principales compuestos volátiles encontrados en las fermentaciones.
Los compuestos volátiles presentes en las bebidas alcohólicas son compuestos secundarios formados de la fermentación alcohólica del mosto durante alguna etapa del proceso de fabricación. Estos compuestos pertenecen a clases funcionales de ácidos, esteres, aldehídos y alcoholes, en proporciones menores forman también cetonas, compuestos fenoles, aminas. Las bebidas alcohólicas son formadas básicamente por una solución de etanol agua. Estos son dos compuestos mayoritarios, que a diferencia de productos secundarios, sienten los alcoholes superiores, principalmente isoamilico, isobutilico, 1-propanol, esteres, principalmente el acetato de etilo contribuyen más significativamente para el aroma y sabor (Miranda 2005).
 Metanol.
El metanol es considerado como un contenido en las bebidas alcohólicas, se tolera un límite máximo de 20mg/100ml de alcohol anhidro en la cachaza para la legislación brasileña. Esto es proveniente de la actividad del metabolismo de saccharomyces cerviciae por la actividad de enzimas pépticas (ficagna 2005).
 Alcoholes superiores.
Durante la fermentación alcohólica, las levaduras producen etanol, u otros alcoholes con más de dos carbonos en su cadena, llamados alcoholes superiores. Estos alcoholes de interés en la cachaza, vino, cerveza deben ser cuantificados como alcoholes: isoamilico (alcoholes

6. 2-metil-1-butano o 3-metil-1-butano), isobutilico (2-metil-1-propanol), n-propilico (1- propanol). El límite máximo de concentración de estos alcoholes es de 360mg/100ml de alcohol anhidro (Brasil, citado por Fontes 2007).
La producción de estos alcoholes durante la fermentación alcohólica se ve influenciado principalmente por las condiciones del medio, entre ellas la concentración de azucares, PH, el contenido de fuente de nitrógeno disponible, temperatura de fermentación, aeración y tipo de levadura (Ficagna 2005).
 Descripción de los instrumentos o aparatos usados
La GC se lleva a cabo en un cromatógrafo de gases. Éste consta de diversos componentes como el gas portador, el sistema de inyección de muestra, la columna (generalmente dentro de un horno), y el detector.
 Gas portador
El gas portador debe ser un gas inerte, para prevenir su reacción con el analito o la columna. Generalmente se emplean gases como el helio, argón, nitrógeno, hidrógeno o dióxido de carbono, y la elección de este gas en ocasiones depende del tipo de detector empleado. El almacenaje del gas puede ser en balas normales o empleando un generador, especialmente en el caso del nitrógeno y del hidrógeno. Luego tenemos un sistema de manómetros y reguladores de flujo para garantizar un flujo estable y un sistema de deshidratación del gas, como puede ser un tamiz molecular.
Generalmente la regulación de la presión se hace a dos niveles: un primer manómetro se sitúa a la salida de la bala o generador del gas y el otro a la entrada del cromatógrafo, donde se regula el flujo. Las presiones de entrada varían entre 10 y 25 psi, lo que da lugar a caudales de 25 a 150 mL/min en columnas de relleno y de 1 a 25 mL/min en columnas capilares. Para comprobar el caudal se puede utilizar un rotámetro o un simple medidor de pompas de jabón, el cual da una medida muy exacta del caudal volumétrico que entra a la columna.
2-metil-1-propanol

7.  Sistema de inyección de muestra
La inyección de muestra es un apartado crítico, ya que se debe inyectar una cantidad adecuada, y debe introducirse de tal forma (como un "tapón de vapor") que sea rápida para evitar el ensanchamiento de las bandas de salida; este efecto se da con cantidades elevadas de analito. El método más utilizado emplea una microjeringa (de capacidades de varios microlitros) para introducir el analito en una cámara de vaporización instantánea. Esta cámara está a 50ºC por encima del punto de ebullición del componente menos volátil, y está sellada por una junta de goma de silicona repta o septum.
En GC se emplean dos tipos de columnas: las empaquetadas o de relleno y las tubulares abiertas o capilares. Estas últimas son más comunes en la actualidad (2005) debido a su mayor rapidez y eficiencia. La longitud de estas columnas es variable, de 2 a 50 metros, y están construidas en acero inoxidable, vidrio, sílice fundida o teflón. Debido a su longitud y a la necesidad de ser introducidas en un horno, las columnas suelen enrollarse en una forma helicoidal con diámetros de 10 a 30 cm, dependiendo del tamaño del horno.
La temperatura es una variable importante, ya que de ella va a depender el grado de separación de los diferentes analitos. Para ello, debe ajustarse con una precisión de décimas de grado. Dicha temperatura depende del punto de ebullición del analito o analitos, y por lo general se ajusta a un valor igual o ligeramente superior a él. Para estos valores, el tiempo de elución va a oscilar entre 2 y 30-40 minutos. Si tenemos varios componentes con diferentes puntos de ebullición, se ajusta la llamada rampa de temperatura con lo cual ésta va aumentando ya sea de forma continua o por etapas. En muchas ocasiones, el ajustar correctamente la rampa puede significar separar bien o no los diferentes analitos. Es recomendable utilizar temperaturas bajas para la elución, pero conforme la temperatura es mayor la elución es más rápida, pero corriendo el riesgo de descomponer el analito.
Inyección de vaporización directa.

