HONGOS GENERALIDADES

2. MICOLOGÍA
* También llamada micetología, es
la ciencia que se dedica al estudio
de los hongos

3. un grupo de organismos
eucariotas entre los que se
encuentran los mohos, las
levaduras y las setas. Estos
pueden ser de virulencia alta

4. • LOS HONGOS MICROSCÓPICOS COMPRENDEN
LAS LEVADURAS, HONGOS FILAMENTOSOS Y
MOHOS

5. • EXISTEN APROXIMADAMENTE 100,000 ESPECIES
DE HONGOS MICROSCOPICOS
• VIVEN COMO SAPROFITOS
• 50 ESPECIES PRODUCEN ENFERMEDADES EN EL
HOMBRE Y ANIMALES
• 8000 ESPECIES CAUSAN
ENFERMEDADES EN PLANTAS

6. • EN EL AREA DE LA INDUSTRIA FARMACEUTICA
ALGUNOS HONGOS SON UTILIZADOS PARA
OBTENER ANTIBIOTICOS, COMO LA
PENICILINA DEL GENERO PENICILLIUM.

7. • PUEDEN USARSE EN LA DEGRADACION DE
HIDROCARBUROS
• CRECEN TANTO EN AGUA DULCE COMO EN
AGUA SALADA
• ALGUNOS HONGOS PRODUCEN SUSTANCIAS
TOXICAS EN ALIMENTOS

8. *Los hongos son muy
abundantes y ubicuos en la
naturaleza.
* Son excelentes
degradadores de materia
orgánica

9. Los hongos son diferentes a otros
organismos vivos, carecen de clorofila, no
pueden ser autótrofos, por tanto,
necesitan obtener sus requerimientos
nutricionales de material orgánico ya
formado.

10. *Son organismos eucariotas.
*Son quimio heterótrofos.
*Son inmóviles.
*Pueden ser unicelulares o pluricelulares.

13. ANATOMÍA DE LA CÉLULA
FÚNGICA

14. ANATOMÍA
• La célula fúngica es una de las menos
conocidas. Posee organización eucariota
también.
• Se suele decir a menudo que este tipo de
célula se parece a la célula animal.

15. ANATOMÍA
ELEMENTOS DE LA ENVOLTURA:
• Cápsula
• Pared celular
• Membrana plasmática
ELEMENTOS INTERNOS:
• Núcleo
• Sistema endomembranal
• Ribosomas

16. CÁPSULA
• Situada fuera de la pared
celular (en pocas especies)
Del género Cryptococcus,
como el Cryptococcus
neoformans.

17. CÁPSULA
• Compuesta por polisacáridos
(glucoroxidomananos) que brinda protección
frente a las defensas del hospedero.
• En hongos unicelulares tiene polisacáridos
mucilaginosos, con capacidad inmunógena y
acción antifagocitaria.

18. PARED CELULAR
• Tiene crecimiento
constate.
• Protege a la célula.
• Le da su forma característica.
• Tiene nutrición absortiva.

19. PARED CELULAR
• Está formada por capas (polímeros
polisacáridos fibrilares) como la quitina y la
celulosa.
• Contiene proteínas asociadas con
polisacáridos y lípidos (antígenos).
Por ejemplo: CANDIDA.

20. MEMBRANA PLÁSMATICA
• Se ubica debajo de la pared celular.
• Integrada por fosfolípidos y proteínas.
• Mesosomas.
• Transporta sustancias de un lugar de la
membrana a otro. (regulación)
• Permite la permeabilidad y es selectiva.
• Rica en sistemas enzimáticos. Por ejemplo:
citocromo P450.
• Protección y forma.

21. MEMBRANA PLÁSMATICA

22. NÚCLEO
• Posee membrana porosa que permite la
comunicación con el citoplasma.
• Tiene entre 2 y 4 cromosomas y un nucléolo.
• Forma esférica
u ovalada.
• Contiene la
mayor parte del
material genético.

23. NÚCLEO
Funciones:
• Replicación y transcripción de ácidos
nucleicos.
• Almacena la información
genética, pasándola a las
células hijas en el
momento de la división
celular.

