Informe de microbiología, en especial de cultivos de helmintos y protozoos

1. CULTIVOS PARA
HELMINTOS Y
PROTOZOOS
Trabajo realizo por Rubén Ariza, Lucía Núñez, Esther López, Sara
Ettaouil y María Cortes Molina
2º de Laboratorio Clínico y Biomédico

2. ÍNDICE
1. Medios según sus componentes y consistencia.
1.1. Introducción
1.2. Protozoos
1.3. Helmintos
2. Medios de cultivo según su utilidad y el objetivo.
3. Cultivos específicos de helmintos.
3.1. Cultivo con el método de Baremann
3.1. Cultivo con el método de Koga
4. Cultivos específicos de protozoos.
4.1.Medio TSI-S-33
4.2.Medio NNN
5. Principales parásitos en cultivo.
5.1. Protozoos
5.2.Helmintos

3. 1. Medios según sus componentes y consistencia
1.1. Introducción
Recipientes
utilizados
Agentes
gelificantes
Usos
Medio sólido Placa de Petri Crecimiento aislado
Medio líquido Tubos, frascos Circulación libre
Medio
semisólido
Tubos Motilidad

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1. Medios según sus componentes y consistencia
1.2.Protozoos
● SÓLIDOS: Cultivo de Tanabe y Chiba
● Agar
● Glucosa
● Agua destilada
● Asparagina
● Cloruro de potasio
● Bicloruro de mercurio
● Cloruro de sodio
● Bicarbonato de sodio
Entamoeba histolytica

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1. Medios según sus componentes y consistencia
1.2.Protozoos
● LÍQUIDOS: Medio Pavlova
Medio Pavlova
● Agua destilada
● Cloruro de potasio
● Extracto de levadura
● Almidón de arroz
● Suero de caballo
● Fosfato de potasio
● Fosfato ácido de sodio
● Penicilina G y
Estreptomicina

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1. Medios según sus componentes y consistencia
1.2.Protozoos
● BIFÁSICO: Medio Diamond
Medio
Diamond
● Agar
● Agua destilada
● Maltosa
● Extracto de levadura
DIFCO
● Tripticasa BBL
● Suero sanguíneo
● Clorhidrato de L-cisteína
● Ácido ascórbico
● Penicilina G
● Sulfato de estreptomicina

7. 1. Medios según sus componentes y consistencia
1.3. Helmintos
● SÓLIDO: Placa de Agar
Método tradicional para controlar de forma diaria el desarrollo de las larvas.
Componentes
● Agar: Componente básico, agente gelificante.
● Cloruro de sodio: Componente inhibidor,
físico-químico.
● Agua destilada: Componente básico.

8. 1. Medios según sus componentes y consistencia
1.3. Helmintos
● SÓLIDO: Agar carbón
Componentes
● Agar: Componente básico, agente gelificante.
● Carbón: Componente básico, macronutrientes.
● Agua destilada: Componente básico.

9. 1. Medios según sus componentes y consistencia
1.3. Helmintos
● LÍQUIDO: Método de Harada - Mori
Permite el desarrollo de huevos a estadios larvales de los nemátodos
permitiendo diferenciar la morfología de estos.
● Uso: Obtención de larvas rabditiformes filariformes de anquilotomídeos
y estrongiloides.

10. 1. Medios según sus componentes y consistencia
1.3. Helmintos
● LÍQUIDO: Método de Harada - Mori
Componentes
● Agua corriente estéril: Componente básico.
● Alcohol 30%: Desinfectante, componente inhibidor.
● Formalina 5%: Agente bactericida, componente
inhibidor.
● Solución fisiológica: cloruro de sodio: Componente
inhibidor, físico-químico.

11. 1. Medios según sus componentes y consistencia.
1.3. Helmintos
● LÍQUIDO: Método de Harada - Mori
Procedimiento: Preparación del tubo
Añadir 1 o 2 mL
de agua destilada
o solución salina
al tubo.
Cortar tira de
papel de filtro
12-15 x 1,5-2
cm.
Realizar una
muesca en el
extremo inferior
del papel de
filtro.
Strongyloides
stercolaris

12. 1. Medios según sus componentes y consistencia.
1.3. Helmintos
Procedimiento: Extendido de la muestra
Paso 1
Extender muestra
de heces (0,5 a 1g)
sobre la superficie
del papel sin llegar
a los extremos.
Paso 2 Paso 4
Paso 3
Colocar el papel de
filtro dentro del
tubo evitando el
contacto de las
heces con el líquido.
Tapar el tubo y
rotular con los datos
del paciente.
Incubar a 27ºC -
37ºC por 4 a 10
días.

