En el presente informe se realizaron simulaciones realistas de gel de agarosa en las trece (13) cepas bacterianas aisladas identificadas en las muestras de agua y suelo contaminado. En el cual se pudo visualizar el resultado de gel de agarosa que se podría obtener estando en laboratorio.
2. BIOTECNOLOGÍA
INFORME
PRÁCTICA DE SIMULACIÓN DE
ELECTROFORESIS EN GEL DE AGAROSA
UTILIZANDO EL PROGRAMA SNAPGENE CON
DATOS DEL ARTÍCULO CIENTÍFICO
"AISLAMIENTO DE BACTERIAS CON
POTENCIAL BIORREMEDIADOR Y ANALISIS DE
COMUNIDADES BACTERIANAS DE ZONA
IMPACTADA POR PETROLEO EN
CONDORCANQUI - AMAZONAS – PERÚ”
Estudiante: Marians Romina Luque Checalla
Docente: Prof. Dr. Hebert Hernan Soto Gonzales
Ilo, Perú – Octubre 29, 2021
VII ciclo
Escuela Profesional de
Ingeniería Ambiental
Facultad de ingenierías:
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1. Introducción
En el presente informe se realizaron simulaciones realistas de gel de agarosa en las trece (13)
cepas bacterianas aisladas identificadas en las muestras de agua y suelo contaminado. En el
cual se pudo visualizar el resultado de gel de agarosa que se podría obtener estando en
laboratorio.
El método empleado fue la electroforesis en gel de agarosa, el cual consiste en separar
fragmentos de ADN según el tamaño de estos o también según su carga. No obstante, el
proceso de separación de los fragmentos de ADN se da solo por su tamaño, ya que todas las
moléculas de ADN contienen la misma cantidad de carga por masa.
Así que, después de que los fragmentos de ADN hayan sido separados, estos pueden ser
visualizados y gracias a ello se puede determinar el tamaño de las bandas. Estas bandas o líneas
del ADN analizadas contienen un gran número de fragmentos del ADN que viajaron junos a
la misma posición y son del mismo tamaño, esto es debido a que un (01) fragmento de ADN
no sería visible en el resultado del análisis en el que se
muestran los carriles o columnas. Así mismo, se puede
comparar dichas bandas con el marcador de peso
molecular (primera columna) para determinar el tamaño
aproximado de la banda.
Cabe resaltar que todo el procedimiento de electroforesis
en gel de agarosa solo es una simulación en el programa
SnapGene, sin embargo, es lo suficientemente realista y
detallada gracias al algoritmo de simulación de gel de
base empírica del programa.
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2. Objetivos
2.1.Objetivo general
Simular el proceso de electroforesis en gel de agarosa mediante el uso de las cepas bacterianas
aisladas provenientes de las muestras de agua y suelo contaminado que se muestran en el
artículo científico “Aislamiento de bacterias con potencial biorremediador y análisis de
comunidades bacterianas de zona impactada por derrame de petróleo en Condorcanqui –
Amazonas – Perú”.
2.2.Objetivos específicos
• Identificar los distintos procedimientos que se pueden realizar en el programa SnapGene.
• Realizar el mapa lineal de cada nucleótido.
• Realizar el mapa circular de cada nucleótido.
• Identificar el gel de agarosa.
3. Metodología
Se realizó una simulación del proceso de electroforesis en gel de agarosa utilizando las
secuencias de los nucleótidos que se muestran en la Figura 1.
Figura 1. Identificación molecular de las cepas bacterianas aisladas. (Aislamiento de bacterias (…), 2020)
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3.1.Materiales
• Laptop
• Artículo científico
• Internet (Google)
• NCBI
• Secuencia de nucleótidos
• SnapGene
3.2.Procedimiento
• Ingresar a la página del NCBI (https://www.ncbi.nlm.nih.gov/)
Figura 2.
• Colocar el N° de Accesión de la cepa bacteriana aislada identificada en el buscador de la
página y seleccionar el resultado que aparece.
Figura 3.
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• Descargar la secuencia del nucleótido en formato fasta y almacenarlo o guardarlo en una
carpeta nueva exclusivamente para el trabajo que se está realizando. Y así sucesivamente
hasta guardar en archivos FASTA los trece (13) nucleótidos.
Figura 4.
• Instalar el programa SnapGene, mediante la página oficial (https://www.snapgene.com/) la
cual le brindará 30 días de prueba para utilizar gratuitamente el programa.
• Abrir el programa y hacer clic en la primera opción “Open”, luego “Open Files…”
Figura 5.
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• Buscar el archivo en la carpeta en la que se guardó.
Figura 6.
• Seleccionar: Double-Stranded < Linear < OK
Figura 7.
• Se obtiene el mapa lineal correspondiente al nucleótido insertado. Así mismo, se puede
visualizar la secuencia, las enzimas y entre otras opciones en la parte inferior e izquierda.
Figura 8.
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Simulación del Gel Agarosa
Figura 73.
5. Conclusión
El programa SnapGene brinda simulaciones realistas de gel de agarosa en el cual se puede
visualizar lo mismo que se visualizaría en el laboratorio. Así mismo, contiene una
configuración flexible de todos los elementos del gel, en el que incluye el número de carriles,
el porcentaje de agarosa y un conjunto completo de marcadores en la primera columna (MW).
Además, se puede identificar la banda que sea de agrado con información detallada de los
fragmentos para cada carril o columna.
SnapGene es un programa que muy aparte de simular el procedimiento de la técnica de
electroforesis en gel, contiene otras opciones de manejo, como la clonación molecular,
mutagénesis, alineación, gestión de datos, seguimiento del historial, entre otros, sin mencionar
que el uso de este programa es de fácil comprensión, haciendo que cualquier persona pueda
comprender la manipulación de este.
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6. Bibliografía
Castillo Rogel, R. T.; More Calero, F. J.; Cornejo La Torre, M.; Fernández Ponce, J. N. & Mialhe
Matonnier, E. L. (2020). Aislamiento de bacterias con potencial biorremediador y análisis
de comunidades bacterianas de zona impactada por derrame de petróleo en Condorcanqui
– Amazonas – Perú
Khan Academy (s.f.). Electroforesis en gel. https://es.khanacademy.org/science/ap-biology/gene-
expression-and-regulation/biotechnology/a/gel-electrophoresis