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Reporte de práctica de
Identificación de Lípidos.
2016
BIOQUIMICA 6º “E”
ESQUIVEL FONSECA JENNIFER
RUDY ALEJANDRO ESMERALDA HERNANDEZ
CAMACHO LUNA VANESSA
GONZALES LOPEZ MARISOL
CORNEJO RAMIREZ KARLA GERALDINE
CETIS NO. 62 | Rafael Garcilita.
OBJETIVO:
Realizar pruebas de identificación de lípidos y grasas. Así como algunas de las
principales reacciones de las grasas.
FUNDAMENTO:
Se llama lípidos a un conjunto de moléculas orgánicas, la mayoría biomoléculas,
compuestas principalmente por carbono e hidrógeno y en menor medida oxígeno,
aunque también pueden contener fósforo, azufre y nitrógeno. Tienen como
característica principal ser insolubles en agua y sí en disolventes orgánicos como el
benceno. A los lípidos se les llama incorrectamente grasas, cuando las grasas son sólo
un tipo de lípidos, aunque el más conocido.
INTRODUCCION:
En bioquímica se acostumbra denominar lípidos a las sustancias que producen ácidos
grasos por hidrólisis, así como a muchos otros compuestos biológicos solubles en
grasas. Las grasas y los aceites son usualmente mezclas de glicéridos mixtos, es decir,
ésteres del glicerol con diversos ácidos grasos. Los ácidos grasos más abundantes en
las plantas y los animales superiores tiene un número par de átomos de carbono, tales
como los ácidos saturados palmítico (C 16 ) y esteárico ( C18 ), y los ácidos no
saturados oleico y linoleico, ambos con 18 átomos de carbono. Estos 4 ácidos se
encuentran en particular en la mantequilla la manteca y el sebo. Los lípidos constituyen
la principal fuente de calorías en la nutrición humana. Al oxidarse en el organismo
producen bióxido de carbono, agua y calorías; su poder calorífico es mayor que el de
los carbohidratos. Su absorción por las paredes intestinales es un fenómeno complejo
. La corriente sanguínea los transporta después a los tejidos donde se queman para
producir energía, o bien se almacenan. Muchos investigadores piensan que las grasas
saturadas tienen a elevar el contenido del colesterol en el organismo. Se cree que un
contenido alto de colesterol en la sangre contribuye a endurecer las arterias y provocar
enfermedades cardiacas; por lo tanto, se procura sustituir grasa saturadas por aceite
de maíz y cártamo, que contienen principalmente ácidos oleico y linoleico. Los lípidos
se descomponen por el calor y se vuelven rancios por oxidación ; en este fenómeno
los dobles enlaces se rompen, dando lugar a la formación de productos de olores
desagradables. Para evitar esto se pueden hidrogenar los aceites o agregarles
antioxidantes. La medida del grado de insaturación de un lípido se puede efectuar en
el laboratorio al determinar la cantidad de halógeno que puede adicionar.
SOLUBILIDAD
MATERIAL REACTIVOS
5 tubos de ensayo Alcohol etílico
5 pipetas de 1ml Cloroformo
1 baño maría Tetracloruro de Carbono
Benceno
Distintas grasas y aceites
TÉCNICA
Coloque en cada tubo de ensayo 0.5 ml de aceite ó grasa.
Añadir 1ml de las sustancias indicadas arriba (una sustancia diferente a cada tubo)
Evítese inflamación de los solventes.
Hágase en frío y caliente.
