Presentation a Congreso Hpylori CIMEQ Mayo 2007.ppt

1. Infección por Helicobacter pylori, infestación por helmintos y
anemia en 1611 escolares del municipio Yaguajay, Cuba.
V Ruiz-Álvarez(1), Manuel Hernandez-Triana(1), Iná dos Santos (5) Lenina Menocal (2), Maria E Díaz(1),
Anabel Otero(1), Odalis Nepumoceno(3), Pablo Palmero(3), Josefa García(3), y Noris Aquino(4)
1. Vicedirección de Nutrición, Instituto de Nutrición e Higiene de los Alimentos
2. Instituto Nacional de Higiene y Epidemiología
3. Centro Municipal de Higiene, Yaguajay, Sancti Spiritus
4. Dirección Municipal de Educación, Yaguajay, Sancti Spiritus
5. Facultad de Medicina, Universidad Federal de Pelotas, Brasil

2. Antecedentes.
• Alteraciones en los parámetros hematológicos y
bioquímicos indicativos de anemia sideropénica en
individuos infectados con H. pylori .
• Recuperación o mejoría de los indicadores, posterior
al tratamiento erradicador del H. pylori .
• Los programas de prevención contra la anemia
sideropénica debieran incluir acciones no sólo contra
el parasitismo sino también contra la infección por H.
pylori

3. • Niveles de ferritina sérica disminuídos en 2794 adultos daneses con
elevados títulos de anticuerpos anti H. pylori. (Barabino A, 1999)
• La recuperación de la anemia por deficiencia de hierro se hizo
evidente después del tratamiento contra H. pylori, aún sin recibir
tratamiento para la anemia. (Milman N, 1998)
• La terapia antianémica sólo fue efectiva después de la erradicación
del H. pylori. (Kostaki, 2003)
• Reversión de anemia por deficiencia de hierro de causa
desconocida asociada a gastritis atrófica después de la erradicación
de H. pylori. (McColl K,1997; El Omar E, 1997; Peach HG, 1998;
Parkinson AJ; 2000; Berg G, 2001)
Helicobacter pylori y anemia por
deficiencia de hierro

4. • ↑ pH gástrico → ↓ solubilidad del Fe
• Proteínas ligando de Hp → Fe unido a proteínas
del Hp
• ↓ secreción de vitamina C en jugo gástrico
• ↓ biodisponibilidad de vitamina B12
• ↓ biodisponibilidad de ácido fólico
Mecanismos hipotéticos por los que H.
pylori puede causar anemia

5. Antecedentes.
• El “Enigma Africano”
• La prevalencia de enfermedades alérgicas y
atopias en general es menor en el continente
africano.
• La prevalencia de úlcera péptica y cáncer
gástrico en África es menor que la reportada en
América. En el primero la infestación por
helmintos es más alta que en el segundo.
Mientras que la prevalencia de Helicobacter pylori
es muy similar.

6. Th0
Th1 Th2
Antecedentes.
IFN-
IL-2
IL-12
IL-4
IL-5
IL-10
Inmunidad mediada por células
• Virus
• Bacterias
• Parásitos intracelulares
Inmunidad humoral
• Helmintos

7. Asociación entre la infección
por Helicobacter pylori y
anemia en niños de edad
escolar
V Ruiz-Alvarez, J Reboso-Pérez, M Hernández-Triana
Departamento de Bioquímica y Fisiología,
Instituto de Nutrición e Higiene de los Alimentos, Havana, Cuba
2003

8. Subjects
sample
100 school
children
Stratified simple
random sampling
Clinical history Physical
examination
Anthropometric
measurements
Biochemical indicators
Hemoglobin
H. pylori IgG antibodies

9. Asociación entre la infección por
Helicobacter pylori y anemia
Niños
H.pylori + H.pylori -
n
Hemoglobina normal 66 31
p=0.940
Hemoglobina baja 22 10
Niñas
H.pylori + H.pylori -
Hemoglobina normal 67 31
p=0.014
Hemoglobina baja 33 4

