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XII Congreso Internacional de la Sociedad Mexicana de Fitopatología

Evaluación de patogenicidad de
Pythium aphanidermatum en
plántulas de Jatropha curcas
Ofelia Andrea Valdés Rodríguez
Roberto García Espinoza

Yucatán, Mérida
Julio 2010
Antecedentes …


Especie originaria del trópico
y subtrópico mexicano y
centroamericano (Heller,
1996)



J. curcas

Altitud:




Precipitación:




0–1500 m
600–1800 mm

Temperatura:


18 – 35 º C

(Zamarripa y Díaz, 2008)
Probables rutas de
dispersión (Heller, 1996)
Antecedentes …








Semillas pueden ser
consumidas por
humanos
Tallos y hojas
comestibles
México es el centro
de origen (Heller,
1996)
Aun sin definir entre
sub-especie,
variedad o forma

J. curcas no tóxica

Probable centro de origen de J. curcas no tóxica
(Heller, 1996; Schmook y Sanchez, 2000)
Antecedentes …

J. curcas no tóxica



Especie sin domesticar



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muy recientes


Iniciaron en 2006 (Martínez-Herrera
2007)



Poca investigación sobre J. curcas
no tóxica



Identificación incompleta de
patógenos


Reportes identifican solo géneros
Antecedentes …
J. curcas y sus patógenos del suelo


Diversos autores reportan:







Cercospera spp, Phytophora spp., Pythium spp.,
Fusarium spp., Helminthoporium tetramera,
Pestalotiopsis versicolor (Heller, 1996; De la
Vega, 2007).
Oidium sp. Alternaria sp. (Biodisol, 2008)
Clitocide tabescens, Phakopsora Jatrophicola,
Xanthomonas sp. (Esquivel, 2008)
Phymatotrichum omnívorus (Félix Moreno, 2008)
Antecedentes …
J. curcas y P. aphanidermatum


Pythium aphanidermatum




Daña frutos, semillas, raíces y bases de tallos de
plántulas juveniles de más de 60 especies
vegetales en México (Rodríguez, 2001; Parker,
2008)

No existen reportes específicos del grado de
interacción entre el patógeno y J. curcas no
tóxica
Objetivo


Determinar el grado de patogenicidad de
Pythium aphanidermatum atacando
Jatropha curcas no tóxica durante las
etapas de pre y post emergencia.
Sitio experimental y condiciones


Sitio de experimentación:




Suelos:





Veracruz centro
Arenoso
Franco-arcilloso

Clima:




Condiciones naturales
Cálido sub-húmedo
Temperaturas: 23º C – 32º C
Aislamiento del patógeno


Colecta de las muestras





Tejidos
Suelos

Aislamiento e identificación


medios selectivos de Tsao y
Ocana, (1969)
Patogenicidad en pre-germinación


Diseño experimental


Tratamientos: 2









Control: 0 ppgs
Inóculo: 800 ppgs

Individuos: 40
Periodo: 14 días
Selección de semillas: aleatoria
Suelo: franco esterilizado
Temperatura: controlada (24-30º C)
Resultados (pre-germinación)





100% semillas
inoculadas fueron
atacadas por el
patógeno
25% germinación
Ataques en
radícula y tallo
causando daños
irrecuperables
Resultados (pre-germinación)
Patogenicidad en post-germinación
Experimento

Tratamientos

Repeticiones

Periodo

1

0 ppgs
160 ppgs
400 ppgs

20

31 días

2

0 ppgs
160 ppgs
400 ppgs

40

64 días

- Transplante a suelo a los 14 días
- 160 ppgs = 20% suelo inoculado + 80% suelo estéril
- 400 ppgs = 50% suelo inoculado + 50% suelo estéril
- Condiciones ambientales naturales de la región
Resultados (post-germinación)


Amarillamiento
foliar después de
las primeras 2
semanas



No se observaron
diferencias
visuales después
del periodo de 31
a 64 días

Control

160 ppgs

400 ppgs
Resultados (post-germinación)
Medidas aéreas durante infestación de P. aphanidermatum por periodo de 31 días
Tratamientos

N

Diámetro de tallo (mm)

Altura de tallo
(mm)

Número de
hojas

Control -0- ppgs

20

1.50 ± 0.46

54.58 ± 53.18

1.90 ± 1.10

Inoculo 160 ppgs

17*

1.29 ± 0.36

32.18 ± 44.92

1.94 ± 0.75

Inoculo 400 ppgs

16*

1.63 ± 0.40

35.44 ± 33.65

2.13 ± 0.72

*Plántulas fueron Eliminadas por ataques de insectos desfoliadores
Diferencias estadísticas: 0
Resultados (post-germinación)
Pesos secos durante infestación de P. aphanidermatum por periodo de 31 días

