Características, epidemiología y diagnóstico molecular de la

1. Licda. Anna Soto de González
MAENFI-USAC-2015
LEISHMANIASIS

2. IMPORTANCIA DEL EVENTO
• DESCRIPCIÓN DEL EVENTO
• Zoonosis que afectan la piel, mucosas o visceras
• Vector: insecto flebotomíneo, del género Lutzomyia

3. DESCRIPCIÓN DEL EVENTO
LEISHMANIASIS CUTÁNEA
• Pápulas  pequeños nódulos firmes
• Manifestaciones clínicas: de acuerdo a la respuesta inmune del
hospedero, la especie del parásito y el tiempo de evolución de la
infección
http://www.who.int/campaigns/world-health-day/2014/photos/leishmaniasis/es/

4. LEISHMANIASIS MUCOCUTÁNEA
• Lesiones en mucosa nasal, faringe, laringe, paladar o labio
• Síntomas: epistaxis, prurito, obstrucción nasal y congestión
• Hay compromiso de mucosa del TRS, con edema, ulceración, prurito
nasal, rinorrea serohemática o purulenta y epistaxis

5. LEISHMANIASIS VISCERAL
• Invasión del sistema retículo-histiocitario
• Reproducción y diseminación por vía linfática o sanguínea hasta
macrófagos de MO, hígado y bazo
• Síntomas: fiebre intermitente, malestar general, astenia, anorexia,
enflaquecimiento progresivo, micropoliadenopatías, anemia y
signos de desnutrición
• http://www.who.int/campaigns/world-health-
day/2014/photos/leishmaniasis/es/

6. ASPECTOS EPIDEMIOLÓGICOS
APECTO DESCRIPCIÓN
AGENTE ETIOLÓGICO Parásitos protozoarios de la familia
Trypanosomatidae, género Leishmania
En Guatemala: L. braziliensis, L. Panamensi,
L. mexicana
MODO DE TRANSMISIÓN Picadura del vector flebotomíneo
Lutzomyia, infectado con promastigote del
parásito, picaduras en sitios expuestos
PERÍODO DE INCUBACIÓN Leishmaniasis cutánea: 3 a 6 meses
Leishmaniasis mucosa: meses o años
después que la una lesión cutánea a
cicatrizado espontáneamente
Leishmaniasis visceral: 3 a 8 meses
PERÍODO DE TRANSMISIBILIDAD El hombre es infectante mientras haya
parásitos en las lesiones de la piel o en
sangre circulante
LC: perduran de pocos meses a 2 años
LV: parásitos persistente incluso después
del restablecimiento clínico de los
pacientes Límite de 10 días a varios años

7. ASPECTOS EPIDEMIOLÓGICOS
ASPECTO DESCRIPCIÓN
SUSCEPTIBILIDAD El factor más importante es la inmunidad
con la respuesta adecuada por células
RESERVORIO LC: Mamíferos silvestres: perezosos de 2 y
4 uñas, el oso hormiguero, chuchas o
zarigüeyas, rata silvestre y el puerco espín
LV: perro principal reservorio doméstico
LC: hospedero reservorio accidental: perro
VECTORES 135 especie válidas del género Lutzomyia.
L. Panamensis -> Lu. Trapidoi
L. Guyanensis -> Lu. Umbratis
L. Braziliensis -> Lu. Spinicrasa
L. Infantun -> Lu. Evansi
L. Colombiensis -> Lu. Harmanni
L. Panamensis _> Lu. Longiflocosa
L. Chagasi -> Lu. longipalpis

8. INFORMACIÓN Y CONFIGURACIÓN DEL CASO
TIPO DE CASO CARÁCTERÍSTICAS D ELA CLASIFICACIÓN
CASOSO SOPECHOSO DE
LEISHMANIASIS CUTÁNEA O
MUCOCUTÁNEA
Paciente con lesiones cutánea
procedente de áreas endémicas que
cumpla con 3 o más de los siguientes
criterios: sin historia de trauma,
evolución mayor de 2 semanas, úlcera
redonda u ovalada con bordes
levantados, lesiones nodulares, lesiones
satélites, adenopatía localizada
CASO CONFIRMADO DE LEISHMANIASIS
CUTÁNEA O MUCOCUTÁNEA
Casos sospechoso con confirmación de
laboratorio por métodos parasitológicos,
histopatológicos o genéticos

9. INFORMACIÓN Y CONFIGURACIÓN DEL CASO
TIPO DE CASO CARÁCTERÍSTICAS DE LA CLASIFICACIÓN
CASOSOSPECHOSO DE LEISHMANIASIS
VISCERAL
Toda persona con fiebre acompañada de
dos o más de los siguientes signos y/o
síntomas: hepatoesplenomegalia,
linfadenopatía, anemia, leucopenia,
trombocitopenia, emaciación y debilidad
progresivas, sin verificación de laboratorio
y que provenga o haya visitado área
endémica
CASO CONFIRMADO DE LEISHMANIASIS
VISCERAL
Caso probable que se confirma
parasitológicamente amastigotes a partir
de aspirado de MO o bazo o prueba de
inmunofluorescencia mayor o igual a 1:32
MUERTE CONFIRMADA POR
LEISHMANIASIS VISCERAL
Persona que fallece y cumple con la
definición de caso confirmado de
Leishmaniasis visceral, o caso sospechoso
que a través de autopsia se demuestre
amastigotes intracelulares en MO, bazo,
hígado, GL o sangre.

