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El agua potable es aquella que cumple con los requisitos microbiológicos, 
organolépticos, físicos, químicos, y radiactivos que establecen las normas sanitarias de 
calidad de agua potable y que se considera apta para el consumo humano.
La contaminación 
proceso de 
alteración o de 
modificación de 
los equilibrios 
físicos, químicos 
o biológicos del 
agua 
responsables de 
su calidad y que 
la hacen 
inadecuada para 
sus numerosos 
usos y 
aplicaciones. 
orígenes: químico o 
microbiológico, 
puede contener 
una gran cantidad 
de sustancias que 
pueden afectar su 
calidad. 
• Gases disueltos 
Sólidos disueltos 
• Materia orgánica no 
ionizada. 
• Material particulado 
(como coloides). 
• Microorganismos. 
¿ Qué hace al agua inadecuada para 
su consumo?
La calidad del agua es un aspecto de gran importancia 
que se debe tener presente cuando se utiliza para el 
consumo o para la fabricación de medicamentos, 
alimentos y cosméticos. 
La calidad microbiológica del agua esta determinada 
por la diversidad, y el número, de poblaciones de 
microorganismos presentes y está perdurablemente 
ligada al uso a que esta está destinada. 
La garantía de esta calidad se basa en el control de la 
presencia y multiplicación de los microorganismos.
En general, la normativa establece que el agua es apta bacteriológicamente para consumo si se encuentra 
exenta de microorganismos patógenos de origen entérico y parasitario intestinal. 
La determinación de la calidad bacteriológica reviste gran importancia en el ámbito de la salud pública ya 
que permite garantizar la inocuidad del agua destinada al consumo evitando así epidemias 
gastrointestinales.
Objetivos del control microbiológico del 
agua 
Inocuidad: que no contenga patógenos 
Aceptabilidad: que no contenga niveles 
de microorganismos suficientes para 
convertirlo en alterado desde el punto 
de vista organoléptico. 
Estabilidad: que tenga una calidad 
constante.
Componentes de un análisis 
microbiológico 
Muestreo: Se debe realizar de forma 
adecuada siguiendo protocolos 
establecidos. Obteniendo muestras 
estadísticamente significativas. 
Método analítico: Se pueden emplear 
diversos métodos analíticos, 
eligiendo el más sensible para 
detectar lo que se quiere. 
Interpretación de resultados: Para ello 
se debe saber el significado de los 
microorganismos.
BACTERIA ENFERMEDAD/INFECCIÓN SÍNTOMAS 
Aeromonas Enteritis 
Diarrea muy líquida, con sangre y 
moco 
Campylobacter jejuni Campilobacteriosis 
Gripe, diarres, dolor de cabeza y 
estómago, fiebre, calambres y náuseas 
Escherichia coli 
Infecciones del tracto urinario, 
meningitis neonatal, enfermedades 
intestinales 
Diarrea acuosa, dolores de cabeza, 
fiebre, uremia homilética, daños 
hepáticos 
Plesiomonas shigelloides Plesiomonas-infección 
Náuseas, dolores de estómago y 
diarrea acuosa, a veces fiebre, dolores 
de cabeza y vómitos 
Salmonella typhi Fiebre tifoidea Fiebre 
Salmonella sp. Salmonelosis 
Mareos, calambres intestinales, 
vómitos, diarrea y a veces fiebre leve 
Streptococcus Enfermedad (gastro) intestinal 
Dolores de estómago, diarrea y fiebre, 
a veces vómitos 
Vibrio El Tor (agua dulce) Cólera (forma leve) Fuerte diarrea
Los controles rutinarios de la totalidad de los microorganismos hídricos, potencialmente riesgosos para la salud, 
resultan difíciles de llevar a cabo debido a: 
la gran variedad de bacterias patógenas cultivables 
la complejidad de los ensayos de aislamientos 
Por esta razón, los análisis bacteriológicos apuntan a la búsqueda de microorganismos indicadores de contaminación 
fecal .