10. Asociación entre la presencia
de anticuerpos IgG contra
Helicobacter pylori y
parasitismo intestinal
M Hernández Triana2 M Bonet1, V Ruiz-Alvarez2,
R Junco1, L Menocal1, AM Collado1,,
(1) Departamento de Microbiología, Instituto Nacional de Higiene
Epidemiología y Microbiología, Habana, Cuba
(2) Departamento de Bioquímica y Fisiología, Instituto de Nutrición e
Higiene de los Alimentos, Habana, Cuba

11. Subjects sample
454
Children (5-12 y)
Double stratification
sampling
Clinical history Physical
examination
Anthropometric
measurements
Hemoglobin
Fecal studies
(helmintes and giardia
IgG H pylori antibodies

12. Fomento SJ Mtnez p
Ruralidad (%) 60.2 50.0 0.047
Prevalencia total Hp 61.2 56.3 0.364
Prevalencia total PI 67.3 97.5 0.000
Prevalencia total Anemia 26.5 41.9 0.001
Results

13. La anemia ferropénica estuvo fuertemente asociada
al parasitismo intestinal (p=0.004), particularmente a
helmintiasis (p=0.000) y a la residencia en
asentamientos urbanos (p=0.004).
86% de niños anémicos tenían helmintos.

14. La infección por H. pylori se presentó en 59.5%
de los niños estudiados (58,7% en niños y
59,6% en niñas) y no tuvo asociación general
en uno u otro sexo con anemia (p=0.476,
p=0.618), parasitismo intestinal general
(p=0,723, 0,839), helmintiasis (p=0.606, 0,933) o
giardiasis (p=0.378, p=0.194).

15. Comparación de niños anémicos y
no anémicos
Helicobacter pylori, anemia y parasitismo intestinal en conjunto:
En los niños no infectados por H.pylori, el 89% de anémicos y el 72 % de
los no anémicos era portador de parasitismo intestinal
solo el 11% de los anémicos y el 22% de los no anémicos estaban libres de
esta afección.
Estos resultados estuvieron altamente asegurados
desde el punto de vista estadístico (p=0.009) y
concordantes con los resultados del estudio mexicano
del 2003 (Torres et al, Helicobacter 2003:8:179-85.

16. El PI si estuvo asociado a la presencia de anemia
PI (p=0.004), pero en niños anémicos y no
anémicos con valores elevados de PI (p= 0.009)
la infección por H. pylori fue menos prevalente,
que en niños menos parasitados.
Los resultados de este estudio apoyan la
hipótesis, de que en poblaciones con elevado
PI, éste genera una respuesta inmunológica a
predominio de células Th2, capaz de reducir la
prevalencia de infección por H. pylori.

17. Proyecto OIEA ARCAL 6054 Cuba “ Nuclear techniques applied to
detect Helicobacter pylori infection in human beings“. Phase II”

18. Objetivos.
• Medir el impacto del tratamiento antiparasitario
sobre la infección por Helicobacter pylori .
• Evaluar la relación entre la infección por
Helicobacter pylori y la presencia de anemia.

19. Municipio Yaguajay, Provincia Sancti Spiritus

20. town
(n = 744)
rural settings
(n = 615)
Studied school children
(7 – 12 años)

21. 1. Examen clínico general, y estado nutricional mediante
evaluación antropométrica: Peso para la Edad y Talla para la
Edad según las tablas nacionales de edad y sexo. Evaluación del
estado nutricional utilizando el Peso para la Talla y con la
utilización de las Tablas de Referencia Nacionales o los valores
del Índice de masa corporal IMC=Peso(Kg)/Talla(m2) y
evaluación según las normas del CDC Atlanta 2000.
2. Cuestionario a padres o personas a cargo que incluyó aspectos
de: Antecedentes patológicos personales parasitismo en los
niños en los últimos seis meses y tratamiento, higiene personal y
condiciones ambientales.
3. Examen heces fecales y técnica de concentración de Kato-Katz.
4. Infección por Helicobacter pylori mediante el test del aliento
con 13C
5. Encuesta dietética de recordatorio de 24 horas
Método

