Practica 5: identificacion de lipidos

1. UNIVERSIDAD TÉCNICA DE AMBATO
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
CARRERA DE ENFERMERÍA
LABORATORIO DE: Bioquímica
PROFESOR: Ing. Mg. Violeta Dalgo Flores
SEMESTRE: Primer semestre “A”, “B”
PRÁCTICA: #5
TEMA:
“IDENTIFICACIÓN DE LÍPIDOS”
1. INTRODUCCIÓN
El grupo de biomoléculas más diverso que estructuran a la célula y que realizan una serie de
funciones celulares, es el de los lípidos. Estas biomoléculas se almacenan en el cuerpo como
material de reserva energética y se oxidan cuando es necesario producir energía.
Los lípidos son moléculas importantes de la dieta porque tienen un alto valor energético,
además constituyen la mitad de la masa de las membranas celulares y forman la estructura
básica de algunas hormonas y de las sales biliares.
Estas biomoléculas orgánicas son un grupo heterogéneo de compuestos celulares, es decir,
de origen biológico con diversas propiedades químicas, pero que tienen en común sus
propiedades físicas: son insolubles en agua y son solubles en los solventes orgánicos no
polares como el éter, benceno, alcohol etílico caliente, acetona y cloroformo, además
participan en el proceso de saponificación, formando jabones. Las propiedades de este
grupo de biomoléculas se identifican a nivel del laboratorio, mediante el ensayo de
diferentes reacciones.
Los principales lípidos del plasma humano son el colesterol, los ésteres del colesterol, los
triglicéridos, los fosfolípidos y los ácidos grasos no esterificados. El colesterol es un
importante componente estructural de las membranas celulares y un precursor para la
biosíntesis de los ácidos biliares y las hormonas esteroideas. La prueba utilizada para
determinar colesterol es mediante un método enzimático colorimétrico.
2. OBJETIVOS
General:
- Determinar las principales propiedades físicas y químicas de los lípidos, mediante
ensayos de laboratorio.
Específicos:
- Conocer los reactivos y factores que intervienen en el proceso de saponificación, así
como la reacción de formación del producto.
- Identificar las técnicas que permiten la identificación y solubilidad de lípidos, mediante
ensayos cualitativos.

2. 3. MATERIALES Y REACTIVOS
MATERIALES Y EQUIPOS:
- Tubos de ensayo
- Gradilla
- Pipeta Pasteur
- Vasos de precipitados de 50ml y 100ml
- Agitador de vidrio
- Equipo de baño María
REACTIVOS:
- Aceite vegetal
- Agua destilada
- Solución de hidróxido de sodio al 20%
- Solución de Sudán III
- Tinta roja
- Alcohol etílico
- Cloroformo
4. PROCEDIMIENTO
Realice los ensayos que se describen a continuación, en tubos de ensayo ROTULADOS,
LIMPIOS Y SECOS, con una solución patrón (agua destilada) y las muestras de lípidos.
SAPONIFICACIÓN:
Las grasas reaccionan en caliente con el hidróxido sódico o potásico descomponiéndose
en los dos elementos que la forman: glicerina y los ácidos grasos. Estos se combinan con
los iones sodio o potasio del hidróxido para dar jabones, que son en definitiva las sales
sódicas o potásicas de los ácidos grasos.
4.1.Técnica:
1. Colocar en un tubo de ensayo 2ml de aceite vegetal y 2ml de una solución de hidróxido
de sodio al 20%.
2. Agitar enérgicamente y colocar el tubo al baño María de 20 a 30 minutos.
3. Transcurrido este tiempo, se puede observar en el tubo tres capas: la inferior clara, que
contiene la solución de hidróxido de sodio sobrante junto con la glicerina formada; la
superior amarilla de aceite no utilizado, y la intermedia, de aspecto grumoso, que es el
jabón formado.

3. Nota: Cuando ya se ha visto como se forma el jabón, se puede colocar en un vaso de
precipitado el contenido de los tubos de ensayo, se remueve bien y se deja calentar
hasta que se forme un trozo de jabón.
IDENTIFICACIÓN DE LÍPIDOS:
Las grasas se colorean en rojo anaranjado por el colorante denominado Sudan III.
4.2.Técnica:
1. Disponer en una gradilla seis tubos de ensayo, colocando en cada uno 2ml de las
muestras de aceites y el vinagre.
2. Añadir a los tres primeros 4 o 5 gotas de solución alcohólica de Sudán III, y a los demás
añadir de 4 a 5 gotas de tinta roja. Agitar los tubos y dejar reposar.
3. Se observará en los tubos en los en los que se le añadió Sudán, que todo el aceite
aparece teñido. En cambio en el frasco al que se añadió tinta roja, la tinta se habrá ido
al fondo y el aceita aparecerá sin teñir.
SOLUBILIDAD:
Las grasas son insolubles en agua. Cuando se agitan fuertemente en ella se dividen en
pequeñísimas gotitas formando una "emulsión" de aspecto lechoso, que es transitoria,
pues desaparece en reposo, por reagrupación de las gotitas de grasa en una capa que
por su menor densidad se sitúa sobre la de agua.
Por el contrario, las grasas son solubles en los llamados disolventes orgánicos como el
alcohol acetona, éter, benceno, otros.
4.3.Técnica:
1. Colocar en el 1 tubo de ensayo ellos 3ml de agua y en el otro 3ml de alcohol acetona u
otro disolvente orgánico.
2. Añadir a cada tubo 1ml de aceite y agitar fuertemente. Observar la formación de gotitas
o micelas y dejar en reposo. Se verá como el aceite se ha disuelto en el alcohol acetona
y en cambio no lo hace en el agua, y el aceite subirá debido a su menor densidad.
5. RESULTADOS OBTENIDOS
Indique las observaciones de los resultados obtenidos en el apartado 4.1
Elabore una tabla con los resultados obtenidos del apartado 4.2.
MUESTRA SOLUCIÓN DE
SUDÁN III
TINTA CHINA ROJA
OBSERVACIONES
Indique las observaciones de los resultados obtenidos en el apartado 4.3.

4. 6. DISCUSIÓN DE LOS RESULTADOS
6.1.Discutir los resultados obtenidos
Analice los resultados obtenidos en cada ensayo para las diferentes muestras de lípidos
y reporte los resultados obtenidos.
7. CONCLUSIONES
8. CUESTIONARIO
8.1.¿Explique por qué los lípidos son solubles en solventes polares?
8.2.¿Qué enzima logra en el aparato digestivo la hidrólisis de las grasas?
8.3.Describa el fundamento del análisis de colesterol en un suero sanguíneo.
8.4.Indique cómo ocurre en el organismo el metabolismo de los lípidos, y las reacciones
que se llevan a cabo.
8.5.Mencione 4 funciones de los lípidos en el organismo
9. BIBLIOGRAFÍA
- García, A; Jiménez, J; Colón, E. Martínez, M. “MANUAL DE PRÁCTICAS DE LABORATORIO
DE QUÍMICA GENERAL II”. 2010. 3ra edición. Editorial UNAPEC. República Dominicana.
95pp.