Tratamientos

n

Raíces (g)

Tallos (g)

Follaje (g)

Control -0- ppgs

20

0.348 ± 0.28

1.102 ± 0.62

1.914 ± 0.18

Inoculo 160 ppgs

17*

0.267 ± 0.15

1.107 ± 0.63

2.013 ± 0.21

Inoculo 400 ppgs

16*

0.302 ± 0.13

1.071 ± 0.39

1.969 ± 0.13

*Plántulas fueron Eliminadas por ataques de insectos desfoliadores
Diferencias estadísticas: 0
Resultados (post-germinación)
Dia 1
Dia 31

Dia 1
Dia 31

300

Diámetro (mm)

Altura (mm)

2,5

200

100

2,0
1,5
1,0
0,5
0,0

0
Control

160 ppgs

Control

400 ppgs

160 ppgs

400 ppgs

b) Inoculaciones vs. Diámetro de tallos

a) Inoculaciones vs. Altura de tallos
Dia 1
Dia 31
3,0

3,0

Raíces
Tallo
Follaje

2,5

2,5

2,0

2,0

Pesos (g)

No. hojas

Medidas aéreas y
pesos secos
durante
infestación de P.
aphanidermatum
por periodo de
31 días

3,0

1,5

1,5

1,0

1,0

0,5

0,5

0,0

0,0

Control

160 ppgs

400 ppgs

c) Inoculaciones vs. Número de hojas

Control

160 ppgs

400 ppgs

d) Inoculaciones vs. pesos secos
Resultados (post-germinación)
Medidas aéreas durante infestación de P. aphanidermatum por periodo de 64 días
Tratamientos

N

Diámetro
(mm)

Control -0- ppgs

40

1.26 ± 0.40

10.22 ± 5.77

0.97 ± 0.16

Inoculo 160 ppgs

40

1.12 ± 0.36

16.43 ± 6.00

1.34 ± 0.99

Inoculo 400 ppgs

40

1.2 ± 0.43

11.05 ± 4.36

1.57 ± 0.26

Diferencias estadísticas

de

tallo Altura
(mm)

de

tallo Número
hojas

de
Resultados (post-germinación)
Pesos secos durante infestación de P. aphanidermatum por periodo de 64 días
Tratamientos

n

Raíces (g)

Tallos (g)

Follaje (g)

Control -0- ppgs

40

0.118 ± 0.05

0.640 ± 0.31

0.290 ± 0.13

Inoculo 160 ppgs

40

0.134 ± 0.07

0.520 ± 0.31

0.314 ± 0.15

Inoculo 400 ppgs

40

0.143 ± 0.08

0.623 ± 0.35

0.377 ± 0.16

*Plántulas fueron Eliminadas por ataques de insectos desfoliadores
Diferencias estadísticas: 0
Resultados (post-germinación)
200

Día 1
Día 64

8

Diámetro (mm)

Altura (mm)

150

100

50

6

4

2

0

0
Control

160 ppgs

Control

400 ppgs

5

160 ppgs

400 ppgs

b) Inoculaciones vs. Diámetro de tallos

a) Inoculaciones vs. Altura de tallos
Día 1
Día 64

3,0

4

Raices
Tallos
Follaje

2,5

3

2,0

Pesos (g)

No. de hojas

Medidas aéreas y
pesos secos
durante
infestación de P.
aphanidermatum
por periodo de
64 días

10

Día 1
Día 64

2

1,5
1,0

1
0,5

0
Control

160 ppgs

400 ppgs

c) Inoculaciones vs. Número de hojas

0,0
Control

160 ppgs

400 ppgs

d) Inoculaciones vs. pesos secos
Conclusiones


Pythium
aphanidermatum es
altamente patogénico en
J. curcas durante pregerminación




Germinación decreció
65%

Durante germinación
ocasiona daño en:
sistemas de raíces
 Tallo emergentes

Conclusiones
Pythium
aphanidermatum no
fue estadísticamente
patogénico en etapas
de crecimiento en
plántulas juveniles de
J. curcas durante
periodos de 31 a 64
días después de la
inoculación

Raíces de plántulas
transplantadas a suelo infestado

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Evaluacion de patogenicidad de Pythium en Jatropha curcas

