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TECNICA TINCION DE GRAM

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TECNICA TINCION DE GRAM

  1. 1. ¿Cómo visualizo las bacterias?
  2. 2. Habitualmente se utiliza un colorante de color rojo, como la safranina o la fucsina básica (coloración de contraste), en la que las células gramnegativas se presentan rojas, mientras que las grampositivas permanecen azules. Habitualmente se utiliza un colorante de color rojo, como la safranina o la fucsina básica (coloración de contraste), en la que las células gramnegativas se presentan rojas, mientras que las grampositivas permanecen azules.
  3. 3. El cristal violeta penetra en todas las células bacterianas a través de la pared bacteriana. El Lugol actúa de mordiente, haciendo que el cristal violeta se fije con mayor intensidad a la pared de la célula bacteriana. El I2 entra en las células y forma un complejo insoluble en solución acuosa con el cristal violeta. Alcohol-acetona, sirve para realizar la decoloración, ya que en la misma es soluble el complejo I2/cristal violeta. Los organismos Gram positivos no se decoloran, mientras que los Gram negativos sí lo hacen. Para poner de manifiesto las células Gram negativas se utiliza una coloración de contraste. Habitualmente es un colorante de color rojo, como la Safranina o la Fucsina. Explicación
  4. 4. Deben destacarse algunos aspectos cruciales de la tinción de Gram: 1) El tratamiento con cristal violeta debe preceder al tratamiento con yodo. El yodo por sí solo tiene poca afinidad con las células. 2) La decoloración debe realizarse con poca agua para evitar que pierdan la tinción las células grampositivas. EI proceso de decoloración debe ser corto y es esencial un cálculo preciso del tiempo para obtener resultados satisfactorios. El carácter de grampositivo no es siempre un fenómeno del todo o nada. Algunos organismos son más grampositivos que otros y algunos son gram-variables, es decir, unas veces grampositivos y otras gramnegativos. 3) Cultivos más viejo de 24 horas pueden perder su habilidad de retener el complejo cristal violeta - yodo.
  5. 5. Causas que alteran la tinción de Gram Uso de antibióticos. Errores del operador. Eda d de la bact eria.
  6. 6. TINCIÓN DE GRAM Bacterias Grampositivas •CocosGrampositivos
  7. 7. Gruesos: Forma típica de Clostridium sp, como C. perfringens, C. septicum Finos: Forma típica de Listeria sp Ramificados: Forma típica de Actinomycetes y Nocardia, como A. israelii BacilosGrampositivos
  8. 8. Diplococos: Forma usual de Neiseria sp, como N. meningitidis También Moraxella sp y Acinetobacter sp aparecen con morfología de diplococos. Cocobacilos: Forma usual de Acinetobacter sp, que puede ser Gram- positivo o Gram- negativo, y, a menudo, Gram-variable. TINCIÓN DE GRAM Bacterias GramnegativasCocosGramnegativos
  9. 9. Bacilos finos: Forma usual de enterobacteriaceae, como E. Coli Cocobacilos: Forma usual de Haemophilus sp, como H. influenzae BacilosGramnegativos

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