Se encuentran como flora normal 
en la fuente de contaminación, es 
decir, en la materia fecal, 
independientemente de que haya 
o no microorganismos patógenos. 
indicadores de 
contaminación que 
reúnen las 
siguientes 
características: 
Deben ser fáciles de aislar, 
identificar y contar. Así 
como soportar mejor a los 
desinfectantes. 
Son más resistentes y 
sobreviven en el agua más 
tiempo que los patógenos. 
Deben ser abundantes en 
heces y escasos en otros 
medios.
Tres tipos de bacterias del 
genero Las enterobacterias 
o Enterobacteriaceae 
califican a tal fin: 
Coliformes fecales: indican 
contaminación fecal. 
Mesófilos aerobios : 
determinan efectividad del 
tratamiento de aguas. 
Pseudomonas: señalan 
deterioro en la calidad del 
agua o una 
recontaminación.
Comprende los bacilos aerobios o anaerobios 
facultativos, no esporulados que fermentan la 
lactosa de 35°C a 37°C con producción de gas 
y acido en un periodo de 24-48 horas. 
Los géneros que componen 
este grupo son: Escherichia, Klebsiella, 
Enterobacter , Serratia, Citrobacter y 
Edwardsiella. 
coliformes fecales (termotolerantes) 
(término que designa a los coliformes de origen exclusivamente 
intestinal) con capacidad de fermentar lactosa 44°C ± 1°C con 
producción de gas y acido en un periodo de 24 horas. habitan 
normalmente en el intestino humano y de otros animales de 
sangre caliente. denominados termotolerantes por su capacidad 
de soportar temperaturas más elevadas. Esta es la característica 
que diferencia a Coliformes Totales y Fecales .
El uso de los coliformes como indicador sanitario 
puede aplicarse para: 
La evaluación de la calidad microbiológica de un 
producto, aunque su presencia no necesariamente 
implica un riesgo sanitario. 
La demostración y la cuenta de microorganismos 
coliformes, puede realizarse mediante el empleo de 
medios de cultivos líquidos o sólidos con 
características selectivas o diferenciales. 
La calidad sanitaria del agua y hielo utilizados en las 
diferentes áreas del procesamiento de alimentos. 
Evaluación de la eficiencia de prácticas sanitarias e 
higiénicas del equipo.
Bacteria descubierta por el bacteriólogo alemán Theodor von Escherich en 1860, quien 
lo denomino “baterium coli” (bacteria del intestino). Bacilo Gram negativo, Aerobio o 
anaerobio facultativo no esporulado que se caracteriza por poseer la enzima beta-galactosidasa, 
se desarrolla a 44°C ± 1°C, fermenta la lactosa y el manitol produciendo 
gas y acido, produce indol a partir de triptófano, es oxidasa negativo y no hidroliza la 
urea. 
NORMA OFICIAL MEXICANA, "SALUD AMBIENTAL, AGUA 
PARA USO Y CONSUMO HUMANO-LIMITES PERMISIBLES 
DE CALIDAD Y TRATAMIENTOS A QUE DEBE SOMETERSE 
EL AGUA PARA SU POTABILIZACION".
Microorganismos cuya temperatura optima de 
crecimiento fluctúa generalmente entre los 25-40°; en este 
grupo se encuentran la mayoría de los contaminantes y 
patógenos para el hombre. 
Estos microrganismos se desarrollan por: 
 la exposición de la muestra a la contaminación en 
general 
 la existencia de condiciones favorables para la 
multiplicación de microorganismos 
 la presencia de materia orgánica 
La determinación de bacterias mesófilas aerobias también 
es rutinaria en el análisis bacteriológico del agua. 
NOM-127-SSA1-1994 limite permisible Mesofílicos 
aerobios UFC/ml 100
El análisis cuantitativo de bacterias indicadoras de contaminación en una muestra de agua puede realizarse por 
dos metodologías diferentes: 
NMX-AA-042-SCFI-2005 DETERMINACION DEL NUMERO 
MAS PROBABLE (NMP) DE COLIFORMES 
TOTALES,COLIFORMES FECALES (TERMOTOLERANTES) Y 
Escherichia coli PRESUNTIVA. 