8.  Columnas y sistemas de control de temperatura
o Detectores
El detector es la parte del cromatógrafo que se encarga de determinar cuándo ha salido el analito por el final de la columna. Las características de un detector ideal son:
 Sensibilidad: Es necesario que pueda determinar con precisión cuándo sale analito y cuando sale sólo el gas portador. Tienen sensibilidades entre 10-8 y 10-15 g/s de analito.
 Respuesta lineal al analito con un rango de varios órdenes de magnitud.
 Tiempo de respuesta corto, independiente del caudal de salida.
 Intervalo de temperatura de trabajo amplio, por ejemplo desde temperatura ambiente hasta unos 350-400ºC, temperaturas típicas trabajo.
 No debe destruir la muestra.
 Estabilidad y reproducibilidad, es decir, a cantidades iguales de analito debe dar salidas de señal iguales.
 Alta fiabilidad y manejo sencillo, o a prueba de operadores inexpertos.
 Respuesta semejante para todos los analitos, o
 Respuesta selectiva y altamente predecible para un reducido número de analitos

9.  Detector de ionización de llama
El detector de ionización de llama es un detector utilizado en cromatografía de gases. Es uno de los detectores más usados y versátiles. Básicamente es un quemador de hidrógeno/oxígeno, donde se mezcla el efluente de la columna (gas portador y analito) con hidrógeno. Inmediatamente, este gas mezclado se enciende mediante una chispa eléctrica, produciéndose una llama de alta temperatura. La mayoría de compuestos orgánicos al someterse a altas temperaturas pirolizan y se producen iones y electrones, que son conductores eléctricos. Este hecho se aprovecha estableciendo una diferencia de potencial de unos centenares de voltios entre la parte inferior del quemador y un electrodo colector situado por encima de la llama. La corriente generada es baja (del orden de los 10-12 A), por lo tanto debe ser amplificada mediante un amplificador de alta impedancia.
El proceso de ionización que se da en la llama es complejo, pero se puede aproximar el número de iones producidos al número de átomos de carbono transformados en la llama. Esto produce que sea un detector sensible a la masa (al número de átomos de carbono que salen de la columna) más que a la concentración, por lo tanto no le afectan demasiado los cambios en el flujo de salida.
Existen algunos grupos funcionales que no dan respuesta en este detector, como el carbonilo, alcohol, halógeno o amina, y tampoco responden gases no inflamables como el CO2, SO2, agua y óxidos de nitrógeno. Este hecho, más que limitar el ámbito de aplicación de este detector, permite el análisis de muestras contaminadas con alguno de los compuestos mencionados.
o Ventajas:
 Alta sensibilidad, del orden de 10-13 g/s.
 Amplio intervalo lineal de respuesta, 107 unidades.
 Bajo ruido de fondo (elevada relación señal/ruido).
 Bajo mantenimiento, fácil de fabricar.
o Desventajas:
 Destruye la muestra (la piroliza).

