Diagnóstico VIH Western blotting

Carmen Yerecxy Sánchez, Jorge Cañarte Alcívar; REVISIÓN BIBLIOGRÁFICA DE
SIDA/VIH Y USO DE WESTERN BLOTTING PARA CONFIRMACIÓN DEL
DIAGNÓSTICO
1Catedra de Inmunología, Escuela de Laboratorio Clínico, Facultad Ciencias de la Salud.
Universidad Técnica de Manabí.
REVISIÓN BIBLIOGRÁFICA DE SIDA/VIH Y USO DE WESTERN
BLOTTING PARA CONFIRMACIÓN DEL DIAGNÓSTICO
Carmen Yerecxy Sánchez1
, Jorge Cañarte Alcívar2-3-4
1
Estudiante de la Escuela de Laboratorio Clínico. Facultad Ciencias de la Salud. Universidad Técnica
de Manabí, Portoviejo – Manabí – Ecuador
2
Docente Investigador. Facultad Ciencias de la Salud. Universidad Técnica de Manabí. Portoviejo –
Manabí – Ecuador
3
Medico especialista en Inmunología Clínica, StemMedic, Manta – Manabí – Ecuador.
4
Director de Docencia e Investigación, Instituto Ecuatoriano de Enfermedades Digestiva IECED,
Portoviejo – Manabí – Ecuador
Resumen.
En la actualidad poder diagnosticar alguna
patología se ha vuelto algo más fácil en
comparación a siglos pasados, ya que
gracias a los descubrimientos y
experimentos de muchos científicos e
investigadores contamos con diferentes
equipos y técnicas clínicas de laboratorio
que nos permiten saber el motivo por el cual
una persona enferma.
En el presente trabajo hablaremos sobre la
técnica de WESTERN BLOT y su
aplicación para la confinación de resultados
de VIH obtenidos mediante el uso de
pruebas rápidas.
Western blotting o prueba de
inmunotransferencia es una técnica
analítica que permite la detección de
proteínas que sean de interés y que se vayan
a estudiar. Dicha técnica basa su en que las
proteínas contenidas en una muestra se
puedan separar debido a su peso molecular
a través del uso de electroforesis en gel, para
luego ser colocadas en una membrana en
donde por medio de la utilización de
anticuerpos específicos para la proteína de
interés se podrá hacer la identificación
especifica de esta. En este caso lo que
vamos a querer detectar son los anticuerpos
de virus de inmunodeficiencia humana para
así dar un diagnostico con alta
especificidad. Por otra parte como sabemos
el síndrome de inmunodeficiencia adquirida
(SIDA) es una afección crónica que puede
poner en riesgo la vida, provocada por el
virus de la inmunodeficiencia humana
(VIH), el cual es muy contagioso y
patógeno, puede dañar tu sistema
inmunitario, el VIH interfiere con la
capacidad de tu cuerpo para luchar contra la
infección y la enfermedad, y así mismo
produce que la persona sea propensa a
desarrollar cualquier infección que le
puedan causar incluso la muerte.
Palabras claves: VIH – SIDA –
Diagnostico de laboratorio - Western
blotting

