Enfermedad de Parkinson. Enfermedades Neurológicas y Conducta
Microbiología Oral.
1. 2
COMPARACIÓN DE LA FLORA ORAL EN ESTUDIANTES DE
INGENIERÍA ELECTRÓNICA Y MEDICINA DE VI A X SEMESTRE DE
LA UNIVERSIDAD EL BOSQUE.
*Bahamon, Valeria. *Calderón, Valentina. *Moros, Gabriela. *Onofre, Alejandra. *Pérez, Daniel.
*Pérez, Zairy. *Pineda, Daniela. *Rivero, Andreina. *Roa, Duvan. *Rodríguez, Liseth. *Torres,
Gina. *Torres, Natalia. ♣Castillo, Yormaris.
* Estudiantes tercer semestre Facultad de Odontología de la Universidad el Bosque.
♣Docente de la Universidad el Bosque, facultad de odontología, área de microbiología.
RESUMEN
Introducción: La cavidad oral es un hábitat microbiano muy diverso y alberga todo un ecosistema que tiene importancia
en la homeostasis de los tejidos orales. Tiene características únicas en términos de pH, nutrientes, oxígeno y temperatura,
las cuales favorecen, el establecimiento de una flora comensal simbiótica muy estable entre los individuos.
Objetivo: Comparar la flora oral en estudiantes de ingeniería electrónica y medicina de VI a X semestre de la Universidad
El Bosque.
Métodos y materiales: Se realizaron cultivos de saliva de estudiantes de la facultad de Ingeniería Electrónica, y de la
facultad de Medicina de la Universidad El Bosque en agar Sangre, Wilkins Chalgrens, Saboraud y Mac Conkey. Se
identificaron los microorganismos que crecieron en los medios de cultivo y los resultados fueron expresados en porcentaje
de cada uno de los microorganismos encontrados.
Resultados: Los Streptococcus del grupo viridans son la flora aislada con mayor frecuencia en las dos facultades evaluadas
(100%); seguido por bacterias anaerobias como Actinomyces spp y Capnocytophaga spp (100%), en menor proporción se
aislaron sobreinfectantes como Candida albicans y especies de Enterobacter.
Conclusiones: Los microorganismos encontrados en la flora oral de los estudiantes de evaluados son flora normal y
transeúnte en cavidad oral, y no se observaron diferencias pronunciadas de microorganismos particulares entre las dos
facultades.
PALABRAS CLAVE: Microbioma oral, Saliva, Cavidad oral, Microorganismos.
ABSTRACT
Introduction: The oral cavity is a microbial habitat that favors the accumulation and growth of microorganisms. We
should note that it is not a homogeneous medium due to environmental factors or conditions that are adhesion ligands, pH,
nutrients, oxygen and temperature.
Objective:This research was conducted with the purpose of comparing scientific literature through oral flora students VI
to X semester faculty of electrical engineering and medicine at the Bosque University.
Methods and materials: An evaluation of the oral flora students of the Faculty of Electronic Engineeringwas performed,
and the faculty of medicine at the El Bosque University taking into account several criteria for inclusion and exclusion
were evaluated 5 patients each faculty the which they tooka saliva sample for culture in different agars andcomplementary
tests.
Results: As for Gram-positive cocci, Streptococcus from viridans group with a prevalence of 100% in both faculties,
anaerobic bacteria Actinomyces prevalence and Capnocytophaga, on infectants microorganisms of the genus Candida and
Enterobacter prevalence.
Conclusions: They were able to confirm the microorganisms belonging to the normal oral flora of humans due to the
observation and comparison of such flora, both students of the Faculty of Medicine and the Faculty of Electronic
Engineering.
KEYWORDS: Oral microbiome, Saliva, Oral health, Microorganisms.
Correspondencia:
Daniel Orlando Pérez Rodríguez
doperez@unbosque.edu.co
Teléfono: 3114707729
Yormaris Castillo Romero
castilloyormaris@unbosque.edu.co
tillo
castilloyormaris@unbosque.edu.co
2. 2
INTRODUCCIÓN
La cavidad oral es un tipo de hábitat donde
viven un conjunto de microorganismos
(comunidad microbiana). Está formada por
un ambiente y propiedades que define la
actividad de los microorganismos que se
encuentran en ella (1). Aquí se encuentra
una gran variedad de bacterias, por lo cual
se considera que la cavidad oral del ser
humano es el nicho ecológico con mayor
biodiversidad conocido hasta ahora después
del intestino (2). En esta cohabitan
principalmente microorganismos
comensales, de los cuales se han descrito
más de 700 especies, que colonizan
diferentes sub-hábitats dentro de la cavidad
oral como las superficies mucosas y los
dientes(3); entre los microorganismos
principalmente aislados en cavidad oral se
encuentran: Streptococcus spp., Gemella
spp, Subacterium spp, Selenomonas spp,
Veillonella spp., Actinomyces, Atopobium,
Rothia, Neisseria, Eikenella,
Campylobacter, Porphyromonas,
Prevotella, Capnocytophaga,
Fusobacterium y Leptotrichia (1,5).
