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LEISHMANIASIS
Generalidades
Enfermedad transmitida por vectores
Insectos dípteros hematófagos del género Lutzomyia.
Ciclo de transmisión complejo
Involucra una amplia variedad de especies de parásitos
El reservorio son animales vertebrados.
El parásito se transmite a través de la picadura de flebótomos
hembra, conocida popularmente con nombres como
papalotillas
manta blanca, titira
chitre, chiclera, asa branca, palomilla,
quemador, pringador, jején, mosquito palha y torito.
 Hay tres diferentes manifestaciones clínicas de la leishmaniasis: cutánea
(piel), mucocutánea (mucosa de la membrana) y visceral (la forma más
grave, que afecta a los órganos internos).
 A nivel mundial, la leishmaniasis se encuentra entre las diez enfermedades
tropicales desatendidas con más de 12 millones de personas infectadas,
con 0,9 a 1,6 millones de nuevos casos al año, entre 20.000 y 30.000
defunciones
 Entre los países del mundo con mayor número de casos de leishmaniasis
cutánea: Brasil, Colombia, Nicaragua y Perú se han caracterizado tres
ciclos diferentes de transmisión: el selvático, el doméstico-rural y el
doméstico urbano.
 Las herramientas disponibles para la prevención y el
control son limitadas, las personas expuestas deben
tomar medidas para reducir el contacto con el vector.
 El diagnóstico precoz es fundamental para establecer
un tratamiento específico y evitar complicaciones
provocadas por la forma cutánea y mucosa, y reducir la
letalidad de la forma visceral.
ECOSISTEMA PROPICIO PARA LA
EXISTENCIA DE FOCOS NATURALES DE
LEISHMANIASIS
LEISHMANIASIS: Situación en Ecuador
En el año 2022 se reportaron 844 casos confirmados de estos L. Cutánea 813
(96,3%) y 31 casos de Mucocutánea (3,7%).
Hasta la SE 10 del 2023 se han reportado 7 casos de confirmados de
Leishmania a nivel nacional.
Existe la presencia de la enfermedad en las 24 provincias del país (datos de
MSP).
Las provincias que más reportan casos de leishmaniasis son: Pichincha,
Morona Santiago, Manabí, Santo Domingo de los Tsáchilas, Esmeraldas y
Orellana.
ESPECIES ECUATORIANAS
DEL GENERO LEISHMANIA
L. brasiliensis
L. panamensis
L. guyanensis
L. mexicana
L. amazonensis
L. major like
L. naiffi
L. lainsoni
VECTOR DE LA LEISHMANIASIS
EN EL ECUADOR
Lu. ayacuchensis
Lu. osornoi
Lu. hartmanni
Lu. trapidoi
Lu. serrana
Lu. shannoni
Lu. gomezi.
Lu. panamensis
Lu. carrerai thula
Lu. Nevesi
Lu. hirsuta hirsuta
Lu. carrerai carrerai
Lu. yuilli
Distribuidas en provincias de la Costa, Amazonía y valles
de provincias Andinas, donde existen condiciones
favorables para el vector
Agente etiológico de la leishmaniasis
Parásito en su ciclo de vida se encuentra en dos formas o estadíos.
PROMASTIGOTE (Forma infectiva)
Mide de 20 a 30 um
Cuerpo alargado y un flagelo
Se multiplica de forma extracelular en el intestino del vector
y en los cultivos in vitro.
Esta forma, al ser inoculada dentro de los hospedadores, se
transforma en amastigote.
Agente etiológico de la leishmaniasis
AMASTIGOTE (forma replicativa)
Son redondeados, de 2 a 5 μm, con un núcleo y un kinetoplasto.
Esta forma es la visualizada en los frotis y biopsia para el
diagnóstico de la enfermedad.
Exclusivamente intracelulares
Carecen de flagelo
Se multiplican en las células del sistema fagocítico (macrófagos).
Ambas formas del parásito se dividen por fisión binaria y
además poseen una única mitocondria modificada conocida
como kinetoplasto.
