Este documento describe un experimento para determinar el crecimiento de la población de levaduras a lo largo del tiempo. El experimento involucra cultivar levaduras en una solución de agua y azúcar y contar la cantidad de levaduras diariamente usando un microscopio. Los resultados muestran un aumento exponencial en la población de levaduras a medida que pasan los días, siguiendo las fases típicas de crecimiento de la curva sigmoidea: fase de latencia, fase exponencial y fase estacionaria. El az
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CRECIMIENTO DE LA LEVADURA
I. INTRODUCCIÓN
Las levaduras se encuentran ampliamente distribuidas en la naturaleza,
localizada en el suelo, en la superficie de las frutas, en el néctar de las flores
y en ambientes acuáticos. La mayoría son saprofitas y proliferan en materia
orgánica muerta; otras son parasitas, facultativas u obligadas, por lo que se
desarrollan en otros seres. Las levaduras parasitas pueden causar
enfermedades en el hombre, animales y plantas. Entre las saprofitas, las
fermentativas llevan a cabo la fermentación alcohólica de azucares,
característica que ha sido aprovechada por el hombre, desde tiempos
remotos.1
La mayoría de las levaduras tienen una reproducción asexual por gemación y
unas pocas por gemación binaria. En el proceso de gemación se forma una
pequeña protuberancia en la periferia de la célula, la cual se debe a un
debilitamiento de la pared celular. Esta pequeña protuberancia se agranda,
al irse llenando de material citoplasmático proveniente de la célula madre,
hasta alcanzar casi el tamaño de esta.2
En la presente práctica, se tiene vamos a determinar el crecimiento de la
masa poblacional de las levaduras la cual se ira registrando en una gráfica
para ver la evolución de las mismas.
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II. OBJETIVOS
Identificar las fases de crecimiento de la levadura.
Identificar las condiciones adecuadas para el crecimiento de las
levaduras.
Determinar con cuanta rapidez aumenta la población de levaduras.
III. MATERIAL Y MÉTODOS
Materiales:
Levadura
Azúcar
Corcho
Vasos de precipitación
2 tubos de ensayo
Pipeta
Cámara de Neubauer
Gradilla
Microscopio
Gotero
Metodología:
Con indicaciones del profesor se realizara los siguientes pasos.
1. En un vaso colocar 100 milímetros de agua a lo que se le agregara 1
cucharada de levadura y 2 cucharadas de azúcar para luego
mezclarlas con la pipeta.
2. Luego de que la que el azúcar y la levadura se mezclen totalmente
con el agua se sacar 1 milímetro de la solución y colocarlo al tubo de
ensayo y aforar totalmente con agua, tapar el tubo con el corcho y
agitar para que se disuelva totalmente.
3. En la fase inicial de la observación se colocara una mínima cantidad
en la cámara de Neubauer para ser observada en el microscopio.
4. En los días siguientes se hará las observaciones respectivas al
microscopio para ver el aumento de la población de las levaduras.
Para contabilizar la población de levaduras en los días de lectura se seguirá
el siguiente método.
1. Se contabilizara la cantidad de levaduras que existen solo en tres
cuadrantes y se los sacara el promedio de los tres, a lo cual
multiplicaremos por 16 y al resultado de este por 2.
2. El resultado que nos dé, significa la cantidad de levaduras que hay en
una area de 100 mm2
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IV. RESULTADOS
En la Tabla N° 1 se observan los datos de las lecturas que se obtuvieron la
evaluar el crecimiento de levaduras con ayuda del microscopio y con la
metodología descrita anteriormente.
Tabla N° 1: Aumento de levaduras por día.
En el gráfico N° 1 se observa una curva sigmoidea del comportamiento que
muestra el crecimiento poblacional de las levaduras, que como se observa
existe un crecimiento de la población a lo largo de los días, en su fase inicial
(lag), Fase log, y fase de equilibrio.
Gráfico N° 1: Comportamiento del crecimiento de las levaduras por días.
V. DISCUSIÓN
¿Cómo se multiplican las levaduras?
La levadura se multiplica mediante unos abultamientos laterales.
Llamados yemas que se separan de la inicial formando un nuevo
individuo. Sin embargo, cuando el crecimiento es rápido, pueden
verse cadenas cortas de varias yemas a veces ramificadas.3
¿Porqué el agregarazúcarfavorecealcrecimientodelas levaduras?
El azúcar permite que las levaduras durante el transcurso de la
fermentación cubran sus necesidades energéticas sin aporte de aire.
3,659
781,600
953,600
0
200,000
400,000
600,000
800,000
1,000,000
1,200,000
Jueves Lunes Miercoles
CANTIDAD
DÌAS
CRECIMIENTO DE LAS LEVADURAS
Días Cantidadde Levadurasobservadas
Jueves 3,659.00
Lunes 781,600.00
Miércoles 953,600.00
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Elmetabolismo anaerobio de los hidratos de carbono, que seproduce
en ausencia de aire, tiene gran importancia en el crecimiento de la
población de la levadura.4
¿Por qué se utiliza la cámara Neubauer para ver el crecimiento
poblacional de las levaduras?