13. 2. Medios de cultivo según su utilidad y objetivo
Medio enriquecido
Medio básico Medio selectivo
● No requiere de
nutrientes
determinados.
● Se busca un
crecimiento controlado.
● Favorece el crecimiento
de microorganismos
característicos.
● Sus nutrientes no suelen
aparecer en medios
básicos.
● Posee factores de
crecimiento.
● Únicamente confiere el
crecimiento de organismos
específicos empleando tanto
inhibidores como
facilitadores.

14. 2. Medios de cultivo según su utilidad y objetivo
Medio especial
Medio diferencial Medio de transporte
● Presencia y efectos
metabolismo
● Diferenciar microorganismos
● Inhibidores y facilitadores
● Difícil de clasificar o
realiza técnicas
concretas
● Mantiene la vida
● No crecimiento
● Viabilidad hasta llegar
al laboratorio

15. 3. Cultivos específicos de helmintos
Especies que permiten diagnosticar
Ancylostoma
duodenale
Trichostrongylus
spp.
Strongyloides
stercolaris spp.

16. 3. Cultivos específicos de helmintos
3.1. Cultivo con el método de Baremann
● Colocar unos 4-6 gramos de materia fecal sobre la
estopilla. Cerrar esta última con ayuda de una goma
elástica.
● Añadir la muestra sobre el embudo y cubrir con agua
tibia. Reposar 24 horas.
● Drenar una parte en un tubo de ensayo y dejar
sedimentar durante 30 minutos.
● Situar una muestra de sedimento en una placa de
Petri en busca de larvas.

17. 3. Cultivos específicos de helmintos
3.1. Cultivo con el método de Koga
● Especializado en la detección de infecciones parasitarias en heces.
● Durante el cultivo en agar, la muestra:
● No se debe refrigerar la muestra, pues se inmovilizan las larvas.
● Se coloca en una placa de agar nutritivo.
● Se incuba durante 48 horas.

18. Larva de Strongyloides stercolaris
cultivada con la técnica de Baremann.
Larva de Strongyloides stercolaris
cultivada con la técnica de Koga.
3. Cultivos específicos de helmintos

19. 4. Cultivos específicos de protozoos
➥Más empleado
➥Medio selectivo y
bifásico
➥Sangre
(desfibrinada)
➥Solución de Locke
Leishmania
Trypanosoma
4.2. Medio NNN

20. 4. Cultivos específicos de protozoos
➥Medio selectivo
➥Triple Sugar Iron Agar
Giardia
4.2. Medio TSI-S-33

21. 5. Principales parásitos en cultivo
5.1. Protozoos
Blastocystis sp.
Cultivo de quistes en un medio Jones.

22. 5. Principales parásitos en cultivo
5.1. Protozoos
Trypanosoma Cultivo en agar básico y tinción con Giemsa.

23. 5. Principales parásitos en cultivo
5.1. Protozoos
Cultivo en agar teñido con azul de bromotimol
Trichomonas vaginalis

24. 5. Principales parásitos en cultivo
5.1. Protozoos
Cultivo de Leishmania en
medio NNN modificado (agar
sangre).

25. 5. Principales parásitos en cultivo
5.1. Protozoos
Giardia
Cultivo TYI-S-33
con extracto bovino

26. 5. Principales parásitos en cultivo
5.1. Protozoos
Entamoeba histolytica Quistes en agar teñidos con Lugol.

27. 5. Principales parásitos en cultivo
5.2. Helmintos
Strongyloides stercolaris
Larva de Strongyloides stercolaris
cultivada con el método Dancescu.

28. 5. Principales parásitos en cultivo
5.2. Helmintos
Ancylostoma duodenale
Cultivo con la técnica de Baermann y tinción
con Lugol.

29. 5. Principales parásitos en cultivo
5.2. Helmintos
Necator americanus Cultivo de huevos teñido con Lugol

30. 6. Bibliografía
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0desarrollo
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ResearchGate | Find and share research. Recuperado de: Strongyloides stercoralis eggs (A), larvae (B), and free-living male... | Download Scientific
Diagram (researchgate.net)
6. Bibliografía