Para el registro de las observaciones se sugiere una tabla como la que se muestra a
continuación
En Frio:
Tipo de grasa Alcohol etílico Cloroformo
Tetracloruro de
carbono Benceno
Aceite de soja Insoluble Soluble Soluble Soluble
Aceite de
almendras
Insoluble Soluble Soluble Soluble
Mantequilla Insoluble Insoluble Soluble Soluble
Aceite de oliva Insoluble Insoluble Soluble Soluble
En Caliente:
Tipo de grasa Alcohol etílico Cloroformo
Tetracloruro de
carbono Benceno
Aceite de soja Insoluble Soluble Soluble Soluble
Aceite de
almendras
Insoluble Soluble Soluble Soluble
Mantequilla Insoluble Insoluble Soluble Soluble
Aceite de oliva Insoluble Insoluble Soluble Soluble
Obtención de lípidos a partir de la yema de huevo
La yema de huevo es una fuente importante de lípidos, además de grasas simples
contiene esteroles y fosfolípidos estas sustancias pueden ser separadas unas de otras
por su diferencia de solubilidad y es relativamente sencillo obtener colesterol en forma
de cristales en una de las fracciones.
MATERIAL REACTIVOS
2 vasos de precipitado Alcohol metílico
1 matraz con tapón Éter
1 embudo Éter - etanol (3:1)
1 papel filtro
TÉCNICA
Separar con mucho cuidado la yema de la clara.
Colocar 2 gramos de la yema en un vaso de precipitado
Añadir 2 ml de alcohol metílico y 2 ml de éter.
Colocar la muestra en un matraz, taparlo y agitarlo por 1 minuto.
Dejar reposar la mezcla por 10 minutos y después filtrar (usar papel filtro).
Lavar el residuo con 2 ml de la solución de éter – etanol.
¿Qué es el residuo insoluble?
El colesterol.
SAPONIFICACION:
1. En dos matraces respectivamente colocar 1.5 mg de grasa o aceite
2. añadir 25 ml e solución de potasa alcohólica
3. Colocar en el matraz un tapón con un tubo de vidrio que actue como refrigerante
4. Calentar a baño maría de 15 a 30 minutos hasta que halla sido totalmente
saponificada (apariencia de clara uniforme)
5. También utilizar un blanco de aceite problema, usar 25 ml de potasa alcohólica y
calentar no usar aceite.
6. Enfriar los matraces y titular usndo una solución estandar (Hcl 5N). Usar 3
gotas de fenolftaleina hasta cambio de color y después agregar 2 más
Acidez
El índice de acidez se define como el número de miligramos de hidróxido de potasio necesarios
para neutralizar los ácidos libres de un gramo de grasa. Su fórmula es:
I.A= n x 28/ P
Donde: n = No. de ml de solución 0.5 N de KOH gastados en la titulación
P = peso de la muestra
MATERIAL REACTIVOS
2 matraz Erlenmeyer 250 ml KOH 0.5 N
1 soporte universal Fenolftaleína
1 bureta
1 pinzas para bureta
TÉCNICA
1.- Colocar 5 g de muestra en un matraz Erlenmeyer y agregar 3 gotas de fenolftaleína (si es
necesario disuelva la muestra en un poco de etanol).
2.- Titular con solución de KOH 0.5 N hasta obtener neutralización
2.- Calcular el índice de acidez.
RESULTADOS:
0.56 + 1.68 + 1.68 = 3.92*28/5gr = 21.952
Rancidez
MATERIAL REACTIVOS
2 tubos de ensayo HCl 5N
1 baño maría Potasa alcohólica
1 bureta Fenolftaleína
2 matraz erlenmeyer 250 ml
1 soporte universal
1 pinzas para bureta
TÉCNICA
Colocar 5ml de aceite de olivo en buen estado en un tubo de ensayo y en el otro
5ml de aceite rancio.
A los dos tubos añadir 1 ml de alcohol y calentar.
Enfriar y colocar una gota de solución en el papel indicador de pH.
Resultados:
en esta imagen se observa los aceites antes de añadirles el alcohol y calentarlos
CUESTIONARIO:
1.¿Qué son los jabones?
Son lípidos saponificables (es decir, que pueden realizar el proceso de
saponificación y son hidrolizables). Son la sal de un ácido graso.
2. ¿Cómo se pueden obtener los jabones?
Mediante el proceso de saponificación, siendo una hidrólisis de un ácido graso
que tiene lugar en medio alcalino y se realiza con NaOH o con KOH.