La cuantificación de la concentración de células permite determinar
el número de unidades por unidad de peso o volumen, existentes en
un cultivo y sirve de base para establecer la dosificación de un
producto o la concentración de una cedula.5
Para el recuento de levaduras se utiliza la cámara de Neubauer o
hemocilometro. La cámara está dividida en 2 retículos y cada uno se
subdivide en 9 cuadrados de 1mm2 cada uno, o sea que cada retículo
tiene una superficie total de 9mm2. El cuadrado central aparece de
nuevo subdividido en 25 cuadrantes y estos en 16 cuadrantes más
pequeños.
¿Qué tipo de reproducción tiene las levaduras?
Lareproducción asexuales aquelladonde un solo progenitor sedivide
y origina dos o más desdientes idénticos a él, pueden tener dos o más
descendientes idénticos a él. Muchos organismos aprovechan las
ventajas de lareproducción asexualpara producir de forma rápida un
elevado número de descendientes. La mayoría de los seres
unicelulares, como protozoos, algas o levaduras, pueden
reproducirse asexualmente. Las formas más frecuentes son:
bipartición o división simple, gemación o esporulación.6
VI. CONCLUSIONES
Una fermentación aeróbica tipo batch o discontinua puede ser
considerada como un sistema cerrado. En el transcurso de la
fermentación hay 4 fases de crecimiento, por las cuales pasa el
microorganismo a través el tiempo, como se muestra en la figura 4:
fase lag, fase exponencial, fase estacionaria y fase de muerte.7
o Fase Lag o de adaptación: también llamada fase de latencia.
Cuando las células sontransferidas de un medio aotro, no hay
inicialmente un incremento en el número de células. Durante
esta fase los microorganismos se toman un tiempo para
adaptarse a su nuevo ambiente fisicoquímico y en ocasiones
se sintetizan nuevas enzimas o componentes estructurales.8
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La duración de esta fase puede variar dependiendo del
crecimiento de las células enel inóculo, elcual debe tener una
edad tal que la mayor parte de las células que contiene deben
encontrarse en fase exponencial y metabólicamente activas.
o Fase Exponencial o log: Al finalizar la fase lag, las células se
han adaptado a las nuevas condiciones de crecimiento. En
este punto las células se reproducen sin limitación de
sustancias nutritivas avelocidad máxima. Elcrecimiento de las
células se puede describir cuantitativamente como la
duplicación del número de células o biomasa por unidad de
tiempo. A través de esta fase las células alteran el medio
constantemente tomando los sustratos y excretando los
productos metabolizados. El crecimiento permanece
constante durante esta fase.9
o Fase de muerte: también llamada fase de decaimiento. En
esta fase la reserva de energía de las células se ha acabado,
debido a condiciones de inanición o como consecuencia del
metabolismo de mantenimiento de algunas células. El tiempo
entre la fase estacionaria y la fase de muerte depende del
microorganismo y el proceso utilizado.10
Condiciones para el Crecimiento de las Levaduras
“Azúcar, como fuente de alimento.
Humedad, sin agua no puede asimilar ningún alimento.
Materias nitrogenadas, necesita nitrógeno.
Minerales, la levadura necesita sales minerales para una
actividad vigorosa.
Temperatura adecuada.”11
Aumento de la Población de Levaduras: Las células aisladas
cultivadas en un volumen finito de medio de cultivo apropiado van
utilizando los nutrientes que tienen disponibles con la mayor
eficiencia y rapidez que pueden, sintetizando sus propios
componentes celulares y dividiéndose en cuanto han podido duplicar
su masa y su material genético. El tiempo que tarda una célula en
hacer todo lo anterior es lo que conocemos como tiempo de
generación y puede variar desde unos 20 minutos en condiciones
óptimas hasta varios meses en condiciones del suelo. Cada vez que
transcurre un tiempo de generación, el número de células se duplica,
siguiendo, por tanto, un incremento exponencial.12
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VII. REFERENCIAS BIBLIOGRÀFICAS
1 VERA G. Introducciónala microbiología.EditorialUniversidadEstatal adistancia.Pág.108
2 IDEM. Pág. 109
3 MACIASA.1975. Cienciacombinada.Editorial Reverte S.A.España.Pág.112
4 KLAGESF. 1968. Tratado de químicaOrgánica.Editorial reverte S.A.España.Pág.283 - 290
5 TOROR. 2005. Manual para la introducciónal laboratoriode microbiología.Asociaciónde
editoriales ASEUC.Colombia.Pág.24
6 CAMPOSTORRES Y Otros.2002. Biología2. EdicionesVicensVivesS.A.México.Pág.128
7 SANCHEZA. 2003. Las Biotecnologías:desafíosypromesasInvestigacionesBiológicas.La
habana
8 DUARTE P.1998. Biotecnologíade lafermentación,primeraedición.EditorialAcribaS.A.
Zaragoza (España).
9 IDEM
10 SANCHEZA. 2003. Las Biotecnologías:desafíosypromesasInvestigacionesBiológicas.La
habana
11 MENDOZA J.2008. Proyectode cienciasbásicasysus tecnologías.AsunciónParaguay.
12 LEVEAU JY, BAUIXM. 2000. MicrobiologíaIndustrial.Acribia, Zaragoza,cap.3.
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VIII. ANEXOS
Anexo1: Materiales
Anexo 2: Agua para la Disolución
Anexo3: Mezclade levaduramásagua