10. o La fase estacionaria
Las propiedades necesarias para una fase estacionaria líquida inmovilizada son:
1. Características de reparto (factor de capacidad κ' y factor de selectividad α) adecuados al analito.
2. Baja volatilidad, el punto de ebullición de la fase estacionaria debe ser al menos 100ºC mayor que la máxima temperatura alcanzada en el horno.
3. Baja reactividad.
4. Estabilidad térmica, para evitar su descomposición durante la elución.
Existen como mucho una docena de disolventes con estas características. Para elegir uno, debe tenerse en cuenta la polaridad del analito, ya que a mayor polaridad del analito, mayor polaridad deberá tener la fase estacionaria. Algunas fases estacionarias utilizadas actualmente (2005) son:
 Polidimetilsiloxano, fase no polar de uso general para hidrocarburos, aromáticos, polinucleares, drogas, esteroides y PCBs.
 Poli(fenilmetidifenil)siloxano (10% fenilo), para ésteres metílicos de ácidos grasos, alcaloides, drogas y compuestos halogenados.
 Poli (fenilmetil)siloxano (50% fenilo), para drogas, esteroides, pesticidas y glicoles.
 Poli (trifluoropropildimetil) siloxano, para aromáticos clorados, nitroaromáticos, bencenos alquilsustituidos.
 Polietilenglicol, para compuestos como glicoles, alcoholes, éteres, aceites esenciales.
 Poli (dicianoalildimetil) siloxano, para ácidos grasos poliinsaturados, ácidos libres y alcoholes.

11. IV. Materiales y método.
 MATERIALES.
o CROMATOGRAFÍA DE GASES, shmadzu, modelo 2010, puerto de inyección: Split, Detector de ionización de llama., Columna capilar restec-07248, stabilmax, diámetro interno 0.25x0.5 um, longitud 100m, gases (Helio, hidrogeno, aire), Headspace.
Principales partes de un cromatografo de gases.
 Equipo de destilación.
 Balanza analítica.
 Purificador de agua.
 Lavador ultrasonido.
 Filtros de membrana de 0.20um/0.45um.
 Viales para la inyección automática.
 Papel toalla.
 Jeringa descartable.
 Probetas.
 Envases embaces.
 Fiolas.
 Micropipetas.
 Agua ultra pura.
 Etanol grado cromatografico.
 Propanol grado cromatografico.
 Metanol grado cromatografico.
 Muestras: pisco, cerveza, vino, alcohol industrial.

12.  MÉTODOS.
o Procedimiento para obtener la curva de calibración de alcoholes por cromatografía de gases.
Abrir las llaves de los gases a utilizar en este método como se indica en la tabla 01.
Encender el equipo.
Ingresamos al programa GC SOLUTION haciendo doble click.
Se abrirá la ventana de G REAL TIME ANALYSIS, en donde programaremos un nuevo método con los parámetros ya establecidos en la tabla 01.
Tabla 01: condiciones de operación de equipos para la determinación y cuantificar alcoholes.
Gases
Aire
Helio
Hidrogeno Columna Restec-07248, stabilwax – DA 30 meter, 0.25 mm ID, 0.5 umdf
Horno
Tº inicial 55ºC …… Tiempo Tº inicial 3 min.
Tº final 120ºC …… Tiempo Tº final 2 min.
Velocidad de calentamiento 10ºC/min Detector (FID) Temperatura 200ºC Presión de hidrogeno 40ml/min Presión del aire 399.9ml/min Presión de helio 30ml/min
Inyector (Split)
Temperatura 200ºC
Split radio 300
Velocidad lineal 32.9 cmm/sec Duración del método 11.5min
Volumen de inyección
1.0 ul Patrones Etanol, metanol y propanol de grasa cromatografica.
Estabilizar la línea base antes de realizar los análisis de la curva de calibración.
Preparar las concentraciones de la curva de calibración del patrón etanol 0.2%, 0.6%, 1.0% y 1.4% de concentración y enrasar con agua ultra pura.
Nota. Los patrones deberán estar refrigerados a fin de evitar que se volatilicen.

13. - Preparación de concentraciones a partir de:
- Realizados los cálculos para las concentraciones de 0.2%, 1%, y 4% procedemos a al preparación.
Etanol
Propanol
Metanol
99,9 % (pureza)
99,9 % (pureza)
99,5 % (pureza)
0.2 %
0.2 -------------- 99.9 %
X -----------------100%
X = 0.2002 ml
ETANOL
METANOL

14. Se extrajo aproximadamente 0.1 ml de cada uno de las sustancias ya que se aforara en una fiola de 50 ml.
0.2 -------------- 99.5 %
X -----------------100%
X = 0.201 ml
PROPANOL
Se extrajo 0.1 ml de cada una de las sustancias.
Colocamos en una misma fiola lo extraído
Se usó una micropipeta para mayor precisión
Agua ultra pura refrigerada
Se aforo a 50 ml con mucho cuidado
MIX 0.2 %