La presencia de una microflora residente no
es esencial para la vida, pero es un
componente importante si el huésped desea
llevar a cabo una vida normal ya que
previene la enfermedad mediante la
reducción de la posibilidad de colonización
por especies exógenas (6).También, ayudan
a mantener condiciones de pH apropiadas en
cavidad oral, unas reduciéndolo y otras
incrementándolo para mantener un balance.
De esta forma, el rol de la flora oral normal
es mantener la homeóstasis en la cavidad oral
(4).
Dichas condiciones consideradas como
ecológicas, dentro de la boca se pueden ver
afectadas en algún momento de la vida por
diferentes factores como: erupción y pérdida
de los dientes, inserción de prótesis tales
como dentaduras postizas, y cualquier
tratamiento dental, incluyendo la
ampliación, pulido y restauraciones. Las
fluctuaciones transitorias en la estabilidad
del ecosistema oral pueden ser inducidas por
la frecuencia y el tipo de alimento ingerido,
los períodos de tratamiento con antibióticos,
y las variaciones en la composición y la tasa
de flujo de saliva. Así mismo el ambiente en
donde se desenvuelve el individuo hace que
adquiera un ecosistema oral característico de
su entorno y de la población con la que
interactúa.
Es por ello que el objetivo de este trabajo es
comparar la flora oral en estudiantes de
ingeniería electrónica y medicina de VI a X
semestre de la universidad el bosque.
MATERIALES Y MÉTODOS
Población y muestra
Se evaluó la flora oral en estudiantes de VI a
X semestre de la facultad de Ingeniería
Electrónica, y de la facultad de Medicina de
la Universidad El Bosque. La población fue
seleccionada mediante una encuesta en la
que se evaluó el estado de salud oral y
sistémica en general. Los individuos que
cumplían con los parámetros requeridos por
la encuesta fueron invitados a participar en el
estudio, mediante la firma de un
consentimiento informado.
Se excluyeron del estudio aquellos pacientes
que presentaron cualquier enfermedad oral o
sistémica, que estaban bajo terapia
antimicrobiana en los tres meses anteriores
y/o en tratamientos inmunosupresores,
personas que presentaron implantes
dentales, tratamiento ortodóntico, mujeres
embarazadas, en tratamiento anticonceptivo
o en estado de lactancia, y fumadores.
Para la toma de muestra de saliva se le indicó
al paciente una serie de recomendaciones,
que incluían dos horas previas a la toma de
la muestra, no consumir alimentos, no
realizar cepillado de dientes, ni usar
3. 3
enjuagues bucales, entre otros. A cada
paciente se le solicitó escupir en un tubo
taparrosca estéril, sin pegar los labios a la
boca del tubo, hasta obtener mínimo 1 ml de
saliva.
La muestra se transportó hasta el laboratorio
de microbiología de la Universidad El
Bosque en un término no mayor a dos horas
después de la toma de la misma, para su
posterior procesamiento microbiológico.
Procesamiento microbiológico
Las muestras de saliva fueron sembradas por
agotamiento en diferentes agares y luego
incubadas a 37°c durante 24 a 48 horas para
bacterias aerobias, mientras que para
anaerobias el tiempo fue de 8 días.
Agar sangre.
Es utilizado en este estudio para la
recuperación de cocos Gram positivos de
interés oral. La identificación microbiana
incluyó examinación de las características
morfológicas de las colonias en los cultivos,
en dicho agar, se reconoció el tipo de
hemólisis existente, se realizó tinción de
Gram y posteriormente se realizaron pruebas
bioquímicas que permitieron diferenciar
especies y géneros de microbianos. Primero
se realizó prueba de catalasa para diferenciar
Staphlylococcus spp (catalasa positivos) de
Streptococcus spp (catalasa negativos). A
aquellas bacterias catalasa positiva, se les
realizó la prueba coagulasa, para diferenciar
Staphylococcus aureus del resto de especies
del mismo género. Para los microorganismos
catalasa negativa que tenían hemolisis alfa,
se realizó la prueba taxo P para diferenciar
Streptococcus del grupo viridans de
Streptococcus pneumoniae.
