Resumen sobre tecnicas parasitarias

1. MishoStudy
RESUMEN : TECNICAS PARASITARIAS
 Diagnostico de Enteroparasitos
1) Técnicas sin concentración de parásitos
- Frotis de heces (directo al fresco): Se realiza un examen microscópico de las heces,
haciendo preparaciones al fresco diluidas con suero fisiológico o diluido con Lugol
(solución yodo yodurada). En el examen de estas preparaciones al fresco, pueden
observarse formas vegetativas y quistes de protozoos, así como huevos o larvas de
helmintos.
- Método de la tira adhesiva (técnica de Graham): Se utiliza para la demostración de
huevos de Enterobius vermicularis. Se aplica a la piel perianal una tira adhesiva
transparente de unos 4 cm de longitud y 1 cm de ancho, por la mañana antes de que el
paciente se bañe o acuda al servicio, se desprende y se extiende sobre un portaobjeto
para su examen microscópico.
2) Técnicas con concentración de parásitos
- Concentración por Sedimentación: Se basa en emulsionar las heces con una solución
de baja densidad donde los parásitos se depositen en el fondo (agua, suero fisiológico).
Luego se procede a centrifugar la suspensión y se realizan preparaciones para examen
microscópico del sedimento. En este sedimento se encontraran concentrados los huevos
de parásitos y los quistes de protozoos. Para huevos de fasciola hepática y huevos de
Schistosoma mansoni. Ejemplo: Examen directo
- Concentración por centrifugación: Se realiza una suspensión filtrada de heces mezclada
con éter, para la concentración de elementos parasitarios. Ejemplo: Telemann
modificado, Técnica de Burrow (PAF)
- Concentración por Flotación: Se basa en emulsionar las heces con una solución de alta
densidad, donde los huevos de los parásitos floten. Después de dejar reposar la
emulsión, se realizan preparaciones en fresco de los elementos que “flotan”. Ejemplo:
Método de Fausto o del sulfato de zinc.

2. MishoStudy
 Diagnostico de Hemoparasitos
Se les denomina Hemoparasitos, a parásitos que viven en el torrente sanguíneo o al interior del
eritrocito; entre los más comunes encontramos al Tripanosoma cruzi (causante de la enfermedad
de Chagas), al Plasmodium (agente causal de la malaria) y a las Microfilarias.
Requisitos para la toma de muestras
 En RN tomar muestras pequeñas de sangre, mediante punción capilar del talón del pie o
del lóbulo de la oreja.
 En niños de mayor edad y adultos, puncionar un dedo de la mano, preferentemente el
pulpejo lateral. ( se recolecta de 0.2 a 0.4 ml de sangre)
 La recolección de sangre venosa permite recolectar volúmenes de hasta 10 ml. Si la
técnica lo requiere, utilizar anticoagulante citrato de sodio al 10% (0.1ml x ml de sangre).
1) Técnicas sin concentración de parásitos
- Frotis sanguíneo: Son extensiones de sangre periférica que se fijan previamente con
metanol y se tiñen con Giemsa. Son apropiados para la detección de Leishmania,
Plasmodium sp., T. cruzi y otros hemoparasitos.
2) Técnicas con concentración de parásitos
- Gota gruesa: Se deja secar una gran gota de sangre sobre un portaobjetos, se aclara
con agua para romper los hematíes y liberar los pigmentos que impedirían transparentar
la preparación y luego se tiñe con Giemsa sin fijar previamente.
- Método de Strout: Es una técnica simple y de buena sensibilidad en los casos agudos de
enfermedad de Chagas. Se basa en al centrifugación de 5 ml de sangre para separar
suero de glóbulos rojos y se observa el sedimento entre cubre y portaobjeto.
- Micro hematocrito o Microstrout: Misma técnica que Strout, pero la sangre se recoge en
capilares de microhematocrito heparinizados. El extremo inferior se tapa con una masilla,
se centrifuga y se fractura el capilar en el límite de la capa leucocitaria. Se deposita en el
portaobjetos la capa leucocitaria y el plasma.
- Xenodiagnóstico: Es una técnica que permite la multiplicación del parásito in vivo y
consiste en hacer picar a la persona sospechosa de infección por el vector libre de
infección. Posteriormente se analizan las heces del vector en búsqueda del parasito.

3. MishoStudy
 Diagnostico de coccidios intestinales
1) Tinciones alcohol acidas para el diagnostico: Permite observar ooquistes de
Cryptosporidium parvum, Isospora belli o Cyclospora cayetanensis, ya que son organismos
con propiedad de coloración acido resistente.
Ejemplos: Método Kinyoun, Tinción Ziehl-Neelsen modificada.
2) Método de observación por fluorescencia: Usado para Cryptosporidium parvum, se utilizan
tinciones fluorescentes de aureamina y aureamina-rodamina.
Son coloraciones acidorresistentes como la tinción de Ziehl-Neelsen, pero el material debe
ser observado en un microscopio UV. Cyclospora cayetanensis no requiere ser teñida, ya
que se ha descrito que los ooquistes son fluorescentes.
 Diagnostico en secreciones y liquidos
1) Examen al fresco de secreción vaginal
 Se utiliza para el diagnostico de trichomoniasis.
2) Examen directo al fresco de orina
 Para detección de trichomoniasis en el hombre mediante orina recién emitida, con o
sin tinción. El examen de sedimento de orina también es útil para la búsqueda de
microfilarias o huevos de S.haematobium, luego de filtrar la orina por una membrana.
3) Examen de expectoración y secreción bronquial
 Se pueden observar larvas de A. lumbricoides, S. stercoralis y huevos de
Paragonimus westermani.
Dentro de los protozoos, en pacientes con inmunodeficiencia, el examen de expectoración es
de utilidad para el diagnostico de Pneumocystis carinii, tiñendo la muestra con azul de
Toluidina. En estos pacientes también se ha encontrado Crystosporidium en expectoración al
ser teñida con Ziehl-Neelsen.

4. MishoStudy
 Alternativas a la microscopia: Deteccion de antigenos parasitarios
Son técnicas que sirven para la identificación y detección de algunos parásitos en muestras
clínicas de forma rápida y sensible. No todas ellas son de uso frecuente, pero su utilización
aumenta de forma exponencial. Los antígenos se pueden determinar en:
- Deposiciones (para amibiasis, giardiasis y criptosporidiosis)
- Sangre (para T. cruzi, T. gondii, Plasmodiun spp.)
- Liquido cefalorraquídeo ( para neurocisticercosis y toxoplasmosis cerebral)
- Orina ( para T. cruzi, T. gondii y Schistosoma)
También están las técnicas basadas en la biología molecular de los parásitos, como la PCR
(reacción en cadena de la polimerasa) en muestras de sangre, orina, heces y muestras de biopsia
tisular, obteniendo una excelente sensibilidad y especificidad.