NORMA OFICIAL MEXICANA NOM-112-SSA1-1994, BIENES 
Y SERVICIOS. DETERMINACIÓN DE BACTERIAS 
COLIFORMES. TÉCNICA DEL NÚMERO MÁS PROBABLE.
El número de organismos se establece mediante la cuenta de unidades formadoras de colonias (UFC) o el uso 
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El método se basa en la inoculación de alícuotas de la 
muestra diluida o sin diluir, en una serie de tubos de un 
medio de cultivo líquido conteniendo lactosa. 
Los tubos se examinan a las 24 y 48 horas de incubación 
ya sea a 35 a- 37°C. 
Se lleva a cabo la incubación de estos medios selectivos 
hasta por 48 horas a 35 - 37 °C para la detección de 
organismos coliformes y por 24 horas a 44.0 ± 1 °C para 
organismos coliformes fecales (termotolerantes) y E. coli.
NORMA OFICIAL MEXICANA NOM-092-SSA1-1994, 
MÉTODO PARA LA CUENTA DE BACTERIAS 
AEROBIAS EN PLACA. 
NORMA OFICIAL MEXICANA NOM-113-SSA1-1994, 
MÉTODO PARA LA CUENTA DE MICROORGANISMOS 
COLIFORMES TOTALES EN PLACA.
El método permite determinar el número de microorganismos coliformes presentes en una muestra, utilizando 
un medio selectivo (agar rojo violeta bilis) en el que se desarrollan bacterias a 35°C en aproximadamente 24 h, 
dando como resultado la producción de gas y ácidos orgánicos, los cuales viran el indicador de pH y precipitan 
las sales biliares.
Limpiar perfectamente toda el área de trabajo y desinfectar con 
alcohol de 96° 
Homogenizar la muestra (esta deberá estar a temperatura ambiente) 
Tomar un volumen de 100 ml
Preparar una serie de 10 tubos con tapa rosca de bakelita de 10 ml (perfectamente limpios y estériles)
Adicionar a cada tubo 9 ml de caldo lactosado a pH=7 estéril y colocar una campana Durham invertida ( 
debe asegurarse de sacar todas las burbujas de aire de la campana).Esterilizar. Poner a temperatura 
ambiente
Tomar 1 ml de muestra e inocular al primer tubo, agitar con el fin de homogenizar 
Tomar 1ml del primer tubo e inocular el segundo tubo, cerrar el primero. 
Así sucesivamente con toda la serie de 10 tubos (serie de dilución 10-1 a 10-10) 
Incubar por 24 horas a 35-37°C
Tubos positivos. Aquellos que presenten turbiedad o formación de gas en la campana 
Tubos negativos. Aquellos que no presentan turbiedad o formación de gas en la campana. 
Transcurridas las 24 horas observar la turbiedad o formación de gas en la campana
Preparar una serie de 3 tubos con tapa rosca de bakelita de 15-20 ml (perfectamente limpios y estériles) 
Prepara dos serie de 3 tubos con tapa rosca bakelita de 10ml (perfectamente limpios y estériles)
Adicionar a cada serie caldo lactosado a pH6.9 +- 2 estéril como sigue: 
Serie 1 Adicionar a cada tubo 10ml 
Serie 2 Adicionar a cada tubo 9ml 
Serie 3 Adicionar a cada tubo 9.9ml 
Colocar un campana Durham invertida en cada tubo (debe asegurase de sacar todas las burbujas de aire de 
la campana).esterilizar. Poner a temperatura ambiente
Serie 1 Tomar 5 ml de muestra e inocular el primer tubo, agitar con el fin de homogenizar, cerrar, 
Así sucesivamente con toda la serie de 3 tubos 
Serie 2 Tomar 1 ml de muestra e inocular el primer tubo, agitar con el fin de homogenizar, cerrar, 
Así sucesivamente con toda la serie de 3 tubos 
Serie 3 Tomar 0.1 ml de muestra e inocular el primer tubo, agitar con el fin de homogenizar, cerrar, 
Así sucesivamente con toda la serie de 3 tubos
Revisar cada tubo y sacar todas las burbujas de aire de la campana 
Incubar por 48 horas a 35°C (registrar hora de inicio del conteo total de horas) 
Transcurridas la 48hrs observar la turbiedad o formación de gas en la campana 
Registrar tubos positivos y negativos. 