DIAGNÓSTICO
INTRODUCCIÓN
El VIH es un retrovirus, cuyo material
genético es el ARN. Tiene como principal
característica disponer de una transcriptasa
inversa o retrotranscriptasa, enzima
responsable de transformar la información
genética del virus en ADN, de tal manera
que éste pueda utilizar las células del
hospedador para dividirse. Cuando dicho
virus afecta de manera desmedida al sistema
inmunitario suprimiendo su funcionalidad y
provocando un cuadro sindromico de
evolución prolongada, que llegando a su
fase final entonces la persona desarrolla
el Síndrome de Inmunodeficiencia
Adquirida (SIDA), que es la enfermedad
como tal en donde el portador tienen
sistema inmune no funcional lo que lo hace
propenso a desarrollar cualquier infección
por algún microorganismo oportunista.
La infección causada por el VIH se
caracteriza por producir una lenta, pero
continua destrucción del sistema inmune
mediante múltiples mecanismos, siendo los
linfocitos CD4+ la diana más importante.
Existen dos tipos de VIH, explican desde
Gesida: “El VIH-1, mayoritario en todo el
mundo y que es al que habitualmente nos
referimos, y otro tipo, el VIH-2 que se
describe mayormente en África Occidental.
Al igual que el VIH-1, el VIH-2 se transmite
por contacto directo con líquidos
corporales, como la sangre, el semen y los
fluidos vaginales infectados por el VIH o de
una madre VIH-positiva al niño durante el
embarazo, el parto o la lactancia materna
(por medio de la leche). Por lo general, la
infección por el VIH-2 lleva más tiempo en
evolucionar a un cuadro sintomático del
VIH/sida que la infección por el VIH-1”.
No todas las personas infectadas por el virus
presentan la enfermedad, aunque la mayoría
la acaba desarrollando. Lo más frecuente es
que al cabo de unos cinco o diez años, un
infectado por el VIH padezca los síntomas
de la enfermedad si no ha recibido
tratamiento. Aunque no existe cura para
erradicar al virus del organismo
infectado, se han elaborado una serie
de medicamentos que pueden retrasar la
aparición de los síntomas patológicos. (1) (2)
El VIH se transmite a través del intercambio
de determinados líquidos corporales de la
persona infectada, como la sangre, la leche
materna, el semen o las secreciones
vaginales. También se puede transmitir de
la madre al hijo durante el embarazo y el
parto. No es posible infectarse en los
contactos ordinarios cotidianos como los
besos, abrazos o apretones de manos o por
el hecho de compartir objetos personales,
agua o alimentos. Es importante tener en
cuenta que las personas con VIH que
reciben tratamiento antirretrovírico (TAR)
y

DIAGNÓSTICO
han suprimido la carga vírica no transmiten
el VIH a sus parejas sexuales. El acceso
temprano al TAR y el apoyo para continuar
el tratamiento son, por tanto, cruciales no
solo para mejorar la salud de las personas
con el VIH, sino para prevenir la
transmisión del virus. Su mecanismo de
trasmisión puede ser directo como se
mencionó en el apartado de arriba, y
también indirecto por medio de agujas
infectadas o un algún otro medio cortante,
debido a que para contagiarte con el VIH, la
sangre infectada, el semen o las secreciones
vaginales deben ingresar en el cuerpo. Esto
puede suceder de varias maneras: (3) (4)
- Si tienes relaciones sexuales. Puedes
infectarte si tienes relaciones sexuales
vaginales, anales u orales con una
pareja infectada cuya sangre, semen o
secreciones vaginales ingresan en tu
cuerpo. El virus puede ingresar en el
cuerpo a través de llagas en la boca o
de pequeñas fisuras que, a veces, se
producen en el recto o en la vagina
durante la actividad sexual.
- Por compartir agujas. Compartir
parafernalia de drogas intravenosas
contaminadas (agujas y jeringas) te
pone en alto riesgo de contraer el VIH
y otras enfermedades infecciosas,
como la hepatitis.
- Por transfusiones sanguíneas. En
algunos casos, el virus puede
transmitirse mediante transfusiones
sanguíneas. Actualmente, los
hospitales y los bancos de sangre
estadounidenses realizan análisis de
sangre para detectar anticuerpos del
VIH, por lo que el riesgo es muy bajo.
- Durante el embarazo o el parto, o
por la lactancia materna. Las madres
infectadas pueden transmitir el virus a
sus bebés. Las madres seropositivas
que reciben tratamiento para la
infección durante el embarazo pueden
reducir significativamente el riesgo
para sus bebés.
Con respectos a los síntomas, estos pueden
darse y variar por etapas dependiendo de
como reaccione el sistema inmune y el
progreso del daño que provoca el virus en
este. En un principio de la infección,
muchas personas no tienen síntomas
aparentes, pero al cabo de entre 1 y 4
semanas algunos afectados sufren fiebre,
erupciones cutáneas, dolor de garganta,
inflamación de los ganglios linfáticos,
fatiga y varios síntomas menos frecuentes.
Los síntomas de la infección inicial
(primaria) por VIH suelen durar entre 3 y 14
días. Después que desaparecen los primeros
síntomas, la mayoría de las personas
infectadas, incluso sin tratamiento, no
presentan ningún otro síntoma, o bien solo