3. ¿Porque en la saponificación la glicerina aparece en la fase acuosa?
Porque en la saponificación, se utilizan grasas y éstas están compuestas por
ácidos grasos y glicerina. Como resultado se obtiene una fase semisólida que
es la sal de sodio de los ácidos grasos (el jabón), por lo tanto, en la fase acuosa
quedará el alcohol (glicerina) como subproducto de la elaboración del jabón
puesto que es parcialmente soluble en agua, por lo que no hay razón para que
no esté presente en esta forma
4¿Qué enzima logra en el aparato digestivo la hidrolisis de las grasas?.
Concretamente en el estómago la enzima lipasa gástrica y en el intestino
delgado la lipasa pancreática-colipasa
5.Indica lo que ocurre con la mezcla aceite-Sudán III y aceite-tinta y explica
a qué se debe la diferencia entre ambos resultados.
Cuando se mezcla el aceite con el Sudán III, todo el aceite se tiñe de rojo puesto
que es un colorante lipofilo (soluble en grasas) y debido a esa afinidad se utiliza
para revelar la presencia de grasas. Pero la tinta roja no es soluble en grasas,
por esa razón, el aceite no se tiñe de rojo con la tinta china roja puesto que no
se mezclan, y la tinta se deposita en el fondo.
6.¿Qué ocurre con la emulsión de agua en aceite transcurridos unos
minutos de reposo? ¿Y con la de benceno y aceite? ¿A qué se deben las
diferencias observadas entre ambas emulsiones?
Al pasar unos minutos de reposo, esa emulsión desaparece por la reagrupación
de las gotitas de grasa en una capa, que por ser menos densa, se sitúa sobre el
agua, de mayor densidad.
- Aparece una disolución homogénea, puesto que el aceite se disuelve en el
benceno, sustancia orgánica y apolar al igual que el aceite. -Simplemente por la
solubilidad de las grasas: insolubles en agua y por tanto no se mezcla con ella,
y solubles en disolventes apolares como él, por eso si se mezclan.
7. Escribe las formulas de los lipidos utilizados en la practica
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  • 1. Reporte de práctica de Identificación de Lípidos. 2016 BIOQUIMICA 6º “E” ESQUIVEL FONSECA JENNIFER RUDY ALEJANDRO ESMERALDA HERNANDEZ CAMACHO LUNA VANESSA GONZALES LOPEZ MARISOL CORNEJO RAMIREZ KARLA GERALDINE CETIS NO. 62 | Rafael Garcilita.
  • 2. OBJETIVO: Realizar pruebas de identificación de lípidos y grasas. Así como algunas de las principales reacciones de las grasas. FUNDAMENTO: Se llama lípidos a un conjunto de moléculas orgánicas, la mayoría biomoléculas, compuestas principalmente por carbono e hidrógeno y en menor medida oxígeno, aunque también pueden contener fósforo, azufre y nitrógeno. Tienen como característica principal ser insolubles en agua y sí en disolventes orgánicos como el benceno. A los lípidos se les llama incorrectamente grasas, cuando las grasas son sólo un tipo de lípidos, aunque el más conocido. INTRODUCCION: En bioquímica se acostumbra denominar lípidos a las sustancias que producen ácidos grasos por hidrólisis, así como a muchos otros compuestos biológicos solubles en grasas. Las grasas y los aceites son usualmente mezclas de glicéridos mixtos, es decir, ésteres del glicerol con diversos ácidos grasos. Los ácidos grasos más abundantes en las plantas y los animales superiores tiene un número par de átomos de carbono, tales como los ácidos saturados palmítico (C 16 ) y esteárico ( C18 ), y los ácidos no saturados oleico y linoleico, ambos con 18 átomos de carbono. Estos 4 ácidos se encuentran en particular en la mantequilla la manteca y el sebo. Los lípidos constituyen la principal fuente de calorías en la nutrición humana. Al oxidarse en el organismo producen bióxido de carbono, agua y calorías; su poder calorífico es mayor que el de los carbohidratos. Su absorción por las paredes intestinales es un fenómeno complejo . La corriente sanguínea los transporta después a los tejidos donde se queman para producir energía, o bien se almacenan. Muchos investigadores piensan que las grasas saturadas tienen a elevar el contenido del colesterol en el organismo. Se cree que un contenido alto de colesterol en la sangre contribuye a endurecer las arterias y provocar enfermedades cardiacas; por lo tanto, se procura sustituir grasa saturadas por aceite de maíz y cártamo, que contienen principalmente ácidos oleico y linoleico. Los lípidos se descomponen por el calor y se vuelven rancios por oxidación ; en este fenómeno los dobles enlaces se rompen, dando lugar a la formación de productos de olores desagradables. Para evitar esto se pueden hidrogenar los aceites o agregarles antioxidantes. La medida del grado de insaturación de un lípido se puede efectuar en el laboratorio al determinar la cantidad de halógeno que puede adicionar.