Reservorios
PEREZOSO (PERICO LIGERO)
OSO HORMIGUERO (ARBORIC)
ARMADILLOS
CUZUMBO
GUANTAS
MAPACHES
ARDILLA GRIS
ARDILLA ROJA
RATA NEGRA
PERRO MESTIZO
Manifestaciones
Clínicas
• Infección local Multiorgánica-sistémica
• 95% Leishmaniasis Cutánea (LC)
• 5 % Leishmaniasis Mucocutánea (LMC)
• < 1% Leishmaniasis Visceral (LV)
• Leishmaniasis Recidivante (LR)
Manifestaciones
Clínicas
OLIGOPARASITOS
• LMC
• LR
POLIPARASITOS
• LCD
• LV
Buena
respuesta
inmune
Mala
Respuesta
inmune
LC
Forma típica
OTRAS FORMAS MENOS
COMUNES
Forma Verrugosa
• Rodríguez-Zúñiga MJM, Idrogo-Bustamante J, Quijano-Gomero E. Leishmaniosis cutanea verrucosa:
inusual presentación. Rev Peru Med Exp Salud Publica. 2017;34(2):344–5.
• Gulum M, Yesilova Y, Savas M, Ciftci H, Yeni E, Yildiz Zeyrek F. A Case of Giant Hyperkeratotic Cutaneous Leishmaniasis
in the Penis. Turkish J Parasitol [Internet]. 2013;37(1):53–4.
• Moreno-villacis S, Veintimilla-quintana P. Leishmaniasis verrucosa cutánea : reporte de caso. 2013;38(1):89–90
• Murray HW, Berman JD, Davies CR, Saravia NG. Advances in leishmaniasis. Lancet. 2005;366(9496):1561–77.
Forma Esporotricoide
• González F, Zerpa O. Leishmaniasis cutánea en la infancia. Dermatol Pediatr Lat. 2004;2:97–108
• Sindhu P, Ramesh V. Unusual presentation of cutaneous leishmaniasis. Indian J Dermatol [Internet]. 2012;57(1):55
• Calvopiña Hinojosa M, Romero Alvarez D, Kato H, Hashiguchi Y. Cutaneous sporotrichoid lesion in a patient from a
subtropical region of Ecuador. Enferm Infecc Microbiol Clin. 2014;32(7):465–6.
Forma Paroniquial
• Raja KM, Khan AA, Hameed A RS. Unusual clinical variants of cutaneous leishmaniasis in Pakistan. Br J Dermatol. 1998;139:111–3. Br J. 1998;111–3
• Iftikhar N, Bari I, Ejaz A. Rare variants of Cutaneous Leishmaniasis: Whitlow, paronychia, and sporotrichoid. Int J Dermatol. 2003;42(10):807–9..
• Niamba P, Goumbri-Lompo O, Traoré A, Barro-Traoré F, Soudré RT. Diffuse cutaneous leishmaniasis in an HIV-positive
patient in western Africa. Australas J Dermatol. 2007;48(1):32–4.
• Hemang MP, Asha NS, Bipin KA, Manoj RS. Diffuse cutaneous leishmaniasis-A rare cutaneos presentation in an HIV positive
patient. Indian J Sex Transm Dis. 2012;33(1):61–2.
Forma Anérgica
Forma Anular
• Raja KM, Khan AA, Hameed A RS. Unusual clinical variants of cutaneous leishmaniasis in Pakistan. Br J Dermatol. 1998;139:111–3. Br J. 1998;111–3.
• Barros C, Maia LC, Soares GC, Teodoro IPP, Gadelha M do SV, da Silva CGL, et al. Atypical presentations of cutaneous leishmaniasis
: A systematic review. Acta Trop [Internet]. 2017;172(May):240–54
Forma
Impetiginoide
• Barros C, Maia Chaves L, Soares GC, Teodoro IPP, Gadelha M do SV, da Silva CGL, et al. Atypical presentations of
cutaneous leishmaniasis: A systematic review. Acta Trop [Internet]. 2017;172(May):240–54
• González F, Zerpa O. Leishmaniasis cutánea en la infancia. Dermatol Pediatr Lat. 2004;2:97–108.