22. Gastric infection with Helicobacter pylori
is the main cause of chronic
gastritis,promotes peptic ulcerisation,
and is a strong cofactor for gastric
cancer. The most reliable test for the
presence of Helicobacter pylori is the
non-invasive 13C-Urea Breath Test.
That test is based on the absence of
urease (urea cleaving enzyme) in a
stomach if non infected by Helicobacter
pylori and on the presence of a strong
urease activity, if H. pylori is present and
cleaving 13C-urea into 13CO2 and NH3
according to this enzymatic reaction.
The 13CO2 is resorbed , transported by
the blood to the lungs and exhaled in
the breath. It must be detected and
quantified precisely by a 13C-Stable
Isotope Analyser.
References Z. f. Gastroenterology 1994.
+
13C-Urea Breath Test (Helicobacter pylori Breath Test)

23. 1. A basal 100 ml - sample of patients breath is collected first.
2. The patient drinks 200 ml orange juice (apple juice, or a citric acid solution 0.1N) with 75
mg 13C-urea.
3. A second breath sample is collected after 30 minutes.
4. Both samples are measured on the IRIS system and compared for their difference of
13C/12C- ratios, expressed as delta over base (DOB).
5. If the DOB is 4 or more, the patient is H.p. positive.
13C-UBT Procedure

24. 1611 Niños de edad escolar de zonas urbanas y
rurales del Municipio Yaguajay

25. 13C-Urea Breath Test con medición de 13CO2 por espectrofotometría infrarojo

26. The IRISTM 2 analyser measures 13C enrichment in
breath as a routine procedure. Its analytical result
provides fast and precise the answers to diagnostic
questions, if an appropriate substrate, artificially or
naturally 13C-labeled, has been administered.
In gastroenterology and nutrition, these non
invasive 13C breath tests are in use to detect
bacterial colonisation and overgrowth, to measure
organ function, to evaluate digestion and absorption
of carbohydrates, lipids, and proteins, and to assess
hepatological oxidative capacities.
IRISTM 2 For 13CO2 - Breath Tests
IRISTM 2: Versatile breath testing in
Gastroenterology, Hepatology, and Nutrition.
Hardware for multi-sample processing, Software
to control and evaluate all kinds of metabolic
function 13C-breath tests.
Dimensions:
510 mm wide, 280 mm deep,
200 mm high
Weight: aprox. 16 Kg plus data
system and printer
Power req.: 115 or 230V, 500 W
Data System: Pentium,
Windows 98/NT/2K Interface: RS 232
Sampling/Interface:
1/8° Tubing, optional 7 mm Tubing<P AL

27. IRISTM 2
Quality of Isotope Ratio Determinations:
Internal reproducibility <= 0.25 delta per mille for 13C/12C-Isotope ratio determination at breath samples.
External reproducibility <= 0.3 delta per mille over two breath samples from the same breath gas.
Time required to measure one sample: 1 - 2 minutes.
Minimum sample volume: 50 ml.
Range of CO2-concentrations: 0.5 to 5.0 Vol. %
Two independent chopped beam and detector

28. The IRISLab autosampler accepts sixteen (16)
samples to be run in automated sequence at two
minutes per sample cycle time. The minimum
sample volume required for a measurement is 5 ml.
Our low volume double chamber breath bags are
well suited for IRISLab.
SAMPLING INTERFACE/
CONNECTOR:1/8° Tubing, optional
7mm Tubing ,
NEW OPTIONAL: 12-15 mm
EXETAINER ADAPTOR