24. SISTEMA ENDOMEMBRANAL
• Es un sistema de membranas interconectadas
que recorren el citoplasma desde el núcleo hasta
la membrana plasmática.
Se divide en:
• Envoltura nuclear.
• Retículo endoplásmatico liso y rugoso.
• Aparato de Golgi.
• Lisosomas.
• Vacuolas.

25. SISTEMA ENDOMEMBRANAL
• Envoltura nuclear:
doble unidad de
membrana porosa que
delimita al núcleo.
Por los poros entran
al núcleo las proteínas,
fabricadas por los
ribosomas
• Retículo endoplásmatico: red membranosa comunica a la
membrana con el núcleo.

26. SISTEMA ENDOMEMBRANAL
• RER: Transporta sustancia y en su superficie
representa ribosomas las cuales
sintetizan proteínas que
posteriormente son
modificadas por el
RER.

27. SISTEMA ENDOMEMBRANAL
• REL: su función es la
• síntesis de lípidos.
No posee ribosomas.

28. SISTEMA ENDOMEMBRANAL
• Aparato de golgi: continuación del R.E. el cual
modifica proteínas
y lípidos producidos
en el RE , es un
sistema de
empaquetado
y de entrega de
moléculas.

29. SISTEMA ENDOMEMBRANAL
• Lisosomas: organelos esféricos que efectúan la
degradación o digestión.
• Vacuolas: almacenan aceite o almidón y
bombean el exceso de agua.

30. RIBOSOMAS
• Orgánulos pequeños que producen proteínas
propias (síntesis de proteínas).
• Formados de ARN y proteínas.
• Lugar donde se ensamblan los aminoácidos
para formar proteínas.

31. MORFOLOGÍA
MACROSCÓPICA
Y
MICROSCÓPICA

32. Morfología
 Disciplina encargada del estudio de la
reproducción y estructura de un
organismo o sistema.

33. Se les llama también Eumicetos, no producen
Flagelos (son inmóviles la mayor parte de ellos.)
Los hongos microscópicos pueden ser:
Hongos Unicelulares
Hongos Filamentosos

34. Hongos Unicelulares
Se llaman hongos levaduriformes o
levaduras

35. Hongos Filamentosos
Se llaman mohos y cada organismo
tiene
muchas células.

36. Tanto las levaduras como los mohos
presentan células eucariontes, es decir,
con cromosomas múltiples, membrana
nuclear bien definida, mitocondrias,
retículo endoplásmico y pared celular.

37. Son microorganismos que contienen paredes
celulares rígidas hechas de glucógeno, de
celulosa, de quitina, o mananas.
La membrana celular fúngica, a diferencia dela
bacteriana, presenta esteroles (esteroides con
27 a 29 átomos de carbono).
Estos microorganismos carecen de clorofila, y
son heterótrofos. Algunas levaduras ó algunas
especies de Candidas tienen capsula , la cual
es antifagocítica.

38. El conjunto celular de los mohos es
llamado micelio.
Hifa Micelio Talo

39. Aspecto de las colonias de Mohos:
Tipo aterciopelado
Algodonoso o polvoso
Diversas coloraciones que abarcan toda
la gama de color

40. Los hongos poseen hifas multinucleadas y estas
pueden tener septos o carecer de ellos; con
base a esta característica, se clasifican en:
Hongos con micelio cenocítico: son los que
carecen de septos o tabicaciones
Hongos con micelio septado: son los que
presentan septos o tabicaciones entre las
células

41. Formación de blastoconidos Fisión Seudohifas
Hifas cenocíticas Hifas tabicadas Hifas tabicadas con conexiones
en Pinza
Morfología de la célula fúngica A. Levaduras que se reproducen formando
blastoconidios B. Levaduras que se dividen por fisión C. Desarrollo de seudohifas D.
Hifas cenociticas E. Hifas tabicadas F. Hifas tabicadas con conexiones en pinza.
Tomado de Murray P. (19)

42. En cuanto a su función, las hifas y
micelios se clasifican en 2 tipos:
1. Hifa o Micelio Vegetativo: Es el que penetra
al sustrato para absorber las sustancias
nutritivas.
2. Hifa o Micelio Aereo o Reproductivo: Es el
que se proyecta sobre el sustrato y produce
las estructuras de reproducción.

43. Los hongos se reproducen principalmente por
medio de esporas, que son, estructuras
especializadas para la propagación del hongo,
y están capacitadas para soportar condiciones
adversas del medio ambiente.