• Hayani K, Dandashli A, Weisshaar E. Cutaneous Leishmaniasis in Syria: Clinical Features, Current Status and the
• Effects of War. Acta Derm Venereol. 2015;95(1):62–6
Forma Lupoidea
• Benvenuti F, Ribera-Pibernat M, Boada-Garcia A, Ferrándiz C. Leishmaniasis cutánea múltiple: Presentación de tres casos.
Piel [Internet]. 2008;23(4):162–5.
• Barros C, Maia Chaves L, Soares GC, Teodoro IPP, Gadelha M do SV, da Silva CGL, et al. Atypical presentations of
cutaneous leishmaniasis: A systematic review. Acta Trop [Internet]. 2017;172(May):240–54
• Arené J, Encinas S, Rollano F. Leishmaniasis Lupoide: Presentación de un caso y revisión de la literatura. Vol. 96. 2011. p. 5–8.
Ulcera del chiclero
• Barros C, Maia LC, Soares GC, Teodoro IPP, Gadelha M do SV, da Silva CGL, et al. Atypical presentations of cutaneous
leishmaniasis : A systematic review. Acta Trop [Internet]. 2017;172(May):240–54
• Hayani K, Dandashli A, Weisshaar E. Cutaneous Leishmaniasis in Syria: Clinical Features, Current Status and the Effects of War.
• Calvopiña M, Martinez L, Hashiguchi Y. Cutaneous leishmaniasis “chiclero’s ulcer” in subtropical Ecuador.
Am J Trop Med Hyg. 2013;89(2):195–6
Forma Cicatrizal
• Sandoval A, Minaya G, Rojas N, Falconi E, Cáceres O. Reporte de Caso. Rev Peru Med Exp Salud Pública. 2014;31(4):788–92
• Torres-Guerrero E, Quintanilla-Cedillo MR, Ruiz-Esmenjaud J, Arenas R. Leishmaniasis: a review. F1000Research [ 2017;6(0):750. .
DIAGNÓSTICO
CLINICO:
- Toda úlcera de varias semanas
de evolución
- No cede a tratamientos
convencionales
- Antecedente de viaje a zonas
endémicas
- Antecedente de picadura de
insectos
LABORATORIO:
- Frotis
- PCR
- BIOPSIA
DIAGNÓSTICO DE LABORATORIO
DIAGNÓSTICO DE LABORATORIO
 Método directo / Frotis
Mediante la visualización microscópica del parásito en la muestra obtenida del paciente
TIPO DE MUESTRA
Raspado de tejido de úlcera
CRITERIOS DE RECHAZO
Usuario que se haya aplicado crema tópica, haya tomado algún fármaco o la úlcera
presenta infección.
DOCUMENTACIÓN ASOCIADA A LA MUESTRA
Ficha epidemiológica SIVE ALERTA EPI1-INDIVIDUAL con sello del área de vigilancia de la
institución solicitante.
Debe contener de forma legible la siguiente información:
Nombres del paciente, edad, sexo, dirección, cédula de ciudadanía, teléfono, procedencia, fecha
de inicio de síntomas, fecha de la toma de muestra.
CRITERIOS DE RECHAZO DE MUESTRA (Placas de raspado de tejido de úlcera)
No tengan formulario EPI1-INDIVIDUAL
Placas que se encuentren quebradas,
trizadas.
Muestras mal rotuladas y que su
identificación no sea legible.
Muestras que tengan incompatibilidad entre
la información de la documentación y la
muestra.
TOMA DE MUESTRA DE PACIENTES QUE ACUDEN AL INSPI
Principio.- El diagnóstico definitivo, requiere la demostración del parásito, observado
en forma de amastigotes a través del frotis.