Reportar el índice del NMP/100 ml
Preparar 3 series de 3 tubos con tapa rosca de bakelita de 10 ml (perfectamente limpios y estériles) por cada 
tubo positivo resultante de la prueba presuntiva. 
Adicionar a cada serie caldo verde brillante a pH=7.2 estéril como se indica: 
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Serie 2 Adicionar a cada tubo 9ml 
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Colocar una campana Durham invertida en cada tubo (debe asegurarse de sacar todas la burbujas de aire de la 
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Colocar una campana Durham invertida en cada tubo (debe asegurarse de sacar todas la burbujas de aire 
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Preparar 1 placa o caja Petri (perfectamente limpia y estéril) etiquetarla e incluir una caja in inoculo como 
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Tomar 1ml de muestra y colocarlo en la caja, agregar de 12 a 15ml de agar nutritivo, y homogenizar.
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Incubar las cajas en posición invertida (la tapa hacia abajo) por 24 horas a 35°C (registrar la hora de inicio del 
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Reportar la cantidad de UFC resultantes como cantidad de UFC/100ml
Desinfección: 
Para eliminar del agua los microorganismos dañinos solemos usar desinfectantes. Algunos ejemplos de 
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Determinar el tipo de microorganismos 
presentes y su concentración proporciona 
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Número Más Probable (NMP): Expresión estadística que se utiliza para estimar la cantidad de bacterias coliformes 
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Medio selectivo: Medio de cultivo sólido - liquido que contiene sustancias químicas específicas que permite el 
desarrollo de un grupo de organismos específicos, inhibiendo al mismo tiempo el desarrollo de otros. 
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Medio de cultivo sólido - liquido que contiene sustancias químicas específicas que permiten al observador 
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Fermentación: Oxidación aerobica-anaerobica de compuestos por la acción enzimática de los 
Microorganismo 
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Microorganismo
http://www.salud.gob.mx/unidades/cdi/nom/127ssa14.html 
http://www.lenntech.es/faq-microbiologia-del-agua.htm 
http://tierra.rediris.es/hidrored/ebooks/ripda/pdfs/Capitulo_20.pdf 
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Roger Y. Stanier John L. Ingraham Mark I. Wheelis Page R. Painter 
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Microbiologia del agua

  • 1.
  • 2. El agua potable es aquella que cumple con los requisitos microbiológicos, organolépticos, físicos, químicos, y radiactivos que establecen las normas sanitarias de calidad de agua potable y que se considera apta para el consumo humano.
  • 3. La contaminación proceso de alteración o de modificación de los equilibrios físicos, químicos o biológicos del agua responsables de su calidad y que la hacen inadecuada para sus numerosos usos y aplicaciones. orígenes: químico o microbiológico, puede contener una gran cantidad de sustancias que pueden afectar su calidad. • Gases disueltos Sólidos disueltos • Materia orgánica no ionizada. • Material particulado (como coloides). • Microorganismos. ¿ Qué hace al agua inadecuada para su consumo?
  • 4. La calidad del agua es un aspecto de gran importancia que se debe tener presente cuando se utiliza para el consumo o para la fabricación de medicamentos, alimentos y cosméticos. La calidad microbiológica del agua esta determinada por la diversidad, y el número, de poblaciones de microorganismos presentes y está perdurablemente ligada al uso a que esta está destinada. La garantía de esta calidad se basa en el control de la presencia y multiplicación de los microorganismos.
  • 5. En general, la normativa establece que el agua es apta bacteriológicamente para consumo si se encuentra exenta de microorganismos patógenos de origen entérico y parasitario intestinal. La determinación de la calidad bacteriológica reviste gran importancia en el ámbito de la salud pública ya que permite garantizar la inocuidad del agua destinada al consumo evitando así epidemias gastrointestinales.
  • 6. Objetivos del control microbiológico del agua Inocuidad: que no contenga patógenos Aceptabilidad: que no contenga niveles de microorganismos suficientes para convertirlo en alterado desde el punto de vista organoléptico. Estabilidad: que tenga una calidad constante.