Aquellas colonias catalasa negativa que
presentaron hemolisis gamma se les realizó
resiembra y posteriormente identificación
bioquímica con BBL Crystal GP.
Agar Wilkin Chalgren.
Fue utilizado para el cultivo de
microorganismos anaerobios, para conferir
esta atmosfera anaeróbica, las muestras
fueron incubadas en cajas de anaerobiosis
con sobres generadores de anaerobiosis.
Después del tiempo de incubación, se realizó
evaluación de las características
morfológicas de las colonias al estereoscopio
y verificación de la presencia de bacterias
negro pigmentadas. Las bacterias negro
pigmentadas, fueron expuestas a luz
ultravioleta para diferenciar dos géneros
importantes en cavidad oral que son género
Prevotella spp el cual tiene la capacidad de
autofluorecer de color rojo oscuro en
presencia de luz ultravioleta (luz UV
positiva) del género de Prophyromonas spp
(luz UV negativo).
Aquellas bacterias positivas a la luz
ultravioleta se les realizó prueba de ONPG
con el fin de diferenciar Prevotella
melaninogenica (prueba de ONPG positiva)
de Prevotella intermedia/ nigrescens.
Las otras bacterias anaerobias que crecieron
en el agar Wilkin Chalgrens fueron
identificadas por las características
morfológicas de las colonias y cuando fue
necesario se realizó resiembra y
posteriormente identificación de especie
usando la galería bioquímica de Rapid Ana
II.
Una parte de la muestra de saliva fue
inoculada en caldo Tioglicolato e incubada
en condiciones anaeróbicas. El crecimiento
microbiano se evidenció por turbidez del
caldo después de 8 días de incubación.
Agar Mac Conkey.
Para la identificación de microorganismos
sobreinfectantes, de la familia
Enterobacteriaceae y Pseudomonadaceae se
empleó el Agar MacConkey. Después de 24
horas de incubación en condiciones
4. 4
aeróbicas, el crecimiento bacteriano fue
evidenciado por la presencia de Unidades
Formadoras de Colonias (UFC), además en
los cultivos positivos se revisó la
fermentación o no de la lactosa. Las colonias
que crecieron fueron resembradas y el
género y la especie fueron identificadas
mediante la galería bioquímica BBL Crystal
GN/NF. Como pruebas complementarias a la
galería se realizó la prueba de indol y de
oxidasa.
Agar Saboraud.
Utilizado para la recuperación de hongos
levaduriformes del género Candida. Con las
colonias que crecieron en este agar primero
se realizó tinción de Gram para confirmar
morfología levaduriforme. Una vez
confirmada la morfología, las colonias
fueron resembradas para posteriormente
realizar prueba de prueba de tubo germinal,
con el fin de diferenciar Candida albicans de
otros tipos de Candida spp aislados de
cavidad oral.
La presencia de Candida albicans fue
confirmada por la formación de pseudohifas
en la prueba de tubo germinal.
Análisis de resultados:
Los resultados de cada uno de los cultivos de
los pacientes evaluados fueron tabulados en
una hoja de Microsoft Excel para versión
Windows y se diseñaron graficas de barras
para la descripción de frecuencias de los
microorganismos presentes en los pacientes
de evaluados.
RESULTADOS
En las figuras 1-3 se muestra la frecuencia de
microorganismos presentes en las muestras
de saliva de los pacientes evaluados. La
figura No1, describe los resultados obtenidos
del cultivo en agar sangre (cocos Gram
positivos); Figura No2. Resultados
obtenidos a partir del cultivo en Agar Wilkin
Chalgrens (Bacterias anaerobias); Figura
No3. Resultados obtenidos del cultivo en
agar Mac Conkey y agar Sabouraud.
Figura 1. Cocos Gram positivos
En la figura 1 se muestran los resultados de
Cocos Gram positivos. Se puede observarque los
Streptococcus del grupo viridans (SGV) en
ambas facultades tienen una frecuencia del
100%, esto debido a que SGV son habitantes
normales de la mucosa oral, respiratoria y
gastrointestinal de los mamíferos y del tracto
genital en la mujer, donde juegan un papel
importante en la prevención de la colonización
de patógenos potenciales (3), por lo tanto, no es
anormal ver en esta cantidad el microorganismo.