15. Se extrajo aproximadamente 0.500 ml de cada uno de las sustancias ya que se aforara en una fiola de 50 ml.
NOTA: mantener los reactivos a utilizar refrigerados y utilizar el agua ultra pura refrigerada para evitar la volatilización de los reactivos durante el proceso
1 -------------- 99.9 %
X -----------------100%
X = 1,001ml
ETANOL
METANOL
0.2 -------------- 99.5 %
X -----------------100%
X = 1,005 ml
PROPANOL
Se extrajo 0.500 ml de cada una de las sustancias.
Colocamos en una misma fiola lo extraído
Se usó una micropipeta para mayor precisión
1 %

16. Agua ultra pura refrigerada
Se aforo a 50 ml con mucho cuidado
MIX 1 %
1.4 %
1.4 -------------- 99.9 %
X -----------------100%
X = 1,407 ml
ETANOL
METANOL
1.4 -------------- 99.5 %
X -----------------100%
X = 1,401 ml
PROPANOL

17. Se extrajo aproximadamente 0.700 ml de cada uno de las sustancias ya que se aforara en una fiola de 50 ml.
Se extrajo 0.700 ml de cada una de las sustancias.
Colocamos en una misma fiola lo extraído
Se usó una micropipeta para mayor precisión
Agua ultra pura refrigerada
Se aforo a 50 ml con mucho cuidado
MIX 1.4 %

18. Añadir los viales del equipo aproximadamente 1 ml de las concentraciones preparadas.
Programar e inyectar.
Obtención de cromatogramas.
Se inyecta aproximadamente 1ml de los MIX preparados

19. o Preparación de la muestra para medir alcoholes por GC.
Según NTP 211.035 2003 bebidas alcohólicas método de ensayo determinación de metanol y congéneres de bebidas alcohólicas y en alcohol etílico empleando en su elaboración, mediante cromatografía de gases.
 Para producir que contiene menos del 60% de alcohol en volumen.
- Colocamos 200ml de la muestra a analizar en el sistema de destilación.
- Destilar hasta aproximadamente hasta las 2/3 partes del volumen inicial.
MUESTRAS
Vino
Alcohol

20. - Enrasar el destilador a 200ml con agua ultra pura filtrada.
Nota: Asegurarse de colocar bien el tubo digestor en el destilador de tal manera que no haya pérdida de alcoholes durante el proceso por tanto no altere los resultados
Pasamos las muestras destiladas a una fiola para aforar
Aforamos a 50 ml con agua ultra pura
ALCOHOL
(Sin destilar)
ALCOHOL
(Destilado)
VINO
(Destilado)

21. - La dilución se hará de acuerdo a la curva patrón que se elaboró inicialmente.
- Filtrar en los filtros de disco de porosidad 0.20um/0.45um.
- Para el análisis cromatografica, adicionar a los viales del GC aproximadamente 1 mililitro de la muestra a analizar, propagar e inyectar de 1 ul en los viales.
VINO
(12%)*(푉1)= (1%)*(50 ml)
푽ퟏ= 4.17 ml
ALCOHOL
(90%)*(푉1)= (1%)*(50 ml)
푽ퟏ= 0.56 ml

22. V. ANÁLISIS REALIZADO EN EL CROMATOGRÁFO
El análisis cromatográfico de gases se utilizó estándares para preparar el Mix con 3 diferentes % (Metanol, Etanol y Propanol) 100μL/50ml donde llegamos a identificar los componentes principales en el vino y el alcohol.
 Determinación de algunos componentes para cromatografía.
La determinación de la composición cualitativa y cuantitativa del alcohol se efectuó por cromatografía de gases, empleando para el efecto un cromatógrafo de gases equipado.
Para la identificación de los compuestos, se procedió en primer lugar, a buscar las condiciones para una óptima separación y luego se inyectaron una serie de estándares en idénticas condiciones, comparándose después los tiempos de retención con los de la muestra problema. En el análisis de cromatografía que se observa en las gráficas.
 Calculamos la cantidad de volumen que se echara para realizar los cálculos en la cromatografía de gases.
 Etanol.
99.9 % 0.2ml
 Metanol.
99.9 % 0.2ml
 Propanol.
99.5 % 0.2ml

23.  Mix Standar 0.2%
Se utilizó Estándares para preparar el Mix 0.2 % (Metanol, Etanol y Propanol) 100ul/50ml.
 Mix Standar 1.4%
Se utilizó Estándares para preparar el Mix 1.4 % (Metanol, Etanol y Propanol) 100ul/50ml.

