Informe de prácticas de laboratorio de microbiología de alimentos

1. "AÑO DE LA UNIDAD, LA PAZ Y EL DESARROLLO"
UNIVERSIDAD NACIONAL DE PIURA
FACULTAD DE CIENCIAS
Escuela Profesional de Ciencias Biológicas
VALORACIÓN DE LOS DESINFECTANTES
AUTORES:
Anastacio Gonzales, Hugo César
Martínez Girón, Paola Milagros
Palacios Castro, Pedro Ángel
CURSO:
Microbiología de Alimentos
N° DE INFORME: 09
DOCENTE:
Mcblgo. María Dorothy Torres de León
SEMESTRE:
2022 - II

2. INTRODUCCIÓN:
La limpieza y desinfección son generalmente las formas más efectivas, dentro de la industria
farmaceútica , para controlar la contaminación microbiana.Las áreas limpias deben mantenerse de
conformidad con normas apropiadas de limpiezas, a las cuáles se le debe suministrar el aire que ha sido
filtrado con comprobación eficiente (Ministerio de Salud, s.f).
Los desinfectantes, son sustancias químicas que tienen como fin disminuir o eliminar el número
de microorganismos que se encuentran en áreas que pueden entrar en contacto con los
alimentos. Los procesos de desinfección, por su parte, pueden llegar a ser más efectivos si se
lleva a cabo una limpieza completa del equipo o de la superficie que se va a desinfectar, debido
a que la materia orgánica que puede estar presente, es capaz de reducir la capacidad biocida de
los desinfectantes, debido a su efecto diluyente (Marriott, 2003).
Para asegurar el buen rendimiento de los desinfectantes utilizados en la industria de alimentos,
además de conocer las condiciones físico-químicas óptimas, es necesario conocer la forma de
acción que este tipo de sustancias tienen para reaccionar con las proteínas y las enzimas
esenciales de los microorganismos. La actuación de las sustancias químicas con acción
desinfectante, se centra por lo general en algún punto concreto de la estructura de los
microorganismos o ejercen su acción sobre algún mecanismo vital (Aldana-Sarassa, 1999).
Un desinfectante es eficaz cuando se aplica en la concentración recomendada y reduce
rápidamente el número de microorganismos patógenos a niveles que sean seguros para la salud
pública. Generalmente se pueden tener en cuenta tres aspectos para la evaluación de un
producto: la eficiencia inmediata de la formulación (hace referencia a la remoción mecánica y
la inactivación inmediata de microorganismos), persistencia antimicrobiana de la efectividad
(es la medida de la habilidad del producto para prevenir la recolonización microbiana en la
superficie después de la aplicación del producto) y las propiedades residuales antimicrobianas
de la formulación (Guevara, 1999).
Los compuestos que liberan cloro son sensibles tanto para las bacterias GRAM positivas como
para las GRAM negativas, además estos compuestos presentan cierta actividad frente a las
esporas bacterianas. Los compuestos que liberan cloro son fáciles de usar y no se afectan por
las aguas duras (Forsythe y Hayes, 2002).
El presente informe se realizó con el objetivo de proporcionar al estudiante la destreza para que
prepare las diluciones de desinfectante y proceder a su valoración.

3. MATERIALES Y MÉTODOS
PRUEBA DE LA SUSPENSIÓN:
A) La solución de desinfectante, a la concentración adecuada se preparó en los 99 ml de agua
dura.
B) Se añadió 1 ml de la suspensión bacteriana a la solución de desinfectante. Se anotó con
exactitud el momento en que se añadió la suspensión y se mezcló bien.
C) Una transcurridos tiempos de exposición de 30 segundos, 2 minutos , 5 min y 10 min, se tomó
1 ml del matraz con la solución de desinfectante - microorganismo y se pasa a uno de los
tubos que contiene 9 ml de solución inactivadora,mezclándolo bien haciendo girar los tubos.
D) El inactivador debe ser apropiado para el desinfectante que se está ensayando. El tiosulfato
sódico al (0.5%) se utiliza para ensayos con hipoclorito y compuestos de yodo (yodóforos).
Cuando se trata d compuestos de amonio cuaternario se pueden emplear otros inactivadores
como:
- Mezcla de lecitina de huevo en solución acuosa de Cirrasol ALN - Wf al 3%.
- Tween 80 al 2%.
- Suero al 10%.
Para inactivar los compuestos orgánicos de mercurio se puede añadir un 0.25% de solución de
tioglicolato sódico.
E) Se determinó el número de bacterias supervivientes , después de cada período de exposición,
se toman 1ml y 0.1 ml de cada tubo de solución inactivadora y se colocan en un medio de
agar PCA, incubándolo a la temperatura óptima de crecimiento de la bacteria que se está
ensayando.
F) Con el número de supervivientes y el tiempo de exposición se determinó el valor D usando
papel semilogarítmico.
RESULTADOS :
a) 𝐶1𝐶1 = 𝐶2𝐶2
- (4%)(7.5ml) = (X)(10 000ml)-----> x = 0.003% = 30 ppm
- (4%)(V1) = (0.003%)(99 ml) ------> V = 0.07425 ml.
b)