La frecuencia de Staphylococcus sppfue de 80%
y 60% para la facultad de Ingeniería Electrónica
y Medicina respectivamente. Streptococcus
mutans fue aislado en un 20% en la facultad de
Ingeniería y no se detectó en la facultad de
Medicina, se sugiere que hipotéticamente los
estudiantes de Medicina tienen un alto consumo
de azucaresensu dieta que implicaría el aumento
en la presencia de este microorganismo y por lo
tanto se tendría que profundizar el estudio,
mientras que Streptococcus bovis se encontró en
la misma proporción de un 20% en ambos grupos
estudiados. Streptococcus mucilaginosus y
0%
20%
40%
60%
80%
100%
Porcentaje% Microorganismos
Cocos Gram Positivos
Ingeniería Medicina
5. 5
Streptococcusuberis fueron identificados solo en
la facultad de Ingeniería con presencia del 20%.
Figura 2. Microorganismos anaerobios.
En la figura 2 se muestran los resultados para
microorganismos anaerobios. Se detectó
presencia de ActinomycessppyCapnocytophaga
spp de un 100% en ambas facultades.
Fusobacterium spp fue identificado tanto en
Medicina como en Ingeniería en el 60% en los
dos grupos, Prevotella intermedia/nigrescens se
encontró en el 100% de los pacientes evaluados
en la facultad de medicina y en el 60% de los
estudiantes evaluados de la facultad de
Ingeniería. Prevotella melaninogenica,
Parvimonas micra y Wollinella spp fueron
identificados solamente en los pacientes de la
facultad de Ingeniería electrónica en un 60%,
20% y 20% respectivamente.
Figura 3. Microorganismos sobreinfectantes
En la figura 3 se pueden observar los
microorganismos sobreinfectantes
(enterobacterias y Candida) tanto en los
estudiantes de la facultad de Medicina como en
Ingeniería Electrónica; se identificó Candida
spp,Candida albicansy Enterobactercloacae en
el 20% de los estudiantes de la facultad de
medicina evaluados, mientras que en ingeniería
electrónica el género Candida no está presente y
el único microorganismo sobreinfectante
encontrado en el grupo de la facultad de
Ingeniería electrónica es Enterobacter
enterogenes en un 20%.
DISCUSIÓN
En este trabajo se evaluó la flora oral
presente en estudiantes de VI a X semestre
de dos facultades diferentes de la
Universidad El Bosque, una facultad
relacionada con ciencias de la salud y otra no
relacionada con dicho ámbito para observar
e identificar la relación que puede tener el
entorno en el que se desenvuelve un
individuo y la flora oral que predomina.
0%
20%
40%
60%
80%
100%
Porcentaje%
Microorganismos
Anaerobias
Ingeniería Medicina
0%
20%
40%
60%
80%
100%
Porcentaje%
Microorganismos
Sobreinfectantes
Ingeniería Medicina
6. 6
Los resultados obtenidos en este proyecto
son consistentes con lo reportado por Aas et
al., 2005, en cuanto a que los Streptococcus
spp son el género más abundante y aislado
como flora normal en la cavidad oral; estos
microorganismos son muy importantes ya
que juegan un rol clave en la homeostasis de
la cavidad oral, además son los primeros
colonizadores e impiden por antagonismo
microbiano la llegada de microorganismos
patógenos.(1)
Se ha reportado que las familias microbianas
más abundantes en cavidad oral y que hacen
parte de la flora normal son Firmicutes, (tales
como especies de Streptococcus, Gemella ,
Eubacterium , Selenomonas , Veillonellas , y
los relacionados), Actinobacterias (tales
como especies de Actinomyces , Atopobium ,
Rothia y concordantes), Proteobacterias (por
ejemplo, especies de Neisseria,
Eikenella,Campylobacter, y concordantes),
Bacteroidetes (por ejemplo, especies de
Porphyromonas, Prevotella,
Capnocytophaga y los relacionados),
Fusobacterias (por ejemplo, especies de
Fusobacterium y Leptotrichia.)(1). Estos
datos son consistentes con los
microorganismos identificados en este
estudio, en el cual hubo predominio de
bacterias tales como Actinomyces spp,
Capnocytophaga spp, Prevotella spp y
Fusobacterium spp los cuales fueron
hallados tanto en la facultad de medicina
como en la de ingeniería (1).
De acuerdo a Alcaide et al., 2010 los
Streptococcus del grupo viridans son
habitantes normales de la mucosa oral,
respiratoria y gastrointestinal de los
mamíferos y del tracto genital de la mujer.
Juegan un papel importante en la prevención
de la colonización de patógenos potenciales.
Este grupo lo componen diversos
microorganismos como Streptococcus mitis,
Streptococcus sanguis y Streptococcus
mutans. Los Streptococcus del grupo
viridans fue el género microbiano
principalmente aislado (100%) en ambas
facultades, lo cual indica normalidad en
cuanto a la flora de los individuos
estudiados.