Material requerido
Láminas portaobjetos
Solución yodada
Solución salina
Bisturí # 15
Gasa
Guantes
Lápiz graso o de grafito
PROCEDIMIENTO
1.- Identificar las láminas con código del paciente
2.- Realizar la limpieza de la lesión
Fuente CIDEIM
PROCEDIMIENTO
Fuente CIDEIM
3.- Tomar la muestra, elegir el borde más activo de la lesión,
4.- Sin dejar de hacer presión, realizar con el bisturí una
incisión superficial, de 3 mm de profundidad
aproximadamente, raspar el interior de la incisión, el material
obtenido del raspado debe tener un aspecto grumoso con
escasa cantidad de sangre.
PROCEDIMIENTO
Fuente CIDEIM
5.- Realizar seis frotis de forma circular de adentro hacia afuera por paciente, en dos
láminas portaobjetos, de 8 a 10 mm de diámetro cada uno.
PROCEDIMIENTO
Fuente CIDEIM
6.- Descartar el bisturí en el guardián de
seguridad.
7.- Al terminar la toma de muestra, hacer
presión en la lesión con una gasa hasta
controlar el sangrado, finalmente si es
necesario cubrir con gasa y esparadrapo
8.- Dejar secar las láminas horizontalmente a temperatura
ambiente de 5 a 10 minutos aproximadamente
PROCEDIMIENTO
Fuente CIDEIM
9.- Fijar las láminas con metanol, colocarlas en posición vertical para escurrir
el exceso de metanol y dejar secar de 5 a10 minutos a temperatura ambiente.
COLORACIÓN
Materiales y reactivos:
Láminas con la muestra a colorear
Colorante de Giemsa (solución madre)
Buffer/ agua destilada
Soporte cóncavo para coloración
Pipetas pasteur
Cronómetro
COLORACIÓN
Solución de trabajo: 3 ml buffer/agua destilada + 3 gotas de
Giemsa solución madre por cada lámina
Buffer/
Agua destilada
3 ml
+
Giemsa
1.- Colocar las láminas con la muestra hacia abajo (teñir por inversión)
sobre un soporte cóncavo para evitar la formación de un precipitado
Nota: Utilizar el colorante con las recomendaciones del fabricante teniendo en
cuenta el tiempo y la concentración estandarizada al utilizar cada lote
Fuente CIDEIM
2.- Agregar el colorante preparado y evitar que se queden burbujas en la
muestra, colorear de 20 a 30 minutos
Fuente CIDEIM
3.- Lavar las láminas con agua de la llave, evitar que el chorro caiga
directamente sobre la muestra
Fuente CIDEIM
Fuente INSPI
LECTURA DEL EXAMEN DIRECTO
 Adicionar una gota de aceite de inmersión en los frotis y colocar
la lámina sobre la platina del microscopio y enfocar con el objetivo
de 10X, luego pasar a objetivo de 100X.
Evaluar los frotis:
o Calidad del extendido (tamaño, grosor)
o Coloración
Fuente INSPI
LECTURA DEL EXAMEN DIRECTO
Muestra óptima.- Aspecto granular, células con una
correcta morfología; leucocitos abundantes; eritrocitos
escasos
Muestra inadecuada.- Carece de aspecto granular;
muestra escasa; abundantes glóbulos rojos o bacterias y
coloración no satisfactoria
Revisar todos los campos en búsqueda de amastigotes
intra-extracelulares, que se presentan de forma
redondeadas, ovalada o alargada como “grano de
arroz”. Su tamaño varía entre 2 – 5 micras
LECTURA DEL EXAMEN DIRECTO
Un resultado es positivo cuando se observa claramente la
presencia de al menos un amastigote con todas sus
características:
Núcleo: color azul-violeta oscuro.
Kinetoplasto: color violeta intenso.
Citoplasma: color azul claro.
Membrana celular definida.
Un resultado es negativo cuando al recorrer todos los
campos de todas las láminas no se observan amastigotes
Macrófago con amastigotes
REPORTE DE RESULTADO
Resultado: POSITIVO
Se observaron amastigotes de Leishmania sp. en la muestra examinada
Resultado: NEGATIVO
No se observaron amastigotes de Leishmania sp. en la muestra examinada
NOTA: Un resultado negativo no excluye el diagnóstico de leishmaniasis.