29. Anthorpometry
Hb by Hemocue
Faeces by Kato Katz Dietary recall
13C-UBT
13C-UBT
Materiales y Método
Ensayos realizados
infrared
spectrophotometry (IRIS 2

30. Método.
Muestra
1650 individuos
Examen físico Encuesta
• APP parasitismo
• Tratamiento
antiparasitario
• Higiene personal
• Condiciones
ambientales
Evaluación Nutricional
Mediciones Antropométricas
• Peso para la edad
• Talla para la edad
• Índice de masa corporal
Heces
fecales
En fresco
Concentrado
(Kato-Katz)
• Indicadores bioquímicos
• Hemoglobina (HemoCue)
Test del aliento UreaC13

31. Primera Etapa (H. pylori, Heces fecales)
Parasitismo -
H. pylori - + - +
Parasitismo +
Si A < B entonces la erradicación de los helmintos potencia la
infección por H. pylori
Tratamiento
antiparasitario
Segunda Etapa (Hb, H. pylori,
Heces fecales)
Dos meses después
+ +
A B
H. pylori
No tratamiento

32. H. pylori - +
Tratamiento antianémico
Tercera Etapa (Hb, Receptores de transferrina, H. pylori)
Dos meses después
A B
Si parámetros hematológicos en B mejoran respecto a A entonces
la anemia sideropénica tiene asociación con infección por H. pylori
Segunda Etapa (Hb, H. pylori, Heces fecales)
Anemia
Tratamiento anti-H. pylori
A B

33. Puntos de corte para diagnóstico de anemia
Edad Ligera Moderada Severa
5-11 años 100-114 g/L 70-99 g/L <70 g/L
12-14 años 100-119 g/L 70-100 g/L <70 g/L
Edad Hb
5-11 años 115 g/L
> 11 años 120 g/L
Puntos de corte para definir severidad
Fuente: WHO/UNICEF/ONU (2001)

34. Análisis estadístico
• Paquete estadístico SPSS 13.0 y STATA 9.0.
• La estadística descriptiva de los datos se analizó mediante el
análisis porcentual.
• La posible asociación entre las variables se estudió mediante
modelos jerárquicos con regresión de Poisson y modelos de
regresión logística.