  • 1. XII Congreso Internacional de la Sociedad Mexicana de Fitopatología Evaluación de patogenicidad de Pythium aphanidermatum en plántulas de Jatropha curcas Ofelia Andrea Valdés Rodríguez Roberto García Espinoza Yucatán, Mérida Julio 2010
  • 2. Antecedentes …  Especie originaria del trópico y subtrópico mexicano y centroamericano (Heller, 1996)  J. curcas Altitud:   Precipitación:   0–1500 m 600–1800 mm Temperatura:  18 – 35 º C (Zamarripa y Díaz, 2008) Probables rutas de dispersión (Heller, 1996)
  • 3. Antecedentes …     Semillas pueden ser consumidas por humanos Tallos y hojas comestibles México es el centro de origen (Heller, 1996) Aun sin definir entre sub-especie, variedad o forma J. curcas no tóxica Probable centro de origen de J. curcas no tóxica (Heller, 1996; Schmook y Sanchez, 2000)
  • 4. Antecedentes … J. curcas no tóxica  Especie sin domesticar  Plantaciones comerciales en México muy recientes  Iniciaron en 2006 (Martínez-Herrera 2007)  Poca investigación sobre J. curcas no tóxica  Identificación incompleta de patógenos  Reportes identifican solo géneros
  • 5. Antecedentes … J. curcas y sus patógenos del suelo  Diversos autores reportan:     Cercospera spp, Phytophora spp., Pythium spp., Fusarium spp., Helminthoporium tetramera, Pestalotiopsis versicolor (Heller, 1996; De la Vega, 2007). Oidium sp. Alternaria sp. (Biodisol, 2008) Clitocide tabescens, Phakopsora Jatrophicola, Xanthomonas sp. (Esquivel, 2008) Phymatotrichum omnívorus (Félix Moreno, 2008)
  • 6. Antecedentes … J. curcas y P. aphanidermatum  Pythium aphanidermatum   Daña frutos, semillas, raíces y bases de tallos de plántulas juveniles de más de 60 especies vegetales en México (Rodríguez, 2001; Parker, 2008) No existen reportes específicos del grado de interacción entre el patógeno y J. curcas no tóxica
  • 7. Objetivo  Determinar el grado de patogenicidad de Pythium aphanidermatum atacando Jatropha curcas no tóxica durante las etapas de pre y post emergencia.
  • 8. Sitio experimental y condiciones  Sitio de experimentación:   Suelos:    Veracruz centro Arenoso Franco-arcilloso Clima:    Condiciones naturales Cálido sub-húmedo Temperaturas: 23º C – 32º C
  • 9. Aislamiento del patógeno  Colecta de las muestras    Tejidos Suelos Aislamiento e identificación  medios selectivos de Tsao y Ocana, (1969)
  • 10. Patogenicidad en pre-germinación  Diseño experimental  Tratamientos: 2        Control: 0 ppgs Inóculo: 800 ppgs Individuos: 40 Periodo: 14 días Selección de semillas: aleatoria Suelo: franco esterilizado Temperatura: controlada (24-30º C)
  • 11. Resultados (pre-germinación)    100% semillas inoculadas fueron atacadas por el patógeno 25% germinación Ataques en radícula y tallo causando daños irrecuperables
  • 13. Patogenicidad en post-germinación Experimento Tratamientos Repeticiones Periodo 1 0 ppgs 160 ppgs 400 ppgs 20 31 días 2 0 ppgs 160 ppgs 400 ppgs 40 64 días - Transplante a suelo a los 14 días - 160 ppgs = 20% suelo inoculado + 80% suelo estéril - 400 ppgs = 50% suelo inoculado + 50% suelo estéril - Condiciones ambientales naturales de la región
  • 14. Resultados (post-germinación)  Amarillamiento foliar después de las primeras 2 semanas  No se observaron diferencias visuales después del periodo de 31 a 64 días Control 160 ppgs 400 ppgs