4. c)
DISCUSIÓN:
Para la técnica de dilución en tubos se realizan diferentes diluciones del agente químico. El
mismo volumen de cada dilución se dispensa en tubos estériles, a cada tubo se le añade la
misma cantidad de una suspensión del microorganismo utilizado como prueba. A determinados
intervalos de tiempo se transfiere una alícuota de cada tubo a otro tubo que contenga medio de
cultivo. Estos tubos inoculados se incuban a una temperatura óptima de crecimiento del
microorganismo utilizado durante 24 o 48 horas. Al cabo de este tiempo se examina el
crecimiento del microorganismo mediante la aparición de turbidez en el tubo (crecimiento +)
o ausencia de turbidez (crecimiento -). Aquellos que presentan crecimiento negativo indican la
dilución a la cual ese agente químico mata al microorganismo utilizado como prueba cuando
este es expuesto a desinfectante durante determinado periodo de tiempo (Henoun et. al, 2006).
El efecto bactericida se fundamenta en la capacidad oxidante del cloro en forma de 2Cl-. Un
mol de Ca (OCl2) y de NaOCl respectivamente libera 141 y 74.5 moles de Cl. También se ha
demostrado su capacidad para producir cambios en la permeabilidad de la membrana celular.
La acción bactericida del cloro disminuye a medida que aumenta el pH y aumenta con la
temperatura de la solución desinfectante que pierde actividad en presencia de materia orgánica
(Aldana- Sarassa, 1999).
Los compuestos que liberan cloro son sensibles tanto para las bacterias Gram negativas como
para las Gram positivas; además estos compuestos presentan cierta actividad frente a las
esporas bacterianas. Los compuestos que liberan cloro son fáciles de usar y no se ven afectados
por las aguas duras. El inconveniente de estos agentes es que se inactivan rápidamente en
presencia de materia orgánica, y además deben juagarse muy bien para evitar corrosión (Hayes,
2002).

5. Las fuentes de cloro más utilizadas son el hipoclorito de sodio, que libera un 12% a 14% de
cloro y el hipoclorito de calcio con un 65% de disponibilidad. Debido a que el blanqueador
domestico hipoclorito de sodio no genera residuos tóxicos es un excelente desinfectante en
laboratorios para las incubadoras, mesas de trabajo entre otros (Aldana-Sarassa, 1999).
Por otra parte, los desinfectantes varían en su composición química y actividad, por esto,
existen en el mercado productos con mayor concentración, lo que asegura una rápida y eficaz
acción. Además del tipo de condiciones a nivel de su composición, se deben tener en cuenta
diferentes factores físico-químicos que en algún momento pueden llegar a afectar la eficacia
de los desinfectantes, como lo son: Tiempo de exposición: La carga microbiana y la diversa
sensibilidad de la población bacteriana al desinfectante, debido a la edad, formación de esporas
y otros factores fisiológicos determinan el tiempo requerido para que el desinfectante sea
eficaz.
CONCLUSIÓN
En el minuto 10 hubo mayor crecimiento bacteriano, siendo este su punto máximo.
REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS:
Aldana L., y Sarassa S., (1999) Efecto de desinfectantes y antimicrobianos naturales
frente a cepas de Listeria monocytogenes. Pregrado. Pontificia Universidad Javeriana.
Facultad de Ciencias. Departamento de Microbiología. Bogotá, Colombia.
Guevara A., (1999) Validación de desinfectantes en una planta de productos
farmacéuticos. Pregrado. Pontificia Universidad Javeriana. Facultad de Ciencias.
Departamento de microbiología. Bogotá, Colombia.
Hayes P. (2002) Higiene de los alimentos, microbiología y HACCP. 2ª. Edición.
Editorial Acribia, S.A. Zaragoza, España. Páginas 359 – 386.
Henoun N., Granbstien N., Faure K.,Guery B. y Beaucaire (2006) Effect of different
stabilized preparations of peracetic acid on biofilm. Journal of Hospital Infection. Vol
63, May 2006, pp 70-72.
Marriot N. (2003) Principios de Higiene Alimentaria. Editorial Acribia S.A.
Ministerio de Salud (s.f) Normas de buenas prácticas de Manufactura.