35. Parasitismo intestinal Infección por H.pylori
Escuela Lugar Día
Niños
posibles a
estudiar
No. niños
estudiados
%
Helmintiasis
No. niños
estudiados
%
infección
Marcelo Salado Yaguajay Dom16 Abr 34 36 36 36 28
C Cienfuegos Total Yaguajay Lun 17 Abr 488 436 27 442 26
C Cienfuegos 1er Gr Yaguajay Lun 17 Abr 40 58 21 59 20
C Cienfuegos 2do Gr Yaguajay Mar 17 Abr 84 88 24 90 19
C Cienfuegos 3er Gr Yaguajay Vier 20 Abr 111 72 26 73 16
C Cienfuegos 4to Gr Yaguajay Jue 19 Abr 75 56 32 56 25
C Cienfuegos 5to Gr Yaguajay Mier 18 Abr 80 74 26 75 31
C Cienfuegos 6to Gr Yaguajay Sab 21 Abr 98 88 32 89 43
Obdulio Morales Narcisa Lun 24 Abr 100 86 50 98 25
Fructuoso Rdguez Narcisa Lun 24 Abr 5 6 50 6 17
José Maria Padrón Narcisa Lun 24 Abr 14 12 33 12 33
Julio Antonio Mella Vitoria Mar 25 Abr 69 67 25 66 26
Máximo Gómez Siboney Mar 25 Abr 40 40 48 41 42
Héroe de Yaguajay Piedrs Prietas Mar 25 Abr 3 3 67 3 67
Boris Luis Sta
Coloma
Rio Mayajigua Mier 26 Abr 90 91 32 92 35
Luis Turcios Lima Calienes Mier 26 Abr 36 34 35 35 55
Juan P Carbo Serviá Nela Jue 27 Abr 84 84 8 84 38
Antonio Maceo Aridanes Jue 27 Abr 26 23 30 24 58
Rafael Trejo Perea Vier 28 Abr 134 133 23 132 18
José L Caballero Centeno Sab 29 Abr 77 77 16 76 26
Reinel Páez La Garita Sab 29 Abr 4 4 0 3 67
Pedro Celestino Itabo Dom30 Abr 63 64 19 60 23
Pepito Tey SJosé Iguará Dom30 Abr 44 41 10 40 30
José Martí Seibabo Mar 2 May 75 70 27 68 35
Roberto Rodríguez Cambao Mar 2 May 25 26 19 23 30
Feliz Varela Platero Mar 2 May 4 4 25 4 75
Camilo Cienfuegos Llanada Arriba Mie 3 Mayo 24 21 38 21 19
Josué Pais Llanada Arriba Mie 3 Mayo 2 2 50 2 0
Felix Varela Llanada Arriba Mie 3 Mayo 5 5 60 5 40
Luis la O Llanada Arriba Mie 3 Mayo 9 8 88 8 75
Rafael Trejo Llanada Arriba Mie 3 Mayo 16 17 35 17 29
Camilo Cienfuegos Jobo Rosado Mie 3 Mayo 68 52 33 51 43
José Maria Padrón Jobo Rosado Mie 3 Mayo 15 15 27 15 40
Abel Roig Batey Colorad Jue 4 Mayo 25 25 20 - -
Frank Pais El Curial Jue 4 Mayo 2 2 50 - -
Frank Pais El Curial Jue 4 Mayo 2 2 50 - -
Manuel Ascunce Jicotea Jue 4 Mayo 1 1 100 1 0
Ramon Lòpez Peña Jicotea Jue 4 Mayo 3 3 33 3 33
Santos Caraballè El Tranque Jue 4 Mayo 9 8 25 - -
Sergio Antuña Juan Fco Jue 4 Mayo 16 15 7 14 7
Ana Betancourt Meneses Jue 4 Mayo 8 6 83 6 17
Fé del Valle Caragui Jue 4 Mayo 1 1 0 1 0
Felino Rodríguez Bamburanao Jue 4 Mayo 14 14 0 14 29
José A Echevarría Melgarejo Jue 4 Mayo 8 7 14 7 0
Máximo Gómez La Caridad Jue 4 Mayo 23 23 39 23 17
Ignacio Agramonte Yaguajay Jue 4 Mayo 54 49 31 53 26
TOTAL 1718 1611 1586
Parasitismo intestinal e infección por H.pylori
39
schools
Municipality Yaguajay, Cuba

36. Distribución de la muestra según área de pertenencia
de las escuelas
Área
Total
Urbana Rural
Escuelas 8 (20,5%) 31 (79,5) 39
Niños 804 (48,7%) 846 (51,3%) 1650

38. Frecuencia de infestación según tipo de parásito
Helmintos n %
Necator americanus 169 38,1
Trichuris Trichiuria 128 28,8
Ascaris lumbricoides 117 26,4
Enterobius vermicularis 64 14,4
Otros parásitos encontrados
Giardia lamblia 275 17,1
Entamoeba histolytica 121 7,5