El resultado se inserta en el Sistema Nacional de Vigilancia en Salud Pública Ecuador
https://viepi.msp.gob.ec/login.php
Tiempo de respuesta: 2 días laborables
GRACIAS

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  • 3. Enfermedad transmitida por vectores Insectos dípteros hematófagos del género Lutzomyia. Ciclo de transmisión complejo Involucra una amplia variedad de especies de parásitos El reservorio son animales vertebrados. El parásito se transmite a través de la picadura de flebótomos hembra, conocida popularmente con nombres como papalotillas manta blanca, titira chitre, chiclera, asa branca, palomilla, quemador, pringador, jején, mosquito palha y torito.
  • 4.  Hay tres diferentes manifestaciones clínicas de la leishmaniasis: cutánea (piel), mucocutánea (mucosa de la membrana) y visceral (la forma más grave, que afecta a los órganos internos).  A nivel mundial, la leishmaniasis se encuentra entre las diez enfermedades tropicales desatendidas con más de 12 millones de personas infectadas, con 0,9 a 1,6 millones de nuevos casos al año, entre 20.000 y 30.000 defunciones  Entre los países del mundo con mayor número de casos de leishmaniasis cutánea: Brasil, Colombia, Nicaragua y Perú se han caracterizado tres ciclos diferentes de transmisión: el selvático, el doméstico-rural y el doméstico urbano.
  • 5.  Las herramientas disponibles para la prevención y el control son limitadas, las personas expuestas deben tomar medidas para reducir el contacto con el vector.  El diagnóstico precoz es fundamental para establecer un tratamiento específico y evitar complicaciones provocadas por la forma cutánea y mucosa, y reducir la letalidad de la forma visceral. ECOSISTEMA PROPICIO PARA LA EXISTENCIA DE FOCOS NATURALES DE LEISHMANIASIS
  • 6. LEISHMANIASIS: Situación en Ecuador En el año 2022 se reportaron 844 casos confirmados de estos L. Cutánea 813 (96,3%) y 31 casos de Mucocutánea (3,7%). Hasta la SE 10 del 2023 se han reportado 7 casos de confirmados de Leishmania a nivel nacional. Existe la presencia de la enfermedad en las 24 provincias del país (datos de MSP). Las provincias que más reportan casos de leishmaniasis son: Pichincha, Morona Santiago, Manabí, Santo Domingo de los Tsáchilas, Esmeraldas y Orellana.
  • 7. ESPECIES ECUATORIANAS DEL GENERO LEISHMANIA L. brasiliensis L. panamensis L. guyanensis L. mexicana L. amazonensis L. major like L. naiffi L. lainsoni VECTOR DE LA LEISHMANIASIS EN EL ECUADOR Lu. ayacuchensis Lu. osornoi Lu. hartmanni Lu. trapidoi Lu. serrana Lu. shannoni Lu. gomezi. Lu. panamensis Lu. carrerai thula Lu. Nevesi Lu. hirsuta hirsuta Lu. carrerai carrerai Lu. yuilli Distribuidas en provincias de la Costa, Amazonía y valles de provincias Andinas, donde existen condiciones favorables para el vector
  • 8. Agente etiológico de la leishmaniasis Parásito en su ciclo de vida se encuentra en dos formas o estadíos. PROMASTIGOTE (Forma infectiva) Mide de 20 a 30 um Cuerpo alargado y un flagelo Se multiplica de forma extracelular en el intestino del vector y en los cultivos in vitro. Esta forma, al ser inoculada dentro de los hospedadores, se transforma en amastigote.
  • 9. Agente etiológico de la leishmaniasis AMASTIGOTE (forma replicativa) Son redondeados, de 2 a 5 μm, con un núcleo y un kinetoplasto. Esta forma es la visualizada en los frotis y biopsia para el diagnóstico de la enfermedad. Exclusivamente intracelulares Carecen de flagelo Se multiplican en las células del sistema fagocítico (macrófagos). Ambas formas del parásito se dividen por fisión binaria y además poseen una única mitocondria modificada conocida como kinetoplasto.