44. Clasificación de las esporas fúngicas
a) Artroconidios
b) Blastoconidios
c) Clamidoconidios
Asexuales D) Mitocondrias
E) Macroconidias
F) Esporangiosporas
Esporas fúngicas
I. Cigosporas (zigospora)
II. Ascospora
Sexuales
III. Basidiospora
IV. Oospora

45. Esporas asexuales
Son generalmente resistentes a la
sequedad o a la radiación pero no
especialmente al calor, y no presentan un
periodo de latencia
Son capaces de germinar cuando hay
humedad y a menudo en ausencia de
nutrientes

46. Esporas sexuales
Son por lo general mas al calor que las
asexuales , aunque ninguna espora de hongos
muestra la extrema resistencia al calor como
la endospora bacteriana
Las esporas sexuales presentan a menudo
latencia, germinando solo cuando han sido
activadas de alguna manera.

47. a) Artroconidios
b) Blastoconidios
c) Clamidoconidios
*****************
d) Microconidias
e) Macroconidias
f) Esporangiosporas

48. Artroconidios
Se forman por fragmentación de hifas,
generalmente son rectangulares con
doble pared gruesa
Anteriormente llamadas artrosporas

49. Blastoconidios
Se forman en las levaduras por la gemación a
partir de una célula preexistente.
Anteriormente llamado blastosporas

50. Clamidoconidios
Se forma cuando las condiciones del medio se
tornan adversas, las células aumentan de
tamaño y se hinchan.
Anteriormente se llamaban clamidosporas

51. Las siguientes son esporas
producidas libremente, por
segmentación de las puntas de las
hifas especializadas, llamadas
conidioforos

52. Microconidias
Son esporas unicelulares que se presentan en
una variedad de tamaños, formas y colores
Son producidos por los conidioforos, mediante
el estrangulamiento sucesivo en el punto de
unión.

53. Macroconidias
Son esporas multicelulares, las hay de diversas
formas
Las Macroconidias pueden dividir en dos o
mas células por tabiques transversales y
pueden adoptar formar de huso o de clava

54. Esporangiosporas
Son esporas producidas dentro de estructuras
especializadas llamadas esporangios, que son
sacos redondos unidos al micelio vegetativo
por una estructura especial llamada
esporangióforo

55. Esporas sexuales
I. Cigosporas o Zigosporas
II. Ascosporas
Diferentes tipos de
III. Basidiosporas esporas sexuales de
mohos (a) Zigospora
IV. Oosporas de un Zigomiceto (b)
Ascosporas en el
asca de un
ascomiceto ©
Basidiosporas en la
basidia de un
basidiomiceto

56. Zigosporas
Las zigosporas se forman al combinarse dos
células sexuales similares entre sí.

57. Ascosporas
La ascospora (fruto de la reproducción sexual)
genera un micelio, que genera a su vez un
conidio fruto de la reproducción asexual y que
también genera micelio

58. Basiodiosporas
Las basiodiosporas son las esporas sexuales
producidas en grandes cantidades por los
basidiomicetos

59. Oosporas
Una oósporo es una espora sexual de pared
celular gruesa que se desarrolla a partir de
una oosfera fertilizada en algunos protista,
algas y hongos. Es una estructura de
supervivencia que puede resistir durante
varios años.

61. FACTORES DE NUTRICIÓN
Y
CRECIMIENTO

62. FUENTES DE ENERGIA
Los hongos son heterótrofos, es decir que
requieren de compuestos orgánicos
preformados como fuente de carbono. La
mayoría de los hongos son saprofitos, sólo
algunas especies son patógenas para el hombre
y los animales

63. Fuente de carbono: pueden ser hidratos de
carbono como glucosa, que adenás actúa
como fuente de energía.
Fuente de nitrógeno: pueden utilizar
compuestos inorgánicos de nitrógeno como
cloruro de amonio, sulfato de amonio, nitrato
de potasio o compuestos orgánicos simples
como urea.

65.  Oligoelementos:Los oligoelementos son
bioelementos presentes en pequeñas cantidades
( menos de un 0,05%) en los seres vivos (Zn, Fe
Ca).
 Ph óptimo de crecimiento:oscila entre 4,5 a 5,5.
este Ph confiere al medio un carácter seletivo
sobre todo cuando se quiere cultivar hongos y
éstos se hallan acompañados de bacterias.
 Temperatura: creen entre 37 y 38 ºC, algunos
desarrollan a temperatura ambiente.