39. 1611 Niños de edad escolar de zonas urbanas y
rurales del Municipio Yaguajay

43. Efecto bruto y ajustado de la infestación por helmintos sobre la prevalencia
de Helicobacter pylori
Variables RP bruta
(IC 95%)
p* RP ajustada
(IC 95%)
p*
Hemintos
No
Si
Referencia
1.00 (0.85 – 1.19)
0.978
Referencia
0.90 (0.70-1.16)
0.435
Escolaridad del padre
Primaria
Secundaria
Pré-universitario
Universitario
3.46 (1.86-6.43)
2.90 (1.67-5.05)
2.22 (1.27-3.88)
Referencia
<0.001
1.64 (0.84-3.18)
1.67 (0.95-2.96)
1.33 (0.76-2.31)
Referencia
0.160
Escolaridad de la madre
Primaria
Secundaria
Pre-universitario
Universitario
3.16 (1.78-5.61)
3.10 (1.85-5.21)
2.19 (1.30-3.67)
Referencia
<0.001
2.69 (1.39-5.21)
3.11 (1.77-5.47)
1.88 (1.07-3.30)
Referencia
<0.001
Hacinamiento
No
Si
Referencia
1.20 (0.94-1.55)
0.140
Referencia
1.11 (0.85-1.46)
0.442
Recibe el agua dentro
de la vivienda
Si
No
Referencia
1.21 (0.96-1.51)
0.106
Referencia
1.12 (0.85-1.46)
0.425
Tipo de servicio
sanitario
Inodoro de agua
Letrina sanitaria
No tiene
Referencia
1.17 (0.94-1.46)
1.58 (1.03-2.42)
0.066
Referencia
1.02 (0.76-1.36)
1.42 (0.84-2.40)
0.402
Juega en la tierra
Si
No
0.81 (0.63-1.04)
Referencia
0.099
0.85 (0.64-1.13)
Referencia
0.267
Escuela (área)
Urbana
Rural
Referencia
1.30 (1.11-1.51)
0.001
Referencia
0.84 (0.62-1.13)
0.246
* Modelo de regresión de Poisson

44. Efecto bruto y ajustado de la infestación por helmintos sobre la prevalencia
de Helicobacter pylori
Variables RP bruta (IC 95%) p* RP ajustada (IC 95%) p*
Hemintos
No
Si
Referencia
1.00 (0.85 – 1.19)
0.978
Referencia
0.90 (0.70 - 1.16)
0.435
Áscaris lumbricoides
No
Si
Referencia
0.57 (0.38 – 0.87)
0.009
Referencia
0.68 (0.43 – 1.07)
0.092
Trichuris trichiuria
No
Si
Referencia
1.21 (0.91 – 1.59)
0.185
Referencia
1.09 (0.65 – 1.82)
0.742
Necator americanus
No
Si
Referencia
0.99 (0.77 – 1.30)
0.992
Referencia
0.82 (0.55 – 1.24)
0.358
* Modelo de regresión de Poisson

45. Valores de hemoglobina: Media (129 g/L) DS (12 g/L)

47. H. pylori
positivo
H. pylori
negativo
p*
Media (DE) Media (DE)
Hemoglobina (g/L) 128 (12) 129 (12) 0,403
Consumo de hierro (mg/día) 10,5 (5,5) 11,5 (7,9) 0,296
H. pylori
positivo
H. pylori
negativo
p*
Media (DE) Media (DE)
Hemoglobina (g/L) 107 (6) 107 (6) 0,963
Consumo de hierro (mg/día) 10,9 (4,7) 10,2 (8,4) 0,762
Comparación de los valores de hemoglobina y consumo de
hierro según infección por Helicobacter pylori
* Test de Student
Todos los individuos
Anémicos

48. CONCLUSIONES
• No asociación entre helmintos y Helicobacter pylori.
• Ascaris lumbricoides individualmente manifestó cierto
efecto protector sobre la infección por Helicobacter
pylori, sin embargo el poder del estudio para hallar una
diferencia en riesgos significativa al nivel del 95% fue
muy bajo (20%).
• No asociación entre Helicobacter pylori y anemia.

49. Muestras de saliva para Grelina y Leptina

50. Dos australianos, Barry Marshall y Robin Warren,
obtuvieron en el 2005 el preciado galardón de la
Academia Sueca por el descubrimiento de la bacteria
Helicobacter pylori, y de su papel en el desarrollo de
la gastritis y la úlcera.

51. 13C-Urea Breath Test con medición de 13CO2 por espectrofotometría infrarojo