DIAGNÓSTICO
de forma muy leve. Este intervalo con pocos
o ningún síntoma puede durar de 2 a 15
años. Los síntomas que aparecen más
frecuentemente durante este intervalo son
Ganglios linfáticos inflamados, que se
pueden palpar como pequeños bultos
indoloros en el cuello, las axilas o las ingles,
manchas blancas en la boca debidas a una
candidiasis (una infección por levaduras),
herpes zóster (culebrilla), diarrea, fatiga,
algunas veces fiebre con sudoración,
pérdida progresiva de peso, anemia. (5)
A medida que el virus continúa
multiplicándose y destruyendo células
inmunológicas, las células del cuerpo que
ayudan a combatir los gérmenes, puedes
desarrollar infecciones leves o signos y
síntomas crónicos debido a microorganismo
oportunista que provocan fuertes
infecciones que pueden conllevar a la
muerte, por eso es importante que se trate ya
que como sabemos aún no hay cura para
esta enfermedad pero se puede tratar
prologando la vida del paciente.
La inmunosupresión es la característica más
conocida de la infección por VIH. Una vez
que el virus ingresa al organismo, las
células que tienen el receptor CD4+ resultan
infectadas, la mayoría de ellas son linfocitos
T CD4+ colaboradores, pero también los
macrófagos y las células dendríticas se
infectan. La infección disminuye
gradualmente la cantidad de linfocitos T
CD4+ en los tejidos y en la sangre, lo cual
conduce al paciente a un estado grave de
inmunosupresión celular tras el cual, un
grupo de microorganismos que
habitualmente no causan enfermedades,
provocan infecciones; estas infecciones
oportunistas explican la gran mortalidad de
las personas afectadas por el VIH antes de
que se empleara el TARAA. Tal estado de
inmunosupresión es la consecuencia de la
progresión de la infección sin que el
paciente reciba tratamiento. Ya que el
TARAA es de amplio acceso en casi todos
los países del mundo, cada vez es más
tolerable y su posología más; los pacientes
que lo toman apropiadamente pueden
mantener controlado el VIH por el resto de
su vida, por lo tanto, la inmunidad
excepcionalmente llega a la condición de
sida, por ende, el sida es cada vez menos
frecuente y la mortalidad por el VIH
disminuye. (6)
Según datos y cifras otorgados por la OMS
el VIH continúa siendo uno de los mayores
problemas para la salud pública mundial, se
ha cobrado ya casi 33 millones de vidas, 2,1
millones de ellos niños y adolescentes. Sin
embargo, habida cuenta del acceso
creciente a la prevención, el diagnóstico, el
tratamiento y la atención eficaces del VIH,
incluidas las infecciones oportunistas, la

DIAGNÓSTICO
infección por el VIH se ha convertido en un
problema de salud crónico llevadero que
permite a las personas que viven con el
virus llevar una vida larga y saludable.
También Entre 2000 y 2019, las nuevas
infecciones por el VIH disminuyeron en un
39% y las muertes relacionadas con el VIH
en un 51%, y se salvaron 15,3 millones de
vidas salvadas gracias al TAR. Este logro
fue el resultado de los grandes esfuerzos
realizados por los programas nacionales
sobre el VIH con el apoyo de la sociedad
civil y los asociados internacionales en
favor del desarrollo. (3) (7)
Las pruebas diagnósticas son una
herramienta importante en la práctica
clínica, su utilización permite determinar la
presencia o ausencia de un determinado
evento en salud, así como la toma de
decisiones sobre el tratamiento y el
pronóstico de las diferentes infecciones o
enfermedades.
En el caso particular de la infección por el
virus de la inmunodeficiencia humana
(VIH), el diagnóstico es la puerta de entrada
para el acceso a la atención en salud y el
inicio de un tratamiento adecuado. En el
diagnóstico de la infección por VIH existen
dos tipos de pruebas diagnósticas para la
detección de anticuerpos: las pruebas
presuntivas y las pruebas confirmatorias.
Las pruebas presuntivas permiten orientar
sobre una probable infección con el virus y
las pruebas confirmatorias son usadas para
confirmarse las muestras con resultados
reactivos en las pruebas presuntivas tienen
anticuerpos específicos contra el VIH. Se
han desarrollado diferentes pruebas
confirmatorias para el diagnóstico de la
infección por VIH, entre ellas están las que
utilizan antígenos propios del virus como la
inmunoelectrotansferencia o Western blot
(WB), la inmunfluorescencia indirecta (IFI)
y las que utilizan péptidos sintéticos y
proteínas recombinantes como los
inmunoblots o inmonoensayos en línea
(LIA). También están las pruebas que
emplean métodos directos y muestran la
presencia del virus o sus constituyentes
(pruebas rápidas Ag/Ac, antigenemia p24 y
ELISA de cuarta generación). Las pruebas
rápidas han ganado importancia en el
diagnóstico de VIH debido a que los
resultados son inmediatos, económicos,
fáciles de utilizar, distribuir y cada nueva
generación acorta más el periodo de ventana
(tiempo de detección en fase aguda cuando
el nivel de anticuerpos es muy bajo),
permitiendo mejorar la oportunidad de
diagnóstico en la población de riesgo y en
aquellos con los que se tiene solo una
oportunidad de asesoramiento. (8) (9) (10)
De todas las pruebas que existe nos
hablaremos de la de Western blot, la cual es