66. FACTORES FISICO-QUIMICOS.
Pueden afectar el crecimiento de
bacterias y homgos
TEMPERATURA:
-Psicrofilicas. -menor de 10ºC
-Psicrofilas. 10 – 20ºC
-Mesofilas. 21 – 40ºc
-Termofilas. Mayor a 41ºC
PH:
-Hongos patogenos pH de 5.5 a 5.7

67.  Presión osmótica. Mantienen una presión de
turgencia positiva, porque la presión osmótica de
su contenido celular es mayor que la presión
osmótica del medio ambiente La presión de
turgencia suministra la fuerza a la célula para
crecer
 Presión hidrostática. La mayoría de levaduras no
pueden crecer a presiones superiores a 8 atmósferas,
una presión muy baja a diferencia de las bacteria que
crecen a menos de una atmosfera.

68. HUMEDAD:
-70% A 80%
ATMOSFERA:
-Anaerobios obligados. Oxigeno es letal
(clostridium, bacteroides)
-Anaerobios aerotolerantes. Pueden
permanecer en oxigeno

69. -Aerobias facultativas, Capaces de crecer en
anaerobiosis y aerobiosis (enterobacterias).
-Aerobias obligadas. El oxigeno es
indispensables para su crecimiento (la mayoria
de los hongos).

70. RESPIRACION - ANAEROBIA -
GLUCOLISIS Y FERMENTACION
2 Ácidos
Glucosa 2 Gliceraldehido
glicéridos
Ciclo de Proceso 2 Ácidos
Krebs aerobio Pirúvicos
2 Alcoholes 2 Ácidos
2 Acetaldehídos
etílicos Lácticos

71. Tipos de metabolismo
• Metabolismo primario y secundario.
• · Primario à usa la célula para mantenerla
viva (reacciones anabólicas y catabólicas
necesarias para el mantenimiento y
crecimiento de la célula).

72. Secundario à rutas metabólicas
alternativas de sustancias no útiles
para las células.
• ·Son vías fundamentalmente anabólicas.
• La estructura química es inusual para la célula
y sin ninguna función celular.
• Las vías son específicas por un grupo de
hongos o hongo concreto.

73. Fermentación
• La fermentación es un proceso catabólico
de oxidación incompleta,
totalmente anaeróbico, siendo el producto
final un compuesto orgánico.

74. • En los seres vivos, la fermentación es un
proceso anaeróbico y en él no interviene
la mitocondria ni la cadena respiratoria.
• Son propias de los microrganismos como
algunas bacterias y levaduras.

75. • También se produce la fermentación en la
mayoría de las células de los animales;
algunas células, como los eritrocitos, carecen
de mitocondrias y se ven obligadas a
fermentar;

76. • el tejido muscular de los animales realiza
la fermentación láctica cuando el aporte
de oxígeno a las células musculares no es
suficiente para el metabolismo aerobio y
la contracción muscular.

77. Tipos de fermentaciones
• Fermentación acética
es la fermentación bacteriana por Acetobacter.

78. Fermentación alcohólica
Ausencia de aire originado por la actividad de
algunos microorganismos que procesan
los hidratos de carbono para obtener:
un alcohol en forma de etanol dióxido de
carbono en forma de gas y unas moléculas
de ATP que consumen los propios
microorganismos en su metabolismo celular
energético anaeróbico.

79. Fermentación butírica
Es la conversión de los glúcidos en ácido
butírico por acción de bacterias de la
especie Clostridium butyricum en ausencia de
oxígeno. Es característica de las bacterias del
género Clostridium y se caracteriza por la
aparición de olores pútridos y desagradables.

80. Fermentación láctica
Es una ruta metabólica anaeróbica que ocurre
en el citosol de la célula, en la cual
se oxida parcialmente la glucosa para obtener
energía y donde el producto de desecho es
el ácido láctico.

81. Alimentación
Realizan una digestión externa de sus
alimentos, secretando enzimas, que
absorben luego las moléculas disueltas
resultantes de la digestión.
A esta forma de alimentación se le llama
osmotrofia, la cual es similar a la que se
da en las plantas pero, a diferencia de
aquéllas, los nutrientes que toman son
orgánicos.
Los hongos son los descomponedores
primarios de la materia muerta de plantas
y de animales en muchos ecosistemas.