  • 7. Componentes de un análisis microbiológico Muestreo: Se debe realizar de forma adecuada siguiendo protocolos establecidos. Obteniendo muestras estadísticamente significativas. Método analítico: Se pueden emplear diversos métodos analíticos, eligiendo el más sensible para detectar lo que se quiere. Interpretación de resultados: Para ello se debe saber el significado de los microorganismos.
  • 8. BACTERIA ENFERMEDAD/INFECCIÓN SÍNTOMAS Aeromonas Enteritis Diarrea muy líquida, con sangre y moco Campylobacter jejuni Campilobacteriosis Gripe, diarres, dolor de cabeza y estómago, fiebre, calambres y náuseas Escherichia coli Infecciones del tracto urinario, meningitis neonatal, enfermedades intestinales Diarrea acuosa, dolores de cabeza, fiebre, uremia homilética, daños hepáticos Plesiomonas shigelloides Plesiomonas-infección Náuseas, dolores de estómago y diarrea acuosa, a veces fiebre, dolores de cabeza y vómitos Salmonella typhi Fiebre tifoidea Fiebre Salmonella sp. Salmonelosis Mareos, calambres intestinales, vómitos, diarrea y a veces fiebre leve Streptococcus Enfermedad (gastro) intestinal Dolores de estómago, diarrea y fiebre, a veces vómitos Vibrio El Tor (agua dulce) Cólera (forma leve) Fuerte diarrea
  • 9. Los controles rutinarios de la totalidad de los microorganismos hídricos, potencialmente riesgosos para la salud, resultan difíciles de llevar a cabo debido a: la gran variedad de bacterias patógenas cultivables la complejidad de los ensayos de aislamientos Por esta razón, los análisis bacteriológicos apuntan a la búsqueda de microorganismos indicadores de contaminación fecal .
  • 10. Se encuentran como flora normal en la fuente de contaminación, es decir, en la materia fecal, independientemente de que haya o no microorganismos patógenos. indicadores de contaminación que reúnen las siguientes características: Deben ser fáciles de aislar, identificar y contar. Así como soportar mejor a los desinfectantes. Son más resistentes y sobreviven en el agua más tiempo que los patógenos. Deben ser abundantes en heces y escasos en otros medios.
  • 11. Tres tipos de bacterias del genero Las enterobacterias o Enterobacteriaceae califican a tal fin: Coliformes fecales: indican contaminación fecal. Mesófilos aerobios : determinan efectividad del tratamiento de aguas. Pseudomonas: señalan deterioro en la calidad del agua o una recontaminación.
  • 12. Comprende los bacilos aerobios o anaerobios facultativos, no esporulados que fermentan la lactosa de 35°C a 37°C con producción de gas y acido en un periodo de 24-48 horas. Los géneros que componen este grupo son: Escherichia, Klebsiella, Enterobacter , Serratia, Citrobacter y Edwardsiella. coliformes fecales (termotolerantes) (término que designa a los coliformes de origen exclusivamente intestinal) con capacidad de fermentar lactosa 44°C ± 1°C con producción de gas y acido en un periodo de 24 horas. habitan normalmente en el intestino humano y de otros animales de sangre caliente. denominados termotolerantes por su capacidad de soportar temperaturas más elevadas. Esta es la característica que diferencia a Coliformes Totales y Fecales .
  • 13. El uso de los coliformes como indicador sanitario puede aplicarse para: La evaluación de la calidad microbiológica de un producto, aunque su presencia no necesariamente implica un riesgo sanitario. La demostración y la cuenta de microorganismos coliformes, puede realizarse mediante el empleo de medios de cultivos líquidos o sólidos con características selectivas o diferenciales. La calidad sanitaria del agua y hielo utilizados en las diferentes áreas del procesamiento de alimentos. Evaluación de la eficiencia de prácticas sanitarias e higiénicas del equipo.