10. DIAGNÓSTICO DE LABORATORIO
• Observación microscópica de frotes de borde de lesión en C y MC
• Biopsias de MO, enviando al LNS para LV

11. DIAGNÓSTICO, OTROS MÉTODOS
NOMBRE METODOLOGÍA
CULTIVO en medio bifásico NNN + Schneider
suplementado con suero bovino fetal,
para obtener promastigotes y lograr
identificación de especies usando
electroforesis de isoenzimas, Ac
monoclonales, PCR
INOCULACIÓN EN ANIMALES DE
LABORATORIO
Hamster dorado, para diferentes
metodologías de tipificación y en la
ejecución y desarrollo de proyectos de
investigación
IFI suero a 4 grados C. Positiva en títulos
mayores o iguales a 1:16

12. DIAGNÓSTICO …
BIOPSIA dividir el material obtenido en 3
fracciones, para realizar improntas y
colorear el primer segmento con Giemsa,
Wrigth o Field, el segundo segmento se
colocará en frascos con G a 100 ug/ml para
cultivos y el tercero en formol para
patología
REACCIÓN DE MONTENEGRO hipersensibilidad tardía, indica contacto
previo con el parásito no infección activa

13. BIOLOGÍA MOLECULAR
• MLST (multilocus sequence typing): para determinación de
variabilidad genética y análisis de dinámica de la población.
• PCR: identificación de especies de Leishmania y de vectores ,
determinación de variabilidad genética
• Nested PCR
• Western Blot y ELISA: diagnóstico rápido y sencillo

14. BIOLOGÍA MOLECULAR
PRUEBA USOS EN EPIDEMIOLOGÍA Y TAXONOMÍA
PCR tiempo real • Determinación de tasa de infección
natural de especies de flebótomos
(Oliveira, Macário Rebelo, Pinto
Morales, & Ferreira Pereira, 2006)
• Determinación de variabilidad
antigénica
• Identificación de especies de
Leishmania.
• Identificación de especies de vectores
• Determinación de infecciones mixtas
(Bastrenta, et al., 2002)
• Determinación de especies presentes
en vector (mezclas de especies)
(Frahtia-Benotmane, Mihoubi, & Picot,
2013)
• Discriminación entre los agentes
etiológicos principales en LC y LV (Pita-
Pereia, et al., 2012)

15. PRUEBA USOS EN EPIDEMIOLOGÍA Y TAXONOMÍA
MLST (multilocus sequence typing) para determinación de variabilidad
genética y análisis de dinámica de la
población (Marco,et al.,2015)
Western Blot y ELISA Diagnóstico rápido

16. Estudios en Guatemala

18. • Bibliografía
• Marco, J., Barroso, P., Locatelli, F., Cajal, S., Hoyos, C., Nevot, M., y otros. (2015). Multilocus sequence
typing approach for a broader range of species of Leishmania genus: describing parasite diversity in
Argentina. Infect Genet Evol , 30, 308-317.
• Mosleh, I., Shönian, G., Geith, E., AlJawabreh, A., & Natsheh, L. (2015). The Jordanian Mid Jordan Valley is a
classic focus of Leishamina major as reveled by RFLP of 56 isolates and 173 ITS-1-PCR postive clinical
samples. Exp Parasitol , 148, 81-85.
• Guimaraes, V., Costa , P., Silva, F., Melo, F., Dantas-Torres, F., Rodrigues , E., y otros. (2014). Molecular
detection of Leishmania in phlebolomine snad flies in a cutaneous and visceral leishmaniasis endemic area
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• Alam, M., Soomro, F., Baloch, J., Nakao, R., Kato, H., Schönian , G., y otros. (2014). Population genetics of
Leishamna (Leishmania) major DNA isolated from cutaneous leishmaniasis patients in Pakistan based on
multilocus microstellite typing. Parasit Vector , 16 (7), 332.
• Es-Sette, N., Ajaoud, M., Laamrani, S., Mellouki, F., & Lemrani, M. (2014). Molecular detection and
identification of Leishmania infection in anturally infected sand flies in a focus of cutaneous leishmaniasis
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• Montoya, Y., Padilla, C., Nolasco, O., león , C., Talledo, M., Coque , J., y otros. (1997). Diagnóstico Moleclar
para leihmaniasis. Peruana de Medicina Experimental y Salud Pública , 14 (1).

19. BIBLIOGRAFÍA CONSULTADA
• Oliveira, Y., Macário Rebelo, J., Pinto Morales, L., & Ferreira Pereira, S. (2006).
Molecular diagnosis of the natural infection rate due to Leishmania sp in sandflies
(Psychodidae, lutzomyia) in the Amazon region of Maranhao, Brazil. Revista da
Sociedad Brasileira de Medicina Tropical , 39 (6).
• Bastrenta, B., Vargas, B., Le Pont, F., Torrez, M., Flores, M., Mita, N., y otros. (2002).
Firs evidence of transmission of Leishmania (Viannia) lainsoni in a Sub Andean region
of Bolivia. Acta Trop , 83 (3), 249-253.
• Frahtia-Benotmane, K., Mihoubi, I., & Picot, S. (2013). Molecular diagnosis by real-time
PCR of Leishmania isolated from the Phlebotomus vector. Med Sante Trop , 32 (2), 230.
• Pita-Pereia, D., Lins, R., Oliveira, M., Lima, R., Pereira, B., Moreira, O., y otros. (2012).
• SYBR Green-based real-time PCR targeting kinetoplast DNA can be used to discriminate
between the main etiologic agents of Brazilian cutaneous and visceral leishmaniasis.
Parasit Vectors , 5 (15).
• MAPAS. Protocolos nacionales de vigilancia de salud pública. guía, Centro nacional de
epidemiología, Guatemala.