82. • Es la intoxicación o envenenamiento causado
por la ingestión de macromicetos que
contengan o produzcan sustancias que no
pueden ser descompuestas por los procesos
digestivos y metabólicos que al ser absorbidas,
provocan reacciones tóxicas que causan desde
un cuadro diarreico sin complicaciones hasta
la muerte por destrucción hepática y/o renal.

83. Micetismo Periodo de Características
incubación
Floidiano 8 a 12 h hasta FASE Pirosis, gastralgias, vómitos, cólicos,
24 h COLERIFORME: diarrea abundante y fétida
Cefaleas, vértigos y calambres. Agitación,
convulsiones y colapso
circulatorio.
FASE Hepatomegalia, ictericia, necrosis
HEPATORRENAL hemorrágica de los hepatocitos,
dolor en hipocondrio derecho,
albuminuria, hematuria y anuria.
Muerte entre 40 y 48 h después de la
ingestión del hongo.
FASE Trastornos de la conciencia, desde
NEUROLÓGICA: confusión hasta coma profundo.
Trastornos del comportamiento, euforia
paradójica y agitación.
Signo de Babinsky, arreflexia total, parálisis
a diferentes niveles.

84. Micetismo Periodo de Características
incubación
Parafaloidian 12 h hasta Sequedad de mucosa oral, signos de nefritis, azoemia y
17 días albuminuria. Hematomas, cefalea,
somnolencia, espasmos musculares y convulsiones. Coma
urémico. Muerte solamente en el
15% de los casos.
Muscarínico 2a3h SÍNDROME SUDORIANO
SÍNDROME PANTERINIANO
Gastrointestinal 30 min a 6 Náuseas, vómitos, diarreas, dolor abdominal intenso.
h
Inconstante o Muy SÍNDROME GIROMITRIANO
condicionad variable SÍNDROME COPRINIANO
Cerebra 1a4 Hipotensión, taquicardia e hipertermia. Céfalea, mialgias y
síntomas psicotrópicos:
cambios en la percepción, translación de estímulos sensoriales
,cambios en la comprensión, alucinaciones y pérdida de la
relación espacio-tiempo.Pueden presentarse alteraciones en
la transmisión de los impulsos cardíacos, arritmias e
infarto al miocardio. Depresión y angustia a la salida del
trance.

85. Los efectos incluyen enfermedades y
problemas de salud, depresión del
sistema inmunológico, irritación, alergias
y en algunos casos, la muerte.
Las mico toxinas causan efectos mediante
su ingestión, contacto con la piel o
inhalación. Pueden inhibir la síntesis de
proteínas, dañar el sistema inmunitario, Aspergillus
los pulmones e incrementar la
sensibilidad a las toxinas bacterianas
Ejemplo de Micotoxicosis: ergotismo
gangrenoso. causado
fundamentalmente por Claviceps
purpurea que contamina el centeno

86. • ALGUNOS HONGOS TOXICOS PRODUCEN
MICOTOXINAS (EXOTOCINAS EXCRETADAS POR
HONGOS).
• CRECEN EN GRANOS CON CIERTA HUMEDAD
PROVOCANDO MICOTOXICOSIS:
AFLATOXINAS: DAÑO EPATICO
FUSARINAS: EFECTOS NEUROLOGICOS Y
ABORTIVOS.

87. Reproducción de los hongos:
La gran mayoría de los hongos producen esporas como
medio para asegurar la dispersión de la especie y su
supervivencia en condiciones ambientales extremas. Así,
la espora es la unidad reproductiva del hongo y contiene
toda la información genética necesaria para el desarrollo
de un nuevo individuo.

88. Existen dos tipos de esporas:
Las asexuales, que suelen ser resistentes a la sequedad
y a la radiación, pero no al calor, por lo cual no tienen
período de latencia. Pueden germinar cuando hay
humedad, incluso en ausencia de nutrientes.
Las sexuales, más resistentes al calor que las asexuales,
aunque no tanto como las endosporas bacterianas;
suelen presentar latencia, germinando sólo cuando son
activadas (por ejemplo por calor suave o alguna
sustancia química)..