  • 14. Bacteria descubierta por el bacteriólogo alemán Theodor von Escherich en 1860, quien lo denomino “baterium coli” (bacteria del intestino). Bacilo Gram negativo, Aerobio o anaerobio facultativo no esporulado que se caracteriza por poseer la enzima beta-galactosidasa, se desarrolla a 44°C ± 1°C, fermenta la lactosa y el manitol produciendo gas y acido, produce indol a partir de triptófano, es oxidasa negativo y no hidroliza la urea. NORMA OFICIAL MEXICANA, "SALUD AMBIENTAL, AGUA PARA USO Y CONSUMO HUMANO-LIMITES PERMISIBLES DE CALIDAD Y TRATAMIENTOS A QUE DEBE SOMETERSE EL AGUA PARA SU POTABILIZACION".
  • 15.
  • 16. Microorganismos cuya temperatura optima de crecimiento fluctúa generalmente entre los 25-40°; en este grupo se encuentran la mayoría de los contaminantes y patógenos para el hombre. Estos microrganismos se desarrollan por:  la exposición de la muestra a la contaminación en general  la existencia de condiciones favorables para la multiplicación de microorganismos  la presencia de materia orgánica La determinación de bacterias mesófilas aerobias también es rutinaria en el análisis bacteriológico del agua. NOM-127-SSA1-1994 limite permisible Mesofílicos aerobios UFC/ml 100
  • 17. El análisis cuantitativo de bacterias indicadoras de contaminación en una muestra de agua puede realizarse por dos metodologías diferentes: NMX-AA-042-SCFI-2005 DETERMINACION DEL NUMERO MAS PROBABLE (NMP) DE COLIFORMES TOTALES,COLIFORMES FECALES (TERMOTOLERANTES) Y Escherichia coli PRESUNTIVA. NORMA OFICIAL MEXICANA NOM-112-SSA1-1994, BIENES Y SERVICIOS. DETERMINACIÓN DE BACTERIAS COLIFORMES. TÉCNICA DEL NÚMERO MÁS PROBABLE.
  • 18. El número de organismos se establece mediante la cuenta de unidades formadoras de colonias (UFC) o el uso de la técnica del número más probable (NMP)
  • 19. El método se basa en la inoculación de alícuotas de la muestra diluida o sin diluir, en una serie de tubos de un medio de cultivo líquido conteniendo lactosa. Los tubos se examinan a las 24 y 48 horas de incubación ya sea a 35 a- 37°C. Se lleva a cabo la incubación de estos medios selectivos hasta por 48 horas a 35 - 37 °C para la detección de organismos coliformes y por 24 horas a 44.0 ± 1 °C para organismos coliformes fecales (termotolerantes) y E. coli.
  • 20. NORMA OFICIAL MEXICANA NOM-092-SSA1-1994, MÉTODO PARA LA CUENTA DE BACTERIAS AEROBIAS EN PLACA. NORMA OFICIAL MEXICANA NOM-113-SSA1-1994, MÉTODO PARA LA CUENTA DE MICROORGANISMOS COLIFORMES TOTALES EN PLACA.
  • 21. El método permite determinar el número de microorganismos coliformes presentes en una muestra, utilizando un medio selectivo (agar rojo violeta bilis) en el que se desarrollan bacterias a 35°C en aproximadamente 24 h, dando como resultado la producción de gas y ácidos orgánicos, los cuales viran el indicador de pH y precipitan las sales biliares.
  • 22.
  • 23.