  • 3. SOLUBILIDAD MATERIAL REACTIVOS 5 tubos de ensayo Alcohol etílico 5 pipetas de 1ml Cloroformo 1 baño maría Tetracloruro de Carbono Benceno Distintas grasas y aceites TÉCNICA Coloque en cada tubo de ensayo 0.5 ml de aceite ó grasa. Añadir 1ml de las sustancias indicadas arriba (una sustancia diferente a cada tubo) Evítese inflamación de los solventes. Hágase en frío y caliente. Para el registro de las observaciones se sugiere una tabla como la que se muestra a continuación En Frio: Tipo de grasa Alcohol etílico Cloroformo Tetracloruro de carbono Benceno Aceite de soja Insoluble Soluble Soluble Soluble Aceite de almendras Insoluble Soluble Soluble Soluble Mantequilla Insoluble Insoluble Soluble Soluble Aceite de oliva Insoluble Insoluble Soluble Soluble
  • 4. En Caliente: Tipo de grasa Alcohol etílico Cloroformo Tetracloruro de carbono Benceno Aceite de soja Insoluble Soluble Soluble Soluble Aceite de almendras Insoluble Soluble Soluble Soluble Mantequilla Insoluble Insoluble Soluble Soluble Aceite de oliva Insoluble Insoluble Soluble Soluble
  • 5.
  • 6. Obtención de lípidos a partir de la yema de huevo La yema de huevo es una fuente importante de lípidos, además de grasas simples contiene esteroles y fosfolípidos estas sustancias pueden ser separadas unas de otras por su diferencia de solubilidad y es relativamente sencillo obtener colesterol en forma de cristales en una de las fracciones. MATERIAL REACTIVOS 2 vasos de precipitado Alcohol metílico 1 matraz con tapón Éter 1 embudo Éter - etanol (3:1) 1 papel filtro TÉCNICA Separar con mucho cuidado la yema de la clara. Colocar 2 gramos de la yema en un vaso de precipitado Añadir 2 ml de alcohol metílico y 2 ml de éter. Colocar la muestra en un matraz, taparlo y agitarlo por 1 minuto. Dejar reposar la mezcla por 10 minutos y después filtrar (usar papel filtro).
  • 7. Lavar el residuo con 2 ml de la solución de éter – etanol.
  • 8. ¿Qué es el residuo insoluble? El colesterol.