89. En los hongos hay dos formas de reproducción: sexual y
asexual, aunque en algunas especies coexisten ambas
formas en el mismo organismo (holomorfo),
denominándose estado perfecto o teleomorfo a la
forma sexual y estado imperfecto o anamorfo a la
asexual.
De esta forma, los hongos que presentan reproducción
sexual se denominan hongos perfectos y los que sólo
tienen (o sólo se les conoce) reproducción asexual se
denominan hongos imperfectos

90. Reproducción asexual:
Los elementos de propagación asexual (esporas asexuales)
pueden generarse de forma interna, redondeándose la
célula del interior de la hifa y quedando rodeada por una
gruesa pared para luego desprenderse (clamidiosporas) o
bien formándose en el interior de una estructura
denominada esporangio que al madurar se rompe
liberando las esporas (esporangiosporas).

91. También pueden generarse de forma externa, como una
producción de la hifa en vez de como una
transformación (conidiosporas) y suelen formarse en
estructuras diferenciadas de la hifa (conidióforos). La
variedad de las estructuras productoras de conidios es
inmensa y se utilizan como característica fundamental
en la clasificación.

92. Reproducción sexual:
En la formación de esporas sexuales intervienen una gran
variedad de estructuras y la reproducción sexual difiere
notablemente entre los diversos grupos de hongos. Así,
en los Zygomycetes es por medio de unas hifas
especializadas llamadas gametangios, en los Ascomycetes
se producen a través de unas células con aspecto de saco
denominadas saco, en los Basidiomycetes intervienen
células especializadas denominadas basidios, etc.

93. En líneas generales dos núcleos haploides de dos
células (gametos) se unen formando un huevo (cigoto)
diploide que por meiosis da lugar a cuatro núcleos
haploides. En este proceso suele haber recombinación
genética (existe un intercambio de genes).
Si los hongos poseen en el mismo micelio núcleos
complementarios capaces de conjugarse se llaman
hongos homotálicos y si necesitan núcleos
procedentes de micelios diferentes se llaman hongos
heterotálicos.

94. Hongos Dimórficos
Algunos hongos y especialmente, las especies patógenas,
muestran dimorfismo, es decir, dos formas de
crecimiento. Estos hongos pueden crecer como moho o
como levadura. A menudo, este dimorfismo depende de
la temperatura de incubación: a 37ºC el hongo es
levaduriforme mientras que a 25ºC es filamentoso.
.

95. Es posible reconocer el genero y especie
de un hongo con reconocer sus formas
de reproducción; el reconocimiento y
estudio de este, se puede hacer de 3
formas:
A partir de la Cultivos en Microcultivo
fuente laboratorio

96. Medios De Cultivo
Para el aislamiento primario de los hongos, se utilizan diversos
medios de cultivo. Estos medios hay que seleccionarlos en función
del hongo que se sospeche y del tipo de muestra.

99. Los medios de cultivo se pueden utilizar en tubos cerrados con
tapón de rosca o en placas de petri. La gran superficie de estas
últimas facilita el aislamiento y la dilución de sustancias
inhibitorias en las muestras. Es importante que el medio no se
deseque por lo que el espesor de las mismas debe ser por lo
menos de 25 mm, aproximadamente 35-40 mL de medio. Las
placas se contaminan con facilidad durante la incubación por lo
que es aconsejable sellarlas con cinta adhesiva. Los medios en
tubo tienen la ventaja de que no se deshidratan y se
contaminan menos, pero en cambio tienen menos superficie.

100. La temperatura de incubación debe ser seleccionada teniendo
en cuenta el tipo de hongo, en general, los medios deben
incubarse a 25ºC y a 37ºC durante 4 semanas antes de
considerarse como negativos. Si se emplean tubos con tapón
de rosca deben estar flojos para permitir la entrada de aire.
Medios más utilizados
Agar Dextrosado de Saboureaud con Cicloheximida y
Cloranfenicol: se utiliza para el aislamiento e identificación
de dermatófitos y Cándidas.
Agar Dextrosado con Cloranfenicol sin Cicloheximida: se
utiliza para el aislamiento e identificación de patógenos
ambientales y oportunitas.