  • 24. Limpiar perfectamente toda el área de trabajo y desinfectar con alcohol de 96° Homogenizar la muestra (esta deberá estar a temperatura ambiente) Tomar un volumen de 100 ml
  • 25. Preparar una serie de 10 tubos con tapa rosca de bakelita de 10 ml (perfectamente limpios y estériles)
  • 26. Adicionar a cada tubo 9 ml de caldo lactosado a pH=7 estéril y colocar una campana Durham invertida ( debe asegurarse de sacar todas las burbujas de aire de la campana).Esterilizar. Poner a temperatura ambiente
  • 27. Tomar 1 ml de muestra e inocular al primer tubo, agitar con el fin de homogenizar Tomar 1ml del primer tubo e inocular el segundo tubo, cerrar el primero. Así sucesivamente con toda la serie de 10 tubos (serie de dilución 10-1 a 10-10) Incubar por 24 horas a 35-37°C
  • 28. Tubos positivos. Aquellos que presenten turbiedad o formación de gas en la campana Tubos negativos. Aquellos que no presentan turbiedad o formación de gas en la campana. Transcurridas las 24 horas observar la turbiedad o formación de gas en la campana
  • 29. Preparar una serie de 3 tubos con tapa rosca de bakelita de 15-20 ml (perfectamente limpios y estériles) Prepara dos serie de 3 tubos con tapa rosca bakelita de 10ml (perfectamente limpios y estériles)
  • 30. Adicionar a cada serie caldo lactosado a pH6.9 +- 2 estéril como sigue: Serie 1 Adicionar a cada tubo 10ml Serie 2 Adicionar a cada tubo 9ml Serie 3 Adicionar a cada tubo 9.9ml Colocar un campana Durham invertida en cada tubo (debe asegurase de sacar todas las burbujas de aire de la campana).esterilizar. Poner a temperatura ambiente
  • 31. Serie 1 Tomar 5 ml de muestra e inocular el primer tubo, agitar con el fin de homogenizar, cerrar, Así sucesivamente con toda la serie de 3 tubos Serie 2 Tomar 1 ml de muestra e inocular el primer tubo, agitar con el fin de homogenizar, cerrar, Así sucesivamente con toda la serie de 3 tubos Serie 3 Tomar 0.1 ml de muestra e inocular el primer tubo, agitar con el fin de homogenizar, cerrar, Así sucesivamente con toda la serie de 3 tubos
  • 32. Revisar cada tubo y sacar todas las burbujas de aire de la campana Incubar por 48 horas a 35°C (registrar hora de inicio del conteo total de horas) Transcurridas la 48hrs observar la turbiedad o formación de gas en la campana Registrar tubos positivos y negativos. Reportar el índice del NMP/100 ml
  • 33. Preparar 3 series de 3 tubos con tapa rosca de bakelita de 10 ml (perfectamente limpios y estériles) por cada tubo positivo resultante de la prueba presuntiva. Adicionar a cada serie caldo verde brillante a pH=7.2 estéril como se indica: Serie 1 Adicionar a cada tubo 10ml Serie 2 Adicionar a cada tubo 9ml Serie 3 Adicionar a cada tubo 9.9ml Colocar una campana Durham invertida en cada tubo (debe asegurarse de sacar todas la burbujas de aire de la campana).Esterilizar. Poner a temperatura ambiente
  • 34. Tomar 0.1ml del tubo positivo resultante de la prueba presuntiva e inocular el primer tubo, agitar con el fin de homogenizar, cerrar. Así sucesivamente en todas las 3 series de 3 tubos Revisar cada tubo y sacar todas las burbujas de aire de la campana. Incubar por 24hrs a 44°C (registrar hora de inicio del conteo total de horas)
  • 35. Transcurridas las 24 horas observar la turbiedad o formación de gas en la campana Registrar tubos positivos y negativos Reportar el índice del NMP/100 ml
  • 36. Prepara 3 series de 3 tubos con tapa rosca de bakelita de 10ml (perfectamente limpios y estériles) por cada tubo positivo resultante de la prueba presuntiva. Adicionar a cada serie (agua de triptona + L o DL triptófano) a pH=7.5 estéril como se indica: Serie 1 Adicionar a cada tubo 5ml Serie 2 Adicionar a cada tubo 4ml Serie 3 Adicionar a cada tubo 4.9ml
  • 37. Colocar una campana Durham invertida en cada tubo (debe asegurarse de sacar todas la burbujas de aire de la campana).Esterilizar. Poner a temperatura ambiente Tomar 0.1ml del tubo positivo resultante de la prueba presuntiva e inocular el primer tubo, agitar con el fin de homogenizar, cerrar. Así sucesivamente con todas las 3 series de 3tubos. Revisar cada tubo y sacar todas las burbujas de aire de la campana. Incubar por 24 horas a 44°C (registrar la hora de inicio del conteo total de horas)
  • 38. Transcurridas las 24 horas observar la turbiedad o formación de gas en la campana Registrar tubos positivos y negativos Reportar el índice del NMP/100 ml
  • 39. Preparar 1 placa o caja Petri (perfectamente limpia y estéril) etiquetarla e incluir una caja in inoculo como testigo de esterilidad. Tomar 1ml de muestra y colocarlo en la caja, agregar de 12 a 15ml de agar nutritivo, y homogenizar.
