mouse S100G

1. ESTEFANÍA GARCIA FRANCO

2. Calcium
is A mineral found mainly in the hard part of bones, where it is stored.
is very essential in muscle contraction, oocyte activation, building
strong bones and teeth, blood clotting, nerve impulse, transmission,
regulating heartbeat and fluid balance within cells.
Eating a well-balanced diet can provide all the necessary nutrients
and help prevent calcium deficiency.
According to the National Academy of Sciences, adequate intake of calcium is 1
gram daily for both men and women. The upper limit for calcium intake is 2.5
grams daily.

3. S100 calcium-
binding
protein
G (S100G)
is a protein that in humans is encoded by the S100G gene.
This cytosolic protein belongs to a family of calcium-
binding proteins that includes calmodulin, parvalbumin,
troponin C, and S100 protein.
In the intestine, the protein is vitamin D-dependent and
its expression correlates with calcium transport activity.
The protein may increase Ca2+ absorption by buffering
Ca2+ in the cytoplasm and increase ATP-dependent
Ca2+ transport in duodenal basolateral membrane vesicles.

4. evaluate how Mouse S100G protein
exhibits properties characteristic of
a calcium sensor
OVERALL OBJECTIVE

5. MATERIALES Y MÉTODOS
1. ESPECTOMETRIA DE MASAS
¿Qué es?
es una tecnica de analisis que se usa para la
determinacion de estructuras organicas.
Fundamento
esta basada en la obtencion de iones a partir de moleculas
organicas en fase gaseosa, una ves obtenidos estos iones, se
separan de acuerdo con su masa y su carga
¿para qué?
propisia una informacion bidimensional que
representa un parametro relacionado con la
abundancia de los diferentes tipos de iones en
funcion De la relacion masa/carga

6. MATERIALES Y MÉTODOS
2. FLUORESCENCIA
¿Quées?
Es un método
rápido, simple y
económico para
determinar la
concentración de un
analito en solución
en función de sus
propiedades
fluorescentes. Fundamento
es un proceso de
emisión en el cual
las moléculas son
excitadas por la
absorción de
radiación
electromagnética y
al relajarse al estado
basal liberan el
exceso de energía en
forma de fotones
¿paraqué?
se usa
principalmente para
medir compuestos
en solución.

7. MATERIALES Y MÉTODOS
3. CALORIMETRÍA
¿Qué es?
Es una tecnica que se encarga de
medir la cantidad de calor
generada o perdida en ciertos
procesos físicos o químicos.
Fundamento
se utiliza un dispositivo que
permite obtener datos térmicos en
pequeñas cantidades de material.
Implica calentar la muestra a una
velocidad controlada y registrar el
flujo de calor hacia o desde la
muestra.
¿para qué?
se utiliza para medir las cantidades
de calor transferidas hacia o desde
una sustancia para conocer si a se
presentaron reacciones
químicas, cambios
físicos o transiciones de fase

8. ¿ QUÉ ES?
Es un método de
electroforesis que permite la
separación de proteínas en
masa.
FUNDAMENTO
Gracias al SDS las proteínas se
desnaturalizan, perdiendo su
conformación tridimensional.
De este modo se obtiene un
fraccionamiento que obedece
a: la diferencia de peso; la
longitud de la cadena
(tamaño); y la forma de la
proteína.
¿PARA QUÉ?
Es el método de
electroforesis empleado con
mayor profusión para analizar
proteínas.
3. SDS-PAGE (sodium dodecyl sulfate–polyacrylamide gel electrophoresis)
MATERIALES Y MÉTODOS

9. RESULTS
• Los resultados del análisis SDS-PAGE de la proteína
S100 G de ratón después de una proteólisis limitada por
α-quimotripsina bovina. Mientras que la proteína apo-
S100 G y S100 G en los estados cargados de Mg2 + se
digieren fácilmente por la α-quimotripsina (como se
juzga por la aparición de bandas adicionales
correspondientes a los fragmentos de proteína), la
proteína S100 G cargada de Ca2 + es muy estable frente
a enzimas proteólisis

10. RESULTS
• La existencia de formas
oligoméricas se ve claramente
en el caso de la proteína
cargada de Ca2 + y Mg2 +,
mientras que apo-S100 G se
caracteriza por una tendencia
mucho menos pronunciada a
formar formas oligoméricas

11. table 5 se espera que todos los S100G estén bastante desordenados.
Por lo general, se pueden clasificar las proteínas como altamente
ordenadas (PPRD <10%), moderadamente desordenadas (30%> PPRD>
10%) y altamente desordenadas (PPRD> 30%) [102 ] De acuerdo con
esta clasificación y en base a los resultados de la evaluación del
trastorno por la mayoría de las herramientas de predicción del
trastorno en la base de datos de MobiDB, todos los S100G se predicen
como proteínas moderadamente o altamente desordenadas
RESULTS

12. La tabla 4 muestra los Parámetros de unión a Ca2 + de S100 G de ratón
recombinante, determinado a partir de experimentos de tampón Ca2 +
usando fluorescencia de proteína intrínseca o fluorescencia de Bis-ANS.
Ambos ajustes proporcionaron prácticamente el mismo resultado (ver
Tabla 4). La constante efectiva de unión al calcio para S100 G es de
aproximadamente 108 M − 1, que está cerca de los valores de la literatura
RESULTS

13. 1 C.G. Bunick, etal.
bound state of mouse S100 G protein indicates that in
this state the protein surface is more hydrophobic
than the surface of the apo-S100 G. The binding of
Ca2+ cations to calmodulin (Fig. 4B) and calbindomo-
dulin causes similar but more pronounced effects on
bis-ANS fluorescence.
2 S.J. Hubbard
The extent of proteolytic digestion by specific
proteases, such as trypsin, has been shown to
correspond to flexibility of the re- gion of the cut site
and not just surface exposure
3 S.E. Permyakov, etal.
The effective calcium binding constant for S100 G is
about 108 M−1, which is close to the literature values
DISCUSSION

14. CONCLUSIONS
In contrast to bovine S100G, mouse S100G when
binding with calcium ions causes serious changes in
its structure, while the binding of calcium to bovine
S100G caused only very small structural changes
both bovine s100G and mouse S100G,
despite not having an identical sequence with
the calcium buffer protein, show properties of
a calcium sensing protein.