24.  Mix Standar 1%
Se utilizó Estándares para preparar el Mix 1 % (Metanol, Etanol y Propanol) 100ul/50ml.
 Gráficos de los experimentos.
Para realizar la curva de calibración se usó una solución de etanol, metanol y propanol como
patrón interno, se les midió el área a diferentes concentraciones y se hizo la relación de área
entre los dos picos. Los datos para esta se muestran en la gráfica relación de área vs porcentaje
de etanol (v/v).
0 50000 100000 150000 200000 Area
0.000
0.003
0.005
0.007
0.010
0.013
Conc.(x100)
CON. ÁREA
0.2 25000
1 181000
1.4 250000

25. De esta curva se obtiene la ecuación lineal y = mx.
Entonces se adiciona una masa conocida del estándar interno a una masa conocida de muestra y esta mezcla se inyecta al cromatógrafo. Del cromatógrama se obtienen las áreas de analito y del estándar y luego con la ecuación de calibración y conociendo la masa del estándar se puede obtener la masa del analito en la muestra.
⁄ ⁄ 1
VI. RESULTADOS

26. VII. CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES.
 La cromatografía de gases es la mejor y más confiable vía para obtener la composición real de una mezcla estos datos pueden ser de gran utilidad debido a que se pueden calcular diferentes propiedades de la mezcla partiendo de las propiedades de cada componente.
 El proceso de cromatografía de gases es sencillo, automatizado y general; lo que lo hace una prueba ampliamente usado en diferentes industrias.
 El cromatógrafo de gases, se caracteriza por ser una técnica de separación que tiene incorporado un sistema de detección, generalmente continuo (tipo on-line), ya que realiza tanto la separación como la determinación cualitativa y cuantitativa de los solutos.
 La cromatografía es una técnica en la cual los componentes de una mezcla son separados con base en las velocidades a los cuales son separados a través de una fase estacionario por una fase móvil gaseosa líquida.
 La elución es un proceso en la cual los solutos son lavados a través de una fase estacionaria por el movimiento de una fase móvil. Un eluyente es un disolvente que se usa para llevar los componentes de una mezcla a través de una fase estacionaria.
 Un cromatograma es un gráfico de alguna función de concentración de soluto contra el tiempo o volumen de elución. El tiempo de retención TR es el tiempo entre la inyección de una muestra muy la aparición de un pico de soluto en el detector de una columna cromatográfica.
 Existen varios métodos para la continuación de curvas de concentración para el análisis cuantitativo por cromatografía de gases y como ocurre muchas veces en la ciencia la mayor exactitud en esta aparición se paga con una mayor laboriosidad en los mismos.
 Las conclusiones que debe cumplir una sustancia para servir como patrón interno son las siguientes:
1. No encontrarse en el problema que se desea.
2. Tener similitud con los componentes del problema.
3. Proporcionar en sí y con el problema, picos bien resueltos y de buena forma.
4. Eluir en un tiempo cercano al de los componentes del problema.

27.  Las siguientes recomendaciones se deben tomar en cuenta a fin de corregir en buen análisis.
1. Se deberá tener en cuenta un control de la temperatura e intervalo de lo mismo.
2. Tipo y características del detector.
3. Variedad de columnas utilizables.
4. Control del caudal de gas.
5. Estabilidad de la línea de base trabajando al máximo de sensibilidad
6. Tipo de sistema para la inyección de muestras.
 Finalmente, cabe recordar que para el llenado de la jeringa microlítrica, es deseable eliminar inicialmente todo el aire. Esto se puede llevar a cabo absorbiendo y eliminando repetidamente líquido dentro de ella, como un enjuage, de tomarse en cuenta que la cantidad de muestra tomada, debe ser la misma en todos los casos.
VIII. DISCUSIONES.
 La cromatografía de gases en la industria tiene una rama bastante amplia uno de estos estudios es en el control de calidad, en el control de calidad la cromatografía de Gas se utiliza para obtener el perfil cromatográfico donde nos enfocaremos a evaluar la pureza de los reactantes y productos de la reacción y también cuantificarlos, es decir si son mayoritarios o aquellos que, sin ser mayoritarios, tengan una especial tendencia para la calidad (responsabilidad en las propiedades olfativas, por ejemplo). El mayor valor de un perfil Cromatográfico es permitir, ante la presencia de un componente inusual, o ante la ausencia de un constituyente típico, el rechazo de un aceite esencial. (Gloria, 2003).
 En esta práctica se pretenden identificar los componentes de una disolución. Esta puede estar formada por algunos compuestos como etanol, metanol y propanol, siendo las cantidades de cada compuesto desconocidas para nosotros siendo la mezcla completamente aleatoria. Para ello el método a utilizar será la cromatografía de gases. Con este método experimental podremos separar los componentes de una disolución desconocida para luego compararlos con diferentes disoluciones patrón.
La cromatografía de gases es probablemente la más versátil de las técnicas de separación: es aplicable a cualquier mezcla soluble o volátil. De hecho las técnicas de