  • 15. Resultados (post-germinación) Medidas aéreas durante infestación de P. aphanidermatum por periodo de 31 días Tratamientos N Diámetro de tallo (mm) Altura de tallo (mm) Número de hojas Control -0- ppgs 20 1.50 ± 0.46 54.58 ± 53.18 1.90 ± 1.10 Inoculo 160 ppgs 17* 1.29 ± 0.36 32.18 ± 44.92 1.94 ± 0.75 Inoculo 400 ppgs 16* 1.63 ± 0.40 35.44 ± 33.65 2.13 ± 0.72 *Plántulas fueron Eliminadas por ataques de insectos desfoliadores Diferencias estadísticas: 0
  • 16. Resultados (post-germinación) Pesos secos durante infestación de P. aphanidermatum por periodo de 31 días Tratamientos n Raíces (g) Tallos (g) Follaje (g) Control -0- ppgs 20 0.348 ± 0.28 1.102 ± 0.62 1.914 ± 0.18 Inoculo 160 ppgs 17* 0.267 ± 0.15 1.107 ± 0.63 2.013 ± 0.21 Inoculo 400 ppgs 16* 0.302 ± 0.13 1.071 ± 0.39 1.969 ± 0.13 *Plántulas fueron Eliminadas por ataques de insectos desfoliadores Diferencias estadísticas: 0
  • 17. Resultados (post-germinación) Dia 1 Dia 31 Dia 1 Dia 31 300 Diámetro (mm) Altura (mm) 2,5 200 100 2,0 1,5 1,0 0,5 0,0 0 Control 160 ppgs Control 400 ppgs 160 ppgs 400 ppgs b) Inoculaciones vs. Diámetro de tallos a) Inoculaciones vs. Altura de tallos Dia 1 Dia 31 3,0 3,0 Raíces Tallo Follaje 2,5 2,5 2,0 2,0 Pesos (g) No. hojas Medidas aéreas y pesos secos durante infestación de P. aphanidermatum por periodo de 31 días 3,0 1,5 1,5 1,0 1,0 0,5 0,5 0,0 0,0 Control 160 ppgs 400 ppgs c) Inoculaciones vs. Número de hojas Control 160 ppgs 400 ppgs d) Inoculaciones vs. pesos secos
  • 18. Resultados (post-germinación) Medidas aéreas durante infestación de P. aphanidermatum por periodo de 64 días Tratamientos N Diámetro (mm) Control -0- ppgs 40 1.26 ± 0.40 10.22 ± 5.77 0.97 ± 0.16 Inoculo 160 ppgs 40 1.12 ± 0.36 16.43 ± 6.00 1.34 ± 0.99 Inoculo 400 ppgs 40 1.2 ± 0.43 11.05 ± 4.36 1.57 ± 0.26 Diferencias estadísticas de tallo Altura (mm) de tallo Número hojas de
  • 19. Resultados (post-germinación) Pesos secos durante infestación de P. aphanidermatum por periodo de 64 días Tratamientos n Raíces (g) Tallos (g) Follaje (g) Control -0- ppgs 40 0.118 ± 0.05 0.640 ± 0.31 0.290 ± 0.13 Inoculo 160 ppgs 40 0.134 ± 0.07 0.520 ± 0.31 0.314 ± 0.15 Inoculo 400 ppgs 40 0.143 ± 0.08 0.623 ± 0.35 0.377 ± 0.16 *Plántulas fueron Eliminadas por ataques de insectos desfoliadores Diferencias estadísticas: 0
  • 20. Resultados (post-germinación) 200 Día 1 Día 64 8 Diámetro (mm) Altura (mm) 150 100 50 6 4 2 0 0 Control 160 ppgs Control 400 ppgs 5 160 ppgs 400 ppgs b) Inoculaciones vs. Diámetro de tallos a) Inoculaciones vs. Altura de tallos Día 1 Día 64 3,0 4 Raices Tallos Follaje 2,5 3 2,0 Pesos (g) No. de hojas Medidas aéreas y pesos secos durante infestación de P. aphanidermatum por periodo de 64 días 10 Día 1 Día 64 2 1,5 1,0 1 0,5 0 Control 160 ppgs 400 ppgs c) Inoculaciones vs. Número de hojas 0,0 Control 160 ppgs 400 ppgs d) Inoculaciones vs. pesos secos
  • 21. Conclusiones  Pythium aphanidermatum es altamente patogénico en J. curcas durante pregerminación   Germinación decreció 65% Durante germinación ocasiona daño en: sistemas de raíces  Tallo emergentes 
  • 22. Conclusiones Pythium aphanidermatum no fue estadísticamente patogénico en etapas de crecimiento en plántulas juveniles de J. curcas durante periodos de 31 a 64 días después de la inoculación Raíces de plántulas transplantadas a suelo infestado