  • 9. SAPONIFICACION: 1. En dos matraces respectivamente colocar 1.5 mg de grasa o aceite 2. añadir 25 ml e solución de potasa alcohólica 3. Colocar en el matraz un tapón con un tubo de vidrio que actue como refrigerante 4. Calentar a baño maría de 15 a 30 minutos hasta que halla sido totalmente saponificada (apariencia de clara uniforme) 5. También utilizar un blanco de aceite problema, usar 25 ml de potasa alcohólica y calentar no usar aceite. 6. Enfriar los matraces y titular usndo una solución estandar (Hcl 5N). Usar 3 gotas de fenolftaleina hasta cambio de color y después agregar 2 más
  • 10. Acidez El índice de acidez se define como el número de miligramos de hidróxido de potasio necesarios para neutralizar los ácidos libres de un gramo de grasa. Su fórmula es: I.A= n x 28/ P Donde: n = No. de ml de solución 0.5 N de KOH gastados en la titulación P = peso de la muestra MATERIAL REACTIVOS 2 matraz Erlenmeyer 250 ml KOH 0.5 N 1 soporte universal Fenolftaleína 1 bureta 1 pinzas para bureta TÉCNICA 1.- Colocar 5 g de muestra en un matraz Erlenmeyer y agregar 3 gotas de fenolftaleína (si es necesario disuelva la muestra en un poco de etanol). 2.- Titular con solución de KOH 0.5 N hasta obtener neutralización 2.- Calcular el índice de acidez. RESULTADOS: 0.56 + 1.68 + 1.68 = 3.92*28/5gr = 21.952
  • 11. Rancidez MATERIAL REACTIVOS 2 tubos de ensayo HCl 5N 1 baño maría Potasa alcohólica 1 bureta Fenolftaleína 2 matraz erlenmeyer 250 ml 1 soporte universal 1 pinzas para bureta TÉCNICA Colocar 5ml de aceite de olivo en buen estado en un tubo de ensayo y en el otro 5ml de aceite rancio. A los dos tubos añadir 1 ml de alcohol y calentar. Enfriar y colocar una gota de solución en el papel indicador de pH. Resultados: en esta imagen se observa los aceites antes de añadirles el alcohol y calentarlos
  • 12. CUESTIONARIO: 1.¿Qué son los jabones? Son lípidos saponificables (es decir, que pueden realizar el proceso de saponificación y son hidrolizables). Son la sal de un ácido graso. 2. ¿Cómo se pueden obtener los jabones? Mediante el proceso de saponificación, siendo una hidrólisis de un ácido graso que tiene lugar en medio alcalino y se realiza con NaOH o con KOH. 3. ¿Porque en la saponificación la glicerina aparece en la fase acuosa? Porque en la saponificación, se utilizan grasas y éstas están compuestas por ácidos grasos y glicerina. Como resultado se obtiene una fase semisólida que es la sal de sodio de los ácidos grasos (el jabón), por lo tanto, en la fase acuosa quedará el alcohol (glicerina) como subproducto de la elaboración del jabón puesto que es parcialmente soluble en agua, por lo que no hay razón para que no esté presente en esta forma 4¿Qué enzima logra en el aparato digestivo la hidrolisis de las grasas?. Concretamente en el estómago la enzima lipasa gástrica y en el intestino delgado la lipasa pancreática-colipasa 5.Indica lo que ocurre con la mezcla aceite-Sudán III y aceite-tinta y explica a qué se debe la diferencia entre ambos resultados. Cuando se mezcla el aceite con el Sudán III, todo el aceite se tiñe de rojo puesto que es un colorante lipofilo (soluble en grasas) y debido a esa afinidad se utiliza para revelar la presencia de grasas. Pero la tinta roja no es soluble en grasas, por esa razón, el aceite no se tiñe de rojo con la tinta china roja puesto que no se mezclan, y la tinta se deposita en el fondo. 6.¿Qué ocurre con la emulsión de agua en aceite transcurridos unos minutos de reposo? ¿Y con la de benceno y aceite? ¿A qué se deben las diferencias observadas entre ambas emulsiones? Al pasar unos minutos de reposo, esa emulsión desaparece por la reagrupación de las gotitas de grasa en una capa, que por ser menos densa, se sitúa sobre el agua, de mayor densidad. - Aparece una disolución homogénea, puesto que el aceite se disuelve en el benceno, sustancia orgánica y apolar al igual que el aceite. -Simplemente por la solubilidad de las grasas: insolubles en agua y por tanto no se mezcla con ella, y solubles en disolventes apolares como él, por eso si se mezclan. 7. Escribe las formulas de los lipidos utilizados en la practica Aceite de Oliva: C18H34O2