28. separación suelen dividirse en dos grandes grupos: cromatograficas y no cromatograficas. La elección de una técnica cromatográfica concreta dependerá de la naturaleza y cantidad de la muestra, del objetivo de la separación y de las limitaciones del tiempo y equipo asequible
Puede hacerse una primera distinción entra las técnicas cromatográficas atendiendo a la integración continua o no del sistema de detección. Así, la cromatografía no conlleva a un sistema de detección, mientras que cualquier cromatógrafo de líquidos o gases lleva incorporado dicho sistema siendo, por tanto, auténticos instrumentos.
 Durante las dos últimas décadas se ha demostrado que uno de los métodos más eficientes para el estudio de la identificación de alcoholes por cromatografía de gases. Es un método muy adecuado para la identificación debido a que los componentes del alcohol son compuestos volátiles y de bajo peso molecular. La esencia se inyecta directamente en el cromatógrafo, sin ningún tratamiento previo, lo cual elimina posibles modificaciones en la composición de la muestra en la estructura de sus constituyentes debidas a pre tratamiento. No se eliminan las alteraciones debidas a su temperatura de análisis, que puede afectar componentes termo sensible. En el cromatógrafo, los componentes de la esencia se separan, tras lo cual penetran en el espectrómetro de masas, que permite registrar el correspondiente espectro década una de las sustancias separadas. Los constituyentes del aceite esencial se identifican gracias a los diferentes patrones de fragmentación que se observan en sus espectros de masas. (Gloria, 2003)
 En la cromatografía de gases (CG), la muestra se volatiliza y se inyecta en la cabeza de una columna cromatográfica, la elución se produce por el flujo de una fase móvil de un gas inerte, a diferencia de otros tipos de cromatografía, la fase móvil no interacciona con las moléculas del analito, ya que su única función es transportar el analito a través de la columna. El desarrollo de esta técnica, se debe a su gran sensibilidad, a su polivalencia, a la rapidez de la puesta a punto de análisis nuevos y a las posibilidades de automatización que acrecientan más su interés, en esta los compuestos deben estar en estado gaseoso, el análisis de líquidos o solidos implica poder transformarlos en vapor por calentamiento. Es sin duda el principal obstáculo antes de elegir esta técnica, puesto que limita su empleo al estudio de compuestos moleculares termostables y suficientemente volátiles (Rouessac F. y Rouessac A).

29. IX. BIBLIOGRAFÍA
o Skoog D., Holler F. y Nieman T.; Principios de Análisis instrumental; 5ª Ed. Mc GRAW HILL, España 2001; pág. 738, 739, 759, 765, 770, 771.
o Rouessac F. y Rouessac A.; Análisis Químico: Métodos y Técnicas Instrumentales Modernas; 1ª Ed. Mc GRAW-HILL, España 2003; pág. 60-73.
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o http://mmrc.caltech.edu/GCMS/6890-operating-manual.pdf (Act: año 2000)
o Guía de selección de columnas Agilent J&W para CG; 1ª Ed. Agilent Technologies, EE.UU 2010; pág. 4, 7, 8.
o http://www.mncn.csic.es/docs/repositorio//es_ES//investigacion/cromatografia/principios_de_cromatografia.pdf (Act: año 2009)
o Harris D.; Análisis Químico Cuantitativo; 3ª Ed. Grupo Editorial Iberoamérica S.A. de C.V., México 1992; pág. 665-637.
o http://www.mncn.csic.es/docs/repositorio//es_ES//investigacion/cromatografia/cromatografia_de_gases.pdf (Act: año 2009)