En el caso de este proyecto, Streptococcus
mutansfue hallado únicamente en la facultad
de medicina, con respecto a lo que
encontrado en la literatura, en el estudio
realizado por Linossier et al., 2011 los
resultados obtenidos indican, la dependencia
de la colonización bacteriana con la edad. La
presencia de este microorganismo también se
podría atribuir a un alto consumo de azucares
por parte de este paciente. Sin embargo, esta
variable en este estudio no fue evaluada por
lo cual no se podría afirmar dicha asociación
en este trabajo.
Con respecto a Staphylococcus spp, los
resultados encontrados en la investigación
nos indican que no hay diferencia marcada
para este microorganismo entre ambas
facultades. Pereira et al., año 2005, reporta
que la mayoría de estos microorganismos no
son patogénicos y residen principalmente en
la piel y membranas mucosas de humanos.
Sin embargo, cuando la superficie es
damnificada por alguna razón, esa bacteria
puede invadir los tejidos y causar infección.
En cavidad oral estos se consideran flora
transeúnte, frecuentemente aislada por la
proximidad entre la cavidad oral y/o
comisuras labiales de donde estos
microorganismos son flora normal. Así
mismo por condiciones exógenas como auto-
inoculación por hábitos como chuparse los
dedos, morderse la uñas, etc. Sin embargo su
detección no se asocia frecuentemente con
infección (4).
Con respecto a Actinomyces spp identificada
en el 100% en ambas facultades, se dice que
sigue siendo un microorganismo de flora oral
normal pero cuando hay un estado de
desequilibrio entre la biopelícula y el mineral
7. 7
dental, este se comporta como patógeno
oportunista relacionado con la caries
radicular. En este estudio solo se pude
reportar su presencia pero no se puede
asociar con ninguna condición clínica en el
paciente puesto que dicha variable no se
analizó (15).
El género Enterobacter fue encontrado en
cavidad oral de los estudiantes de la facultad
de Medicina e Ingeniería, estas bacterias que
son transeúntes en boca, puesto a que su
medio natural, es en el tracto intestinal de los
seres humanos (16), según Oliveira et al.,
2015 “la insalubridad, el contacto con
personas enfermas y diversos agentes
biológicos son factores predisponentes
asociados a la colonización por diferentes
microorganismos, incluyendo bacterias
entéricas.
Dentro de los microorganismos
sobreinfectantes de la familia
Enterobacteriaceae, el género Enterobacter,
seguido del género Klebsiella son muy
frecuentemente detectados en la cavidad oral
de individuos sanos, donde se comportan
como flora transeúnte. Sin embargo, su
presencia en boca es indicador de hábitos de
higiene inadecuados y estos
microorganismos tienen gran relevancia
puesto se han reportado por presentar gran
cantidad de genes que confieren resistencia a
los antibióticos, situación que podría
complicar tratamientos a nivel oral.
La presencia de estos microorganismos en
cavidad oral de dichos estudiantes se
atribuye a distintos mecanismos exógenos
tales como la contaminación cruzada (mano-
ano-mano-boca), auto inoculación con
cepillo de dientes contaminados por hábitos
como dejar el cepillo de dientes en el baño,
consumo de alimentos contaminados, etc.
Estos factores propician condiciones
favorables para hallar dicho género y especie
de entero bacteria en cavidad oral.
Así mismo otro microorganismo que hace
parte de la flora normal en cavidad oral pero
que se considera sobreinfectante en la misma
es el género Candida y las especie más
comúnmente detectada es C. albicans.
Salazar et al., 2005, reportan que Candida
spp forma parte de la flora oral normal en el
ser humano sistémicamente sano. Así mismo
Candida albicans a pesar de ser un
microorganismo asociado a patogenicidad
por la presencia de factores de virulencia
como las pseudohifas y su capacidad
invasiva. Este hongo necesita de
características específicas en el hospedador
para generar una infección. Por lo tanto
nuestros resultados muestran que a pesar de
que Candida albicans está presente en 20%
de la población evaluada de la facultad de
medicina, este grupo podría considerarse
como portadores sanos, ya que el
microorganismo en bajas proporciones es
normal detectarlo en cavidad oral.
CONCLUSIONES
Los microorganismos encontrados en la flora
oral de los estudiantes de la facultad de
Ingeniería Electrónica y facultad de
Medicina hacen parte de la flora normal y
transeúnte en cavidad oral.
No se observaron diferencias pronunciadas
de microorganismos particulares
aumentados o disminuidos en una facultad
con respecto a la otra.
Los Streptococcus del grupo viridans, el
género Actinomyces spp y Capnocytophaga
spp podrían ser la flora más estable que se
mantiene en las dos poblaciones evaluadas.
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