101. Agar de harina de maíz (“Corn Meal Agar”):
Suplementado con Tween 80: para diferenciar distintas
especies de Cándida y para realizar subcultivos ya que
estimula la esporulación de hongos miceliales.
Suplementado con 10 gramos de Glucosa: para
diferenciar Trichophyton
Agar de Urea: se utiliza para diferenciar entre levaduras e
identificar diferentes especies de Trichophyton.

102. Procesamiento
El procesamiento debe ser inmediato. Muchas muestras se
pueden sembrar inmediatamente tras su recogida.
Se debe sembrar la muestra en su totalidad. En caso de
aspirado de abscesos, médula ósea, líquido cefalorraquídeo,
etc, el volumen deberá ser de al menos 2 mL.
En el caso de que la muestra proceda de exudados vaginales:
agitar la torunda en 0,5 mL de agua y sembrar, o bien sembrar
con la torunda directamente.

103. En el caso de líquidos corporales se deberán tomar más de
2 mL y si en los líquidos hay coágulos o material
membranoso, será necesario fragmentarlos con el bisturí y
luego realizar la siembra.
Cuando la muestra son pelos y raspados: depositar
directamente en el medio, presionando para que queden
adheridos. En caso de uñas se pueden pulverizar o cortar en
fragmentos.
Por último, cuando se trata de cepillados bronquiales, hay
que mezclar con agua destilada y sembrar el volumen total
(más de 1 mL).

104. Siembra con concentración
Se realizan siempre que la muestra es líquida y se hace por
centrifugación a 1500-2000 r.p.m. durante 10 minutos. El
sedimento se utiliza para un examen directo o bien para
cultivo.
En líquidos corporales: el volumen tiene que ser mayor de 2
mL. Se fragmenta y se centrífuga. Si las muestras son muy
densas, hay que diluirlas con agua destilada y centrifugar.
En orina: volumen superior a 2 mL
En LCR: centrifugar el LCR durante 10 minutos a 1500-2000
r.p.m. Retirar el sobrenadante con una pipeta estéril y
resuspender el sedimento con el líquido que ha quedado.
Sembrar.

105. Cultivo O Microcultivo
No se alteran las estructuras fúngicas. Se utiliza un
medio Saboraud que se vierte sobre una placa de
petri (capa delgada). Una vez solidificado cortamos
cuadrados con un bisturí estéril de 1-3 cm y los
colocamos en un porta estéril o flameado. El porta
estará colocado en una placa de petri estéril, sobre
un soporte. En el fondo de la placa añadiremos unas
gotas de agua para evitar la desecación durante la
incubación.

106. Inoculamos o bien las esquinas, o bien los bordes del agar
con el hongo a estudiar. Tomamos la muestra con un asa
estéril humedecida con agua. Sellamos las placas con
parafilm y llevamos a incubar.
Técnica Para Confirmar El Dimorfismo
Consiste en incubar la misma muestra a 25ºC, temperatura
a la que crecen los hongos miceliales, y a 37ºC temperatura
a la que crecen las levaduras (tejidos o medios especiales).

107. Las especies más importantes dimórficas son: Histoplasma
capsulatum, Blastomyces dermatidis, Paracoccidioides
brasiliensis, Coccidiodes imitis. Penicillium marneffei,
Slorothrix schenckii.
Para la confirmación es necesario convertir la fase filamentosa
en levaduriforme. Para ello incubamos parte de la colonia
micelial en una placa de Agar Sangre (3-4 fragmentos).
Sellamos e incubamos a 37ºC. Examinamos periódicamente el
crecimiento buscando levaduras. Si crece colonia micelial
repetimos la siembra hasta conseguir fase levaduriforme.

108. Dentificación De Levaduras
Test De Filamentación
Preparamos una suspensión de levaduras en 0.5-1 mL de
suero de conejo e incubamos a 35-37ºC no más de 3 horas.
Transcurrido el tiempo observamos al microscopio la
presencia o ausencia de tubos germinales, es decir, de
filamentos que no constriñen su punto de origen en la
levadura.
El test será POSITIVO si se observan los tubos germinales (C.
albicans)
El test será NEGATIVO cuando no encontremos los tubos
germinales ((otras especies de Cándida).

109. Medio diferenciador para levaduras
Posee cromógenos que colorean las colonias según la
especie. En el caso de la Cándida albicans, las colonias son
de color azul.