  • 10.
  • 11. Reservorios PEREZOSO (PERICO LIGERO) OSO HORMIGUERO (ARBORIC) ARMADILLOS CUZUMBO GUANTAS MAPACHES ARDILLA GRIS ARDILLA ROJA RATA NEGRA PERRO MESTIZO
  • 12. Manifestaciones Clínicas • Infección local Multiorgánica-sistémica • 95% Leishmaniasis Cutánea (LC) • 5 % Leishmaniasis Mucocutánea (LMC) • < 1% Leishmaniasis Visceral (LV) • Leishmaniasis Recidivante (LR)
  • 13. Manifestaciones Clínicas OLIGOPARASITOS • LMC • LR POLIPARASITOS • LCD • LV Buena respuesta inmune Mala Respuesta inmune LC
  • 16. Forma Verrugosa • Rodríguez-Zúñiga MJM, Idrogo-Bustamante J, Quijano-Gomero E. Leishmaniosis cutanea verrucosa: inusual presentación. Rev Peru Med Exp Salud Publica. 2017;34(2):344–5. • Gulum M, Yesilova Y, Savas M, Ciftci H, Yeni E, Yildiz Zeyrek F. A Case of Giant Hyperkeratotic Cutaneous Leishmaniasis in the Penis. Turkish J Parasitol [Internet]. 2013;37(1):53–4.
  • 17. • Moreno-villacis S, Veintimilla-quintana P. Leishmaniasis verrucosa cutánea : reporte de caso. 2013;38(1):89–90 • Murray HW, Berman JD, Davies CR, Saravia NG. Advances in leishmaniasis. Lancet. 2005;366(9496):1561–77.
  • 18. Forma Esporotricoide • González F, Zerpa O. Leishmaniasis cutánea en la infancia. Dermatol Pediatr Lat. 2004;2:97–108 • Sindhu P, Ramesh V. Unusual presentation of cutaneous leishmaniasis. Indian J Dermatol [Internet]. 2012;57(1):55 • Calvopiña Hinojosa M, Romero Alvarez D, Kato H, Hashiguchi Y. Cutaneous sporotrichoid lesion in a patient from a subtropical region of Ecuador. Enferm Infecc Microbiol Clin. 2014;32(7):465–6.
  • 19. Forma Paroniquial • Raja KM, Khan AA, Hameed A RS. Unusual clinical variants of cutaneous leishmaniasis in Pakistan. Br J Dermatol. 1998;139:111–3. Br J. 1998;111–3 • Iftikhar N, Bari I, Ejaz A. Rare variants of Cutaneous Leishmaniasis: Whitlow, paronychia, and sporotrichoid. Int J Dermatol. 2003;42(10):807–9..
  • 20. • Niamba P, Goumbri-Lompo O, Traoré A, Barro-Traoré F, Soudré RT. Diffuse cutaneous leishmaniasis in an HIV-positive patient in western Africa. Australas J Dermatol. 2007;48(1):32–4. • Hemang MP, Asha NS, Bipin KA, Manoj RS. Diffuse cutaneous leishmaniasis-A rare cutaneos presentation in an HIV positive patient. Indian J Sex Transm Dis. 2012;33(1):61–2. Forma Anérgica
  • 21. Forma Anular • Raja KM, Khan AA, Hameed A RS. Unusual clinical variants of cutaneous leishmaniasis in Pakistan. Br J Dermatol. 1998;139:111–3. Br J. 1998;111–3. • Barros C, Maia LC, Soares GC, Teodoro IPP, Gadelha M do SV, da Silva CGL, et al. Atypical presentations of cutaneous leishmaniasis : A systematic review. Acta Trop [Internet]. 2017;172(May):240–54
  • 22. Forma Impetiginoide • Barros C, Maia Chaves L, Soares GC, Teodoro IPP, Gadelha M do SV, da Silva CGL, et al. Atypical presentations of cutaneous leishmaniasis: A systematic review. Acta Trop [Internet]. 2017;172(May):240–54 • González F, Zerpa O. Leishmaniasis cutánea en la infancia. Dermatol Pediatr Lat. 2004;2:97–108. • Hayani K, Dandashli A, Weisshaar E. Cutaneous Leishmaniasis in Syria: Clinical Features, Current Status and the • Effects of War. Acta Derm Venereol. 2015;95(1):62–6
  • 23. Forma Lupoidea • Benvenuti F, Ribera-Pibernat M, Boada-Garcia A, Ferrándiz C. Leishmaniasis cutánea múltiple: Presentación de tres casos. Piel [Internet]. 2008;23(4):162–5. • Barros C, Maia Chaves L, Soares GC, Teodoro IPP, Gadelha M do SV, da Silva CGL, et al. Atypical presentations of cutaneous leishmaniasis: A systematic review. Acta Trop [Internet]. 2017;172(May):240–54 • Arené J, Encinas S, Rollano F. Leishmaniasis Lupoide: Presentación de un caso y revisión de la literatura. Vol. 96. 2011. p. 5–8.