DIAGNÓSTICO
considerada como una prueba confirmatoria
de los resultados positivos obtenidos por
pruebas rápidas, ya que esta es altamente
especifica pero debido a que es costosa solo
se la emplea para corroborar los resultados
indeterminados de la IFI.
La primera prueba confirmatoria
desarrollada para el diagnóstico de la
infección por VIH fue el Western blot y
todavía hoy sigue siendo la prueba de
elección, sin embargo los ensayos que
utilizan péptidos sintéticos y proteínas
recombinantes cada vez son más utilizados
como una alternativa diagnóstica, debido a
que su lectura e interpretación es más fácil,
al usar péptidos sintéticos se disminuye la
probabilidad de encontrar resultados
inconcluyentes o indeterminados y su costo
es relativamente más bajo. En la actualidad,
de acuerdo a los informes del programa de
evaluación de pruebas diagnósticas de la
OMS, los inmunoensayos en línea junto con
el Western blot, hacen parte de las pruebas
evaluadas y aprobadas como pruebas
confirmatorias para el diagnóstico de la
infección por VIH , adicionalmente estas
pruebas están empezando a ser incluidas en
las guías de manejo y algoritmos
diagnósticos en diferentes países o regiones,
como es el caso de la Guía europea para el
control y la prevención de enfermedades del
año 2010, la Guía clínica Chilena Síndrome
de inmunodeficiencia adquirida VIH/SIDA
2010. (8)
CONCLUSIÓN
El VHI es un virus muy virulento y
patógeno para nosotros los seres humanos
ya que ataca y destruye nuestro sistema
inmune el cual es el encargado de
protegernos, motivo por el cual cuando este
ya no funciona bien es donde aparece la
enfermedad conocida como SIDA
(Síndrome de Inmunodeficiencia
Adquirida) la cual sino se trata podría hacer
que cualquier infección hasta una simple
gripe pueda matar al portador. También
como es de conocimiento hasta el momento
no existe cura contra dicha enfermedad pero
si hay tratamientos, los cuales consisten en
la administración de medicamentos
antirretrovíricos, los cuales son tres que se
deben combinar y se conoce este
tratamiento con el nombre de TARAA
(Terapia Antirretroviral Altamente Activa),
recalcar que este tratamiento no cura la
infección, sino que inhibe la replicación del
virus en el organismo permitiendo así que el
sistema inmunitario recobre fortaleza y
capacidad para combatir las infecciones y
así esta persona pueda llevar una vida
cotidiana normal.
El diagnóstico oportuno es crucial en el
desarrollo de la enfermedad ya que así se

DIAGNÓSTICO
pueden evitar que se presenten los síntomas
crónicos mediante el tratamiento oportuno,
previniendo así que la persona que porta el
virus pueda contagiar a otra persona y así
mismo que pueda tener un tiempo de vida
prolongado.
En la actualidad existen distintas pruebas
para poder tener un diagnóstico de la
presencia del virus, estas pruebas van desde
las rápidas que brinda un resultado en poco
tiempo, son más económicas y pueden estar
al alcance de todos pero que de una u otra
forma no son altamente especificas ya que
lo único que hacen es dar a conocer si existe
o no la presencia de antígenos del virus. Por
eso muchas veces cuando existe duda de un
resultado positivo obtenido por medio de las
pruebas rápidas se debe recurrir a las
pruebas de confirmación como la de
Western blot, la cual es una prueba más
precisa y con una alta sensibilidad aunque
su costo es un poco elevado, aun así esta
prueba se la ha usado desde hace años y
aunque ahora en la actualidad existan otras
pruebas esta se la sigue usando.
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