  • 40. Colocar la tapa de la caja a medio abrir y dejar que se seque y solidifique Una vez seca y solidificada tapar completamente Incubar las cajas en posición invertida (la tapa hacia abajo) por 24 horas a 35°C (registrar la hora de inicio del conteo total de horas)
  • 41. Transcurridas las 24 horas contar todas las colonias desarrolladas (excepto las de mohos y levaduras) incluyendo las colonias puntiformes.
  • 42. Hacer uso del microscopio para resolver los casos en los que no se pueden distinguir las colonias. Reportar la cantidad de UFC resultantes como cantidad de UFC/100ml
  • 43. Desinfección: Para eliminar del agua los microorganismos dañinos solemos usar desinfectantes. Algunos ejemplos de desinfectantes son cloro, UV, ozono (O3) y dióxido de cloro (ClO2).
  • 44. Determinar el tipo de microorganismos presentes y su concentración proporciona herramientas indispensables para conocer la calidad del agua y para la toma de decisiones en relación al control de Vertidos y tratamiento de aguas.
  • 45. Número Más Probable (NMP): Expresión estadística que se utiliza para estimar la cantidad de bacterias coliformes presentes en un volumen de muestra determinado. Inocuidad: Incapacidad para hacer daño Aguas residuales: Las aguas de composición variada provenientes de las descargas de usos municipales, industriales, comerciales, agrícolas, pecuarias, domésticos y similares, así como la mezcla de ellas. Medio selectivo: Medio de cultivo sólido - liquido que contiene sustancias químicas específicas que permite el desarrollo de un grupo de organismos específicos, inhibiendo al mismo tiempo el desarrollo de otros. Medios diferenciales Medio de cultivo sólido - liquido que contiene sustancias químicas específicas que permiten al observador diferenciar distintos tipos de organismos. Fermentación: Oxidación aerobica-anaerobica de compuestos por la acción enzimática de los Microorganismo Organismo aerobio: Organismo que requiere de oxígeno molecular para su desarrollo. Organismo anaerobio: Organismo que se desarrolla en ausencia de oxígeno molecular. Organismo Anaerobio facultativo: Organismo que se desarrolla tanto en condiciones aeróbicas como anaeróbicas. Fermentación: Oxidación aerobica-anaerobica de compuestos por la acción enzimática de los Microorganismo
  • 46. http://www.salud.gob.mx/unidades/cdi/nom/127ssa14.html http://www.lenntech.es/faq-microbiologia-del-agua.htm http://tierra.rediris.es/hidrored/ebooks/ripda/pdfs/Capitulo_20.pdf http://www.lenntech.es/glosario-agua.htm Roger Y. Stanier John L. Ingraham Mark I. Wheelis Page R. Painter Microbiología segunda edición Editorial: REVERTÉ S.A NORMA OFICIAL MEXICANA NOM-112-SSA1-1994, BIENES Y SERVICIOS. DETERMINACIÓN DE BACTERIAS COLIFORMES. TÉCNICA DEL NÚMERO MÁS PROBABLE. NMX-AA-042-SCFI-2005 DETERMINACION DEL NUMERO MAS PROBABLE (NMP) DE COLIFORMES TOTALES,COLIFORMES FECALES (TERMOTOLERANTES) Y Escherichia coli PRESUNTIVA. NORMA Oficial Mexicana NOM-092-SSA1-1994, Bienes y servicios. Método para la cuenta de bacterias aerobias en placa. NORMA OFICIAL MEXICANA NOM-113-SSA1-1994, BIENES Y SERVICIOS. MÉTODO PARA LA CUENTA DE MICROORGANISMOS COLIFORMES TOTALES EN PLACA.