Ante-Proyecto con una Breve Descripcion de Metodologia para la identificar Batrachochytrydium Dendrobatidis

1. Universidad Nacional Autónoma De Honduras
Facultad De Ciencias
Escuela De Biología
Seminario de Investigación BI-500
“Detección Poblacional de Anuros
con Relación a Infecciones por
Batrachochytrium dendrobatidis
(Hongo Quitridiomicosis) en Parque
Nacional Cusuco, Honduras.”
Por: Daniela Herrera
20093000147

2. OBJETIVO GENERAL
 Definir situación poblacional de los Anuros en cuanto a su estado de hábitat
en el Parque Nacional Cusuco.
 Examinar cómo se encuentra los Anuros en su estado de larva, metamorfos y
adulto y probabilidad que se encuentren infectados con el Hongo
Quitridiomicosis por medio de PCR de tiempo real.
 Identificar y justificar que especies puede estar en el listado de peligro crítico
en cuanto a Batrachochytrium dendrobatidis y como está afectando y en
cuanto la destrucción del declive en que se encuentra su hábitat.
 Fundamentar como se encuentra la Situación población de lo Anuros con
relación a las infecciones por Batrachochytrium dendrobatidis (Hongo
Quitridiomicosis) en Parque Nacional Cusuco Honduras.
OBJETIVOS ESPECÍFICOS

3. INTRODUCCIÓN
 En el Neo trópico, la disminución de anfibios es dramáticos y esta asociados con
la infección por Batrachochytrium dendrobatidis han sido ampliamente
documentado en las tierras altas de los que se han descrito las mayores pérdidas
en la diversidad de especies y la abundancia de la población en respuesta a la
creación del patógeno. Por otra parte, una ola de infección que se extiende
desde México a través de América Central hasta Panamá "ha sido descrita a
fondo. Además, Batrachochytrium dendrobatidis la infección se ha extendido a
través de los bosques de las tierras altas de América del Sur, incluyendo los
Andes Colombianos. Así, la región de Panamá "y Colombia es considerado uno
de los últimas en zonas de América Central. Aunque se pensaba que la invasión
de Batrachochytrium dendrobatidis ser inevitable, no hay encuestas antes de
este estudio han confirmado la presencia del patógeno en esta región (Rebollar,
2014).

4. UBICACIÓN DEL ÁREA DE ESTUDIO
 El Parque Nacional Cusuco está ubicado al Suroeste de la ciudad de San Pedro
Sula. Fue declarado Parque Nacional en 1987 mediante el decreto 87-87 en el
parlamento hondureño; el Parque Nacional Cusuco posee una extensión
territorial de 234.43 km2, la zona núcleo es toda área protegida es intocable
ya que protege a los ecosistemas más altos y en mayor riesgo de
perturbación, la zona núcleo está declarada por encima de los 1700 m.s.n.m.

5. METODOLOGÍA
Los anfibios serán capturados al inicio de la temporada de lluvias, en diferentes
micro hábitats que incluyen bosques, y charcas, entre los meses de agosto
septiembre durante el día (para especies diurnas) y la noche (para especies
nocturnas) por el método de encuentro visuales (REV).
Los individuos serán manipulados utilizando guantes de nitrilo para cada espécimen,
con el fin de evitar contaminación cruzada (Hyatt et al. 2007).

6. METODOLOGÍA
 Se realizara la toma de muestras según el protocolo Vredenburg y Briggs
(2004/2007), utilizando hisopos previamente esterilizados frotando el parche
ventral, la superficie dorsal, las extremidades y el interior de los dedos, 10 veces
por duplicado.
 Posteriormente, los hisopos destinados para el análisis molecular se introducirán
individualmente en un ependorff de 1.5 mL que contendrá 300μl de etanol al
70%, luego serán refrigerados a 4°C para su conservación y transporte.

7. METODOLOGÍA
 Los anfibios serán liberados después de la toma de los siguientes datos:
a) Fecha y hora de captura,
b) Condiciones Climáticas y Ambientales (altitud, % humedad, temperatura).
c)Los hisopos que contendrán el etanol para la conservación de la muestra se
dejaran evaporar a temperatura ambiente en una cabina de extracción durante un
lapso de 30 a 48 horas
Departamento Municipio Altitud (m) Temperatura
(°C)
Humedad
Relativa (%)
N° individuos
Muestreados /
Bd positivo

8. RESULTADOS
 Los resultados esperados se tomara un total de muestras, representadas en los
diferentes especies de anfibios correspondientes a los tres órdenes
Gymnophiona, Caudata, y Anura. Esperando que los anfibios presente signos
aparentes de Quitridiomicosis, como letargo, posición del cuerpo anormal,
pérdida de reflejos o anorexia, encontrar individuos muertos o muertes masivas
durante los muestreos. Fueran positivas a la presencia de B. dendrobatidis.

9. CONCLUSIONES
 Durante el estudio es detectar la presencia de Batrachochytrium dendrobatidis
en especies de anfibios dependiendo del alto número de individuos muestreados.
Los resultados esperados mediante PCR en tiempo real (qPCR) evidenciara las
bajas concentraciones de zoosporas en las muestras, las cuales a que niveles se
puede encontrar por debajo de la regla de las 104 zoosporas propuesta por
Vredenburg et al. (2010), cuyo modelo sugiere que valores mayores o iguales a
esta concentración pueden ocasionar la muerte a los anfibios.

10. CONCLUSIONES
 Resultados esperados tendrán que ser similares a la baja carga de zoosporas
equivalentes.
 Muchos factores pueden estar asociados con el bajo número de individuos
positivos y con la baja concentración detectada; entre las posibles causas se
pueden encontran: que los ejemplares posiblemente se encuentren en las etapas
iniciales de la enfermedad donde no se evidencia sintomatología, o podrá ser las
mudas excesivas de piel que se presentan cuando ya se han infectado.

11. BIBLIOGRAFÍA
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 Rebollar, Eria A.; Hughey, Myra C.; Harris, Reid N.; Domangue, Rickie J.; Medina, Daniel; Ibáñez,
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