Notas del editor

  1. Las notas explican lo que se pretende mostrar en cada diapositiva
  2. Los orígenes de la planta la sitúan en México y Centroamérica. Las estrellas indican los posibles puntos de su origen Las líneas punteadas indican las rutas de dispersión Comerciantes portugueses la llevaron de America a través de las antillas hasta África. La planta tolera escasas precipitaciones, pero no tolera heladas.
  3. Existen dos tipos de J. curcas la tóxica, proveniente de México y Centroamérica y La no tóxica proveniente solo de México. J. Curcas no tóxica posee contenido de esteres de forbol muy bajos (0.11 mg/g máximo) O no detectado. Se ha visto que tallos y hojas de J. curcas no tóxica pueden ser comidos por insectos y animales domésticos. J. curcas tóxica no es comida por animales domésticos, aunque sí por algunos insectos. -No existen estudios genéticos para diferenciar entre estas dos formas de J. curcas.
  4. Existe un mayor enfoque en la forma toxica por tener una distribución más amplia y mayor abundancia internacional Los reportes no tienen solidez científica, son muy generales y no realizan analisis de patogenicidad a largo plazo
  5. Existe un mayor enfoque en la forma toxica por tener una distribución más amplia y mayor abundancia internacional Los reportes no tienen solidez científica, son muy generales y no realizan analisis de patogenicidad a largo plazo
  6. Existe un mayor enfoque en la forma toxica por tener una distribución más amplia y mayor abundancia internacional Los reportes no tienen solidez científica, son muy generales y no realizan analisis de patogenicidad a largo plazo
  7. Los experimentos se realizaron en Veracruz, Veracruz. El patógeno fue aislado de suelos tipo arenosos y también de suelos tipo franco- Arcillosos. Experimentos de germinación iniciaron en Abril Experimentos de inoculación en plantas iniciaron en Octubre
  8. El patógeno fue aislado directamente de semillas, plántulas recién germinadas y tierra Todo localizado en Veracruz. Las muestras colectadas fueron lavadas y se utilizaron medios de cultivo selectivo Para aislar al patógeno e identificarlo. Los medios de cultivo favorecen crecimiento de Pythium, pero inhiben otros patógenos. -Una vez aislado el patógeno, para identificarlo se procuró su reproducción. De las oosporas se procedió a identificarlode acuerdo con las claves de Van Der Plaats-Niterink (1981).
  9. Suelo inoculado con P. aphanidermatum aislado fue aplicado al 100% A semillas de J. curcas. Un conteo de unidades formadoras de colonias determinó que: El 100% de este suelo contenía 800 propágulos por gramo de suelo (ppgs)
  10. Todas las semillas inoculadas fueron atacadas por el patógeno. La germinación disminuyó de un 90% de las semillas control a un 25% de las semillas Contaminadas. 75% de las semillas se pudrieron 25% de las semillas germinaron pero mostraron los síntomas del ataque en cuanto Emergían las raíces primarias (raíz principal y laterales) El ataque iniciaba en la punta de la raíz y se iba extendiendo hasta el tallo emergente.
  11. La gráifca compara germinación en ausencia y presencia del patógeno
  12. La tabla muestra el diseño experimental para la etapa de post-germinación. Se realizaron dos experimentos: El primero a 31 días y el segundo a 64 días Las correspondencias muestran que 160 ppgs corresponden a una mezcla de 20% de suelo Inoculado con el patógeno y 80% de suelo estéril. Posteriormente ambas proporciones se mezclaron y se sembraron las plantas la mezcla de Esta tierra. Las condiciones fueron las mismas para ambos experimentos El suelo utilizado fue tipo arenoso. El experimento se inicio en Octubre
  13. La foto fue tomada una semana después del transplante a suelos inoculados. Todas las plantas fueron transplantadas al mismo tiempo en sustrato tipo arenoso Con sus respectivas mezclas de control y patógeno.
  14. Al concluir los 31 días Las plantas fueron extraídas, medidas y pesadas Las variables de respuesta fueron analizadas con ANOVA unifactorial no paramétrica. No se encontraron diferencias estadísticamente significativas entre los 3 grupos
  15. En las gráficas se aprecia que los promedios ± su desviación estándar al inicio Y al final del experimento no muestran diferencias significativas entre los grupos Sometidos.
  16. Las diferencias significativas en este grupo no implican que exista afectación negativa Por parte del patógeno a las plántulas que tenían el 20% de suelo inoculado. Por el contrario, parece que dicho patógeno favoreció el crecimiento de estas plántulas en la proporción de 140 ppgs. Los demás parámetros no se vieron afectados significativamente.
  17. En la condición pre-emergente, el patógeno podría ser altamente dañino para la germinación de las plantas, especialmente si se encuentran en sustratos con poca capacidad de drenaje.
  18. plántulas de 14 días o más son capaces de desarrollarse sin efectos significativos ante la presencia y ataque del patógeno. Aunque cabe resaltar que los tipos de sustratos utilizados (franco y arenoso) y el descenso de temperaturas registrado durante la realización del experimento de 64 días de duración podrían haber tenido un efecto importante sobre la atenuación de los efectos dañinos del patógeno.