  • 24. Ulcera del chiclero • Barros C, Maia LC, Soares GC, Teodoro IPP, Gadelha M do SV, da Silva CGL, et al. Atypical presentations of cutaneous leishmaniasis : A systematic review. Acta Trop [Internet]. 2017;172(May):240–54 • Hayani K, Dandashli A, Weisshaar E. Cutaneous Leishmaniasis in Syria: Clinical Features, Current Status and the Effects of War. • Calvopiña M, Martinez L, Hashiguchi Y. Cutaneous leishmaniasis “chiclero’s ulcer” in subtropical Ecuador. Am J Trop Med Hyg. 2013;89(2):195–6
  • 25. Forma Cicatrizal • Sandoval A, Minaya G, Rojas N, Falconi E, Cáceres O. Reporte de Caso. Rev Peru Med Exp Salud Pública. 2014;31(4):788–92 • Torres-Guerrero E, Quintanilla-Cedillo MR, Ruiz-Esmenjaud J, Arenas R. Leishmaniasis: a review. F1000Research [ 2017;6(0):750. .
  • 27. CLINICO: - Toda úlcera de varias semanas de evolución - No cede a tratamientos convencionales - Antecedente de viaje a zonas endémicas - Antecedente de picadura de insectos
  • 30. DIAGNÓSTICO DE LABORATORIO  Método directo / Frotis Mediante la visualización microscópica del parásito en la muestra obtenida del paciente
  • 31. TIPO DE MUESTRA Raspado de tejido de úlcera CRITERIOS DE RECHAZO Usuario que se haya aplicado crema tópica, haya tomado algún fármaco o la úlcera presenta infección. DOCUMENTACIÓN ASOCIADA A LA MUESTRA Ficha epidemiológica SIVE ALERTA EPI1-INDIVIDUAL con sello del área de vigilancia de la institución solicitante. Debe contener de forma legible la siguiente información: Nombres del paciente, edad, sexo, dirección, cédula de ciudadanía, teléfono, procedencia, fecha de inicio de síntomas, fecha de la toma de muestra.
  • 32. CRITERIOS DE RECHAZO DE MUESTRA (Placas de raspado de tejido de úlcera) No tengan formulario EPI1-INDIVIDUAL Placas que se encuentren quebradas, trizadas. Muestras mal rotuladas y que su identificación no sea legible. Muestras que tengan incompatibilidad entre la información de la documentación y la muestra.
  • 33. TOMA DE MUESTRA DE PACIENTES QUE ACUDEN AL INSPI Principio.- El diagnóstico definitivo, requiere la demostración del parásito, observado en forma de amastigotes a través del frotis. Material requerido Láminas portaobjetos Solución yodada Solución salina Bisturí # 15 Gasa Guantes Lápiz graso o de grafito
  • 34. PROCEDIMIENTO 1.- Identificar las láminas con código del paciente 2.- Realizar la limpieza de la lesión Fuente CIDEIM
  • 35. PROCEDIMIENTO Fuente CIDEIM 3.- Tomar la muestra, elegir el borde más activo de la lesión, 4.- Sin dejar de hacer presión, realizar con el bisturí una incisión superficial, de 3 mm de profundidad aproximadamente, raspar el interior de la incisión, el material obtenido del raspado debe tener un aspecto grumoso con escasa cantidad de sangre.
  • 36. PROCEDIMIENTO Fuente CIDEIM 5.- Realizar seis frotis de forma circular de adentro hacia afuera por paciente, en dos láminas portaobjetos, de 8 a 10 mm de diámetro cada uno.
  • 37. PROCEDIMIENTO Fuente CIDEIM 6.- Descartar el bisturí en el guardián de seguridad. 7.- Al terminar la toma de muestra, hacer presión en la lesión con una gasa hasta controlar el sangrado, finalmente si es necesario cubrir con gasa y esparadrapo 8.- Dejar secar las láminas horizontalmente a temperatura ambiente de 5 a 10 minutos aproximadamente
  • 38. PROCEDIMIENTO Fuente CIDEIM 9.- Fijar las láminas con metanol, colocarlas en posición vertical para escurrir el exceso de metanol y dejar secar de 5 a10 minutos a temperatura ambiente.
  • 39. COLORACIÓN Materiales y reactivos: Láminas con la muestra a colorear Colorante de Giemsa (solución madre) Buffer/ agua destilada Soporte cóncavo para coloración Pipetas pasteur Cronómetro
  • 40. COLORACIÓN Solución de trabajo: 3 ml buffer/agua destilada + 3 gotas de Giemsa solución madre por cada lámina Buffer/ Agua destilada 3 ml + Giemsa
  • 41. 1.- Colocar las láminas con la muestra hacia abajo (teñir por inversión) sobre un soporte cóncavo para evitar la formación de un precipitado Nota: Utilizar el colorante con las recomendaciones del fabricante teniendo en cuenta el tiempo y la concentración estandarizada al utilizar cada lote Fuente CIDEIM
  • 42. 2.- Agregar el colorante preparado y evitar que se queden burbujas en la muestra, colorear de 20 a 30 minutos Fuente CIDEIM
  • 43. 3.- Lavar las láminas con agua de la llave, evitar que el chorro caiga directamente sobre la muestra Fuente CIDEIM
  • 44. Fuente INSPI LECTURA DEL EXAMEN DIRECTO  Adicionar una gota de aceite de inmersión en los frotis y colocar la lámina sobre la platina del microscopio y enfocar con el objetivo de 10X, luego pasar a objetivo de 100X. Evaluar los frotis: o Calidad del extendido (tamaño, grosor) o Coloración
  • 45. Fuente INSPI LECTURA DEL EXAMEN DIRECTO Muestra óptima.- Aspecto granular, células con una correcta morfología; leucocitos abundantes; eritrocitos escasos Muestra inadecuada.- Carece de aspecto granular; muestra escasa; abundantes glóbulos rojos o bacterias y coloración no satisfactoria Revisar todos los campos en búsqueda de amastigotes intra-extracelulares, que se presentan de forma redondeadas, ovalada o alargada como “grano de arroz”. Su tamaño varía entre 2 – 5 micras
  • 46. LECTURA DEL EXAMEN DIRECTO Un resultado es positivo cuando se observa claramente la presencia de al menos un amastigote con todas sus características: Núcleo: color azul-violeta oscuro. Kinetoplasto: color violeta intenso. Citoplasma: color azul claro. Membrana celular definida. Un resultado es negativo cuando al recorrer todos los campos de todas las láminas no se observan amastigotes Macrófago con amastigotes
  • 47. REPORTE DE RESULTADO Resultado: POSITIVO Se observaron amastigotes de Leishmania sp. en la muestra examinada Resultado: NEGATIVO No se observaron amastigotes de Leishmania sp. en la muestra examinada NOTA: Un resultado negativo no excluye el diagnóstico de leishmaniasis. El resultado se inserta en el Sistema Nacional de Vigilancia en Salud Pública Ecuador https://viepi.msp.gob.ec/login.php Tiempo de respuesta: 2 días laborables